醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊

醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第1頁。新冠病毒核酸檢測策略靈敏、特異的檢測新冠病毒核酸需要注意以下因素：1、取樣問題：取樣是影響檢出率最重要的因素；2、輕癥患者：強烈推薦鼻咽拭子，而不是口咽拭子；其次是取樣時機3、重癥患者：強烈推薦使用深部痰液、肺泡灌洗液；4、現(xiàn)行試劑問題：強烈建議使用兩個基因片段以上的試劑盒，可以捕獲更多的患者；實驗室應常備兩種以上不同廠家的核酸檢測試劑；試劑盒必須高靈敏（檢測限≤500拷貝/ml)的試劑。5、參考品問題：參考品用于生產(chǎn)廠商建方法時驗證試劑盒性能，不用于臨床實驗室；6、實驗室操作：經(jīng)過實驗室驗收合格的PCR實驗室完整的性能驗證、每天每批檢測至少有1份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的1.5-3倍)、3份陰性質(zhì)控品（生理鹽水)、室間質(zhì)評。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第2頁。新冠核酸樣本采集

A、樣本采集準備

B、采集樣本類型

C、采集樣本容器

D、鼻咽拭子采集方法

E、口咽拭子采集方法新冠核酸樣本保存與轉(zhuǎn)運要求新冠核酸樣本轉(zhuǎn)運人員個人防護要求新冠病毒核酸檢測的注意事項院感防控要求新冠相關醫(yī)療廢物的處置內(nèi)容醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第3頁。A新冠核酸樣本采集準備個人防護用品采樣人員從事核酸檢測標本采集的技術人員應當經(jīng)過生物安全培訓（培訓合格）熟悉標本種類和采集方法掌握標本采集操作流程及注意事項（記錄，確保標本質(zhì)量符合要求、信息追溯）采樣工具（新冠核酸保存管、拭子（鼻咽拭子、口咽拭子）、壓舌板）采集場所（具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施）填寫記錄采樣人員防護裝備要求：N95及以上防護口罩、護目鏡或防護面屏、防護服、乳膠手套、防水靴套；如果接觸患者血液、體液、分泌物或排泄物，戴雙層乳膠手套；手套被污染時，及時更換外層乳膠手套。每采一個人應當進行嚴格手消毒或更換手套注意事項：嚴格按生物安全規(guī)范操作醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第4頁。B新冠核酸檢測常用的臨床樣本類型注意：血液標本核酸檢測陽性率低，一般不采用；血清標本主要是用于（新冠抗體檢測），發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及發(fā)病后第3～4周的恢復期血清。上呼吸道標本：口咽拭子、鼻咽拭子（優(yōu)先）下呼吸道標本：痰、氣管吸出物和支氣管肺泡灌洗液注意：臨床標本應盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標本（尤其是下呼吸道標本）

人群篩查及集中隔離人員的標本選擇：鼻咽拭子→口咽拭子已知感染住院患者的標本選擇：痰→鼻咽拭子→口咽拭子或唾液→糞便糞便（肛拭子）：以消化道癥狀為主的患者醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第5頁。D鼻咽拭子的采集方法鼻咽拭子：采樣人員一手輕扶被采集人員的頭部，一手執(zhí)拭子，拭子貼鼻孔進入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過猛，以免發(fā)生外傷出血。（鼻咽拭子進入鼻腔深度約為鼻尖到耳垂的距離。）待拭子頂端到達鼻咽腔后壁時，輕輕捻轉(zhuǎn)拭子一周（如遇反射性咳嗽，應停留片刻）并保留10-15秒，然后緩緩取出拭子。將拭子頭浸入含2～5ml病毒保存液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。關鍵點：“要深、要轉(zhuǎn)、要取細胞”深度：4CM停留：10-15S旋轉(zhuǎn)：一周醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第6頁。E口咽拭子的采集方法口咽拭子：用1根配套的口咽拭子同時擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含5ml病毒保存液的管中，棄去尾部，旋緊管蓋。取樣關鍵點：用拭子擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁3~5次為提高檢出陽性率，可同時采用鼻咽拭子和口咽拭子采樣，采樣后放入同一管細胞保存液或病毒保存液中；必要時也可采集痰液標本，痰液標本應該取患者深咳的痰液醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第7頁。新冠核酸樣本保存與轉(zhuǎn)運要求含胍鹽保存液采樣管采集的標本可根據(jù)采樣管說明書要求的保存條件及時間要求進行運送和保存。24小時內(nèi)無法檢測的標本則應置于-70℃或以下保存(如無-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存)。境外高風險區(qū)域人群以及新冠肺炎患者的密接者和密接者的密接者等集中隔離人員的核酸檢測標本，檢測后，應當在-20℃保存7天。其他一般人群篩查標本，則可在-4℃保存24小時。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第8頁。新冠核酸樣本保存與轉(zhuǎn)運要求樣本轉(zhuǎn)運：

1、樣本包裝按照B類感染性物質(zhì)進行三層包裝。

樣本放在采集管里，擰緊。容器外貼好條碼并注明標本編號。將密閉后的標本放入大小合適的帶有生物安全警示標識的專用標本自封袋內(nèi)密封，每袋裝一份標本；使用75%酒精或0.2%含氯消毒劑噴灑消毒標本包裝袋；將包裝好的標本放入專用轉(zhuǎn)運箱；將密閉后的標本放入轉(zhuǎn)移試管架中豎立放置。注意勿使標本污染容器外部或傾翻、滲漏以免造成人員感染，以確保生物安全。轉(zhuǎn)運箱封閉后，須用75%酒精或0.2%含氯消毒劑噴灑消毒轉(zhuǎn)運箱表面。由經(jīng)過生物安全培訓的專人進行樣本的運送和交接。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第9頁。新冠核酸樣本保存與轉(zhuǎn)運要求2、標本送檢：標本采集后室溫放置不超過4小時，應在2-4h內(nèi)送到實驗室。如果需要長途運輸標本，應采用干冰等制冷方式進行保存，嚴格按照相關規(guī)定包裝運輸；標本運輸途中應有緩沖設備避免劇烈振搖，應有保溫設備避免高溫、嚴寒等惡劣環(huán)境，保證標本質(zhì)量。標本運送期間避免反復凍融。3、標本接收：標本接收人員的個人防護按采樣人員防護裝備執(zhí)行。標本運送人員和接收人員對標本進行雙簽收；

轉(zhuǎn)運箱要在生物安全柜內(nèi)開啟，開啟后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精對轉(zhuǎn)運桶內(nèi)壁和標本采集密封袋進行噴灑消毒。取出標本采集管后，應首先檢查標本管外壁是否有破損、管口是否泄漏或是否有管壁殘留物。確認無滲漏后，推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面（此處不建議使用75%酒精，以免破壞標本標識）。如發(fā)現(xiàn)滲漏應立即用吸水紙覆蓋，并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進行消毒處理，不得對標本繼續(xù)檢測操作，做好標本不合格記錄后需立即進行密封打包，壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。

轉(zhuǎn)運箱封閉后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精噴灑消毒表面，由轉(zhuǎn)運人員帶走。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第10頁。新冠核酸樣本轉(zhuǎn)運人員個人防護要求樣本轉(zhuǎn)運人員防護裝備要求（一級生物安全防護）：工作服或者隔離衣、一次性醫(yī)用防護口罩、一次性帽子、乳膠手套、鞋套；醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第11頁。新冠病毒核酸檢測的注意事項

對集中隔離人員，要通過鼻咽拭子采集上呼吸道標本，并選擇高靈敏（檢測限≤500拷貝/ml）的試劑。原則上，提取試劑、提取儀、擴增試劑和擴增儀應當配套使用，并在檢測前進行性能驗證。鼓勵在兩個以上檢測機構通過不同設備和試劑，對集中隔離人員的樣本進行平行檢測，進一步提高檢測結果的準確性。其中，入境人員應當至少在開始集中隔離和解除隔離時各進行一次核酸檢測，隔離期間如出現(xiàn)癥狀應當及時檢測；入境人員要采用高靈敏（檢測限≤500拷貝/ml）和雙靶區(qū)域以上的試劑進行檢測，以降低因試劑靈敏度不足或病毒變異可能造成的漏檢風險。檢測結果的處理：1.混采檢測結果為陽性、灰區(qū)或單個靶標陽性，通知相關部門對該混采管的10個或5個受試者暫時單獨隔離，并重新采集單管拭子進行復核；2.復核單管核酸檢測如均為陰性，則按照陰性結果報告。暫時隔離人員即解除隔離；如檢測結果陽性，按程序上報。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第12頁。院感防控要求1、做好日常的醫(yī)療機構感染防控工作，把標準預防理念貫穿到日常各項工作，做好消毒、隔離、預防職業(yè)暴露、醫(yī)療廢物管理等工作，降低醫(yī)院感染發(fā)生風險。2、加強感控專兼職人員配備，加大感控經(jīng)費投入，落實各級感控管理組織責任。3、嚴格開展全員崗前感染防控培訓工作，未經(jīng)培訓合格不得上崗。按照相關技術標準和規(guī)范，重點部門建筑布局和工作流程符合要求，并配備必要的設備設施。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第13頁。院感防控要求目標要求：提高新冠肺炎診療防控能力，預防和控制新冠病毒在醫(yī)療機構內(nèi)傳播，有效防范醫(yī)源性感染發(fā)生，杜絕感染暴發(fā)事件，實現(xiàn)院內(nèi)零感染目標。工作原則：1、建立“兩個屏障”：物理屏障和行為屏障

2、實現(xiàn)“雙向防護”：醫(yī)務人員防護和患者防護

3、落實“三防融合”：人防：規(guī)范行為，強化管控技防：提升技能，優(yōu)化流程物防：適宜可及、守正創(chuàng)新醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第14頁。環(huán)境的清潔消毒《消毒劑使用指南》做好個人手衛(wèi)生隔離病區(qū)、病人住所進行隨時消毒和終末消毒高頻接觸的門把手、電梯按鈕等加強清潔消毒醫(yī)院、機場、車站等人員密集場所的環(huán)境物體表面增加消毒頻次垃圾、糞便和污水進行收集和無害化處理醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第15頁。環(huán)境的清潔消毒《消毒劑使用指南》1、不宜對室外環(huán)境開展大規(guī)模的消毒2、不宜對外環(huán)境進行空氣消毒3、不宜直接使用消毒劑（粉）對人員進行消毒4、不宜對水塘、水庫、人工湖等環(huán)境中投加消毒劑（粉）進行消毒5、不得在有人條件下對空氣（空間）使用化學消毒劑消毒6、不宜用戊二醛對環(huán)境進行擦拭和噴霧消毒7、不宜使用高濃度的含氯消毒劑（有效氯濃度大于1000mg/L）做預防性消毒。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第16頁。新冠相關醫(yī)療廢物的處置

所有的危險性醫(yī)療廢物必須按照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標示方式，完整且合規(guī)地標示廢物內(nèi)容。應當由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備和設備處理危險性醫(yī)療廢物。固體廢物的處理小型固體廢物如檢測耗材、個人防護裝備等按照潛在感染性廢物使用雙層防滲漏專用包裝袋打包密封后，由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備（二級生物安全防護）轉(zhuǎn)運到指定的醫(yī)療廢物暫存地點，集中進行滅菌處理。運送過程防止醫(yī)療廢物直接接觸身體，避免醫(yī)療廢物泄漏和擴散。每天運送結束后，對運送工具用1000mg/L的含氯消毒液進行清潔和消毒；如果被感染性醫(yī)療廢物污染時，應當及時消毒處理；醫(yī)療廢物暫存地點應當有嚴密的封閉管理措施，設有工作人員進行管理，防止非工作人員接觸醫(yī)療廢物。用1000mg/L的含氯消毒液對醫(yī)療廢物暫存地點地面進行消毒，每天兩次。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第17頁。新冠相關醫(yī)療廢物的處置1、加強醫(yī)療廢物的分類收集醫(yī)療垃圾和生活垃圾規(guī)范包裝容器3/4鵝頸結式封口；2、分類收集使用后的一次性手術衣、防護服等物品時，嚴禁擠壓。

3、分區(qū)域進行處理收治新冠肺炎患者或者疑似患者的醫(yī)療廢物，在離開污染區(qū)前應當對包裝袋表面用1000mg/L的含氯消毒液噴灑消毒或者在其外面加套一層醫(yī)療廢物包裝袋；清潔區(qū)產(chǎn)生的醫(yī)療廢物按照常規(guī)醫(yī)療廢物處理。4、做好病原標本處理醫(yī)療廢物中含病原體的標本和相關保存液等高危險廢物，應當在產(chǎn)生地點進行壓力蒸汽滅菌或者化學消毒處理，然后按照感染性醫(yī)療廢物收集處理。5、嚴格執(zhí)行醫(yī)療廢物產(chǎn)生部門、運送人員、暫存處工作人員以及醫(yī)療廢物處置單位運送人員逐層轉(zhuǎn)運交接登記制度。

醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第18頁。核酸結果判讀和解釋結果判斷應按照說明書1.陰陽性質(zhì)控在控2.內(nèi)標正常：內(nèi)標一般為人工合成的假病毒，用于監(jiān)控核酸提取過程和反應體系可能存在的抑制因素，提示假陰性結果3.根據(jù)CT值判讀結果4.結果解釋依據(jù)說明書，應排除實驗室污染、標本采集保存不當?shù)葘е碌募訇?、假陰性結果。醫(yī)療機構新冠核酸檢測工作手冊全文共22頁，當前為第19頁。核酸報告判讀和解釋（一）二個基因片段結果報告判讀與解釋ORF1ab和N基因二個同時陽性時，判定為陽性若僅ORF1ab或N基因其中之一檢測結果陽性時，需重新采樣復查，復查后ORF1ab或N基因仍為陽性時，判定為陽性若ORF1ab或N基因檢測結果處于灰