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細(xì)菌的營養(yǎng)代謝
一細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)及其作用1、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)作用:
(1)供給細(xì)菌合成細(xì)胞物質(zhì)的原料;
(2)用以產(chǎn)生能量;
(3)有的營養(yǎng)物如維生素主要用于調(diào)節(jié)新陳代謝。2、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)(1)水是細(xì)胞維持正常生命活動所必不可少的,一般可占細(xì)胞重量的70-90%。在微生物各種各樣的生理活動中必須有水參加才能進(jìn)行。水是一種最優(yōu)良的溶劑,可保證幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行水可維持各種生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,并參與某些重要的生物化學(xué)反應(yīng)。水還有許多優(yōu)良的物理性質(zhì),諸如高比熱、高汽化熱、高沸點(diǎn)以及固態(tài)時密度小于液態(tài)等,都是保證生命活動十分重要的特性。
(2)碳源:是構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架來源的營養(yǎng)物。碳源既是微生物的組成成分,又是微生物的能量來源。微生物可以利用的碳源范圍極廣,分為有機(jī)碳源和無機(jī)碳源兩大類,糖類是最廣泛利用的碳源。碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的細(xì)胞物質(zhì)(如碳水化合物、脂、蛋白質(zhì)等)和代謝產(chǎn)物,碳可占一般細(xì)菌細(xì)胞干重的一半。
(3)氮源:是能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源。氮是組成微生物蛋白質(zhì)、酶和核酸的成分。能利用的氮源種類十分廣泛。空氣中分子態(tài)的氮、無機(jī)和有機(jī)氮。氮源這類物質(zhì)主要用來合成細(xì)胞中的含氮物質(zhì),一般不作為能源,只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時作為氮源與能源。不同種類的微生物對氮源的需要也不盡相同。微生物培養(yǎng)時最常用的有機(jī)氮源是牛肉膏、酵母膏等,蛋白胨(部分水解蛋白質(zhì))是許多微生物良好的氮源。(4)無機(jī)鹽主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量元素等。無機(jī)鹽是微生物生長必不可少的一類營養(yǎng)物質(zhì),它們在機(jī)體中的生理功能主要是作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓平衡、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)等。主要元素包括磷、硫、鉀、鎂、鈣、鈉等。微量元素包括鋅、錳、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、鎳、硼等。在配制培養(yǎng)基時,首選加入磷酸氫二鉀和硫酸鎂,基本時可以同時提供4種需要量最大的元素。
(5)生長因子通常指那些微生物生長所必需且需要量很小,而且微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物。根據(jù)生長因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)和它們在機(jī)體中的生理功能的不同,可將生長因子分為維生素、氨基酸與嘌呤及嘧啶三大類。生長因子可以從酵母膏、玉米漿、麥芽汁、血液或血清中獲得。1、自養(yǎng)型:能在完全為無機(jī)物的環(huán)境中生長,所需營養(yǎng)物質(zhì)簡單,他們具有完備的酶系統(tǒng),能利用二氧化碳和碳酸鹽作為碳源,合成菌體內(nèi)所需要的有機(jī)碳化合物。例如:菌紅素、菌綠素等等。即這類細(xì)菌含有特殊的色素。
2、異養(yǎng)型:必須利用有機(jī)物作為其碳源,不具備完備的酶系統(tǒng),其代謝所需能量大多通過分解化學(xué)物質(zhì)而獲得。
腐生菌:從無生命的有機(jī)物中取得能量和碳源的細(xì)菌。
寄生菌:從活的動植物或微生物體內(nèi)取得能量和碳源的細(xì)菌。二細(xì)菌的營養(yǎng)類型三細(xì)菌攝取營養(yǎng)的方式1、被動擴(kuò)散:指疏水性雙分子層細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依靠物理擴(kuò)散方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水性分子被動通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。主要有氧、二氧化碳、乙醇和某些氨基酸分子。2、促進(jìn)擴(kuò)散:指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié)助,但不消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。促進(jìn)擴(kuò)散與被動擴(kuò)散的主要區(qū)別在于通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助與載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞.而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì),具有較高的專一性。3、主動運(yùn)輸指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象的變化,而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。運(yùn)送對象舉例:氨基酸、乳糖等糖類,Na+、Ca2+等無機(jī)離子。ATP
ADP
+Pi
恢復(fù)原構(gòu)像再循環(huán)耗能構(gòu)像改變膜上膜外膜內(nèi)移位結(jié)合12主動運(yùn)輸特點(diǎn):被運(yùn)送的物質(zhì)可逆濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)要消耗能量,必需有能量參加。有膜載體參加,膜載體發(fā)生構(gòu)型變化。被運(yùn)送物質(zhì)不發(fā)生任何變化。
4、基團(tuán)轉(zhuǎn)移指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質(zhì)運(yùn)送方式,其特點(diǎn)使溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化,因此不同于一般的主動運(yùn)送。
運(yùn)送對象舉例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。運(yùn)送機(jī)制主要靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)。運(yùn)輸方式濃度載體耗能運(yùn)送分子發(fā)生變化單純擴(kuò)散高→低不需要不耗能不變化促進(jìn)擴(kuò)散高→低需要不耗能不變化主動運(yùn)輸?shù)汀咝枰哪懿蛔兓鶊F(tuán)轉(zhuǎn)位低→高需要耗能變化運(yùn)輸方式:1、根據(jù)各種酶所催化的反應(yīng)類型,將酶分為氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂解酶、異構(gòu)酶、合成酶六大類。
2、根據(jù)酶作用的部位分為:胞外酶、胞內(nèi)酶
胞外酶:是在細(xì)菌內(nèi)部產(chǎn)生后分泌到菌體細(xì)胞外的酶。例如:水解酶:蛋白酶、脂肪酶、糖酶。
胞內(nèi)酶:在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生并發(fā)揮作用。例如:生物氧化的呼吸酶。
3、按照酶的產(chǎn)生方式分:
固有酶:細(xì)菌本身具有,是細(xì)菌代謝中必需的酶。
例如:大多水解酶。
誘導(dǎo)酶:細(xì)菌在環(huán)境因素刺激下產(chǎn)生的酶,也稱適應(yīng)酶。例如:大腸桿菌的半乳糖酶,只有在環(huán)境中存在乳糖時才產(chǎn)生。四細(xì)菌的酶根據(jù)細(xì)菌呼吸時對氧的需要程度,可將細(xì)菌分為需氧菌、厭氧菌、微嗜氧菌、兼性厭氧菌。
1、需氧菌:如果細(xì)菌只具有催化有氧呼吸的酶系統(tǒng),必須在有氧的條件下才能夠完成生長和繁殖,稱為需氧菌。例如:綠膿桿菌。
2、厭氧菌:細(xì)菌只能在無氧條件下才能生長繁殖,稱為厭氧菌。例如:破傷風(fēng)梭菌,肉毒梭菌等。
3、微嗜氧菌:細(xì)菌酶介于需氧與厭氧之間,其代謝過程中雖然需要氧,但只在一定的壓強(qiáng)下生長最好。例如:牛流產(chǎn)布魯氏菌。
4、兼性厭氧菌:細(xì)菌的酶系統(tǒng)較完善,既含有催化有氧呼吸的酶,又含有催化無氧呼吸的酶,在無氧和有氧的條件下均能生長繁殖。例如:大腸桿菌。
五細(xì)菌的呼吸類型1、分解產(chǎn)物:
(1)糖的分解產(chǎn)物:糖、二氧化碳、酸類、醇類、酮類等。不同種類的細(xì)菌有不同的酶,對于某種糖,有的細(xì)菌能分解,有的細(xì)菌則不能分解。
例如:大腸桿菌能分解乳糖,而沙菌不能。-----乳酸發(fā)酵試驗(yàn),v--p實(shí)驗(yàn),MR實(shí)驗(yàn)(產(chǎn)酸)
(2)蛋白質(zhì)的分解產(chǎn)物:不同種類的細(xì)菌,分解蛋白質(zhì)的能力有差異。
?H2S試驗(yàn):分解含硫氨基酸、產(chǎn)生硫化氫。
?明膠試驗(yàn):有的細(xì)菌含有明膠酶,有的不含。含有的可使明膠液化。
?尿素試驗(yàn):分解尿素---NH3
?硝酸鹽還原試驗(yàn):到亞硝酸鹽
六細(xì)菌的新陳代謝產(chǎn)物2、合成產(chǎn)物:
(1)維生素:人和動物體內(nèi)的細(xì)菌能合成維生素B和維生素K。
(2)細(xì)菌素:是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一種具有抗菌作用的蛋白質(zhì),只對親源關(guān)系較近的細(xì)菌有抑制作用。例如大腸菌素、綠膿菌素、葡萄球菌素等。
(3)毒素:內(nèi)毒素與外毒素
(4)熱源質(zhì):G-產(chǎn)生的酯多糖物質(zhì),注入人和動物體內(nèi),可以引起發(fā)熱反應(yīng)。故成為熱源質(zhì)。它能耐高壓蒸汽滅菌,故在制備注射劑和生物制品時,應(yīng)將其除去。(5)酶類:細(xì)菌在代謝過程中產(chǎn)生毒性酶,能破壞動物的正常組織和細(xì)胞成分有助于細(xì)菌在體內(nèi)擴(kuò)散,增強(qiáng)細(xì)菌的致病能力。
(6)色素:多種細(xì)菌在條件適宜時,能形成各種色素。
?水溶性色素:例如綠膿桿菌產(chǎn)生的綠膿色素是水溶性。
?脂溶性色素:例如葡萄球菌產(chǎn)生類胡蘿卜素。溶于氯仿、遺傳等,稱為脂溶性色素,故菌落顯示顏色。1、細(xì)菌生長繁殖的條件:
(1)營養(yǎng)物質(zhì):水分、含碳化合物、含氮化合物、礦物質(zhì)。
(2)溫度:病原菌的最適宜生長溫度為37℃。
實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)菌用恒溫培養(yǎng)箱調(diào)至37℃。
(3)PH:最適7.2-7.6,所以往往需要在培養(yǎng)基內(nèi)加入一定的緩沖劑。例如:K2HPO4
(4)滲透壓:例如:鹽腌的原理(防腐)、鹽提高食品中的滲透壓,細(xì)菌不能生長,有的細(xì)菌,如:副溶血弧菌,糞鏈球菌等能在較高的食鹽濃度下生長(百分之八)。七細(xì)菌的生長與繁殖2、細(xì)菌生長繁殖的特點(diǎn):
(1)細(xì)菌的繁殖方式和速度:
細(xì)菌的繁殖方式“二分裂”,環(huán)境適宜,大多細(xì)菌每秒20至30分鐘分裂一次,按此速度計(jì)算,一個細(xì)菌生長繁殖10小時后,可以形成10億個細(xì)菌,有些細(xì)菌如分枝桿菌,10多個小時才能分裂一次。
(2)細(xì)菌的生長曲線:
營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,細(xì)菌不可能始終保持這種高速度的繁殖,經(jīng)過一段時間后,繁殖速度逐漸減慢,死亡細(xì)菌數(shù)增加。
如果將一定數(shù)量的細(xì)菌接種于適宜的培養(yǎng)基中,間隔不同時間取樣檢查,以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo),以細(xì)菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo),可以形成一條生長的曲線,稱為細(xì)菌的生長曲線。細(xì)菌的典型生長曲線總菌數(shù)活菌數(shù)培養(yǎng)時間/h
Ⅱ.指數(shù)期Ⅲ.穩(wěn)定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.延滯期細(xì)菌數(shù)目(個/ml)對數(shù)ⅡⅢⅣⅠ
根據(jù)細(xì)菌的生長速率常數(shù)的不同,可將生長曲線大致分為四個時期:
Ⅰ遲緩期
遲緩期出現(xiàn)的原因把少數(shù)單細(xì)胞細(xì)菌接種到新鮮的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,細(xì)胞并不立即進(jìn)行分裂繁殖,微生物的增殖數(shù)為0,這時細(xì)胞需要合成多種酶,輔酶和某些中間代謝產(chǎn)物,因此要經(jīng)歷一個調(diào)整和適應(yīng)過程。
遲緩期的特點(diǎn)
1、生長速率常數(shù)為零;
2、細(xì)胞形態(tài)變大或增長;
3、細(xì)胞內(nèi)的RNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性;
4、合成代謝十分活躍;
5、對外界不良環(huán)境反應(yīng)敏感。
影響遲緩期長短的因素
1、菌種特性;2、接種齡;3、接種量;4、培養(yǎng)基成分
縮短遲緩期的方法
1、接種對數(shù)生長期的菌種,采用最適菌齡;
2、加大接種量;
3、用營養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基等。
Ⅱ指數(shù)期指數(shù)期的特點(diǎn)
1、活菌數(shù)和總菌數(shù)接近
2、生長速率常數(shù)最大,代時最短
3、細(xì)胞進(jìn)行平衡生長,細(xì)胞的化學(xué)組成及形態(tài),生理特性比較一致
4、酶系活躍,代謝旺盛
該期的微生物生產(chǎn)中多被用做種子和科學(xué)試驗(yàn)材料影響指數(shù)期微生物代時長短的因素菌種營養(yǎng)成分營養(yǎng)物濃度培養(yǎng)溫度生長限制因子:凡處于較低濃度范圍內(nèi)可影響生長速率和菌體產(chǎn)量的某營養(yǎng)物。Ⅲ穩(wěn)定期穩(wěn)定期的特點(diǎn):
1、生長速率常數(shù)R等于零,活菌數(shù)達(dá)到最高峰,并保持相對穩(wěn)定。
2、微生物細(xì)胞內(nèi)代謝物積累達(dá)到最高峰。
3、芽孢桿菌這時開始形成芽孢。
4、這是產(chǎn)物(菌體或與菌體生長相平行的代謝產(chǎn)物)的最佳收獲時期。穩(wěn)定期到來的原因
1、營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡
2、營養(yǎng)物的比例失調(diào)
3、有害代謝產(chǎn)物的積累
4、pH值、Eh值等理化條件不適宜Ⅳ衰亡期衰亡期的特點(diǎn)1、微生物死亡數(shù)大于增殖數(shù),活菌數(shù)大大減少,群體衰落2、細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài),大小不等的畸形,變成衰退型3、細(xì)胞死亡,出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。4、有的微生物在此期合成或釋放次生代謝物。5、芽孢桿菌在此期釋放芽孢。
細(xì)菌的人工培養(yǎng)一般檢驗(yàn)方法
主要動物細(xì)菌
一細(xì)菌的人工培養(yǎng)
培養(yǎng)基是人工配制的適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物營養(yǎng)基質(zhì)。
根據(jù)培養(yǎng)基的用途來分基礎(chǔ)培養(yǎng)基:滿足一般微生物生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
營養(yǎng)培養(yǎng)基:在自然界中各種微生物通常是混雜在一起的,了解了某一些微生物的營養(yǎng)要求,配制適合這種微生物生長而不適合其他微生物生長的培養(yǎng)基,就達(dá)到了從自然界中分離這種微生物的目的,這種培養(yǎng)基就稱為營養(yǎng)培養(yǎng)基。一般常加入血、血清或動植物提取液等。----“投其所好”
選擇性培養(yǎng)基:根據(jù)不同的微生物對營養(yǎng)的特殊要求,或?qū)ξ锢砘瘜W(xué)條件的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,利用這一類培養(yǎng)基可以把需要微生物從混雜的其他微生物分離和確定。
----“取其所抗”鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物,而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化,根據(jù)這種特征性變化,可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。
根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)分1、液體培養(yǎng)基:配制后不加任何凝固劑。2、半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基上加進(jìn)一定凝固劑,在液體培養(yǎng)基中如加0.5%瓊脂,可以用來觀察細(xì)胞運(yùn)動的特征,鑒定菌種,測定抗菌素的效價等。3、固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如1.5-2.0%瓊脂)。固體培養(yǎng)基為微生物的生長提供了一個營養(yǎng)表面,在這個表面生長微生物可形成單個菌落,用于微生物的分離,鑒定,計(jì)數(shù),保管。粘液型菌落菌膜菌沉淀均勻渾濁對照固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基菌落:細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上定點(diǎn)繁殖時,形成孤立的、肉眼可見的堆積物。
表現(xiàn):大小、形態(tài)、透明度、隆起度、度、濕潤度,表面光滑、粗糙、有無光澤。
菌苔:許多菌落融合成一片。
1、有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)
2、PH、水分
3、均勻透明,易于觀察。
4、經(jīng)過滅菌和無菌檢驗(yàn)細(xì)菌的生長表現(xiàn)培養(yǎng)基的基本要求菌落形態(tài)細(xì)菌菌落特征正面圖細(xì)菌菌落特征剖面圖1、傾注平皿接種法:做好平皿(帶有培養(yǎng)基)將少量液體在待檢材料中加入滅菌平皿中,均勻放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。例如:用于鮮奶、飲水、尿液。
2、平板劃線培養(yǎng)法:無菌操作,用滅過菌的接種環(huán)取少量材料,然后在瓊脂平板培養(yǎng)基表面劃線。
3、斜面接種法:用滅過菌的接種環(huán)將菌體材料接種于瓊脂斜面上使其生長。
例如:移植細(xì)菌、保存菌種。
4、穿刺接種法:用滅過菌的接種針挑取少量菌落或液體培養(yǎng)基,于中心穿入,距底零點(diǎn)3厘米-0.5厘米時,將針原路退出。例如:半固體培養(yǎng)基接種,
5、液體培養(yǎng)基接種法:用接種環(huán)取材料,插入盛有液體培養(yǎng)基的試管中二至三次搖動。細(xì)菌的接種培養(yǎng)平板劃線培養(yǎng)法二細(xì)菌的一般檢驗(yàn)方法
分離培養(yǎng)涂片鏡檢取可疑菌落病料鑒定試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)動物接種免疫學(xué)診斷結(jié)果報(bào)告初染結(jié)晶紫媒染碘液脫色乙醇復(fù)染沙黃甲菌紫色(G+)乙菌紅色(G-)革蘭氏染色步驟示意圖細(xì)胞壁與革蘭氏染色三主要病原細(xì)菌
革蘭氏陽性桿菌(G+)革蘭氏陰性桿菌G-)1、葡萄球菌:G+
(1)形態(tài):呈球形,排列成堆,如葡萄狀,無鞭毛、芽胞。金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。
(2)培養(yǎng):在普通培養(yǎng)基上產(chǎn)生金黃色色素,致病性葡萄球菌在血液瓊脂平板上形成明顯的溶血環(huán),MR試驗(yàn)陽性,致病性的葡萄球菌在厭氧條件下能分解甘露醇產(chǎn)酸。
金黃色葡萄球菌營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧。最適生長溫度37°C,最適生長pH7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1-2mm.
(3)致病性與抵抗力
致病力主要是毒素和酶,所致的疾病為畜禽的化膿性疾病,如:創(chuàng)傷感染、膿腫、皮炎、乳房炎、敗血癥等。
抵抗力是在不形成芽胞的細(xì)菌中是最強(qiáng)的,80℃30分鐘才被殺死,碳酸效果最好。
對青霉素、慶大霉素高度敏感。耐藥菌株逐年增多。(4)檢查:
根據(jù)病型采集病料,如取血液,乳汁,膿汁等直接鏡檢:分離培養(yǎng)與鑒定:血液瓊脂平板,有無溶血,菌落的顏色,甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)。
2、鏈球菌:G+
(1)形態(tài):球形、卵圓形,呈鏈狀排列,無芽胞、鞭毛,
(2)培養(yǎng)
根據(jù)鏈球菌在血液瓊脂平板上的溶血現(xiàn)象分為三類:
1、甲型(α)溶血性鏈球菌:菌落周圍有1~2毫米的草綠色溶血環(huán),本類型致病力較弱。
2、乙型(β)溶血性鏈球菌:菌落周圍形成2~4毫米的透明溶血環(huán),致病力強(qiáng)。
3、丙型(r)鏈球菌:無溶血環(huán),無致病性。
根據(jù)抗原構(gòu)造分類:將乙型(β)溶血性鏈球菌分19個血清群。(3)致病性與抵抗力:產(chǎn)生多種酶和外毒素,不同的血清群的鏈球菌所致動物的疾病不同,引起急性敗血癥,肺炎,淋巴結(jié)膿腫,膿毒敗血癥。
本菌抵抗力不強(qiáng),青霉素是首選藥物。(4)檢查根據(jù)不同的疾病,采集相應(yīng)的病料,如取血液,乳汁,膿汁、滲出物等。
1、直接涂片鏡檢:鏈狀排列的球菌。分離培養(yǎng):病料接種于血液瓊脂平板。鏈球菌的檢驗(yàn)方法
3、多殺性巴氏桿菌G-
(1)形態(tài):球桿菌,不形成芽胞,鞭毛,病畜的血液涂片或組織觸片經(jīng)美藍(lán)或瑞氏染色呈兩級濃染。
美藍(lán)或瑞氏染色呈兩級濃染(2)培養(yǎng)
在普通培養(yǎng)基上生長不旺盛,在加有血液或血清瓊脂培養(yǎng)基上生長良好,培養(yǎng)24h形成灰白色、濕潤、邊緣整齊、表面光滑閃亮的露珠狀小菌落。無溶血現(xiàn)象。(3)致病性與抵抗力
根據(jù)血清培養(yǎng)基上形成的菌落,可以分Fg型:對豬、牛、羊?yàn)閺?qiáng)菌,對禽類毒力弱。Fo型:對禽類及兔強(qiáng)毒菌。常存在于畜禽的上呼吸道內(nèi),引起豬肺疫,禽霍亂等。抵抗力不強(qiáng),一般消毒劑可殺滅。(4)檢查鏡檢:病料觸片,用美藍(lán)或瑞氏染色,兩極濃染。分離培養(yǎng):血液瓊脂平板上,有白色,不溶血小菌落。動物試驗(yàn):4、炭疽桿菌G+
(1)形態(tài):單個排列或呈短鏈狀,相連的菌端平直而呈竹節(jié)狀。無鞭毛,有芽孢、莢膜。
(2)培養(yǎng)炭疽桿菌為兼性需氧菌。在普通瓊脂平板上生長呈灰白色,表面粗糙的菌落,邊緣在低倍鏡檢查時呈卷發(fā)狀。
(3)致病性與抵抗力:產(chǎn)生很強(qiáng)的炭疽毒素,引起皮膚水腫,中毒癥狀等。主要感染草食動物。有芽胞的抵抗力強(qiáng),干燥下22年,20%漂白粉和5%碘酊是適用本菌芽胞的消毒藥。
(4)檢查:疑似炭疽病死動物尸體應(yīng)嚴(yán)禁解剖
豬對炭疽的抵抗力較強(qiáng)。有的為咽部炭疽,咽喉部和附近淋巴結(jié)明顯腫脹。5、大腸桿菌:大腸埃希氏菌G-(1)形態(tài):中等大小,兩端鈍圓桿菌,無芽胞,周身鞭毛和菌毛。
(2)培養(yǎng):在普通培養(yǎng)基上生長良好,伊紅美蘭瓊脂平板上,形成紫黑色菌落,麥康凱培養(yǎng)基上形成紅色菌落,分解乳糖,MR試驗(yàn)陽性,O(菌體)抗原,鞭毛(H)抗原,K(莢膜)抗原。
(3)致病性:仔豬黃痢、仔豬白??;雞引起心包炎、肺炎、輸卵管炎、腹膜炎;犢牛、羔羊下痢、敗血癥。
在選擇性培養(yǎng)基上比較好識別,以下是在SS培養(yǎng)基上的菌落特點(diǎn)
仔豬白?。翰∝i排出的乳白色糊狀糞便
仔豬黃痢:病豬排出的黃色稀便
六、沙門氏菌
(1)形態(tài):與大腸桿菌相似,無芽胞,除雞沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌無鞭毛外,其余都有。
(3)致病性與抵抗力
1、馬流產(chǎn)沙門氏菌
2、豬霍亂沙門氏菌:仔豬副傷寒
3、雞白痢沙門氏菌:20日齡以內(nèi),卵巢炎。
4、雞傷寒沙門氏菌
破傷風(fēng)梭菌豬丹毒桿菌G+
病毒2-1病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)一病毒的發(fā)展
中國從公元十世紀(jì)宋真宗時代就有接種人痘預(yù)防天花的記載了。先后傳至俄國、日本、朝鮮、土耳其及英國。1796英國醫(yī)生琴納(Jenner),才得出了結(jié)論,牛痘可能使人預(yù)防天花。法國人巴斯德(Pasteur)在1884年發(fā)明了狂犬疫苗。第一個記載的植物病毒病的是郁金香碎色病,據(jù)記載一個得病郁金香球莖竟能換來牛、豬、羊甚至成噸的谷物或上千磅的奶酪。細(xì)菌病毒--噬菌體的結(jié)構(gòu)
二病毒的分類根據(jù)宿主的不同,有動物病毒、植物病毒、細(xì)菌病毒(噬菌體)和擬病毒(寄生在病毒中的病毒)等多種類型。病毒的基本類型名稱基本特征(真)病毒至少含有蛋白質(zhì)和核酸兩類物質(zhì)亞病毒類病毒含有具有單獨(dú)侵染性的核糖核酸擬病毒只含有不具備侵染性的RNA
朊病毒沒有核酸而有感染性的蛋白質(zhì)顆粒三病毒的特點(diǎn)沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)只含有一種核酸(DNA或RNA)病毒的增值方式為復(fù)制病毒為嚴(yán)格的寄生生活病毒對抗菌素不敏感
四病毒的大小與形態(tài)
(一)大?。簻y量單位為NM,20—30NM
(二)形態(tài):多為球形,有的呈磚形,絲狀,子彈形。
有囊膜:磚形:痘病毒子彈形:狂犬病圓形
無囊膜:近似圓形:20面體立體對稱圓柱形:螺旋對稱
五病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成(一)核酸:即芯髓,既DNA或RNA,是病毒遺傳的(二)衣殼:蛋白質(zhì),既有多肽鏈構(gòu)成的殼粒組成。(三)囊膜:脂類、蛋白質(zhì)構(gòu)成的囊膜,是病毒通過宿主細(xì)胞膜或核膜時獲得的。容易被脂溶劑如乙醚、氯仿和膽鹽等溶解。對病毒起保護(hù)作用,并與病毒吸附有關(guān)。病毒的結(jié)構(gòu)示意圖核衣殼的對稱形式A、螺旋對稱型B、復(fù)合對稱型C、二十面體立體對稱型復(fù)合對稱的代表-
-T偶數(shù)噬菌體二十面體對稱的代表--腺病毒螺旋對稱的代表--煙草花葉病毒七病毒的增殖
病毒的感染:只有當(dāng)病毒與細(xì)胞相互作用,才能發(fā)揮生物活性,這種病毒與細(xì)胞相互作用。這種作用會出現(xiàn)兩個結(jié)果:
1、溶解性相互作用
2、轉(zhuǎn)化性相互作用病毒缺乏增殖所需要的酶系統(tǒng),只能在活的宿主細(xì)胞內(nèi)增殖(自我復(fù)制)。絕大多數(shù)病毒復(fù)制過可分為下列五階段:吸附、侵入、脫殼、生物合成、組裝和釋放。吸附:非特異性吸附,特異性吸附、。侵入:細(xì)胞內(nèi)吞、注射式侵入、膜融合。脫殼:有囊膜和無囊膜
生物合成:(1)mRNA轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)合成(2)核酸復(fù)制。
裝配與釋放:裝配、釋放方式:
(1)破胞釋放;
(2)芽生。病毒的復(fù)制吸附細(xì)胞吞飲脫殼(脫囊膜和衣殼)生物合成裝配與釋放吸附膜融合(囊膜脫去)脫殼(衣殼)生物合成裝配與釋放吸附注射式侵入(脫殼)生物合成裝配與釋放
經(jīng)細(xì)胞膜內(nèi)陷形成吞噬泡,使病毒粒子進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,經(jīng)蛋白酶的降解,先后脫去囊膜和衣殼。注射式侵入的噬菌體和某些直接侵入的病毒可以直接在細(xì)胞膜或細(xì)胞壁表面同步完成侵入和脫殼有包膜病毒侵入過程中病毒囊膜與細(xì)胞膜融合。其囊膜在與細(xì)胞膜融合時即已脫掉,核衣殼被移至脫殼部位并在酶的作用下進(jìn)一步脫殼。
膜融合生物合成
病毒借助宿主細(xì)胞提供的原料、能量和場所合成核酸和蛋白質(zhì),期間所需的多數(shù)酶也來自宿主細(xì)胞。在病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后生物合成階段,胞漿中無病毒顆粒,稱為隱蔽期。2-2病毒的其他特性與培養(yǎng)
干擾現(xiàn)象1、概念:兩種病毒感染同一種細(xì)胞或機(jī)體時,常常發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制的現(xiàn)象,稱為干擾現(xiàn)象。2、病毒干擾的類型:自身干擾同種干擾異種干擾名詞解釋:缺陷型病毒:這是因?yàn)椴《净蚪M缺少一段特殊的RNA,干擾了病毒的復(fù)制,這種缺陷病毒又稱缺陷性病毒粒顆,能干擾同種的正常病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制,如流感病毒。3、干擾現(xiàn)象發(fā)生的原因:(1)兩種病毒感染都是需要細(xì)胞膜上同一受體。一種病毒感染后,由于阻斷或破壞了細(xì)胞的受體部位,從而阻止了另一個病毒吸附或穿入。(2)一種病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時,已經(jīng)啟動了細(xì)胞的某種主要物質(zhì)、關(guān)鍵性酶或有限的復(fù)制部位。(3)受病毒感染的宿主細(xì)胞產(chǎn)生了干擾素,可以抑制病毒復(fù)制。干擾素:是病毒作用于宿主細(xì)胞(病毒寄生的機(jī)體),誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抑制病毒復(fù)制的蛋白質(zhì)。病毒的濾過特性
病毒微小,能通過孔徑為0.02微米的濾膜過濾器,細(xì)菌不能透過,可將病毒、細(xì)菌分開。
病毒的血凝現(xiàn)象
許多的病毒表面有血凝素,能與雞、豚鼠的紅細(xì)胞表面受體結(jié)合,而出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,簡稱病毒的血凝現(xiàn)象。病毒的血凝現(xiàn)象是非特異性的。病毒的紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn):病毒的血凝現(xiàn)象是非特異性的,當(dāng)加入特異性抗病毒血清時,血凝素的作用被抑制,凝集現(xiàn)象即不會發(fā)生。其特異性很高。例如:用于診斷雞的ND,流感,流行性乙型腦炎病毒的培養(yǎng)(一)動物接種:
病毒經(jīng)注射、口服等途徑進(jìn)入易感動物的體內(nèi)后可大量增殖,并使動物產(chǎn)生特定的反應(yīng)。
優(yōu)點(diǎn):操作方面易行,經(jīng)濟(jì)。缺點(diǎn):受機(jī)體免疫力的影響,常用無菌動物。
運(yùn)用:分離、增殖病毒,疫苗效力試驗(yàn),疫苗和抗血清的生產(chǎn)。(二)雞胚培養(yǎng):
一般用9至12日齡的雞胚,分別接種于卵黃囊內(nèi),羊膜腔,尿囊腔等部位。
病毒生長的標(biāo)志為雞胚死亡、畸型和出血。用于病毒分離與疫苗生產(chǎn)。卵黃囊接種法羊膜腔接種法
雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內(nèi),生長后,雞胚全身皮膚出現(xiàn)出血點(diǎn),以腦后最顯著。
(三)組織培養(yǎng):在離體活細(xì)胞上培養(yǎng)病毒的方法
1、組織塊培養(yǎng):取組織片(如一段胎兒氣管或一小塊鼻黏膜)進(jìn)行培養(yǎng)。
2、細(xì)胞培養(yǎng):病毒感染細(xì)胞后,大多數(shù)引起細(xì)胞病變,稱為病毒的致細(xì)胞病變作用。表現(xiàn)為細(xì)胞變形,胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆?;?,核濃縮、核裂解等。2-3病毒的一般診斷程序及主要動物病毒
病料的采取包涵體檢查病毒的分離培養(yǎng)病毒的血清學(xué)試驗(yàn)動物接種雞胚培養(yǎng)組織培養(yǎng)中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)
病毒的紅C凝集熒光抗體技術(shù)免疫酶標(biāo)記技術(shù)免疫擴(kuò)散試驗(yàn)一病毒的一般診斷程序(一)病料的采取常用于病毒分離的病料有血液、糞便、滲出液、腦脊液、水皰病、活檢組織或尸檢組織等。進(jìn)行畜禽病毒性傳染病的實(shí)驗(yàn)室診斷時,應(yīng)注意以下幾點(diǎn):1、采集適宜的病料一般應(yīng)采集病畜禽體內(nèi)含病毒最多的器官或組織。2、注意采集病料的時間以癥狀剛出現(xiàn)時最佳。檢查抗體時,則應(yīng)采取一頭病畜的發(fā)病初期和恢復(fù)期的血清,以便了解抗體滴度的消長程度。3、保存與運(yùn)送病毒對外界因素特別是熱很敏感。(1)必須將病料放在滅菌的保存液(50%甘油磷酸鹽緩沖液)中。(2)液體病料可加適量的抗生素以防污染。(3)盛有病料的器皿應(yīng)封口,再放入冰瓶內(nèi)(內(nèi)放冰塊和食鹽或干冰和酒精)。4、防止病料污染采集病料時,必須無菌操作。(1)為防止液體病料被污染,加入適量的青霉素和鏈霉素或其他抗生素,如慶大霉素;(2)若防止霉菌污染,可加霉菌素。
(3)供抗體檢測的血清可加入防腐劑。(二)包涵體檢查
不同類型的包涵體有些動物病毒于感染宿主細(xì)胞后,在胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成具有特殊染色特性的內(nèi)含物,稱為包涵體,如痘病毒的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)包涵體和皰疹病毒的胞核內(nèi)包涵體。這些包涵體有的是由未成熟或成熟的病毒粒構(gòu)成,有的是宿主細(xì)胞的反應(yīng)產(chǎn)物,有的是兩者的混合物。有些昆蟲病毒的病毒粒包埋在蛋白基質(zhì)中,形成包涵體如核型多角體病毒。(三)病毒的分離培養(yǎng)(3種)(四)病毒的血清學(xué)試驗(yàn)(1)中和試驗(yàn)應(yīng)用的原則有兩種,一是可用已知抗原檢查末知抗體。二是用已知抗體鑒定末知病毒。(2)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)常用已知的病毒抗原測定動物體內(nèi)有無相應(yīng)的抗體,以對某些傳染病做出診斷。如用于診斷馬流行性乙型腦炎和馬傳染性貧血等。(3)病毒的紅細(xì)胞凝集和紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)用已知的抗血清鑒定病毒??捎糜谠\斷雞新城疫、流行性乙型腦炎、流感、減蛋綜合征等。用已知的病毒測定被檢動物血清中抗體情況??捎糜诒O(jiān)測雞群對新城疫等病的免疫狀況及發(fā)病情況。(4)熒光抗體技術(shù)熒光抗體技術(shù)能較快地測出少量抗原或抗體在細(xì)胞內(nèi)或組織內(nèi)的分布,也是測定血清抗體的一種比較敏感的方法。已用于口蹄疫、馬傳貧、狂犬病、豬瘟、豬水皰病、豬傳染性胃腸炎等的診斷。(5)免疫酶標(biāo)技術(shù)免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前比較先進(jìn)的診斷技術(shù),它具有敏感性高的特點(diǎn)。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于牛腹瀉病毒、豬瘟病毒、雞新城疫病毒和流感病毒等的檢查以用法醫(yī)鑒定。(6)免疫擴(kuò)散試驗(yàn)用已知抗體鑒定病毒,或用已病毒抗原檢查待檢血清中的相應(yīng)抗體。常用于診斷馬傳貧、雞馬立克氏病、雞傳染必法氏囊病、雞白血病、偽狂犬病、小鵝瘟、禽流感等。二主要動物病毒口蹄疫病毒(1)病毒的主要特性屬于微核糖核酸病毒科,口蹄疫病毒屬,單股RNA,呈20面體對稱,近似球形,無囊膜,有七個血清學(xué)主型,每個主型又有若干個亞型,70多亞型。各主型之間無交互免疫力。本病毒是已知最小的動物RNA病毒。(2)病原性與抵抗力病原性:干擾能力強(qiáng),偶蹄獸如牛、羊、豬、駱駝、鹿等動物的口腔、蹄部位發(fā)生水泡。抵抗力:不耐高溫,易滅活,常用消毒方法1%NaOH來消毒車、船等運(yùn)輸工具或飼槽等用具。(3)檢查
取水皰皮和水皰液,以補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和試驗(yàn)來檢驗(yàn),各主型口蹄疫病毒不能交叉免疫,必須確定其血清型才能用同型疫苗免疫。在唇內(nèi)面、齒齦、舌面和頰部粘膜發(fā)生蠶豆至核桃大的水皰病豬以蹄部皰為主要特征,主要癥狀是跛行
嚴(yán)格封死疫點(diǎn),捕殺病畜及同群畜狂犬病病毒(一)主要特性:屬于彈狀病毒科,狂犬病病毒屬。單股RNA,彈狀病毒,具有囊膜,感染動物的腦組織細(xì)胞漿內(nèi)可見到包涵體。內(nèi)基氏小體,呈圓形或卵圓形,染色后呈嗜酸性反應(yīng)。(二)病原性與抵抗力病原性:侵害動物神經(jīng)系統(tǒng)、能引起人和各種家畜的神經(jīng)興奮,意識障礙,麻痹和死亡。V存在于神經(jīng)系統(tǒng)與唾液中,經(jīng)咬傷而直接傳播。抵抗力:56℃經(jīng)30min即可滅活病毒。0.1%升汞、1%來蘇兒等均可迅速使其滅活。(三)檢查1、內(nèi)基氏小體檢查2、動物接種3、熒光抗體檢查4、病毒分離豬瘟病毒(一)主要特性屬于黃病毒科,瘟疫病毒屬,單股RNA,病毒呈球形,核衣殼呈20面體對稱,有囊膜。野毒株的毒力變化很大,強(qiáng)毒株急性疾病、中等毒力引起亞急性和慢性。(二)病原性與抵抗力病原性:感染慢性溫和性豬瘟,會導(dǎo)致生長阻滯和發(fā)育不全,最后死亡。妊娠母豬感染中、低毒力毒株后會引起以繁殖障礙為主要癥狀的“帶毒母豬綜合癥”,引起先天性流產(chǎn),木乃伊胎、弱胎和產(chǎn)出仔豬顫抖癥。抵抗力:豬瘟病毒抵抗力較強(qiáng)72∽76℃1h、1%∽2%燒堿或石灰水15∽60min才能殺滅病毒,對對紫外線和0.5%石炭酸溶液抵抗力較強(qiáng)。(三)檢查臨床實(shí)驗(yàn)室:冰凍切片直接熒光抗體:常用扁桃體,應(yīng)注意區(qū)別是否感染ELISA:豬傳染性胃腸炎(一)主要特性
屬冠狀病毒科、冠狀病毒屬、單股RNA病毒。二病原性與抵抗力病原性:豬,2周以內(nèi)仔豬死亡率高,架子豬、成豬一般的良性經(jīng)過。犬、貓可發(fā)病。抵抗力:病毒對乙醚敏感,但耐酸、乃胰蛋白酶,在低溫下極為穩(wěn)定。(三)檢查1、細(xì)胞培養(yǎng)2、中和試驗(yàn)3、熒光抗體檢查:空腸、回腸粘膜刮取物或空腸、回腸制備冷凍切片、直接或間接IF染色。4、動物試驗(yàn)
免疫概述免疫:機(jī)體識別自我物質(zhì)和排除異己物質(zhì)的復(fù)雜的生物學(xué)反應(yīng),是動物在長期進(jìn)化中所形成的一種保護(hù)性生理功能。
基本功能:
1、免疫防御:病原微生物侵入時,機(jī)體的防御機(jī)制,消滅病原微生物,防止感染。
2、自身穩(wěn)定:指免疫具有清除體內(nèi)衰老或損傷的組織細(xì)胞,維持正常的機(jī)體內(nèi)環(huán)境。
3、免疫監(jiān)視:指免疫具監(jiān)視體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的出現(xiàn),并在其尚未發(fā)展之前將其殲滅。一、免疫學(xué)的發(fā)展簡歷
(一)經(jīng)驗(yàn)免疫學(xué)時期:
11世紀(jì)——18世紀(jì),積累了大量的免疫學(xué)知識。如:觀察到很多傳染病,其康復(fù)后,很少再患同一類疾病。我國民間醫(yī)學(xué)家創(chuàng)立了預(yù)防天花的種痘法,應(yīng)用良好天花患者的干燥痂皮制成粉末進(jìn)行吹鼻免疫接種。引用強(qiáng)毒接種,具有很大危險性。1798年英國醫(yī)生琴納受到擠奶女工大多不感染天花,創(chuàng)立了牛痘膿瘡制成預(yù)防天花的接種方法,宣告了免疫學(xué)的誕生。
(二)實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)時期:18世紀(jì)—20世紀(jì)初,
提出了“細(xì)胞免疫學(xué)說”“體液免疫學(xué)說”補(bǔ)體等。
(三)免疫學(xué)的飛躍期:20世紀(jì)以后,免疫化學(xué),
免疫血清學(xué),分子免疫學(xué)等。二非特異性免疫
(一)
屏障結(jié)構(gòu)
(二)吞噬細(xì)胞
(三)體液中的殺菌因素
(一)屏障結(jié)構(gòu):
1、皮膚和黏膜屏障:結(jié)構(gòu)完整的皮膚和黏膜能阻擋大多數(shù)病原微生物的侵入,汗腺分泌的乳酸,淚液,唾液等都有抑菌和殺菌作用。
2、血腦屏障:由腦毛細(xì)血管壁、軟腦膜和膠質(zhì)細(xì)胞等組成,防止中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的重要防衛(wèi)機(jī)構(gòu)。
3、胎盤屏障:防止母體內(nèi)的多種病原微生物通過胎盤感染胎兒,但豬瘟、布氏桿菌感染母畜后能經(jīng)胎盤感染胎兒。(二)吞噬細(xì)胞
1、吞噬細(xì)胞:
(1)小吞噬細(xì)胞:血液中以嗜中性粒細(xì)胞為代表,具有高度移行性和非特異性吞噬功能。嗜酸性粒細(xì)胞具吞噬作用,抗寄生蟲感染,過敏反應(yīng)。
(2)大吞噬細(xì)胞:屬于單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)。包括血液中的單核細(xì)胞及單核細(xì)胞移行至各組織的多種巨嗜細(xì)胞。如:肺臟中的塵細(xì)胞,肝臟中的枯否氏細(xì)胞,皮膚和結(jié)締組織中的組織細(xì)胞,骨組織中的破骨細(xì)胞,神經(jīng)組織中的小膠質(zhì)細(xì)胞等。
2、吞噬細(xì)胞的吞噬、殺菌過程:
吞噬細(xì)胞與病原菌接觸后,能伸出偽足將其包圍,吞入細(xì)胞漿內(nèi)形成吞噬體,吞噬體向溶酶體靠近,融合成吞噬溶酶體,溶酶體擴(kuò)散后,消化和破壞異物。
3、吞噬的結(jié)果:
(1)完全吞噬:動物整體抵抗力和吞噬細(xì)胞的功能較強(qiáng),病原微生物被殺滅,消化后連同溶酶體內(nèi)容物殘?jiān)懦黾?xì)胞外。
(2)不完全吞噬:有些病原菌(結(jié)核,布菌,病毒)不被殺滅,反而可在吞噬細(xì)胞內(nèi)生長、繁殖,隨吞噬細(xì)胞的游走而擴(kuò)散,引起更廣泛的感染。圖二:(三)正常體液中的殺菌滅毒因素。
1、補(bǔ)體系統(tǒng):
(1)概念:正常人和動物血清中存在的一類與免疫有關(guān)的具有酶活性的球蛋白。它們可輔助特異性抗體的作用,是抗體發(fā)揮作用的必要補(bǔ)充條件,故稱為補(bǔ)體。
(2)生物學(xué)特性:正常情況下,補(bǔ)體沒有活性,只有在抗原抗體復(fù)合物及其他激活因子作用下激活。使細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生溶解,起到殺菌溶菌、溶血作用。也可增強(qiáng)抗體對病毒的中和作用。
2、溶菌酶:單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的堿性蛋白酶,分布于唾液、淚液、鼻液、血清、乳汁中,殺滅G+,與補(bǔ)體一起殺滅G-。二、影響非特異性免疫的因素:
1、遺傳(種屬)因素:不同種或不同品種的動物,對病原微生物的易感性和免疫反應(yīng)性有差異。如:炭疽感染草食動物,家禽無感受性。馬不感染牛瘟等。
2、年齡因素:不同年齡對病原微生物的易感性和免疫反應(yīng)性不同。幼齡易感。而布病感染性成熟的。老年防御能力降低,易發(fā)生腫瘤與反復(fù)感染。
3、環(huán)境因素:氣候、溫度、濕度等。如:寒冷使呼吸道黏膜抗力下降。VA缺黏膜發(fā)病。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,可增強(qiáng)非特異性免疫能力。
三特異性免疫
(一)免疫器官與免疫細(xì)胞(二)抗原(三)免疫應(yīng)答(四)免疫應(yīng)答中的效應(yīng)物質(zhì)(五)特異性免疫的抗感染作用
一.免疫器官
?中樞免疫器官
——免疫細(xì)胞產(chǎn)生與成熟場所(一)
骨髓長骨髓源生各種免疫細(xì)胞。哺乳動物B細(xì)胞成熟,直接進(jìn)行免疫應(yīng)答,產(chǎn)生大量抗體,約占40%。(二)
胸腺誘導(dǎo)淋巴干細(xì)胞成熟T細(xì)胞(三)
禽法氏囊誘導(dǎo)淋巴干細(xì)胞成熟為B細(xì)胞
外周免疫器官
——免疫細(xì)胞分布及進(jìn)行免疫應(yīng)答的場所(一)淋巴結(jié)皮質(zhì)區(qū):B細(xì)胞25%副皮質(zhì)區(qū):T細(xì)胞75%髓質(zhì)區(qū):巨噬細(xì)胞(Mφ)、樹突狀細(xì)胞(DC)作用:對淋巴液來的抗原(注射的疫苗)進(jìn)行免疫應(yīng)答
(二)脾臟(spleen)
白髓淋巴鞘——T細(xì)胞25%
脾小結(jié)——B細(xì)胞65%
紅髓巨噬細(xì)胞(Mφ)、樹突狀細(xì)胞(DC)
作用對來自血液的抗原進(jìn)行免疫應(yīng)答,主要產(chǎn)生抗體
二、抗原1、概念
2、構(gòu)成抗原的條件異物性大分子物質(zhì)一定的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)
3、抗原的特異性與交叉性
4、抗原類型:(1)完全抗原和不完全抗原
(2)胸腺依賴性抗原和胸腺非依賴性抗原
(3)天然抗原和人工抗原
(4)微生物抗原支持?完全抗原免疫原性物質(zhì)(細(xì)菌)機(jī)體免疫細(xì)胞免疫產(chǎn)物
(效應(yīng)細(xì)胞、抗體)+物質(zhì)特異反應(yīng)
反應(yīng)原性
不完全抗原(半抗原)
物質(zhì)(激素)+蛋白載體機(jī)體免疫細(xì)胞免疫產(chǎn)物
(抗體)+物質(zhì)特異反應(yīng)
?完全抗原(免疫原)的基本條件異物性,大分子,化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜一.異物性親緣關(guān)系越遠(yuǎn)的物質(zhì),免疫性越強(qiáng)自身物質(zhì)可以形成“天然免疫耐受”自身物質(zhì)結(jié)構(gòu)、成分改變后成為“自身抗原”自身也有一些“隱蔽抗原”——眼球晶體、精子、甲狀腺等蛋白二.大分子通常在10000dal以上三.化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜明膠蛋白分子量10萬dal,但免疫原性差
—因是直鏈AA組成胰島素只有5734dal,但免疫原性好—因組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜凡含有苯環(huán)、雜環(huán)AA和糖的蛋白,結(jié)構(gòu)都較復(fù)雜,免疫原性好三、免疫應(yīng)答(一)免疫應(yīng)答的概念。(二)免疫應(yīng)答的基本過程:識別階段
增殖階段
效應(yīng)階段(三)體液免疫應(yīng)答:1、概念2、基本過程:B細(xì)胞在抗原的刺激下分化為漿細(xì)胞,漿細(xì)胞進(jìn)一步分化成抗體,抗體和抗原結(jié)合將抗原清除。(四)細(xì)胞免疫應(yīng)答:1、概念2、基本過程:T細(xì)胞在抗原的刺激下分化為淋巴因子,淋巴因子與抗原結(jié)合,將抗原清除。
四、免疫應(yīng)答中的效應(yīng)物質(zhì)(一)抗體:1、概念:B細(xì)胞受抗原刺激后產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
2、免疫球蛋白結(jié)構(gòu):Y字型結(jié)構(gòu),三個功能區(qū)鉸鏈區(qū)恒定區(qū)可變區(qū)抗體3、各類免疫球蛋白的特性與功能:(1)免疫球蛋白G:它占整個免疫球蛋白70-80%,抗感染的主力,持續(xù)時間長。(2)免疫球蛋白M:10%,體液免疫反應(yīng)出現(xiàn)最早.(3)免疫球蛋白A:血清型免疫球蛋白A:分泌型免疫球蛋白A:(4)免疫球蛋白E:參與一型變態(tài)反應(yīng),抗寄生蟲感染。(5)免疫球蛋白D:
4、抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律:(1)初次應(yīng)答:抗原第一次進(jìn)入機(jī)體后,要經(jīng)過較長的誘導(dǎo)期才出現(xiàn)抗體,低,時間短,
(2)再次應(yīng)答:初次應(yīng)答后,抗體降低,用同種抗原再次免疫機(jī)體時,誘導(dǎo)期顯著縮短,抗體含量達(dá)到幾倍、幾十倍,時間延長。
4、影響抗體產(chǎn)生的因素:
(1)抗原方面:
a、抗原的性質(zhì):活病毒進(jìn)入機(jī)體后2-3天出現(xiàn)抗體,活細(xì)菌需5-7天,類毒素需2-3周。
B、抗原的用量、次數(shù)與間隔時間:
c、免疫途徑:注射、滴鼻、點(diǎn)眼、吸入、刺種等。
D、佐劑的作用:增強(qiáng)抗原的免疫原性。如:明礬、氫氧化鋁、磷酸鈣、磷酸鋁等。
(2)機(jī)體方面:*先天和后天性免疫缺陷
*動物的年齡、品種、營養(yǎng)狀況等。
5、單克隆抗體:
#克?。褐赣梢粋€細(xì)胞無性增殖而來的細(xì)胞群體。#B細(xì)胞克隆:由一個B細(xì)胞增殖而來的B細(xì)胞群體為—。#單克隆抗體:由一個B細(xì)胞分化增殖的子代細(xì)胞(漿細(xì)胞)產(chǎn)生的針對單一抗原決定簇的抗體。
6、免疫球蛋白的抗原性:免疫球蛋白結(jié)構(gòu)復(fù)雜,分子量大,對另一動物說構(gòu)成抗原。如:一種動物抗體免疫異種動物,獲得抗這種抗體的抗體,即Ig的抗抗體。(二)細(xì)胞因子:主要由激活的淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的除抗體以外的免疫效應(yīng)分子。包括淋巴因子和白細(xì)胞介素。1、淋巴因子:指T細(xì)胞被抗原激活后產(chǎn)生的非抗體,非補(bǔ)體的具有多種生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)分子。包括:
#移動抑制因子(MIF)#特意性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)
#巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)#粒細(xì)胞淋巴毒素(LT)
#促有絲分裂因子(MF)#轉(zhuǎn)移因子(TF)
#皮膚反應(yīng)因子(SRF)2、白細(xì)胞介素:IL,在白細(xì)胞間發(fā)揮作用的一些糖蛋白分子。18種,由B、T細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。增強(qiáng)細(xì)胞免疫與體液免疫的功能。五、特異性免疫的抗感染作用:(一)體液免疫的抗感染:
1中和作用2抗吸附作用3調(diào)理作用4免疫溶解作用
5、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用(二)細(xì)胞免疫的抗感染作用:
1、抗細(xì)菌感染:
T細(xì)胞致敏釋放淋巴因子促進(jìn)巨噬細(xì)胞,使細(xì)胞內(nèi)寄生菌殺滅
2、抗病毒感染:
T細(xì)胞直接殺死病毒,T細(xì)胞釋放淋巴因子殺死病毒,致敏T細(xì)胞增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬作用,殺滅病毒
變態(tài)反應(yīng)變態(tài)反應(yīng)定義:以被致敏的機(jī)體再次接觸相應(yīng)變應(yīng)原(抗原)后所發(fā)生的一種異?;虿±硇缘拿庖叻磻?yīng),主要表現(xiàn)為機(jī)體的生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷,又稱變態(tài)反應(yīng)或過敏反應(yīng)。基本特點(diǎn):引起超敏反應(yīng)的變應(yīng)原種類繁多,這種反應(yīng)具有免疫學(xué)反應(yīng)的特異性和記憶性的特征,可涉及細(xì)胞和體液免疫的整個過程,但以某一種類型的反應(yīng)為主。分型:常分為四型,即I、II、III和IV型,又分別稱為速發(fā)型、細(xì)胞毒型、免疫復(fù)合物型和遲發(fā)型超敏反應(yīng),其中前三型均由體液免疫介導(dǎo),第IV型由細(xì)胞免疫介導(dǎo)。
Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)主要特點(diǎn):1.發(fā)生快、消退快,一般不易造成組織細(xì)胞的損傷,多表現(xiàn)為功能的紊亂;2.參與的抗體為IgE和IgG4,參與的細(xì)胞為肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等;3.補(bǔ)體不直接參與其反應(yīng);4.有明顯的個體差異和遺傳傾向;5.可經(jīng)血清被動轉(zhuǎn)移。參與的細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞:通過1)直接吞噬、破壞肥大細(xì)胞等脫出的顆粒;2)釋放組胺酶滅活組胺;3)釋放芳基硫酸酯酶滅活白三烯;4)釋放磷酯酶D滅活血小板活化引子,從而對Ⅰ型超敏反應(yīng)有負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用嗜堿性粒細(xì)胞:同肥大細(xì)胞一樣,其表面有大量的FcR,胞漿內(nèi)有含多種生物活性介質(zhì)的大量嗜堿性顆粒。當(dāng)IgE與其FcR結(jié)合形成“橋聯(lián)”后可導(dǎo)致細(xì)胞脫顆粒,釋放出生物活性介質(zhì)而引起過敏反應(yīng)。參與的抗體抗體與受體結(jié)合導(dǎo)致細(xì)胞脫顆粒Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和機(jī)制機(jī)體致敏階段:變應(yīng)原初次進(jìn)入機(jī)體后,刺激機(jī)體的B細(xì)胞產(chǎn)生特異性IgE/IgG4抗體,這些抗體同肥大/嗜堿性粒細(xì)胞表面的FcR結(jié)合,形成致敏的肥大/嗜堿性粒細(xì)胞,這種致敏狀態(tài)可維持半年至數(shù)年。發(fā)敏階段:機(jī)體再次接觸相同的變應(yīng)原后,可迅速同結(jié)合在肥大/嗜堿性粒細(xì)胞表面FcR上的緊密相連的IgE/IgG4抗體形成“橋聯(lián)”結(jié)合,使肥大/嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒,釋放出胞內(nèi)的生物活性介質(zhì),引起過敏反應(yīng)。觸發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒的幾種方式I型超敏反應(yīng)的基本過程Ⅰ型超敏反應(yīng)的早期相和晚期相反應(yīng)急性過敏反應(yīng)的常見疾?。哼^敏性休克:以青霉素等藥物和再次使用抗毒素血清時容易出現(xiàn);其它如過敏性哮喘、過敏性鼻炎;過敏性腸炎和特應(yīng)性皮膚超敏反應(yīng)等也常出現(xiàn)。防治原則預(yù)防原則:
1.查明變應(yīng)原并避免接觸;
2.特異性脫敏治療:短期內(nèi)進(jìn)行小劑量、多次注射特異性變應(yīng)原進(jìn)行脫敏治療;
3.減敏療法:采用多次、少量、長間隔(5~7天)皮下注射特異性必要性進(jìn)行減敏治療;藥物治療:
1.抑制活性介質(zhì)釋放的藥物:
2.生物活性介質(zhì)拮抗藥:
3.改善器官反應(yīng)性的藥物:
4.某些調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的中藥Ⅱ型超敏反應(yīng)(細(xì)胞毒型)特點(diǎn):1.IgG、IgM類抗體直接作用于細(xì)胞表面的抗原或半抗原;2.激活補(bǔ)體系統(tǒng)、單核吞噬細(xì)胞及其它細(xì)胞參與造成細(xì)胞損傷和溶解。發(fā)生機(jī)制:1.受攻擊靶細(xì)胞表面的抗原:存在于自身正常細(xì)胞的表面成分、結(jié)合于正常細(xì)胞表面的半抗原等;2.細(xì)胞損傷機(jī)制:1)抗原-抗體復(fù)合物經(jīng)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),靠補(bǔ)體的攻膜復(fù)合體殺傷細(xì)胞;2)對體內(nèi)游離并結(jié)合IgG抗體的血細(xì)胞,通過位于單核吞噬細(xì)胞表面的FcR,或C3bR的介導(dǎo)產(chǎn)生調(diào)理吞噬作用;3)對固定的組織細(xì)胞,在特異性IgG的介導(dǎo)下,具有FcR的NK細(xì)胞參與下產(chǎn)生ADCC效應(yīng)而殺傷靶細(xì)胞。常見疾病:1.血型不合的輸血反應(yīng):2.新生兒溶血癥:見下圖3.自身免疫性溶血性貧血:因感染或藥物引起4.藥物過敏性血小板減少癥:5.鏈球菌感染后引起的腎炎:6.特殊的II型超敏反應(yīng)-抗體刺激型:如橋本氏甲狀腺炎等Ⅲ型超敏反應(yīng)(免疫復(fù)合物型)特點(diǎn):可溶性抗原與相應(yīng)IgG、IgM類抗體結(jié)合形成可溶性復(fù)合物,沉積于全身或局部血管的基底膜,激活補(bǔ)體系統(tǒng),吸引白細(xì)胞和血小板聚集,導(dǎo)致在復(fù)合物沉積部位出現(xiàn)一系列的炎癥反應(yīng)。常見病如初次接受一種動物抗血清治療1~2周后出現(xiàn)的反應(yīng)、鏈球菌感染后的腎小球腎炎、過敏性休克樣反應(yīng)等疾病。Ⅳ型超敏反應(yīng)(遲發(fā)型)特點(diǎn):致敏T細(xì)胞與相應(yīng)致敏原作用而引起的以單個核細(xì)胞(巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)浸潤和細(xì)胞變性壞死為主要特征,其發(fā)生較慢(一般在抗原刺激后24~72h發(fā)生),與抗體和補(bǔ)體無關(guān)。發(fā)生機(jī)制:與常規(guī)的細(xì)胞免疫應(yīng)答的過程和機(jī)制一樣。常見?。喝绨麅?nèi)寄生菌引起的感染、接觸性皮炎、器官抑制排斥反應(yīng)和某些自身免疫病等。
其它微生物一真菌真菌是一類有細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、沒有根莖葉分的異養(yǎng)型單細(xì)胞或多細(xì)胞真核微生物。能危害人和動植物,造成一些病害,稱為病毒性真菌。
真菌的分類(一)分類:黏菌門真菌門鞭毛菌亞門接合菌亞門子囊菌亞門擔(dān)子菌亞門半知菌亞門通常人為地把真菌區(qū)分為3大類。酵母菌霉菌蕈菌這些不是分類上的名詞,但在應(yīng)用上給人類帶來很大的方便。(二)形態(tài)結(jié)構(gòu)
1、酵母菌類單細(xì)胞菌體,有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核四種結(jié)構(gòu)。2、絲狀菌類:(1)菌細(xì)結(jié)構(gòu)(2)細(xì)胞結(jié)構(gòu)(三)繁殖1、無性孢子2、有性孢子(四)培養(yǎng)
1、培養(yǎng)條件:20∽28℃,pH5.6∽5.8,需氧。2、分離方法:常用的有孢子分離法、組織分離法、基內(nèi)菌分離法三種。3、培養(yǎng)特性:酵母菌的菌落有黏稠性,乳白色或奶油樣;霉菌的菌落呈絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀。(五)致病性及防治1、煙曲霉菌預(yù)防措施:定期對籠舍、用具進(jìn)行福爾馬林熏蒸消毒,保持禽舍干燥,禁止用發(fā)霉的飼料和墊草。2、黃曲霉菌防治措施:防止飼料發(fā)生霉變,禁止使用霉變飼料。3、甘薯黑斑病霉菌預(yù)防措施:加強(qiáng)對甘薯黑斑病的檢疫和處理,禁止用病薯及其糟粕飼喂家畜。酵母菌酵母菌是一個通俗名稱,一般泛指能發(fā)酵糖類的各種單細(xì)胞真菌。
一酵母菌的形態(tài)和構(gòu)造大多數(shù)酵母菌為單細(xì)胞,一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形。有些酵母菌細(xì)胞與其子代細(xì)胞連在一起成為鏈狀,稱為假絲酵母。酵母菌無鞭毛,不能游動。酵母菌的細(xì)胞形態(tài)子細(xì)胞芽痕二酵母菌的繁殖方式
無性繁殖有性繁殖芽殖裂殖產(chǎn)無性孢子產(chǎn)子囊孢子三酵母菌的菌落特征酵母菌的菌落形態(tài)特征與細(xì)菌的相似,但較細(xì)菌菌落大而厚,較濕潤,表面較光滑,多數(shù)黏稠且不透明,菌落顏色單調(diào),多數(shù)呈乳白色,少數(shù)紅色,個別黑色。酵母菌生長在固體培養(yǎng)基表面,容易用針挑起,菌落質(zhì)地均勻,正、反面及中央與邊緣的顏色一致。有些種因培養(yǎng)時間太長使菌落表面皺縮。酵母菌的菌落一般會散發(fā)出酒香味。凡是不產(chǎn)假菌絲的酵母菌,其菌落更為隆起,邊緣極為圓整;然而會產(chǎn)生大量假菌絲的酵母菌,則其菌落較扁平,表面和邊緣較粗糙。菌落的顏色、光澤、質(zhì)地、表面和邊緣特征,均為酵母菌菌種鑒定的依據(jù)。在液體培養(yǎng)基中有的長在培養(yǎng)基底部并產(chǎn)生沉淀;有的在培養(yǎng)基中均勻生長;有的在培養(yǎng)基表面生長并形成菌膜以上特征對分類也具有一定意義。
啤酒酵母的菌落
紅酵母的菌落
各種酵母菌的菌落霉菌霉菌(mold)霉菌分屬于鞭毛菌亞門、接合菌亞門、子囊菌亞門和半知菌亞門。霉菌通常是指那些菌絲體較發(fā)達(dá)又不產(chǎn)生大型肉質(zhì)子實(shí)體結(jié)構(gòu)的真菌。一霉菌的形態(tài)和構(gòu)造(一)霉菌的菌絲霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。
霉菌菌體均由分枝或不分枝的菌絲構(gòu)成。許多菌絲交織在一起,稱為菌絲體。
在固體培養(yǎng)基上,部分菌絲伸入培養(yǎng)基內(nèi)吸收養(yǎng)料,稱為營養(yǎng)菌絲;另一部分則向空中生長,稱為氣生菌絲。有的氣生菌絲發(fā)育到一定階段,分化成繁殖菌絲。霉菌的菌絲有兩類:
1、無隔菌絲整個菌絲為長管狀單細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有多個核。其生長過程只表現(xiàn)為菌絲的延長和細(xì)胞核的裂殖增多以及細(xì)胞質(zhì)的增加。如根霉屬、毛霉屬、犁頭霉屬等低等真菌所具有。
2、有隔菌絲(多數(shù))
菌絲由橫隔膜分隔成成串多細(xì)胞,每個細(xì)胞內(nèi)含有一個或多個細(xì)胞核。如:曲霉屬和青霉屬等高等真菌所具有。
有些菌絲,從外觀看雖然像多細(xì)胞,但橫隔膜上具有小孔,使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核可以自由流通,而且每個細(xì)胞的功能也都相同。如青霉菌、曲霉菌、白地霉等絕大多數(shù)霉菌菌絲均屬此類。無隔菌絲有隔菌絲霉菌的菌絲霉菌的繁殖方式無性繁殖有性繁殖節(jié)孢子厚垣孢子孢囊孢子分生孢子子囊孢子卵孢子接合孢子(一)霉菌的無性孢子
無性繁殖是指不經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合而直接由菌絲分化形成孢子的過程,所產(chǎn)生的孢子叫無性孢子。常見的有孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子和節(jié)孢子,此外還有游動孢子、芽孢子、擲孢子。分生孢子節(jié)孢子(二)霉菌的有性孢子
有性繁殖是不同性別細(xì)胞結(jié)合后,經(jīng)質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂形成孢子的過程,而產(chǎn)生的孢子稱為有性孢子。在霉菌中,有性繁殖不及無性繁殖普遍,僅發(fā)生于特定條件下,一般培養(yǎng)基上不常出現(xiàn)。霉菌的有性孢子主要有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子。
卵孢子子囊孢子三霉菌的菌落特征
由于霉菌的菌絲較粗而長,因而霉菌的菌落較大,有的霉菌的菌絲蔓延,沒有局限性,其菌落可擴(kuò)展到整個培養(yǎng)皿,有的種則有一定的局限性,直徑1~2cm或更小。菌落質(zhì)地一般比放線菌疏松,外觀干燥,不透明,呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀;菌落與培養(yǎng)基的連接緊密,不易挑?。痪湔疵娴念伾瓦吘壟c中心的顏色常不一致。同一種霉菌,在不同成分的培養(yǎng)基上形成的菌落特征可能有變化。但各種霉菌,在一定培養(yǎng)基上形成的菌落大小、形狀、顏色等卻相對穩(wěn)定。故菌落特征也是鑒定霉菌的重要依據(jù)之一。
各種類型的子囊孢子紅曲霉的菌落形態(tài)各種曲霉的菌落微生物類別菌落特征單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌主要特征菌落含水情況很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀特征小而突起或大而平坦大而突起小而緊密大而疏松或大而致密參考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落與培養(yǎng)基結(jié)合度不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢固結(jié)合菌落的顏色多樣單調(diào)十分多樣十分多樣菌落正反面顏色差別相同相同一般不同一般不同細(xì)胞生長速度一般很快較快慢一般較快氣味一般有臭味多帶酒香常有泥腥味霉味四大類微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特征的比較放線菌放線菌是一類主要呈菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物。與細(xì)菌十分接近,幾乎都呈革蘭氏陽性。因菌落呈放射狀而得名。放線菌最突出的特性之一是能產(chǎn)生大量的、種類繁多的抗生素。全世界共發(fā)現(xiàn)4,000多種抗生素,其中絕大多數(shù)由放線菌產(chǎn)生。有的放線菌還用于生產(chǎn)維生素、酶制劑、烴類發(fā)酵、污水處理等方面。
一放線菌的形態(tài)放線菌的形態(tài)比細(xì)菌復(fù)雜些,但仍屬于單細(xì)胞。在顯微鏡下,放線菌呈分枝絲狀,我們把這些細(xì)絲一樣的結(jié)構(gòu)叫做菌絲。菌絲無隔膜,直徑與細(xì)菌相似,小于1微米,呈多核的單細(xì)胞狀態(tài)。放線菌菌落的橫界面孢子絲氣生菌絲瓊脂表面基內(nèi)菌絲放線菌在固體培養(yǎng)基上形成與細(xì)菌不同的菌落特征:放線菌菌絲相互交錯纏繞形成質(zhì)地致密的小菌落,干燥、不透明、菌落和培養(yǎng)基的連接緊密,難以挑取,當(dāng)大量孢子覆蓋于菌落表面時,就形成表面為粉末狀或顆粒狀的典型放線菌菌落,由于基內(nèi)菌絲和孢子常有顏色,使得菌落的正反面顏色常不一致,在菌落邊緣的瓊脂平面有變形的現(xiàn)象。放線菌的菌落特征放線菌的菌落特征
A:諾爾斯氏鏈霉菌B:皮疽諾卡氏菌C:酒紅指孢囊菌D:游動放線菌E:小單胞菌F:皺雙孢馬杜拉放線菌
產(chǎn)抗菌素的放線菌的菌落特征
A:卡特利鏈霉菌B:弗氏鏈霉菌C:吸水鏈霉菌金淚亞種D:卡那霉素鏈霉菌E:除蟲鏈霉菌F:生磺酸鏈霉菌
放線菌主要通過形成無性孢子方式進(jìn)行繁殖,成熟的分生孢子或孢囊孢子散落在適宜環(huán)境里發(fā)芽形成新的菌絲體。二、放線菌的繁殖從土壤中分離的放線菌放線菌與畜禽關(guān)系較大的屬一、分枝桿菌屬引起人和畜禽的結(jié)核病。二、放線菌屬引起牛放線菌病。支原體一、形態(tài)與染色:無細(xì)胞壁,基本形態(tài)為球狀、桿狀和絲狀,尚有梨狀、分枝狀、環(huán)狀、螺旋狀等不規(guī)則形狀。革蘭氏染色陰性;姬姆薩染色,呈淡黃色。二、增殖與培養(yǎng):以二分裂為主,也可出芽增殖。三、抵抗力:對一般消毒劑較敏感;對醋酸鉈、結(jié)晶紫、亞硝酸鹽有較強(qiáng)的抵抗力;對抗生素敏感。四、致病性和防治:多為寄生性,寄生于多種動物呼吸道、泌尿生殖道、消化道黏膜以及乳腺關(guān)節(jié)等處,導(dǎo)致人和畜禽患病;加強(qiáng)綜合防治措施,治療可選用敏感
螺旋體
是一類細(xì)長、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動活潑的原核細(xì)胞型微生物。一、形態(tài)結(jié)構(gòu)與染色:呈螺旋狀或波浪形,有一個或多個完整的螺旋,均體大小極為懸殊。革蘭氏染色陰性。二、培養(yǎng)特性:有的為嚴(yán)格厭氧,有的為嚴(yán)格需氧。三、致病性及防治:大部分為非致病性;目前尚無有效疫苗預(yù)防鉤端螺旋體,治療可選廣譜抗生素。黃疸出血熱群鉤端螺旋體立克次氏體專性寄生、二分裂繁殖與節(jié)肢動物關(guān)系密切,寄生在吸血節(jié)肢動物體內(nèi),或?yàn)榧纳拗?、或?yàn)閮Υ嫠拗?、或同時為傳播媒介多形態(tài),革蘭染色陰性,大小介于細(xì)菌和病毒之間大多是人獸共患病的病原體對多種抗生素敏感
衣原體與人類關(guān)系較大的有鸚鵡衣原體和沙眼衣原體。一、概述:呈球形。為嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物,必須用活細(xì)胞培養(yǎng);對外界環(huán)境抵抗力弱。二、致病性和防治:鸚鵡衣原體可致人和畜禽的多種疾?。簧逞垡略w可引起人的沙眼、新生兒肺炎、泌尿生殖道感染。
微生物與外界環(huán)境一、自然界中的微生物的分布:(一)土壤中的微生物:10-20cm的土壤中微生物最多。(表層,4-5米深層幾乎無)大多為有益的,少數(shù)為病原微生物(來自患病動物的尸體、糞便、排泄物等)(二)水中的微生物:1、水中細(xì)菌總數(shù):1ML水樣中的細(xì)菌菌落總數(shù)。(我國〈100/ML〉2、水中大腸菌群數(shù):每1000ML水樣中含有大腸菌群數(shù)的最近似數(shù)來表示。(我國〈3個/1000ML〉。(三)空氣中的微生物:
二、動物體的微生物:(一)正常菌群:存在于動物體與外界相通的部位,在正常情況下,對機(jī)體無害。補(bǔ)充:保持消化道微生物正常菌群的重要性:
1、維持家畜的正常消化代謝,維持器官的正常生理機(jī)能。
2、形成局部保護(hù)膜
3、合成動物必需的營養(yǎng)物質(zhì)。(導(dǎo)致:長期口服抗生素,引起菌群失調(diào),反芻動物采食含糖、蛋白質(zhì)過多的飼料,使瘤胃正常微生物區(qū)系改變,導(dǎo)致前胃疾?。ǘo菌動物和無特定病原體動物:
1、無菌動物:GF,用無菌操作從母體取出未接觸微生物的健康胎兒,專門在室內(nèi)無微生物的環(huán)境中養(yǎng)育而成。GF動物的體表和體內(nèi)不含任何微生物。
2、無特定病原體動物:SPF,含有特定病原體以外的一般微生物,而不含特定種類的微生物的動物。
殺菌滅菌:徹底殺滅(一切微生物)殺滅法溶菌消毒:部分殺滅(僅殺滅病原菌)控制有害菌的措施防腐:抑制霉腐微生物抑制法化療:抑制寄主體內(nèi)的病原菌一幾個基本概念
滅菌(sterilition)
:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措施。消毒(disinfection)
:采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體或動、植物有害的病原菌。而對被消毒的對象基本無害的措施。
防腐(antisepsis):利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖,即通過制菌作用防止食品、生物制品等對象發(fā)生霉腐的措施?;?chemotherapy):利用具有高度選擇毒力即對病原菌具高度毒力而對其宿主基本無毒的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖,借以達(dá)到治療該宿主傳染病的一種措施。物理因素對微生物的影響高溫滅菌(重點(diǎn)介紹)低溫抑菌輻射干燥和滲透壓過濾除菌超聲波
高溫滅菌
干熱滅菌法熱空氣滅菌法高溫滅菌火焰滅菌法煮沸消毒法流通蒸汽滅菌法濕熱滅菌法間歇滅菌法巴氏消毒法連續(xù)加壓滅菌法
濕熱滅菌效果比干熱滅菌效果好火焰滅菌法此法滅菌徹底,迅速簡便,但使用范圍有限。常用于接種工具、污染物品以及實(shí)驗(yàn)動物尸體等廢棄物的處理。熱空氣滅菌法主要在干燥箱中利用熱空氣進(jìn)行滅菌。通常160℃處理1~2h便可達(dá)到滅菌的目的。如果被處理物傳熱性差、體積較大或堆積過擠時,需適當(dāng)延長時間。此法只適用于玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。其優(yōu)點(diǎn)是可保持物品干燥。★濕熱消毒、滅菌法:濕熱的穿透力強(qiáng)。殺滅微生物速度快,比干熱滅菌的效果好。★煮沸法:煮沸10-20MIN可殺滅絕大多數(shù)細(xì)菌的繁殖體,水中加入2-5%石炭酸,能增強(qiáng)殺菌力。水中加入1%碳酸鈉,增強(qiáng)殺菌力。同時減緩金屬氧化,防銹作用。如:刀、剪、注射器、針頭的消毒。★間歇滅菌法:經(jīng)第一次流通蒸汽滅菌后的物品放于室溫或37度溫箱過夜,使芽孢發(fā)育成繁殖體,再用同樣的方法進(jìn)行滅菌。如此連續(xù)3次,即可保證殺滅全部細(xì)菌和芽孢。這種滅菌法,稱為--。用于不耐高溫的某些培養(yǎng)基的滅菌。★巴氏消毒法:是利用不太高的溫度殺死食品中的病原菌或一般雜菌,同時又不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消毒方法。用于牛奶、酒類的消毒。如:加溫63度消毒牛奶30MIN或72度、20MIN。85-90度,10S。殺死非芽孢的病原菌。超高溫巴氏滅菌法,132度,1-2S?!锔邏赫羝麥缇ǎ河酶邏赫羝麥缇鬟M(jìn)行。在密閉的情況下加熱,產(chǎn)生蒸汽不能外溢,器內(nèi)壓力持續(xù)增高,溫度也升高,殺菌力增強(qiáng)。溫度121.3度,20-30MIN,壓力0.105MP。凡是耐高溫,不怕潮濕的物品。如:外科手術(shù)器械,生理鹽水,玻璃器皿,普通培養(yǎng)皿等。高壓蒸汽滅菌(normalautoclvi
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