《迷迭香水中微量芳香性化合物的測定 氣相色譜法》-編制說明

《迷迭香水中微量芳香性化合物的測定氣相色譜法》標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿編制說明用率低的迷迭香水的研究和標(biāo)準(zhǔn)化工作對我省迷迭香系列產(chǎn)品附加值的提升有要是為了形成測定迷迭香水中微量芳香性物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)化檢測規(guī)范，構(gòu)建一個(gè)準(zhǔn)圖1直立型迷迭香監(jiān)標(biāo)函〔2023〕25號），項(xiàng)目由湖南省產(chǎn)商品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、湖南省藥品檢湖南先偉陽光生物科技有限公司、湖南德普斯醫(yī)療科技有限公司在前期資料搜2023年2月標(biāo)準(zhǔn)制定任務(wù)下達(dá)后，湖南省產(chǎn)商品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、湖南省限公司迅速組建了標(biāo)準(zhǔn)起草組并召開了項(xiàng)目啟動會議。會上確定了標(biāo)準(zhǔn)修訂原2023年3～10月：按照第一次會議安排，標(biāo)準(zhǔn)起草組單位和成員各司其職到的反饋意見進(jìn)行了逐條討論和研究并依據(jù)相關(guān)意見對標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了認(rèn)真修改和《迷迭香水中微量芳香性化合物的測定氣相色譜法》標(biāo)準(zhǔn)在制定工作中，定了本文件的適用范圍，將迷迭香水芳香性化合物檢測的項(xiàng)容的可行性，確保標(biāo)準(zhǔn)要求可以有效適用于迷迭香水中相關(guān)芳香性物質(zhì)檢測需本文件中涉及的術(shù)語和定義均引用國內(nèi)、國際現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)管理規(guī)范要調(diào)節(jié)試樣pH值至4.0-5.0后，用四氯化碳萃取微量芳香性化合物，離心分法的可操作性和實(shí)驗(yàn)室間所有的設(shè)備儀器差異，本文件規(guī)μm,或相當(dāng)色譜柱。載氣，高純氮?dú)?純度≥99.999%);恒流模式，柱流速1.0mL/min。采用程序升溫：柱初始溫度50℃,保持3min,以4℃/min升溫至160℃,保持0min,以20℃/min升溫至240℃,保持5.5min,色譜分析進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比20:1。保留時(shí)間的確定：將24種各標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液 試樣溶液注入氣相色譜儀中，得到峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到待測溶液中24種目標(biāo)物質(zhì)的質(zhì)量濃度。如果待測試樣溶液某種目標(biāo)物質(zhì)峰面積超過標(biāo)準(zhǔn)曲圖224種混標(biāo)稀釋液的氣相色譜譜圖(50μg/mL)圖3天然迷迭香純露(進(jìn)口迷迭香葉)的氣相色譜譜圖圖4天然迷迭香純露(中國產(chǎn)迷迭香葉)的氣相色譜譜圖注：圖2、圖3、圖4代表的物質(zhì)與表1相同序號代表的物質(zhì)一致。表124種目標(biāo)物質(zhì)在出峰時(shí)間、定量限、線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)r2(n=3)目標(biāo)物質(zhì)保留時(shí)間1α--蒗烯234月桂烯5678青葉醛11.9450.03Y=811.7X-41080.99979γ-萜品烯12.7880.03Y=1260.9X-58310.9997對傘花烴13.5590.03Y=1376.0X-64930.9997萜品油烯13.9720.03Y=1152.9X-53220.9997甲基庚烯酮15.7200.03Y=1039.5X-52980.999717.2980.03Y=984.6X-49570.9997樟腦（天然）21.2480.03Y=1473.7X-71870.9997芳樟醇22.1990.03Y=1091.4X-51260.9997乙酸芳樟酯22.4010.03Y=1240.2X-54350.9997乙酸異龍腦酯23.2940.03Y=1492.2X-72090.9997反式石竹烯23.5750.03Y=1901.2X-77220.99974-萜烯醇23.8170.03Y=1613.3X-76820.999720異龍腦25.6900.03Y=1256.6X-55700.999821α-松油醇26.4790.03Y=924.5X-36380.999822馬鞭草烯酮26.7300.03Y=1396.2X-74400.999723乙酸橙花酯27.1740.03Y=1172.0X-44360.999824香葉醇30.4580.03Y=1345.2X-62390.9997表23種不同添加濃度下24種目標(biāo)物質(zhì)的回收率和精密度（n=6）序號混標(biāo)：1.5μg混標(biāo)：15μg混標(biāo)：150μgRSD(%)RSD(%)RSD(%)1α--蒎烯3.5094.60.5796.30.662崁烯90.283.80.8595.03β-蒎烯89.588.00.8490.14月桂烯93.32.0492.64.8895.23.655α-松油烯98.43.8895.63.4796.63.906檸檬烯95.13.9997.43.8495.42.9671,8-桉葉素2.850.768青葉醛94.798.30.4497.40.969γ-萜品烯99.14.8597.73.9198.23.50對傘花烴2.963.4599.92.55萜品油烯95.04.7598.54.5196.34.25甲基庚烯酮2.200.7389.280.90.3586.2樟腦（天然）0.960.89芳樟醇0.80乙酸芳樟酯0.88乙酸異龍腦酯0.87反式石竹烯94.24.5595.34.9598.64.004-萜烯醇97.194.60.5795.620異龍腦89.483.80.8590.421α-松油醇90.988.00.8492.422馬鞭草烯酮97.23.8792.64.8895.53.2023乙酸橙花酯94.44.8795.63.4798.024香葉醇4.0697.43.843.51序號純露半成（湖南迷迭香葉）純露半成（河南迷迭香葉）純露半成（云南迷迭香葉）純露半成品4（進(jìn)口葉）市售市售純露2市售純露3市售純露41α--蒎烯0.90.90.90.958.60.80.80.92崁烯0.50.60.00.616.0NDNDND3β-蒎烯NDNDND0.53.4NDNDND4月桂烯0.60.70.60.64.7NDNDND5α-松油烯0.60.60.50.6ND6檸檬烯0.60.60.60.67.3NDND0.571,8-桉葉素355.7370.5376.9356.3261.859.58青葉醛NDND0.99γ-萜品烯NDNDNDND1.5NDNDND對傘花烴NDNDND0.66.4NDNDND萜品油烯NDNDNDND1.2NDNDND甲基庚烯酮0.90.80.70.60.9樟腦（天然）90.080.2571.654.527.445.8芳樟醇29.723.833.816.55.927.224.4乙酸芳樟酯NDNDNDNDNDNDNDND乙酸異龍腦酯0.90.7反式石竹烯NDNDND0.92.1ND0.6ND4-萜烯醇15.222.93.57.65.38.920異龍腦NDNDNDND2.92.2NDND21α-松油醇68.674.870.1228.411.724.225.640.522馬鞭草烯酮802.3762.0853.9NDND97.0322.823乙酸橙花酯NDNDNDNDNDNDNDND24香葉醇備注：ND代表未檢出20.65.60.9（小于檢出限:0.30mg/L）。4.626.1化合物，通過氣相色譜分離檢測樣品中的目標(biāo)化合物含量，具有較高的準(zhǔn)確度和實(shí)用性。依據(jù)GB/T27417-2017《合格評定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》,采用實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)的方法，與湖南先偉實(shí)業(yè)有限公司進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間方法比對，對適用對象、線性范圍、定量限和精密度進(jìn)行考察。經(jīng)驗(yàn)證，各項(xiàng)方法學(xué)參數(shù)均滿足GB/T27417-2017要求。相關(guān)驗(yàn)證材料見附件1。圖5氣相色譜儀式中：X——試樣中待測組分含量，單位為毫克每千克（mg/L）；ρ——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的試樣液中待測物的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL）;V1——萃取劑四氯化碳體積，單位為毫升（mL）；V0——試樣體積，單位為毫升（mL）；1000——換算系數(shù)。結(jié)果保留三位有效數(shù)字。用率低的迷迭香水的研究和標(biāo)準(zhǔn)化工作對我省迷迭香系列產(chǎn)品附加值的提升有地方標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證材料2023年9月11-9月15日，湖南先偉陽光生物科技有限公司對《迷迭香水中微量芳香性化合物的測定氣相色譜法（草案）》進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。用到的試劑材料與湖南省質(zhì)檢院保持一致。一、適用對象的驗(yàn)證對國產(chǎn)迷迭香純露半成品（湖南產(chǎn)）進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果與湖南省質(zhì)檢院結(jié)果比較，匯總結(jié)果見表1（n=4）.表1半成品檢驗(yàn)結(jié)果比較（n=4）序號湖南省質(zhì)檢院結(jié)果（mg/L）湖南先偉結(jié)果（mg/L）偏差（%）1α--蒎烯NDND/2崁烯NDND/3β-蒎烯NDND/4月桂烯NDND/5α-松油烯NDND/6檸檬烯NDND/71,8-桉葉素355.7332.8-6.78青葉醛+6.59γ-萜品烯NDND/對傘花烴NDND/萜品油烯NDND/甲基庚烯酮-8.0+8.0樟腦（天然）90.088.2-2.0芳樟醇29.728.0-5.9乙酸芳樟酯NDND/乙酸異龍腦酯+11.8反式石竹烯NDND/4-萜烯醇-4.920異龍腦NDND/21α-松油醇68.665.8-4.222馬鞭草烯酮802.3810.8+1.123乙酸橙花酯NDND/24香葉醇ND代表未檢出（定量限：1.0mg/L）-7.2表2成品檢驗(yàn)結(jié)果比較（n=4）序號目標(biāo)物質(zhì)湖南省質(zhì)檢院結(jié)果（mg/L）湖南先偉結(jié)果（mg/L）偏差（%）NDND/2崁烯NDND/3β-蒎烯NDND/4月桂烯NDND/5α-松油烯NDND/6檸檬烯NDND/71,8-桉葉素8青葉醛0.90.89γ-萜品烯NDND/10對傘花烴NDND/11萜品油烯NDND/+7.70.90.92+2.214樟腦（天然）45.848.0+4.715芳樟醇24.421.716乙酸芳樟酯NDND/17乙酸異龍腦酯0.918反式石竹烯NDND/194-萜烯醇8.9-9.420異龍腦NDND/21α-松油醇40.538.2-5.822馬鞭草烯酮322.8338.7+4.823乙酸橙花酯NDND/24香葉醇26.124.3-7.1ND代表未檢出（定量限：1.0mg/L）由表1和表2可知，在湖南省質(zhì)檢院和湖南先偉檢測的迷迭香純露半成品（湖南產(chǎn)）和市售迷迭香純露成品中24種目標(biāo)物質(zhì)含量的偏差范圍在±15%范圍內(nèi)。二、線性范圍配制2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、800.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性方程和相關(guān)系數(shù)r2見表3.表3線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)（n=2）1α--蒎烯Y=1230.5X-54430.9997Y=865.7X-3631.00002崁烯Y=1238.6X-53100.9997Y=827.9X-2600.99993β-蒎烯Y=1308.6X-59290.9997Y=859.8X-3930.99994月桂烯Y=1208.8X-55030.9997Y=696.9X-2050.99995α-松油烯Y=1350.1X-62080.9997Y=818.3X-3281.00006檸檬烯Y=1392.1X-65140.9997Y=834.6X-3930.999971,8-桉葉素Y=1321.1X-66210.9997Y=697.4X-2581.00008青葉醛Y=811.7X-41080.9997Y=586.7X-2091.00009γ-萜品烯Y=1260.9X-58310.9997Y=862.6X-7430.9999對傘花烴Y=1376.0X-64930.9997Y=934.6X-3130.9999萜品油烯Y=1152.9X-53220.9997Y=736.4X-5121.0000甲基庚烯酮Y=1039.5X-52980.9997Y=665.6X-2480.9999Y=984.6X-49570.9997Y=602.8X-2861.0000樟腦（天然）Y=1473.7X-71870.9997Y=760.8X-2380.9999芳樟醇Y=1091.4X-51260.9997Y=726.4X-3071.0000乙酸芳樟酯Y=1240.2X-54350.9997Y=667.1X-6460.9999乙酸異龍腦酯Y=1492.2X-72090.9997Y=705.1X-4450.9999反式石竹烯Y=1901.2X-77220.9997Y=756.3X-4040.99994-萜烯醇Y=1613.3X-76820.9997Y=848.5X-3701.000020異龍腦Y=1256.6X-55700.9998Y=769.4X-5790.999821α-松油醇Y=924.5X-36380.9998Y=459.7X-2300.999922馬鞭草烯酮Y=1396.2X-74400.9997Y=741.1X-1200.999923乙酸橙花酯Y=1172.0X-44360.9998Y=667.5X-7360.999624香葉醇Y=1345.2X-62390.9997Y=732.0X-6940.9998線性范圍和線性回歸方程相關(guān)系數(shù)符合GB/T27417-2017《合格評定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》5.3要求（線性范圍包含6個(gè)校正點(diǎn)，相關(guān)系數(shù)≥0.99）。三、檢出限和定量限按照《迷迭香水中微量芳香性化合物的測定氣相色譜法（草案）》中規(guī)定的檢出限（0.30mg/L）和定量限（1.0mg/L）濃度，湖南先偉添加混標(biāo)溶液，考察在規(guī)定檢出限濃度下，24種目標(biāo)物質(zhì)的信噪比是否大于等于3；考察在規(guī)定定量限濃度下，24種目標(biāo)物質(zhì)的信噪比是否大于等于10（n=3）.結(jié)果見表4.表4檢出限和定量限（n=3）1α--蒎烯5.612崁烯4.883β-蒎烯5.394月桂烯4.345α-松油烯5.516檸檬烯5.5171,8-桉葉素6.38青葉醛5.819γ-萜品烯7.05對傘花烴6.9320.68萜品油烯5.82甲基庚烯酮6.298.8723.70樟腦（天然）7.5822.50芳樟醇6.33乙酸芳樟酯5.58乙酸異龍腦酯5.07反式石竹烯8.4321.564-萜烯醇3.7920異龍腦7.6821α-松油醇5.2122馬鞭草烯酮6.32