替西沙林鈉克拉維酸鉀穩(wěn)定性和有效性研究

替西沙林鈉克拉維酸鉀穩(wěn)定性和有效性研究

青霉素是一種半合成青霉素，其抗菌譜與羧醇青霉相似。然而，對綠膿桿菌的抗菌活性是羧醇青霉的2倍，對g-菌的相對活性較低，對嚴(yán)重的g-菌感染特別有效。其常用制劑為替卡西林鈉/克拉維酸鉀混合無菌粉末?？死S酸鉀作用于β-內(nèi)酰胺酶,兩者聯(lián)用擴大了抗菌譜,增強了抗菌活性。臨床上將替卡西林鈉/克拉維酸鉀用于靜脈滴注,因此,特主要考察其在水溶液中的穩(wěn)定性。1實驗部分1.1流動相、色譜相LC-AT液相色譜儀(日本島津);C18柱(迪瑪公司,200mm×4.6mm,5μm)。流動相為pH4.2磷酸緩沖液-乙腈(92:8);流速1ml·min-1;柱溫40℃;檢測波長220nm;進樣量20μl。替卡西林鈉、克拉維酸鉀原料藥(自制);乙腈為色譜純;水為超純水;其余試劑為分析純。1.2方法和結(jié)果1.2.1高、中、低濃度的加標(biāo)回收率精密稱取100mg替卡西林鈉、6.67mg克拉維酸鉀于100ml量瓶中,用純水定容,搖勻,備用。方法學(xué)研究表明,替卡西林鈉在1442～632μg·ml-1的線性良好(r=0.9994),克拉維酸鉀96.15～42.13μg·ml-1的線性良好(r=0.9996)。替卡西林鈉高、中、低濃度回收率分別為99.17%(RSD=0.32%)、99.97%(RSD=0.46%)、99.31%(RSD=0.61%)。低、中、高濃度的日內(nèi)RSD分別為2.39%、1.28%、2.2%。高、中、低濃度的日間RSD分別為1.56%、0.75%、2.34%?？死S酸鉀高、中、低濃度的回收率分別為98.15%(RSD=0.33%)、99.37%(RSD=0.43%)、98.98%(RSD=0.64%)。低、中、高濃度的日內(nèi)RSD分別為1.59%、1.23%、1.21%。高、中、低濃度的日間RSD分別為1.06%、0.53%、2.56%。1.2.2初始濃度的確定取供試品溶液適量封裝于2ml安瓿中,置40℃、60℃、70℃、80℃恒溫水浴中,于不同時間點取樣,放入冰水浴中終止反應(yīng)。即時取樣作為初始濃度。測定結(jié)果見表1。1.2.3替西林鈉流動相的制備以0.01mol·L-1pH7磷酸氫二銨緩沖液為流動相A;0.01mol·L-1pH7磷酸氫二銨緩沖液-甲醇(1:1)為流動相B;流速1.0ml·min-1,梯度洗脫;檢測波長220nm。待測溶液加0.01mol·L-1pH7磷酸氫二銨緩沖液制成含替卡西林鈉0.02mg·ml-1的對照溶液,取20μl進樣,替卡西林鈉兩異構(gòu)體峰高為記錄儀滿量程的25%。各取20μl供試品溶液與對照液,進樣,梯度洗脫,0～30min,流動相B的比例從0增加到70%,維持10min;40min時,流動相A的比例增加到100%,維持5min。將供試品溶液與對照溶液中替卡西林鈉的兩異構(gòu)體主峰面積和進行比較,計算其百分率,考察研究有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果見表2。1.2.4濁度標(biāo)準(zhǔn)液與濁度標(biāo)準(zhǔn)液《中國獄》2.取樣品,加水制成含替卡西林鈉0.15g·ml-1的溶液,與濁度標(biāo)準(zhǔn)液(《中國藥典》2005年版)比較。溶液略顯色,與標(biāo)準(zhǔn)比色液(《中國藥典》2005年版)比較,觀察溶液在熱降解過程中澄明度和顏色的變化(表3)。1.2.5降解動力學(xué)方程將表1在4個溫度條件下得到的數(shù)據(jù)用0～2級化學(xué)反應(yīng)動力學(xué)方程式進行擬合(表4),根據(jù)r2來判斷降解動力學(xué)過程。替卡西林鈉、克拉維酸鉀的降解均遵循一級動力學(xué)過程。1.2.6降解速度及速率替卡西林鈉、克拉維酸鉀按一級動力學(xué)擬合,得出4個不同溫度下的降解速度常數(shù)k;再根據(jù)Arrhenius公式以lnK對1/T作圖,推算其在25℃條件下的降解速度常數(shù)。lnK替卡西林鈉=6.124-2.629×103(1/T)(r=0.9997);lnK克拉維酸鉀=7.819-3.055×103(1/T)(r=0.9967)。因此,可推導(dǎo)出替卡西林鈉和克拉維酸鉀溶液25℃的K值分別為1.996×103、3.683×103h-1,分解5%的時間分別為25.73、13.94h。1.2.7lnvai線性回歸分析根據(jù)實驗,不同溫度下分解初始的速度VOi=(CO-Ci)/ti(i=1,2,3,…,n)(表5)。根據(jù)Arrhenius定律的對數(shù)公式:lnK=-E/2.303RT+lnA,用lnVOi對1/T線性回歸,回歸方程為:lnVOi替卡西林鈉=-2.333×103(1/T)+7.131(r=0.9949);lnVOi克拉維酸鉀=-2.774(1/T)+8.863(r=0.9973)。由此可知,替卡西林鈉、克拉維酸鉀在25℃分解5%的時間分別為24.89、14.00h。2注射用溶劑的穩(wěn)定性文中實驗采用經(jīng)典恒溫法與初勻速法,測定了新近配制的替卡西林鈉/克拉維酸鉀溶液在不同溫度下的分解程度和穩(wěn)定性。結(jié)果表明,該制劑在25℃的有效期限為13.94～14.00h,兩種方法的結(jié)果無顯著性差異,所以注射用溶液應(yīng)隨