果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留的測定

·· 職業(yè)與健康2012年6月第28卷第12期OccupandHealth，Jun．2012，Vol．28，No．12果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留的測定劉克斌，天津市河?xùn)|區(qū)中山門街社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，300181天津市河?xùn)|區(qū)中山門新村中心北道3件人劉克斌摘要：本文主要介紹了果蔬有機磷農(nóng)藥殘留測定前樣品的處理方法，以及幾種具體的有機磷農(nóng)藥殘留分析方法。關(guān)鍵詞：果蔬；有機磷；農(nóng)藥殘留；測定早在上世紀五十年代我國就開始對農(nóng)藥殘留分析技術(shù)進行研究，最近幾年有了實質(zhì)性突破，GB2763－2005《食品中農(nóng)藥的最大殘留限量》中對包括甲胺磷在內(nèi)的近13種有機磷農(nóng)藥殘留在果蔬中的最大殘留限量（MRLs）有了明確的規(guī)定，GB/T5009.20－2003《食品中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定》對果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留量的檢測方法進行了詳盡闡述。果蔬產(chǎn)品中殘留了一定量的有機磷農(nóng)藥，前期對果蔬樣品的處理也有很多種方式，鑒于此深入探討前處理及分析方法[1]。1樣品前處理關(guān)于檢測果蔬中有機磷農(nóng)藥的方法已經(jīng)有較多研究，很多文獻中有關(guān)檢測方法已有報道，前期要做的工作就是將選擇的果蔬樣品進行預(yù)處理。一般預(yù)處理的目的就是把果蔬中殘留的農(nóng)藥同果蔬進行分離，祛除有機磷農(nóng)藥之外的其他雜質(zhì)混雜，保證測量的準確性。對果蔬樣品前期處理已經(jīng)有很多方法，譬如，包含了浸漬法、搗碎法、超聲波提取法、微波輔助萃取法等等。通過這些預(yù)處理保障了果蔬有機磷農(nóng)藥的檢測工作的順利展開。1.1浸漬法浸漬法時最為常見簡單的處理樣品的方法，取一定量果蔬樣品進行實驗操作，最先經(jīng)過脫水，然后脫色，完成后將樣品置入具塞三角瓶內(nèi)，選取合適的有機溶劑加入到三角瓶中進行溶解萃取，此過程要不斷振蕩，或者直接將三角瓶放在振蕩搖床上振蕩，浸漬法在操作上相對簡單，但是經(jīng)常會碰到一些樣品成分分子結(jié)合常數(shù)較大，相對穩(wěn)定或者這些樣品再有機溶劑中溶解度很小，如此一來給樣品的預(yù)處理帶來很大麻煩，在前處理提取樣品過程中提取不完全，花費時間過長。1.2搗碎法搗碎法在樣品有效成分提取中相對于浸漬法有較高的提取效率，操作方法也相對簡單，一般是將樣品同提取溶劑置入組織搗碎機內(nèi)，設(shè)定速度為2×104r/min，時間1~2min。由于樣品經(jīng)過搗碎能夠同加入的溶劑進行充分接觸，因此，待檢測物質(zhì)能夠在很短時間內(nèi)提取出來，但是搗碎法還是存在弊端，經(jīng)過這種方式得到的提取液極易出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，盡管可以通過離心機進行離心操作消除，但是后續(xù)還要進行鹽析分析、再提取、脫水和濃縮等實驗操作，會花費大量時間，過程過于繁瑣。對樣品的再提取、去除水分以及濃縮等等操作，這個過程消耗大量時間，操作也過于繁瑣。1.3超聲波提取法超聲波提取法利用的就是超聲波，由于超聲波的頻率在2×104Hz以上，它們能夠通過液體媒介傳播，其中的液體微粒會發(fā)生強烈震動，由此會出現(xiàn)數(shù)量極多的小空洞，的聲波即為超聲波，超聲波能夠以液體作為媒介進行傳播，此時液體微粒能夠產(chǎn)生強烈震動，媒介中因此會產(chǎn)生無數(shù)個小空洞，產(chǎn)生的空洞能夠擴展膨脹，繼而閉合，致使液體微粒互相產(chǎn)生碰撞，微粒之間產(chǎn)生的這些相互作用，能夠?qū)悠愤M行充分攪拌作用，促進了溶質(zhì)快速溶解，超聲波利用微粒之間的相互作用，通過選用適宜的溶劑能夠高效地實現(xiàn)樣品中殘留有機磷農(nóng)藥的提取。1.4微波輔助萃取法(MAE)微波輔助萃取法的原理就是微波傳輸過程也就是將極性分子產(chǎn)生作用的過程，會將樣品中的一些分子極化，被極化的分子彼此間會不停地撞擊、摩擦，進而被測組分能夠同溶劑實現(xiàn)大面積接觸，很大程度上促進了樣品的分離萃取，采用這種方式進行萃取同過去傳統(tǒng)的萃取方式進行比對，可以發(fā)現(xiàn)微波輔助萃取的方式在操作上更為簡便、耗時少、耗材少、萃取率高等特點。美國科學(xué)家Ganzler等在1986年第一次通過家用微波爐對土壤中的有機成分進行提取，如今已經(jīng)研制了專門的微波輔助萃取裝置，比如美國培安公司推出的型號MARS-X微波輔助萃取系統(tǒng)，上海上海新儀微波化學(xué)科技有限公司生產(chǎn)的MAS－1型常壓微波萃取儀等。2分析方法對有機磷農(nóng)藥的檢測方式有很多，普遍利用的檢測方法，比如氣相色譜法(GC)、氣質(zhì)聯(lián)用法(GC/MS)、快速檢測法、液相色譜法－質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC/MS)、高效液相色譜法(HPLC)，除此之外還有光度法、極譜法、酶聯(lián)免疫法等等。2.1氣相色譜法氣相色譜法在運用中具有一系列實用的優(yōu)點，具備良好的選擇性、檢測靈敏度高、分析效率相對較高等等，對果蔬中殘留的有機磷農(nóng)藥的檢測一般利用氣相色譜法，國家在制定檢測標準方法選擇的方式也是氣相色譜法。NPD、FPD等檢測器常用于有機磷農(nóng)藥的檢測分析，除此之外還出現(xiàn)了一種電子捕獲檢測器(ECD)。對果蔬中殘留有機磷農(nóng)藥檢測分析時，各類檢測器表現(xiàn)出不同的性能，NPD的靈敏程度很明顯要高于FPD，NPD檢測器有其獨特的結(jié)構(gòu)，這就使在實際檢測有機磷農(nóng)藥時氣相色譜圖譜中會出現(xiàn)嚴重的色譜峰拖尾狀況。假設(shè)選用的樣品中富含天然的有機氮化合物，那么其對色譜峰會產(chǎn)生一定程度的干擾。選用FPD檢測器進行檢測的方式相對普遍，但是極易滅火，當烴類化合物與待測組分相遇而且同一時間進入火焰中時，很大程度上會對檢測結(jié)果造成干擾，極易會出現(xiàn)檢測器沒有響應(yīng)的情況。NPD、FPD、ECD檢測器在實際檢測應(yīng)用中是沒有定性功能，即不能對待測物質(zhì)進行定性分析，只是對峰進行分析，特別時峰保留時間，以此作為依據(jù)能夠做出定性判斷，但是比較容易出現(xiàn)假陽性的狀況，如果樣品較為復(fù)雜，其中部分組成也會造成干擾影響判斷。2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)(串)用法(GC/MS、GC/MS-MS)在實際應(yīng)用中，會有多種有機磷農(nóng)藥運用到果蔬中，實際上國家對它們的檢測方式大都選用氣相色譜法，由于自身有限的定性能力，一般對準確性高、靈敏度高的檢測方法的選擇就特別重要，充分利用好氣相色譜在靈敏度上的優(yōu)勢以及質(zhì)譜自身具備的定性能力，遠比單個使用氣相色譜或者質(zhì)譜的檢測結(jié)果準確，在GB/19648－2006中，GC/MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[2]已經(jīng)成為果蔬中近500種農(nóng)藥和相關(guān)化學(xué)品殘留量檢測的標準法。2.3高效液相色譜法(HPLC)氣相色譜法測定磷農(nóng)藥殘留量時，有些有機磷農(nóng)藥熱穩(wěn)定性差、極性強、容易吸附在色譜柱上，此時采用氣相色譜法顯然時不合適的，高效液相色譜能夠解決這類問題，能夠?qū)咧袣埩舻乃杏袡C磷農(nóng)藥進行檢測測定，操作簡便、測定結(jié)果準確度高、靈敏度高等等。張卓旻等用固相萃?。咝б合嗌V聯(lián)用對蔬菜中五種常見的有機磷進行檢測分析，建立了建立了固相萃取(SPE)－高效液相色譜(HPLC)聯(lián)用測定蔬菜中甲基對硫磷、三唑磷、乙基對硫磷、倍硫磷和辛硫磷的分析方法。利用自制的FlorisilSPE柱，對萃取溶劑、SPE柱的填料類型、用料、淋洗溶劑等等前處理條件和高效液相色譜條件進行優(yōu)化改良。2.4液相色譜法徐遠金等[2]建立了通過固相萃取/液相色譜－電噴霧質(zhì)譜(SPE/HPLC-MSn)對果蔬中痕量的有機磷農(nóng)藥（甲胺磷、久效磷、敵百蟲、馬拉硫磷、對硫磷、二嗪農(nóng)和辛硫磷）殘留量的檢測方法，結(jié)合二級質(zhì)譜的特征碎片離子狀況探索了這7種有機磷農(nóng)藥產(chǎn)生裂解的規(guī)律。經(jīng)過固相萃取后的樣品提取液通過C18柱進行分離，流動相為0.1%(φ)甲酸乙腈－0.1%(φ)甲酸水溶液，線性梯度進行洗脫，通過保留時間和質(zhì)荷比對分離開的組分進行定性判別，以峰面積的大小進行定量確定。經(jīng)過結(jié)果分析討論，發(fā)現(xiàn)在一定范圍內(nèi)七種有機磷農(nóng)藥的濃度和峰面積呈現(xiàn)出線性關(guān)系，檢出限范圍為0.002～0.090μg/kg，樣品的加標平均回收率為85%～97%，相對標準偏差為3.1%～5.2%。選用的液相色譜法在操作上更加簡便、耗時少、靈敏度高，能夠?qū)崿F(xiàn)果蔬中7種有機磷農(nóng)藥的同步檢測分析。3總結(jié)與展望對果蔬產(chǎn)品中有機磷農(nóng)藥殘留量的檢測技術(shù)引起了社會各界的廣泛關(guān)注，科研工作者對檢測技術(shù)的發(fā)展創(chuàng)新研究工作不斷完善優(yōu)化，出現(xiàn)了新的磷農(nóng)藥檢測技術(shù)，比如免疫分析檢測技術(shù)、生物傳感器檢測技術(shù)、活體檢測技術(shù)等等，隨著社會各界對果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留的持續(xù)關(guān)注和科學(xué)技術(shù)的深入發(fā)展，檢測技術(shù)服務(wù)