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文檔簡介

山楂及其保健食品的開發(fā)利用論文提要經(jīng)梳理近幾年有關(guān)山楂炮制、化學(xué)成分含量以及藥理活性作用方面研究的文獻(xiàn),對其進(jìn)行總結(jié)以供進(jìn)一步研究。本文通過梳理山楂的炮制工藝,指出其火力、火候的控制有待優(yōu)化。研究實驗表明,山楂所含有機酸類、黃酮類、糖類、微量元素物質(zhì)等化學(xué)成分的含量、種類經(jīng)炮制后發(fā)生變化,使得山楂在心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、降血糖等方面的藥理活性作用發(fā)生改變。由此可啟發(fā),對于山楂化學(xué)成分與炮制過程中所產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)、新物質(zhì)之間的聯(lián)系,以及化學(xué)成分變化與藥理作用之間的關(guān)系還需進(jìn)一步研究。關(guān)鍵詞

山楂炮制化學(xué)成分現(xiàn)代研究山楂,為薔薇科植物山里紅CrataeguspinnatifidaBge.var.majorN.E.Br.和山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥成熟果實。山楂為藥食同源品,歸脾、胃、肝經(jīng),性酸、甘,味溫,具有消食化積,行氣活血散瘀的藥用功效。主治飲食化積導(dǎo)滯,瀉痢腹痛,疝氣痛,瘀阻胸腹痛,痛經(jīng)。山楂在臨床上常用其炮制品,規(guī)格有生山楂、炒山楂、焦山楂、山楂炭、蜜山楂等。現(xiàn)代的多種藥理研究表明,山楂及其炮制品對改善消化系統(tǒng)、心腦血管系統(tǒng)疾病方面具有著很重要價值的重要生理或藥用價值[1-4]。研究分析表明,山楂經(jīng)過炮制后,山楂提取物的主要成分有無機酸、酚酸類、黃酮類和三萜類物質(zhì)等含量比例均發(fā)生了明顯變化,從而進(jìn)一步改變影響了山楂性味和藥理療效[6-9]。本文通過比較山楂四種炮制品經(jīng)炮制后,其所含化學(xué)成分及其含量的變化,以及山楂的現(xiàn)代研究進(jìn)行概述。1山楂炮制工藝1.1山楂的炮制沿革據(jù)現(xiàn)代初步考證,山楂始載自唐代《新修本草》中的木部下品,名為“赤爪草”,后世《神農(nóng)本草經(jīng)集注》中則稱其為“鼠楂”,在宋代《本草圖經(jīng)》的記載中稱之為“棠棣子”,其炮制應(yīng)始于我國的元代《丹溪心法》,記載了“炒”和“蒸”的炮制方法[10-12]。綜合記載古代各種山楂果實的具體炮制使用方法,包括炮制有凈制、切制、炒制、加以輔料炮制。古代炮炙山楂的主要的炮制工藝方法還可以包括清炒、炒焦、制炭、加其他多種加工輔料炒以及蒸制等。其中的清炒法、蒸制法等均為最早始見于載并見于的中國的元代的古籍版本《丹溪心法》之中,據(jù)今筆者于目前所訪可查到的歷代本草書譜中有記載的版本《滇南本草》則也是目前為止我國目前唯一記載的有關(guān)清炒山楂核的一本古籍記載。“山楂:炭”的記載出現(xiàn)在清代《吳鞠通醫(yī)案》、《外科證治全生集》、《校注醫(yī)醇剩義》等多種文獻(xiàn)資料中。加各種輔料炒制的加工方式的主要工藝形式主要有酒制、姜制、童便制等[5,13-14]。1.2現(xiàn)代炮制方法山楂的現(xiàn)代炮制方法主要沿承了古代的炒制法。20年版《中國藥典》收載的炮制方法有凈制、清炒(炒黃、炒焦)。生山楂,除去雜質(zhì)及脫落的核。炒山楂,取待炮炙品,置炒制容器內(nèi),用文火加熱至規(guī)定程度時,取岀,放涼。焦山楂,一般用中火炒至表面焦褐色,斷面焦黃色為度,取出,放涼;炒焦時易燃者,可噴淋清水少許,再炒干。山楂炭,見于1963年版《中國藥典》,在此之后的藥典對山楂炭均無記載[5]。通過查找中國的醫(yī)藥信息在線查詢系統(tǒng)平臺中的中藥材目錄可知:山楂炭,取鮮凈品山楂炭置瓦鍋內(nèi),用小武火上加熱,炒炭至其外表成焦綠黑色,內(nèi)部變成焦灰褐色,噴淋適量少許的清水,取出,曬干。1.3山楂炮制工藝存在的問題研究數(shù)據(jù)表明,仍存有許多文獻(xiàn)中對于炮制山楂及不同類型炮制品時所應(yīng)需要控制的火力火候都不甚清楚,部分文獻(xiàn)記載中所說的炒山楂要用中火慢慢加熱,焦山楂可以用武火緩慢加熱,與2020年版《中國藥典》中所記載的有所不同。[41]傳統(tǒng)法中炮制焦山楂使用中火且受熱不均勻,據(jù)實驗表明焦山楂的炮制以武火(180℃)加熱3min,炒制過程中噴水降溫為佳。由此可見,炮制同一種中藥材所用的火力和火候,應(yīng)加以明確的規(guī)定,以更好地控制中藥炮制品的質(zhì)量。傳統(tǒng)中藥鑒定的主要手段是性狀評價,人對于中藥性狀的鑒別缺乏客觀標(biāo)準(zhǔn),全靠主觀感受進(jìn)行評判,且每個人對于顏色、氣味等性狀的鑒別存在一定程度的偏差,容易使中藥鑒定受到影響。為了能夠更全面、科學(xué)、系統(tǒng)的量化來進(jìn)行對同一種中藥的品質(zhì)特征進(jìn)行準(zhǔn)確地鑒定,已有多位知名學(xué)者都已經(jīng)在嘗試研究過利用計算機智能感官技術(shù)已經(jīng)可以使得對中藥產(chǎn)品特征的品質(zhì)性狀特征進(jìn)行一個更為直觀快速、準(zhǔn)確且有效的客觀量化,智能感官技術(shù)系統(tǒng)主要就是基于現(xiàn)代電腦仿生學(xué)原理所研究設(shè)計,由機器視覺、電子鼻、電子舌的識別功能等多種相關(guān)檢測技術(shù)組成,可客觀分析其質(zhì)量[15,42]。另有研究還表明,可考慮應(yīng)用在線式紅外測溫新技術(shù),研究山楂機械炒制過程中產(chǎn)生的“火力”問題,同時可以引入色彩色差計技術(shù)和電子鼻新技術(shù)客觀化表達(dá)“火候”評價指標(biāo)中的顏色和氣味。2山楂化學(xué)成分研究山楂還可含有豐富營養(yǎng)物質(zhì),迄今為止,從山楂中經(jīng)分離純化加工得到的有效物質(zhì)達(dá)150多種,黃酮類、有機酸類、氨基酸類、微量元素、三萜類、維生素以及其它礦質(zhì)元素。在20世紀(jì)50年代,重點研究報道了山楂中富含的天然黃酮類化合物對心血管系統(tǒng)損害具有的明顯的藥理作用,且近幾年對于山楂果中富含一些抗癌微量元素作用物質(zhì)的抗癌藥理的研究越發(fā)廣泛及深入,發(fā)現(xiàn)了多酚類物質(zhì)具有明顯的抗癌作用活性[16]。山楂中所含的化學(xué)成分,經(jīng)過不同的炮制方法,而受到不同程度的影響,大多數(shù)的化學(xué)成分的含量均有不同程度的影響,且有新的化學(xué)成分的產(chǎn)生,從而表現(xiàn)出不同的藥理作用。2.1有機酸類成分研究近年來,許多國內(nèi)外學(xué)者對山楂炮制品中多種有機酸類化學(xué)成分進(jìn)一步深入研究:如蔡琳等人[17]首次采用我國2015年版的《中國藥典》中山楂有機酸含量測定(以枸櫞酸計算結(jié)果為準(zhǔn))及測定方法,對各種不同山楂炮制品中各種有機酸含量和土壤pH測定值也進(jìn)行過測定,結(jié)果表明炒山楂、焦山楂、山楂炭中有機酸含量分別測為30.53mg、7.33mg、1.56mg,pH平均值分別為2.195、2.508、2.696。楊濱等[18]還對焦山楂炮制前后總有機酸、枸櫞酸、蘋果酸、和熊果酸、齊墩果酸中的酸性含量分別進(jìn)行測定。結(jié)果表明,焦山楂水溶性的總有機酸的保留率為在60%左右,脂溶性的熊果酸含量和齊墩果酸幾乎無變化。以上這兩位國內(nèi)學(xué)者做的相關(guān)研究分析結(jié)果還表明,炮制處理后山楂的游離總有機酸的含量均明顯得到降低,尤其是山楂對其水溶性有機酸濃度影響顯著較大,脂溶性有機酸幾無影響,這體現(xiàn)了炮制后的山楂酸性減弱,對胃的刺激性減弱。2.2黃酮類成分研究研究數(shù)據(jù)表明,在炮制過程中黃酮類成分與有機酸類成分含量變化規(guī)律相似,隨著其炮制過程溫度壓力持續(xù)的升高,炮制時間的延長,呈下降趨勢。毛淑杰等[19]分別采用比色分析法對山楂等四種常用炮制品及山楂果肉、山楂核中提取的山楂總黃酮成分進(jìn)行含量測定,分別可顯示結(jié)果為含量約達(dá)7.52%、7.59%、3.15%、1.94%、11.25%、0.82%,且一般隨著炮制過程中溫度的逐漸升高而逐漸降低,在超過175℃時下降幅度加大。2.3糖類、微量元素和氨基酸類成分研究研究工作表明,植物多糖是一類具有顯著效果的重要生物活性物質(zhì),而目前針對山楂多糖的相關(guān)研究尚少,山楂果實中總糖含量為10.23%~14.25%。劉暢等[20]測定四種山楂炮制品中總糖含量分別為7.94、7.93、7.18、6.48mg/kg,還原糖含量分別為6.05、5.66、4.84、4.00mg/kg,總氨基酸含量分別為1022.57、1149.04、689.47、146.35。實驗表明,隨著炮制溫度的升高,山楂炮制品中糖類和氨基酸類含量顯著降低,這可能是由于糖類受熱分解或與其他物質(zhì)發(fā)生美拉德反應(yīng)而造成的,氨基酸類成分受熱發(fā)生結(jié)構(gòu)性改變或參與美拉德反應(yīng)生成新物質(zhì),且氨基酸多數(shù)為水溶性,遇熱不穩(wěn)定,所以含量降低。中藥中有的多種微量元素又常直接與其他有機酸、氨基酸等重要成分互相絡(luò)合,而彼此產(chǎn)生藥物協(xié)同作用,以顯著增強療效。用李飛等方法[1]分別對上述四種類型山楂炮制品原料中各種微量元素成份進(jìn)行對比測定,結(jié)果還表明,不同配方的不同炮制方法均對山楂微量元素含量變化影響均不同,炒山楂提取物中游離Ni均降低,Na、Pt都增加各約近1倍;焦山楂酸中含Ni約增加了80倍,Na、Pt各增加了約為1倍左右;山楂炭中Na、Pt等有所增加。3山楂藥理作用現(xiàn)代研究3.1對心血管系統(tǒng)作用山楂中的黃酮類成分是其主要的化學(xué)成分之一,具有降壓、抗心動脈粥樣硬化病變和保護(hù)心內(nèi)皮細(xì)胞作用,還可以具有降脂、抗心律失常、抗功能性心肌性缺血、抑制腦神經(jīng)凋亡的作用。研究人員表明,黃酮類成分中因多含有一種活性酚羥基衍生物而本身具有較為良好持久的抗氧化性,對心臟功能改變、血管通透性明顯異常、5-羥色胺、前列腺素過量引起心血管的一些炎性反應(yīng)都具有良好抑制緩解作用,抗氧化功能和有效抑制各種炎性反應(yīng)共性作用是研究其對調(diào)節(jié)機體心血管功能方面的有效作用機理基礎(chǔ)之一。3.1.1降血壓作用林啟云[22]動物實驗表明山楂的乙醇提取物有降低貓血壓的藥理作用,并且可加強戊巴比妥鈉中樞抑制作用,以利于有效降壓。研究表明,山楂總黃酮類似一種Ca2+離子拮抗劑,通過抑制細(xì)胞中的Ca2+離子向外釋放和向內(nèi)內(nèi)流,以及激活非選擇性鉀通道和向內(nèi)整流鉀通道,起到舒張大鼠離子血管的作用,從而達(dá)到降壓作用[23]。3.1.2抗動脈粥樣硬化作用研究表明,山楂抗動脈粥樣硬化作用是通過山楂降血脂、抗氧化、增加活化調(diào)節(jié)因子的生成、抗血小板凝集等而實現(xiàn)的。山楂中總黃酮有擴張冠脈、舒張血管、改善心臟活力和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)的良好作用。3.1.3保護(hù)人血管內(nèi)皮細(xì)胞常翠青等[24]所做實驗表明,山楂總黃銅對oxLDL誘導(dǎo)的人內(nèi)皮細(xì)胞損傷具有顯著的拮抗作用,并減弱其對內(nèi)皮細(xì)胞的毒性,通過直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞,增強內(nèi)皮細(xì)胞抵抗力和耐受性,從而有效地保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞。3.2對消化系統(tǒng)作用武蕾蕾[25]發(fā)現(xiàn),山楂水煎劑能緩解小鼠胃腸蠕動,降低血漿胃動素水平。陳洪雨[26]發(fā)現(xiàn),山楂中的膳食纖維高劑量時(500mg/(kg?d))可以提高小鼠小腸推進(jìn)率、縮短首粒排黑便時間,小鼠排便頻率未增加。以上兩位學(xué)者研究表明,山楂對胃腸道具有雙向調(diào)節(jié)作用。山楂還含有多種維生素和有機酸,能增加胃消化酶的分泌,還含有淀粉酶,能增強胰脂肪酶活性,促進(jìn)腸蠕動達(dá)到消食開胃的作用。王穎等[27]發(fā)現(xiàn),其中山楂酸在中高劑量(100、200mg/kg)時,能增強肝組織抗氧化作用,清除氧自由基,還能減少白介素1β、腫瘤壞死因子-α的產(chǎn)生,從而起到保護(hù)肝臟的作用。山楂經(jīng)過不同的炮制方法炮制后,其在消化系統(tǒng)方面的作用存在明顯差異。研究表明,山楂生品和炒山楂在保護(hù)胃蛋白酶的分泌和增強胃腸道推進(jìn)功能方面強于焦山楂和山楂炭。南云生等[28]研究結(jié)果表明,生品或炒品對小白鼠消化功能影響較大,其亞硝酸鹽含量較低,認(rèn)為生山楂或炒山楂入消食藥為佳。中醫(yī)認(rèn)為“焦香可健脾和胃”,焦山楂以消食導(dǎo)滯為強。王云等[29]實驗結(jié)果表明,山楂炒焦所產(chǎn)生的的焦香氣味可降低正常和食積大鼠腦電的基本頻率,增加腦電的平均波幅,從而增加神經(jīng)元的興奮性,起到消食導(dǎo)滯的作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)山楂炭的止血作用可能與炒炭后其5-HMF、原兒茶酸、鞣質(zhì)和碳素的吸附力增加有關(guān)。3.3降血糖作用鐘麗霞等[30]采用單因素實驗法和響應(yīng)面法優(yōu)化微波輔助提取山楂中的多糖,并通過實驗表明,山楂粗多糖對α-葡萄糖苷酶抑制率的IC50值為0.16μg/ml,有較好的抑制作用,從而起到降血糖的功效。且山楂多糖對DPPH?清除能力隨多糖質(zhì)量濃度升高呈上升趨勢,具有良好的抗氧化功能,可以清除體內(nèi)異常增多的自由基,對山楂降血糖作用具有指導(dǎo)意義。有研究表明,山楂葉總黃酮能降低糖尿病大鼠的血糖,且與劑量呈相關(guān)性[31]。3.4其他藥理作用研究表明,山楂浸膏具有利尿作用,給藥60min時尿量較給藥前增加44.2%,90min增加53.9%,120min增加63.7%,由此可見其利尿作用緩慢而持久,且該藥對電解質(zhì)影響較小[32]。低缺氧實驗表明,山楂可顯著延長小鼠在常壓缺氧環(huán)境中的存活時間[33]。藥物學(xué)家研究發(fā)現(xiàn),山楂黃酮類成分中的杜荊素具有抗癌、防癌作用,能增強機體的非特異免疫功能。有學(xué)者認(rèn)為,焦山楂可在體外抑制金黃色葡萄糖菌、沙門菌、志賀菌的生長,無殺菌作用,抗菌作用較弱[34]。山楂果煎劑1g/ml對多種細(xì)菌具有較強的抗菌作用[35]。山楂原花青素能促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡,抑制其增殖,還促進(jìn)食道癌細(xì)胞凋亡[36];山楂核中多種化合物對HT1080等腫瘤細(xì)胞有較好的細(xì)胞活性作用[37],對人骨髓瘤細(xì)胞有較好的抑制活性[38]。有學(xué)者表明,山楂具有止痛作用,能舒張血管,解除局部瘀血狀態(tài),并由收縮子宮、促進(jìn)子宮復(fù)原的作用,由此可推測這可能是山楂對治療原發(fā)性痛經(jīng)有顯著作用的原因[4,16]。除此之外,通過多篇關(guān)于黃酮類成分藥理作用的文獻(xiàn)可看出山楂的主要生物活性成分是黃酮類,若過量食用或食用不當(dāng),其中有機酸和單寧有引起腸胃結(jié)石的不良反應(yīng)。4結(jié)語綜上所述,目前對于炒山楂、焦山楂、山楂炭的生產(chǎn)炮制在工藝流程中對火力、火候無明確操作規(guī)范,缺乏科學(xué)準(zhǔn)確可靠的量化指標(biāo),導(dǎo)致飲片質(zhì)量參差不齊,而使其藥理作用也存在差異。且現(xiàn)有的研究難以完全解釋山楂炮制前后藥效變化的內(nèi)在原理,以及不同炮制品藥理作用的作用靶點和具體的信號通路?,F(xiàn)今對于焦山楂的研究較為豐富,而對于炒山楂、山楂炭的相關(guān)研究較少,有待進(jìn)一步深入研究。對于山楂化學(xué)成分與炮制過程中所產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)、新物質(zhì)之間的聯(lián)系還需進(jìn)一步的研究,更進(jìn)一步的深究化學(xué)成分變化與藥理作用之間的關(guān)系?,F(xiàn)對于山楂心血管系統(tǒng)作用方面的研究較多,而在其他方面研究尚少。隨著對山楂果的深入開發(fā),使得更多的學(xué)者開始關(guān)注山楂的花、葉、核等其他部位,并優(yōu)化提取分離其中所含化學(xué)成分的工藝,以便更好的研究這些部位中所含化學(xué)成分含量與山楂果中的差異及其藥理活性作用的差異。因此,要從多角度、多層次、多維度對山楂及其炮制品進(jìn)行深究,并結(jié)合現(xiàn)代先進(jìn)技術(shù)手段,建立最優(yōu)化活性成分提取分離工藝,研發(fā)新技術(shù),從細(xì)胞、組織乃至分子層面對山楂的作用機理、作用靶點、作用物質(zhì)進(jìn)行全方位的研究,以發(fā)現(xiàn)山楂在新的方面的藥理活性作用,開發(fā)有效地治療藥物,對臨床治療疾病做出一點貢獻(xiàn)。參考文獻(xiàn)1張三印,周艷霞,孫改俠,等.山楂不同炮制品對胃腸平滑肌收縮的影響研究[J].中藥材,2009,32(10):1519-15222王玲,吳軍林,吳清平,等.山楂降血脂作用和機理研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2015,36(36):245-2483李貴海,孫敬勇,張希林,等.山楂降血脂有效成分的實驗研究[J].中草藥,2002,33(1):50-524王現(xiàn)春,潘麗輝,林輝.山楂不同方法炮制治療原發(fā)性痛經(jīng)的臨床觀察[J].中醫(yī)臨床研究,2012,4(19):46-475李化,楊濱.山楂的炮制研究[J].中國中藥雜志,2004,29(6):501-5036毛淑杰,李鐵林.炮制對山楂中總黃酮及總有機酸含量的影響[J].中國中藥雜志,1989,14(9):532-5337張良,姜思凡,萬軍,等.炮制對山楂主要化學(xué)成分的影響[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2014,30(1):31-348黎量,楊詩龍,劉玉杰,等.基于相關(guān)性分析的山楂炮制過程氣味變化機制研究[J].中國中藥雜志,2014,39(17):3283-32869陳奇云.不同炮制方法對山楂中總黃酮的影響[J].中藥通報,1986,11(12):2910薛恒燕.山楂的炮制與現(xiàn)代研究概述[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2013,32(18):102-10311張英杰,苑述剛,洪振豐,等.山楂的中藥學(xué)及臨床文獻(xiàn)研究概述[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2011,31(01):68-7012張洪坤,郭長達(dá),黃玉瑤,等.山楂炮制過程中藥效物質(zhì)成分的變化規(guī)律研究[J].中藥材,2017,40(04):811-81513蘭茂.滇南本草[M].第一卷.云南:人民衛(wèi)生出版社,1975.16514繆希雍.炮制大法[M].北京:中國書店,1985.3115韋志強.基于外觀性狀-內(nèi)在成分-藥效的山楂炮制機制研究[D].成都中醫(yī)藥大學(xué),201916陳佳,宋少江.山楂的研究進(jìn)展[J].中藥研究與信息,2002(05):5617蔡琳,沈美玲.不同炮制方法對山楂pH值及有機酸含量變化的研究[J].山東化工,2017,40(04):811-81518楊濱,李化,趙宇新,等.山楂炮制前后有機酸含量的變化[J].中國中藥雜志,2004(11):35-3819毛淑杰,李鐵林.炮制對山楂中總黃酮及總有機酸含量的影響[J].中國中藥雜志,1989(09):20-2120劉暢,宮瑞澤,張磊,等.山楂不同炮制方法對5-羥甲基糠醛含量及抗氧化活性的影響[J].特產(chǎn)研究,2019,41(04):29-3521李飛,閻汝南.山楂炮制前后微量元素的對比[J].中藥材,1994,17(8):2922林啟云,潘曉春,方敏.廣西大果山楂藥理作用研究[J].廣西中醫(yī)藥,1990(03):45-4723姜建芳,沈曉蘭,張寧.山楂總黃酮對大鼠離體血管功能的影響及其機制[J].中國現(xiàn)代化應(yīng)用藥學(xué),2011,28(7):614-61724常翠青,陳吉棣.山楂總黃酮對人血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用[J].中國公共衛(wèi)生,2002,18(4):390-39225武蕾蕾,高忠良,何志鵬.山楂水提物對腸易激綜合征大鼠血漿胃動素的影響[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,32(2):10-1226陳洪雨,馬蕾,楊建橋,等.山楂膳食纖維改善功能性便秘及預(yù)防鉛中毒作用[J].食品科學(xué),2013,34(15):232-23527王穎,蔡永青,黃明春,等.山楂酸對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用及機制研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2016,21(8):854-85828南云生,馬春亮,王洪波.山楂炮制研究[J].中成藥,1992(04):18-20+5229王云,萬軍,孫靜瑩,等.焦山楂焦香氣味消食導(dǎo)滯的作用機制[J].中藥藥理與臨床,2019,35(5):73-7630鐘麗霞,江震宇,汪嘉妮,等.山楂多糖提取工藝優(yōu)化及其降血糖、降血脂活性[J].食品工業(yè)科技,2019,40(13):119-124+12731朱柳瑩,吳忠祥,李苗苗,等.山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血糖、血脂代謝的影響[J].湖北科技學(xué)院學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2014,28(6):469-47232QiChang,MinZhu,ZhongZuo,etal.High-performanceliquidchromatographicmethodforsimultaneousdeterminationofhawthornactivecomponentsinratplasma[J].Journalofchromatography.B.biomedicalapplications,2001,760(2)

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