玉米端粒酶RNA模板基因候選序列的克隆鑒定的開(kāi)題報(bào)告

玉米端粒酶RNA模板基因候選序列的克隆鑒定的開(kāi)題報(bào)告一、研究背景及意義玉米是我國(guó)重要的糧食作物之一，同時(shí)也是全球重要的農(nóng)作物之一。隨著人們對(duì)玉米的深入了解和科學(xué)研究的不斷深入，越來(lái)越多的基因被發(fā)現(xiàn)。其中，崗菜代表大麥、小麥、玉米等禾本科作物，其內(nèi)含的蛋白質(zhì)可以抑制一些致癌基因的激活，是一種潛在的抗癌物質(zhì)。而端粒酶RNA是控制細(xì)胞增殖與細(xì)胞死亡的關(guān)鍵分子，其重要性不言而喻。因此，研究玉米端粒酶RNA模板基因候選序列的克隆鑒定，對(duì)揭示玉米基因的分子特征，進(jìn)一步探究其生物學(xué)功能和應(yīng)用價(jià)值具有重要意義。二、研究現(xiàn)狀目前，關(guān)于玉米端粒酶RNA模板基因候選序列的研究還比較有限。部分研究者已經(jīng)克隆了玉米端粒酶RNA的編碼基因，但這些研究還沒(méi)有涉及到其候選序列的克隆。因此，本研究將針對(duì)該序列的克隆鑒定進(jìn)行研究。三、研究?jī)?nèi)容及方法1.研究?jī)?nèi)容本研究旨在通過(guò)PCR擴(kuò)增、克隆和測(cè)序等技術(shù)，克隆鑒定玉米端粒酶RNA模板基因候選序列，進(jìn)一步分析其基本特征，為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。2.研究方法本研究將采用以下方法：（1）PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)端粒酶RNA模板基因候選序列特異引物，通過(guò)PCR擴(kuò)增目的序列。（2）克隆將PCR產(chǎn)物進(jìn)行構(gòu)建pGEM-T簡(jiǎn)易克隆載體，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到E.coliDH5α中，轉(zhuǎn)化后進(jìn)行PCR擴(kuò)增篩選。（3）測(cè)序與分析將篩選出的重組質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序，通過(guò)比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)和系統(tǒng)發(fā)育分析等方法對(duì)基因序列進(jìn)行分析，并對(duì)其功能進(jìn)行預(yù)測(cè)。四、預(yù)期成果本研究旨在克隆鑒定玉米端粒酶RNA模板基因候選序列，得到其基本特征、系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系、功能等信息，并為后續(xù)研究提供基礎(chǔ)。預(yù)期成果包括：（1）成功克隆了玉米端粒酶RNA模板基因候選序列。（2）對(duì)其的功能、系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系和分子特征進(jìn)行分析，并預(yù)測(cè)其生物學(xué)功能。（3）為后續(xù)研究提供基礎(chǔ)，為探究玉米基因的分子特征和生物學(xué)功能提供一定參考。五、進(jìn)度安排本研究共計(jì)三個(gè)月左右，具體進(jìn)度安排如下：第一階段（1個(gè)月）：設(shè)計(jì)端粒酶RNA模板基因候選序列特異引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并進(jìn)行膠回收。第二階段（1個(gè)月）：將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物構(gòu)建到pGEM-T簡(jiǎn)易克隆載體，進(jìn)行克隆轉(zhuǎn)化和PCR擴(kuò)增篩選。第三階段（1個(gè)月）：對(duì)克隆鑒定的玉米端粒酶RNA模板基因候選序列進(jìn)行測(cè)序、分析和預(yù)測(cè)功能。六、參考文獻(xiàn)[1]KimNW,PiatyszekMA,ProwseKR,etal.Specificassociationofhumantelomeraseactivitywithimmortalcellsandcancer[J].Science,1994,266(5193):2011-2015.[2]WuY,DingX,SunH,etal.CloningandExpressionAnalysisofMaizeTelomeraseReverseTranscriptaseGene[J].ScientiaAgriculturaSinica,2014,47(20):3990-3999.[3]WangH,TangY,ZhangQ,etal.AdvancesinTelomera