一個(gè)擬南芥花器官發(fā)育突變體的遺傳分析和基因定位的中期報(bào)告

一個(gè)擬南芥花器官發(fā)育突變體的遺傳分析和基因定位的中期報(bào)告本實(shí)驗(yàn)旨在研究擬南芥（Arabidopsisthaliana）花器官的發(fā)育，通過(guò)觀察發(fā)育突變體的表現(xiàn)、遺傳分析和基因定位等手段，探究與花器官發(fā)育相關(guān)的基因和調(diào)控機(jī)制。1.實(shí)驗(yàn)材料本實(shí)驗(yàn)采用的擬南芥品種為Col-0，包括以下突變體：突變體名稱|表型特征---|---ap1-1|無(wú)花瓣、無(wú)雄蕊、非常類似于萼片的花瓣、僅有兩個(gè)子房和少數(shù)胚珠的花ap2-1|花瓣、雄蕊、子房?jī)?nèi)壁和胚珠的發(fā)育異常ap3-1|萼片與花瓣之間模糊不清、雄蕊比正?；ㄉ?、子房發(fā)育受限pi-1|與ap1-1類似的表型，但是有少量分化的雄蕊2.實(shí)驗(yàn)方法2.1觀察花器官發(fā)育突變體的表現(xiàn)在生長(zhǎng)室中培養(yǎng)Col-0和不同突變體的擬南芥，觀察花器官的發(fā)育和形態(tài)。2.2遺傳分析采用分離重組法進(jìn)行遺傳分析，分別將突變體ap1-1、ap2-1和ap3-1與野生型Col-0交配，得到F1代。再將F1代與不同突變體雜交，得到F2代，觀察F2代花器官的發(fā)育和表現(xiàn)，分析突變體的遺傳模式和遺傳比例。2.3基因定位選取ap1-1突變體，對(duì)其進(jìn)行基因定位。構(gòu)建F2代個(gè)體DNA池，分別以突變和野生型上下游引物擴(kuò)增多態(tài)性標(biāo)記，并進(jìn)行基因組測(cè)序，獲得突變位點(diǎn)和位于突變位點(diǎn)周?chē)臉?biāo)記，通過(guò)重組率和頻率的計(jì)算，逐漸縮小位點(diǎn)區(qū)域，最終定位到與突變體表型相關(guān)的基因。3.中期報(bào)告進(jìn)展目前，已經(jīng)完成了部分實(shí)驗(yàn)工作，結(jié)果如下：3.1觀察花器官發(fā)育突變體的表現(xiàn)三個(gè)突變體的表現(xiàn)如表格所示：突變體名稱|表型特征---|---ap1-1|無(wú)花瓣、無(wú)雄蕊、非常類似于萼片的花瓣、僅有兩個(gè)子房和少數(shù)胚珠的花ap2-1|花瓣、雄蕊、子房?jī)?nèi)壁和胚珠的發(fā)育異常ap3-1|萼片與花瓣之間模糊不清、雄蕊比正?；ㄉ?、子房發(fā)育受限與野生型相比，三個(gè)突變體的表現(xiàn)均有明顯差異，特別是ap1-1和ap2-1突變體的表現(xiàn)非常顯著。3.2遺傳分析已經(jīng)完成了突變體和野生型的交配和F1代觀察，結(jié)果表明，三個(gè)突變體的遺傳模式都是單基因隱性遺傳，F(xiàn)1代表現(xiàn)均與野生型相似。目前正在進(jìn)行F2代的觀察和分析，預(yù)計(jì)在近期可以收集足夠數(shù)量的F2代個(gè)體，進(jìn)行遺傳比例分析和位點(diǎn)定位工作。3.3基因定位基因定位工作還沒(méi)有開(kāi)始，需要等到F2代個(gè)體數(shù)量足夠多時(shí)才能進(jìn)行。預(yù)計(jì)在下一階段可以開(kāi)始基因定位工作。4.下一步計(jì)劃下一步的實(shí)驗(yàn)工作包括繼續(xù)觀察F2代個(gè)體的表現(xiàn)，進(jìn)行遺傳分析和比例分析，逐漸縮小位點(diǎn)區(qū)域