營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)課件胡蘿卜素2009

單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式單擊此處編輯母版副標(biāo)題樣式*1食物來(lái)源胡蘿卜素：深色蔬菜水果——西蘭花、胡蘿卜、菠菜、芒果、橘子等胡蘿卜素〔μg/100g〕芒果8050橘子1660枇杷700西蘭花7210胡蘿卜4010菠菜2920莧菜2110小白菜〔青菜〕1853生菜1790油菜620一、

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模菏煜な卟酥泻}卜素的測(cè)定原理測(cè)定樣品中的胡蘿卜素的含量二、原理：蔬菜的植物色素包括葉綠素、葉黃素及胡蘿卜素等

蔬菜中各種色素均可溶于石油醚，將一定量的植物色素石油醚提取液點(diǎn)在層析紙的一端，用石油醚作展開(kāi)劑，進(jìn)行上行展開(kāi)。

由于胡蘿卜素極性最小，故被石油醚洗走的速度最快，從而可將胡蘿卜素與其它色素分開(kāi)?！?/p>

用石油醚將胡蘿卜素洗脫，用比色法直接測(cè)定。三、儀器組織搗碎機(jī)層析缸新華中速濾紙〔16cm×20cm〕分液漏斗125ml具塞試管

50ml

、10ml瓷蒸發(fā)皿分光光度計(jì)天平水浴鍋四、試劑石油醚〔分析純〕丙酮〔分析純〕3．3:7丙酮-石油醚4．無(wú)水硫酸鈉5．5%硫酸鈉溶液6．β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)液〔20μg/ml〕五、操作步驟1.150g蔬菜(洗凈晾干)+350ml水→搗碎

3min(公用)2.稱(chēng)取10g勻漿〔相當(dāng)于原樣品3g〕入具塞比色管→參加丙酮20ml、石油醚5ml→用力振搖1min(脫色)→靜置5min于125ml分液漏斗內(nèi)先放入5%硫酸鈉溶液30ml，用滴管吸上清液入分液漏斗用3:7丙酮-石油醚混合溶劑提取殘?jiān)?，每?0ml，共3次，直至提取液無(wú)色為止，每次提取液入分液漏斗振搖分液漏斗使水與提取液混合均勻?yàn)橐恕膊灰酥負(fù)u〕,靜置分層，放掉下層再以5%硫酸鈉溶液15

ml振搖洗滌，反復(fù)三次以除盡丙酮。6.將上液通過(guò)盛有無(wú)水硫酸鈉的漏斗濾入蒸發(fā)皿，用少量石油醚分?jǐn)?shù)次洗盡無(wú)水硫酸鈉及分液漏斗中的色素，洗液合并于蒸發(fā)皿。棉花團(tuán)無(wú)水硫酸鈉7.在60~70℃水浴上蒸至近干，立刻用滴管吸至5ml具塞刻度試管內(nèi)，反復(fù)用少量石油醚洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入刻度試管，直至洗至無(wú)色，定容至5ml，混勻待檢。8． 層析〔1〕點(diǎn)樣：距濾紙底邊4cm處用鉛筆劃一基線(xiàn)，在基線(xiàn)上取兩點(diǎn)，每點(diǎn)距紙兩側(cè)不少于4cm。準(zhǔn)確吸取檢液0.3

ml，以畫(huà)好的點(diǎn)為中心，迅速進(jìn)行帶狀點(diǎn)樣，一次點(diǎn)完?！?〕展開(kāi)：將點(diǎn)好樣的濾紙卷成圓筒狀，固定兩邊〔不使兩邊重疊〕，放入預(yù)先用石油醚飽和的層析缸內(nèi)。紙筒必須放正，濾紙筒基線(xiàn)以下1/3浸入液內(nèi)，進(jìn)行上行層析。4cm4cm9．洗脫及比色待胡蘿卜素與其它色素完全別離后，停止層析，將胡蘿卜素層析帶剪下，放入盛有5ml石油醚的試管中，用力振搖，使之洗入醚內(nèi)，以石油醚為空白，立即在450nm波長(zhǎng)處比色。10.

作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)取胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)液〔20

μg/ml

〕0.05，0.1，0.2

，0.4，0.8

ml入試管

加石油醚至5ml

以石油醚為空白在450nm波長(zhǎng)處比色。六、計(jì)算A1001胡蘿卜素=————×

V2

×——×

—1000V1W〔mg/100g〕A=樣品光密度相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)的μg數(shù)V1=點(diǎn)樣ml數(shù)七、本卷須知在使用比色管和分液漏斗前要檢查密閉性水浴上蒸醚時(shí)，蒸醚時(shí)蒸發(fā)皿中不能進(jìn)水，不能蒸干石油醚不能倒入水池比色皿不能接觸水思考題本次實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟有哪些