先天性心臟病患兒CITED2基因突變分析的開題報告

先天性心臟病患兒CITED2基因突變分析的開題報告題目：先天性心臟病患兒CITED2基因突變分析一、研究背景先天性心臟病（CongenitalHeartDisease,CHD）是出生后在左心房右心房間、左心室右心室間、主動脈肺動脈間等位置出現(xiàn)的心臟結(jié)構(gòu)異常。CHD是新生兒死亡和嬰兒死亡的主要原因之一，并且是兒童期最常見的先天性畸形之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的數(shù)據(jù)，全球每年有大約130萬例兒童出生時患有CHD。目前，各國已經(jīng)開始進行大規(guī)模篩查以及與微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和生物信息學(xué)等領(lǐng)域聯(lián)合開展先天性心臟病的早期預(yù)警和診斷，為預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)。CITED2（CBP/p300InteractingTransactivatorwithED-richTail2）基因編碼一種共刺激轉(zhuǎn)錄因子，是一種重要的DNA結(jié)合因子，能夠與CBP/p300對接，并通過間接參與不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和基因表達，影響細(xì)胞增殖、分化和轉(zhuǎn)化。研究表明CITED2在心臟發(fā)育和代謝中起重要作用，CITED2基因錯義突變會導(dǎo)致先天性心臟病的出現(xiàn)。二、研究內(nèi)容和方法研究目的：探究CITED2基因在先天性心臟病中的作用以及CITED2基因的突變對先天性心臟病的影響。研究內(nèi)容：收集50例患有先天性心臟病的患兒的DNA樣本，利用PCR擴增CITED2基因，然后進行測序，檢測50例患兒中CITED2基因的突變情況。同時，利用正常人DNA庫中的100例DNA樣本進行對照分析，分析CITED2基因的遺傳多態(tài)性以及與先天性心臟病的關(guān)聯(lián)程度。研究方法：1.樣本收集。收集50例患有先天性心臟病的患兒的口腔拭子，提取全血基因組DNA。2.PCR擴增CITED2基因。將提取的DNA模板、引物和PCRMasterMix按以下步驟放入PCR擴增儀進行擴增：預(yù)到達溫度：95℃，5min；PCR循環(huán)：95℃，30s→60℃，30s→72℃，30s→(循環(huán)28次)→72℃，10min。3.測序分析。將擴增的CITED2基因產(chǎn)物進行測序，在利用基因分析軟件分析檢測CITED2基因中的遺傳多態(tài)性以及與先天性心臟病的關(guān)聯(lián)程度。三、研究意義1.CITED2基因的突變與先天性心臟病的關(guān)聯(lián)性，對先天性心臟病機制的理解和診斷有重要啟示作用。2.對先天性心臟病的早期預(yù)警和診斷具有重要的臨床意義。3.對CITED2在心臟發(fā)育、代謝中起作用的機理和分子機制具有重要參考作用。四、研究計劃1.取得研究許可和道德審批。2.收集50例患有先天性心臟病的患兒的口腔拭子。3.提取全血基因組DNA。4.PCR擴增CITED2基因。5.利用基因分析軟件分析檢測CITED2基因中的遺傳多態(tài)性以及與先天性心臟病的關(guān)聯(lián)程度。6.分析、統(tǒng)計典型