芒果葉及芒果苷研究進(jìn)展

芒果葉及芒果苷研究進(jìn)展

果實(shí)葉子是油漆科植物的果實(shí)。芒果苷是芒果葉中的主要活性成分。研究發(fā)現(xiàn)芒果苷是治療呼吸系統(tǒng)疾病的主要有效成分,并在其他科屬植物中相繼被發(fā)現(xiàn)。隨著研究的不斷擴(kuò)大和深入,揭示了芒果葉及芒果苷更為廣泛的生理活性和藥理活性。本文對(duì)近30年來(lái)芒果葉及芒果苷在生藥學(xué)、制劑學(xué)、藥理學(xué)及臨床應(yīng)用等方面的研究成果作一綜述。1細(xì)胞束的顯微觀察芒果始載于宋《開寶本草》,葉的應(yīng)用始見于《嶺南采藥錄》?！蛾懘ū静荨?、《南寧市藥物志》(1959年,第一輯)和《全國(guó)中草藥匯編》對(duì)芒果葉也有相應(yīng)記載,但均附錄于芒果項(xiàng)下。而單獨(dú)將芒果葉作為中藥記載則始于1977年的《中藥大辭典》。據(jù)《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》記載:芒果葉氣微,味微澀,呈長(zhǎng)圓形至長(zhǎng)圓狀披針形,長(zhǎng)10～30cm,革質(zhì),稍卷曲,灰棕色或灰綠色,中部寬,兩端漸細(xì),稍有光澤,先端尖或漸尖,邊緣常呈波浪狀,無(wú)鋸齒,基部楔形。葉柄長(zhǎng)4～6cm,基部膨大。其顯微鑒別為上表皮細(xì)胞不規(guī)則,細(xì)胞壁呈波狀彎曲。下表皮細(xì)胞不規(guī)則形。大小不一,細(xì)胞壁稍彎曲;氣孔較少,不定式,副衛(wèi)細(xì)胞3～4個(gè);可察見眾多腺毛,腺頭圓形,內(nèi)含棕色分泌物;腺柄短,腺柄細(xì)胞1～2個(gè)。葉橫切面:表皮細(xì)胞1列,近方形,細(xì)胞淡黃綠色,外細(xì)胞壁稍厚,細(xì)胞腔內(nèi)含有眾多細(xì)小的結(jié)晶;皮層細(xì)胞橢圓形,分布有眾多草酸鈣結(jié)晶,有的細(xì)胞腔內(nèi)含有2～3個(gè)方晶;韌皮部細(xì)胞類圓形或橢圓形,細(xì)胞較皮層的細(xì)胞小,分布有大量的草酸鈣方晶;形成層明顯成環(huán),細(xì)胞較小;木質(zhì)部較小,導(dǎo)管3～5個(gè)成群;木射線細(xì)胞3～5列。粉末:草酸鈣方晶眾多,大小不等,大多數(shù)為正方體形和長(zhǎng)方體形,少數(shù)呈腰鼓形;纖維束隨處可見,胞腔線形或稍大,木化,有些可察見圓形紋孔,有的纖維束周圍的薄壁細(xì)胞中含有草酸鈣方晶,形成晶纖維;有的薄壁細(xì)胞中同時(shí)含有2～3個(gè)草酸鈣方晶;葉表皮細(xì)胞類圓形,有時(shí)可察見已破碎的腺鱗,內(nèi)含有棕黃色物質(zhì)。2芒果形貌和最佳溶出率20世紀(jì)六七十年代參加全國(guó)中草藥普選的一個(gè)小組在廣西百色發(fā)現(xiàn),那里的群眾常以芒果葉裹糍粑,或以芒果葉代茶飲用,因此患呼吸系統(tǒng)疾病者較少。很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)芒果葉無(wú)成藥劑型,人們習(xí)慣將芒果葉作為草藥煮水服用。1973年廣西中醫(yī)學(xué)院將芒果葉開發(fā)成為芒果止咳片,并于1982年獲藥“準(zhǔn)”字號(hào)批文,1998年被列為國(guó)家中藥保護(hù)品種,同年又被列為國(guó)家基本藥物。目前芒果葉的制劑較少,主要有利用芒果葉提取芒果苷后的母液制成的芒果葉沖劑和以芒果葉為原料的芒果止咳片。經(jīng)臨床證明芒果葉中的芒果苷有較好的祛痰鎮(zhèn)咳效果。劉華鋼等以芒果苷為指標(biāo),用轉(zhuǎn)藍(lán)法在不同條件下測(cè)定芒果止咳片體外溶出率,經(jīng)方差分析表明,同一批號(hào)樣品在不同條件下的溶出速率有顯著性差異,溶出速率與轉(zhuǎn)速無(wú)顯著相關(guān)性。吳玉強(qiáng)用薄層色譜法,經(jīng)溶劑提取制備樣品,以氯仿-醋酸乙酯-甲酸(3∶4∶2)為展開劑,在與對(duì)照品相應(yīng)的位置,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。方法簡(jiǎn)便快捷,層析斑點(diǎn)清晰易判斷。謝東等對(duì)芒果止咳片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的鑒別方法進(jìn)行改進(jìn),分別用石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(8.5∶1.5)、苯-無(wú)水乙醇(8∶3)、醋酸乙酯-甲醇-稀醋酸(8∶3∶3)為展開劑。結(jié)果供試色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置,顯相同顏色的斑點(diǎn)。斑點(diǎn)清晰,重現(xiàn)性好。劉華鋼等用反相高效液相色譜法測(cè)定了芒果止咳片中芒果苷的含量。Shim-packCLC-ODS柱,甲醇-0.05mol/LH3PO4(用三乙胺調(diào)pH=3,37∶63)為流動(dòng)相,UV258nm波長(zhǎng)處檢測(cè)。平均回收率為97.8%,相對(duì)偏差為1.84%。方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確。黃華藝等利用高效毛細(xì)血管電泳的自由溶液毛細(xì)管區(qū)帶電泳(CZE)技術(shù)分析從芒果樹葉中提取的芒果苷,是一種簡(jiǎn)便、快速、成本低和效果好的方法,在臨床藥物分析中尤其適用。3芒果苷及其提取芒果葉含抗壞血酸237mg%,鞣質(zhì)11.73%,芒果苷6.9%及鞣花酸、?-兒茶精、莽草精、奎尼酸、山奈醇、ι-α-側(cè)柏烯等多種成分;EL-sissi等從芒果葉中分離到芒果苷、槲皮素、高芒果苷、原兒茶酸、沒(méi)食子酸等成分并層析檢出有沒(méi)食子酸、沒(méi)食子酸甲酯及異芒果苷。周沛椿等用芒果葉制成水煎液、水煮醇溶、總苷等,經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)篩選,證明芒果葉水煎60%醇溶部分有一定的鎮(zhèn)咳作用并分離出有一定鎮(zhèn)咳、祛痰作用的芒果苷和對(duì)流感病毒和金黃色葡萄球菌有抑制作用的沒(méi)食子酸。陸仲毅等用芒果葉粗粉經(jīng)95%乙醇回流提取、濃縮,過(guò)濾得濾液及濾渣。濾渣用50%乙醇及活性炭重結(jié)晶,經(jīng)聚酰胺粉干柱低壓層析,甲醇為洗脫劑,合并Rf為0.4的熒光斑點(diǎn)部分,蒸干,重結(jié)晶得芒果苷。合并Rf為0.5的熒光斑點(diǎn)部分,蒸干,用石油醚、氯仿處理后再以55%乙醇重結(jié)晶得到高芒果苷。將30%乙醇洗脫液分段收集a-d四部分,a部分分得芒果苷,d部分經(jīng)濃縮后析出固體,經(jīng)纖維素干柱層析,重結(jié)晶得異芒果苷。同時(shí)還從芒果葉中分離得到?jīng)]食子酸乙酯、原兒茶酸、沒(méi)食子酸、槲皮素、金絲桃苷。其中芒果苷是芒果葉的主要有效成分。芒果苷(mangiferin)是一種四羥基吡酮的碳糖苷,屬雙苯吡酮類化合物,在多種植物中存在,如漆樹科植物芒果樹、扁桃樹(Mangiferapersiciformis)的葉、果實(shí)、樹皮,龍膽科植物東北龍膽(GentianamanshuricaKitag),川西獐芽菜(SwertiamussotiiFranch),百合科植物知母(AnemarrhenaasphodeloidesBge.),水龍科植物光石韋[Pyrrosiaclvata(Bak)Chinl]等。思秀玲等用95%乙醇滲漉提取,減壓回收乙醇,稠膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取,回收溶劑得到石油醚提取部、乙酸乙酯提取部、水層沉淀物。其中水層沉淀物用55%乙醇熱提,冷卻得到黃色針狀結(jié)晶,經(jīng)反復(fù)純化處理得到芒果苷。黃海濱等應(yīng)用空氣爆破法研究芒果苷提取工藝,在芒果苷滲漉實(shí)驗(yàn)中效果顯著,浸出率達(dá)到90%和100%所需的時(shí)間均比無(wú)爆破法縮短一半。滲漉最初3h,浸出率達(dá)41.8%,而無(wú)爆破法的只有27.6%。劉青等用水作溶劑從芒果葉中提取芒果苷,用正交設(shè)計(jì)法確定影響芒果苷提取率的因素,選擇50℃水為溶劑,考察不同頻率超聲波對(duì)芒果苷提取率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)19kHz超聲波50℃提取60min的提取率相當(dāng)于常規(guī)水煎煮120min的提取率,超聲波頻率對(duì)提取率有顯著影響。4關(guān)于卡其色藥物的有效性研究4.1芒果苷的藥效學(xué)廣西中醫(yī)學(xué)院芒果葉研究小組通過(guò)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)芒果葉浸膏具有較好的鎮(zhèn)咳、祛痰作用和一定的平喘作用。扁桃葉煎劑和復(fù)方扁桃葉煎膏均有顯著的鎮(zhèn)咳、祛痰作用,能顯著延長(zhǎng)Ach對(duì)豚鼠的致喘潛伏期。鄭作文等對(duì)芒果止咳片進(jìn)行藥效學(xué)研究,表明其能明顯延長(zhǎng)豚鼠Ach引喘的潛伏期和對(duì)抗Ach所致氣管平滑肌的收縮,對(duì)小鼠二氧化硫引咳能明顯延長(zhǎng)咳嗽潛伏期,并能減少刺激貓喉上神經(jīng)引起的咳嗽次數(shù),明顯增加小鼠氣管的酚紅排泌量,具有平喘、止咳、化痰作用。鄧家剛等進(jìn)行芒果苷的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)芒果苷對(duì)豚鼠組胺、乙酰膽堿混合引喘有明顯延長(zhǎng)引喘潛伏期作用;對(duì)小鼠濃氨水引咳有明顯延長(zhǎng)引咳潛伏期并明顯減少小鼠咳嗽次數(shù);對(duì)小鼠氣管的酚紅排泌有明顯促進(jìn)作用。4.2芒果苷是受免疫調(diào)節(jié)作用的藥物王偉等選擇了4個(gè)芒果苷劑量(5,15,50,100μg)使其作用于老化紅細(xì)胞,觀察對(duì)老化紅細(xì)胞免疫指標(biāo)(RBC-C3bRR,RBC-ICR,RBC-CaR)的影響,結(jié)果50,100μg劑量組RBC-C3bRR,RBC-ICR,RBC-CaR比對(duì)照組明顯增高,而LPO含量和對(duì)照組相比明顯降低,而另有文獻(xiàn)報(bào)道在應(yīng)用體外誘生抗體方法研究中藥免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)中,證明芒果苷(0.1μg/ml)有免疫抑制作用而不影響細(xì)胞活力。于慶海等發(fā)現(xiàn)芒果苷能抑制化合物48/80誘發(fā)的大鼠腹腔肥大細(xì)胞組胺釋放。有研究發(fā)現(xiàn)芒果苷對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞有激活作用,采用48h間隔腹腔注射10μg/g體重的芒果苷能產(chǎn)生強(qiáng)的峰誘導(dǎo)效應(yīng)。經(jīng)芒果苷誘導(dǎo)的或體外芒果苷處理的腹腔巨噬細(xì)胞,其酸性磷酸酯酶活性增加,細(xì)胞毒性提高,對(duì)腹水纖維瘤細(xì)胞的吞噬作用增強(qiáng),但體內(nèi)芒果苷激活巨噬細(xì)胞的作用是短暫的。鄭作文、鄧家剛等分別對(duì)芒果止咳片、芒果苷進(jìn)行抗炎試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)能抑制蛋清致大鼠足趾腫脹和冰醋酸所致腹腔通透性增加,具有明顯的抗炎作用。芒果苷本身并不具有鎮(zhèn)痛作用,即使劑量達(dá)40mg/kg(i.p),然而以該劑量給藥30min后,芒果苷能明顯增強(qiáng)次鎮(zhèn)痛劑量嗎啡(2mg/kg,i.p)的鎮(zhèn)痛作用(P<0.001)。4.3對(duì)肝臟的保護(hù)作用成海龍等利用醋氨酚、四氯化碳和D-氨基半乳糖三種大鼠肝損傷模型研究芒果苷的肝保護(hù)作用,芒果苷能明顯降低三種肝損傷模型大鼠血清的GPT和GOT水平,病理檢查結(jié)果顯示,芒果苷還能使大鼠肝損傷顯著減輕,表明具有一定的肝保護(hù)作用。杜繼曾等采用模擬高原急性低氧造成大鼠肝損傷的方法,觀察芒果苷對(duì)肝臟的保護(hù)作用,在大鼠肝溶酶體體外溫孵實(shí)驗(yàn)中,芒果苷有穩(wěn)定溶酶體膜的作用,且對(duì)溶酶體酸性磷酸酶活力有直接抑制作用。芒果苷具有明顯的利膽作用。按20mg/kg體重劑量經(jīng)靜脈給藥,受試動(dòng)物膽汁流量30min后開始增加(增加190%),60min后膽汁分泌量達(dá)高峰(增加290%),90min后開始下降(220%),至240min后幾乎恢復(fù)正常。給藥后30min,60min和90min的膽汁流量與基礎(chǔ)膽汁流量比較有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。4.4抗氧化活性研究Sato在研究芒果苷抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用機(jī)理中發(fā)現(xiàn),芒果苷能快速?gòu)氐椎厍宄?,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH),并抑制大鼠肝臟微粒體中由煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯還原酶(NADPH)或非酶類因子抗壞血酸、Fenton’s反應(yīng)物引起的類脂化合物過(guò)氧化反應(yīng)的啟動(dòng)階段;而在微粒體酶促系統(tǒng)或亞麻酸氫過(guò)氧化物所致的過(guò)氧化反應(yīng)系統(tǒng)的類脂化合物過(guò)氧化反應(yīng)過(guò)程中,芒果苷沒(méi)有終止作用。這些結(jié)果提示芒果苷具有抗氧化活性,可能由于與它能專一清除類脂化合物過(guò)氧化反應(yīng)啟動(dòng)階段的自由基有關(guān)。夏維木等研究芒果苷等5種黃酮類化合物對(duì)超氧陰離子、羥自由基和單線態(tài)氧(102)的清除作用,結(jié)果顯示芒果苷有良好的清除活性氧作用,且量效關(guān)系明顯。黃華藝等發(fā)現(xiàn)芒果苷對(duì)四氧嘧啶造模大鼠能降低其血清LOP和Hb含量,提高GSH-PX和RBC-CAT活性,能顯著提高大鼠腦勻漿液SOD活性和LOP含量,但對(duì)大鼠腦勻漿線粒體MAO活性的影響無(wú)顯著性。4.5芒果苷體外藥動(dòng)力學(xué)對(duì)hsv-的作用葉惠珍等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明芒果葉浸膏在雞胚內(nèi)對(duì)流感病毒有一定的抑制作用。鄭民實(shí)等用組織培養(yǎng)法對(duì)從芒果樹葉中提取的芒果苷進(jìn)行抗Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV-Ⅰ)作用的實(shí)驗(yàn)觀察。檢測(cè)其抗病毒藥效時(shí),采用原代人胚肌皮單層細(xì)胞,病毒對(duì)照組與給藥組平行操作,25～250μg/ml藥物直接或同時(shí)作用病毒以及先感染病毒后給藥或先給藥后感染病毒,結(jié)果顯示芒果苷均能阻止病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。而朱雪梅等采用空斑減數(shù)試驗(yàn)與產(chǎn)量減數(shù)試驗(yàn)對(duì)芒果苷體外抗Ⅱ型單純皰疹病毒(HSV-Ⅱ)作用的研究表明,芒果苷抑制50%空斑形成有效濃度(ED50)為111.7μg/ml。藥物加入和去除試驗(yàn)結(jié)果提示芒果苷抗HSV-Ⅱ作用的機(jī)制可能是抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的晚期。4.6芒果苷可顯著降低肺癌細(xì)胞周期的血清中e-cad和mao黃華藝等用MTT法觀察芒果苷對(duì)人肝癌細(xì)胞株增殖的抑制作用、對(duì)細(xì)胞的毒性作用、對(duì)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用和對(duì)細(xì)胞周期的干預(yù)作用。結(jié)果顯示出芒果苷對(duì)肝癌細(xì)胞株有明顯的毒性作用,能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡和阻滯細(xì)胞周期于G2/M期,具有潛在的藥用價(jià)值。用Walker256肝癌細(xì)胞和Wistar大鼠建立大鼠肝癌模型,用ELISA法檢測(cè)血清中上皮鈣粘蛋白(E-cad)和癌胚抗原(CEA)含量,酶法測(cè)定MAO含量,結(jié)果顯示芒果苷有明顯降低肝癌大鼠血清中E-cad和MAO作用,但對(duì)血清CEA無(wú)明顯影響。芒果苷還能明顯降低Walker256肝癌細(xì)胞系培養(yǎng)液中可溶性E-cad含量。提示芒果苷具有干預(yù)由E-cad介導(dǎo)的細(xì)胞粘附和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用,同時(shí)對(duì)減緩肝硬化的形成也有明顯作用。但具體針對(duì)這個(gè)過(guò)程中哪一個(gè)環(huán)節(jié),是受體酪氨酸蛋白激酶或磷酸酶或其他成分,有待進(jìn)一步研究。4.7芒果苷對(duì)戊巴比妥睡眠時(shí)間的影響B(tài)hattacharya等在對(duì)龍膽科植物Canscoradecussate提取的芒果苷的系統(tǒng)研究中發(fā)現(xiàn),芒果苷具有明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮作用;50～100mg/kg劑量的芒果苷腹腔注射,可使所有受試動(dòng)物出現(xiàn)動(dòng)作震顫、豎毛、強(qiáng)迫性撕打和自主活動(dòng)增加等癥狀。這些行為改變的高峰是在給藥后30min,并維持至60min,120min后逐漸下降。若試驗(yàn)動(dòng)物預(yù)先腹腔注射氯丙嗪5mg/kg,則可阻斷芒果苷這些作用。說(shuō)明芒果苷可能是中腦邊緣系統(tǒng)D2受體的激動(dòng)劑。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在腹腔注射給戊巴比妥30mg/kg之前先腹腔注射芒果苷50mg/kg,可明顯延長(zhǎng)戊巴比妥睡眠時(shí)間。先給予芒果苷的大鼠睡眠時(shí)間為56.2±7.8min,而空白對(duì)照組為36.2±5.7min。50mg/kg劑量的芒果苷能明顯加強(qiáng)輕度麻醉劑量的乙醇的麻醉作用。在該劑量范圍,60%的小鼠失去正常的反射而空白對(duì)照組則無(wú)此現(xiàn)象。4.8ger’s液灌注蛙心刺激劑1～2mg劑量的芒果苷對(duì)正?；蚬δ艿拖碌碾x體Ringer’s液灌注蛙心均有短暫、確切的增強(qiáng)心肌收縮力的作用,且該作用不被心得安所阻斷。因此,它可能是一種心臟直接刺激劑。芒果苷對(duì)麻醉動(dòng)物的血壓無(wú)明顯影響。4.9不同抗菌活性成分對(duì)金葡菌抗菌作用的影響體外抗菌試驗(yàn)觀察復(fù)方芒果葉、扁桃葉煎劑、芒果葉沖劑的抗菌作用,結(jié)果表明對(duì)金葡25023菌、金葡京耐菌、白葡萄球菌、奈氏球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、福氏桿菌、傷寒桿菌均有較好的抗菌作用。5芒果研磨片治療慢性呼吸道感染的臨床效果據(jù)記載,芒果葉能行氣疏滯,去瘀積。用于熱滯腹痛,氣漲,小兒疳積,消渴。陳揚(yáng)選于1973年12月至1974年10月,應(yīng)用廣西中醫(yī)學(xué)院制藥廠生產(chǎn)的芒果片對(duì)129例慢性支氣管患者作了臨床治療觀察,初步證明有較好的療效。另?yè)?jù)報(bào)道,慢性氣管炎經(jīng)一個(gè)療程治療后,總有效率93.02%,顯效率達(dá)54.26%以上。1975年又對(duì)78例進(jìn)行治療觀察,與1974年129例療效相近似,總有效率93.6%,顯效率達(dá)62.8%;對(duì)中西醫(yī)各型慢性氣管炎均有較好的療效,尤以虛寒型、痰濕型或單純型療效更顯著。未發(fā)現(xiàn)有任何毒性作用和不良反應(yīng)。廣西中醫(yī)學(xué)院芒果葉浸膏香煙研究組將芒果葉加入香煙,能降低香煙中焦油、煙堿的含量;對(duì)患有慢性支氣管炎的吸煙者,吸用芒果葉浸膏香煙后咳嗽、氣喘、咯痰、口苦、口干