高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用-課件

高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件1應(yīng)用技術(shù)發(fā)展部

2011年高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件2北京創(chuàng)新通恒科技有限公司是一家面向全球的專業(yè)HPLC企業(yè)，主要致力于高效液相色譜系統(tǒng)研制、開發(fā)、生產(chǎn)和銷售。創(chuàng)建于2000年，公司總部位于北京市海淀區(qū)中關(guān)村高科技園區(qū)上地信息產(chǎn)業(yè)基地，是一家極具創(chuàng)造力的國家級高新技術(shù)企業(yè)。十年來一直秉承“精益求精，追求品質(zhì)，值得信賴”傳統(tǒng)，根據(jù)用戶需求，在用戶關(guān)鍵領(lǐng)域進行持續(xù)的技術(shù)研發(fā)。我們擁有卓越的技術(shù)團隊和專家級的一流研發(fā)人才，“CXTH

DAC800工業(yè)化生產(chǎn)型HPLC系統(tǒng)”研發(fā)投產(chǎn)，將中國工業(yè)化色譜系統(tǒng)推向世界前列，這是中國大型純化分離研發(fā)領(lǐng)域的一座里程碑；“CXTH

Kilotide500

DNA合成儀”投入使用，彌補中國大型合成設(shè)備領(lǐng)域的空白。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件3關(guān)于我們國家級高新技術(shù)企業(yè)國家級軟件產(chǎn)品企業(yè)創(chuàng)新通恒科學(xué)技術(shù)部技術(shù)創(chuàng)新基金國家級、北京高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件4市創(chuàng)新基金關(guān)于我們軟件著作權(quán)7項儀器儀表協(xié)會創(chuàng)新金獎發(fā)明專利3項，實用新型專利13項DAC800大型工業(yè)化制備色譜系統(tǒng)BCEIA金獎公司資質(zhì)、獎項高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件5高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件6北京創(chuàng)新通恒科技有限公司北京鋼臣科技有限公司總經(jīng)理辦公室開發(fā)部財務(wù)部營銷事業(yè)部中小設(shè)備加工中心應(yīng)用技術(shù)發(fā)展部工業(yè)化設(shè)備加工中心上海辦事處成都辦事處廣州辦事處售后技術(shù)支持中心組織構(gòu)架高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件7走近我們高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件8引言：

HPLC的特點HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用藥物色譜分析方法的開發(fā)藥物色譜純化方法的建立和優(yōu)化：

從分析到工業(yè)制備目錄高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件9內(nèi)容提要引言HPLC的特點：高效：分離效能高高靈敏度應(yīng)用范圍廣：70%以上的有機化合物可以用HPLC分析分析速度快條件溫和，樣品不被破壞分析HPLC由于靈敏度高，快速簡便，廣泛地應(yīng)用于藥物分析制備HPLC是目前分離與純化領(lǐng)域中處理多組分復(fù)雜體系的最有效的方法高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件10引言：

HPLC的特點HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用藥物色譜分析方法的開發(fā)藥物色譜純化方法的建立和優(yōu)化：

從分析到工業(yè)制備目錄高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件11內(nèi)容提要分析型HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用檢測藥物含量天然藥物化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分可能有一個，也可以有多個，因此精確測定各有效成分的含量對藥品質(zhì)量控制，建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有重要的意義。高效液相色譜法由于其專一性、靈敏度高、快速簡便的特點可廣泛應(yīng)用于藥物分析中的定量分析，尤其在干擾因素見多的時候表現(xiàn)出更大的優(yōu)越性。藥效檢測：藥物代謝動力學(xué)研究，新藥效能研究檢測藥物殘留高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件12三七藥材組分分析：高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件13感冒清熱顆粒中的葛根素有效成分分析：高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件14高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件15高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件16高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件17半制備型HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用高通量篩選活性物質(zhì)實驗室規(guī)模純化（克級）高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件18DISCOVERYACTIVECOMPONENT發(fā)現(xiàn)活性高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件19高通量篩選活性物質(zhì)中藥提取物或發(fā)酵液等的分析譜圖高通量篩選活性物質(zhì)高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件20用半制備色譜系統(tǒng)，對可能具有生物活性的組分，多次進樣，分段制備幾十毫克做活性研究，最終確定活性組分高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件21高通量篩選活性物質(zhì)高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件22制備HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用純化藥物有效成分高附加值產(chǎn)品（如紫杉醇、長春堿等癌癥治療藥物）上樣量大，附加值低產(chǎn)品（甜菊糖苷等附加值低的藥物輔料）工藝改進類產(chǎn)品（增大生產(chǎn)量或提高產(chǎn)品純度類產(chǎn)品）高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件23制備HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件24小試級制備色譜系統(tǒng)：方法的放大及標(biāo)準(zhǔn)品、對照品的制備。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件25中試級制備色譜系統(tǒng)：年產(chǎn)公斤級至百公斤級高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件26DAC800

型工業(yè)化色譜：年產(chǎn)噸級高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件27引言：

HPLC的特點HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用藥物色譜分析方法的開發(fā)藥物色譜純化方法的建立和優(yōu)化：從分析到工業(yè)制備目錄高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件28內(nèi)容提要液相色譜實驗所需的基本參數(shù)流動相：種類及配比，等度或梯度固定相：色譜柱類型及內(nèi)徑、長短流動相輸送系統(tǒng)參數(shù)：流速檢測器參數(shù)溫度控制進樣量以上參數(shù)即構(gòu)成一個具體的HPLC方法；亦稱色譜條件高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件29藥物色譜分析方法的開發(fā)高壓輸液泵的選擇平流（單泵）高壓梯度使用多臺色譜泵，在泵后混合配置靈活、簡單，脫氣簡單低壓梯度用單泵產(chǎn)生梯度，泵前混合對脫氣要求高高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件30檢測器的選擇a、紫外可見光檢測器應(yīng)用最廣泛的檢測器，是在UV及VIS區(qū)有吸收物質(zhì)檢測的首選檢測器。b、示差折光檢測器一種通用型的檢測器，靈敏度偏低，對溫度穩(wěn)定性要求過高，不能用于梯度洗脫。通常用來分析糖類及高聚物（GPC）c、熒光檢測器靈敏度極高，常用來進行痕量檢測。

d、二極管陣列檢測器（DAD）可用于全波長的檢測，可以測量峰純度，可在線得到色譜圖和光譜圖。

e、蒸發(fā)光散射檢測器一種通用型檢測器，它可以檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品。ELSD可以用于測量無生色團物質(zhì)的檢測，如碳水化合物、類脂物、聚合物、不進行衍生化的脂肪酸及氨基酸、表面活性劑及結(jié)構(gòu)不明又無標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)的檢測。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件31根據(jù)分離模式劃分的色譜柱類型色譜柱的選擇高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件32高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件33常用色譜柱類型高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件34ODS（C18）—應(yīng)用范圍最廣的填料，大部分小分子有機化合物都可進行分析C8、C4—保留要比C18弱，適合用于大分子的多肽和蛋白類的分離純化氨基柱—正反雙模式，主要用于小分子糖類化合物苯基柱—通常用于分離含苯環(huán)的化合物氰基柱—正反雙模式，和ODS基不同的色譜間作用力，因而氰基柱擁有 獨特的選擇性正向硅膠環(huán)糊精—根據(jù)物質(zhì)光學(xué)性質(zhì)的不同進行手性分離進樣系統(tǒng)的選擇六通進樣閥六通閥的構(gòu)造Load狀態(tài)Inject狀態(tài)自動進樣器高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件35為保證重現(xiàn)性以及峰形等，很多情況下需要使用柱溫箱來控制柱溫。選配：恒溫裝置高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件36引言：

HPLC的特點HPLC在制藥行業(yè)中的應(yīng)用藥物色譜分析方法的開發(fā)藥物色譜純化方法的建立和優(yōu)化：

從分析到工業(yè)制備目

錄高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件37內(nèi)容提要藥物色譜純化方法的建立和優(yōu)化：從分析到工業(yè)制備理論的放大設(shè)備的放大高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件38分析型色譜：線性色譜指組分在固定性和流動相中的平衡濃度呈正比例關(guān)系，即吸附（分配）等溫線為一條直線。用于分離和鑒別樣品中的組分，為此希望能在盡可能小的進樣量下，提供盡可能高的組分分辨率。制備色譜：非線性色譜在制備色譜中，進樣量一般都比較大，例如在克量級范圍，這時樣品在流動相和固定相中的比例不再是正比例的關(guān)系，相對應(yīng)的吸附（分配）等溫線將發(fā)生彎曲。用于分離、富集或純化混合物中的某一或某些組分，為此需要一定的處理量，一般進樣量比分析型色譜大得多。能有適當(dāng)?shù)姆蛛x度，并要考慮層析分離過程的規(guī)模、速率和分離成本。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件39理論的放大：非線性色譜線性色譜分析制備非線性色譜理論的放大：非線性色譜高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件40制備色譜峰型高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件41理論的放大：非線性色譜色譜峰型不再對稱色譜峰的保留時間隨著進樣濃度而變化色譜峰高度（峰面積）與進樣濃度不成正比高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件42非線性色譜的特點理論的放大：非線性色譜濃度超載進樣體積超載進樣PKLangmuir型容量因子降低，峰形從高斯曲線變?yōu)槿切翁岣邩悠返臐舛龋３诌M樣體積不變；取決于組分在流動相中的溶解度峰高不變，峰變寬并呈矩形取決于進樣體積，生產(chǎn)效率決定于制備柱直徑，需要小顆粒填料高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件43理論的放大：過載進樣理論的放大：過載進樣高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件44理論的放大：過載進樣應(yīng)盡可能選用流動相來溶解樣品，但應(yīng)注意樣品在流動相中應(yīng)有良好的溶解度。同時，若樣品體積太大，分辨能力就會下降；若樣品過濃，則可能在柱的頂部形成沉淀。盡管如此，為每次可分離得到更多的樣品，還是應(yīng)在小體積的流動相中溶解較多的樣品?？蓪悠啡苡诓煌诹鲃酉嗟娜軇?，但用此法時需很謹(jǐn)慎。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件45設(shè)備的放大：分析設(shè)備與制備設(shè)備高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件46設(shè)備的放大：分析設(shè)備與制備設(shè)備設(shè)備

的放大：分析設(shè)備與制備設(shè)備高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件47設(shè)備的放大：分析設(shè)備與制備設(shè)備更大的容器：儲罐流量更大的輸液泵≥50ml定量管≥1ml進樣泵≥50ml≥10mm法蘭柱

DAC大體積流通池接溶劑回收系統(tǒng)高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件48制備系統(tǒng)分析制備放大優(yōu)化分析方法的選擇性在分析柱上進行超量載樣放大到制備柱高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件49設(shè)備的放大：過程原料分析分析柱模擬制備放大至半制備（50DAC）中試放大（150

or200DAC)工業(yè)化制備（300-800DAC)完全

線性放大高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件50設(shè)備的放大：過程可完全線性放大原因：可達(dá)到30000每米的塔板數(shù)，幾?與10um填料的分析柱柱效相當(dāng)800DAC柱效測試結(jié)果圖設(shè)備的放大：過程高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件51重點1高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件52上樣量的調(diào)整：mp/ma=lp/la *

rp2

/ra

2L:柱長；m：進樣量；r：色譜柱內(nèi)徑

p:制備柱；a：分析柱設(shè)備的放大：公式重點2高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件53流速的調(diào)整：Fp/Fa

=

Vp/Va

=

Lp/La *

rp2

/ra

2F

：流速；V:柱體積；L:柱長；

r：色譜柱內(nèi)徑；p:制備柱；a：分析柱設(shè)備的放大：公式梯度的調(diào)整方法：tp/ta=Vp/Va *Fp/FaF

：流速；V:柱體積；t:梯度洗脫時間；p:制備柱；a：分析柱重點3高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件54設(shè)備的放大：公式example樣品：粗品含量大約68%，白色粉末狀固體，對熱（能夠耐受100攝氏度）和光穩(wěn)定客戶要求：純化后純度大于99%，單雜小于0.8%，回收率達(dá)到70%1step:了解客戶需求高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件55從分析到制備的過程：案例2step:原始樣品分析example用分析型HPLC（填料5u甚至更?。悠愤M行分離，并對流動相進行改進，直到主峰和雜質(zhì)完全分離，摸索好的條件用來對以后純化后的樣品進行純度分析。高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件56從分析到制備的過程：案例example分析條件：甲醇：乙腈：水=81：12：7檢測波長：246nm流速：1.0mL/min柱子：C18，5μm，4.6*250mm結(jié)果從分析到制備的過程：案例高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件573step:分析柱模擬制備填料粒徑≥10um，4.6*250mm的柱子不加非揮發(fā)性的酸堿鹽，重新摸索制備條件高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件58主峰和雜質(zhì)分離充分的條件下開始做過載實驗將主峰分段收集，一般為分成10段左右分別測定純度，計算回收率，進一步優(yōu)化制備條件從分析到制備的過程：案例example制備條件摸索流動相填料90%甲醇、75%甲醇、75%乙腈、70%乙腈、60%乙腈。4種不同品牌的填料60%乙腈XX牌填料

C18-10um-100A確定高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件59確定從分析到制備的過程：案例example分析柱模擬制備譜圖結(jié)果從分析到制備的過程：案例高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件604step:確定最大上樣量不斷增大上樣量，直到回收率明顯下降理論上樣量：填料質(zhì)量的

3‰---8‰，可以從3‰逐漸增大來確定最大上樣量高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件61example60%乙腈，進樣量4‰時，收率為36.3%60%乙腈，進樣量3‰時，收率為78.9%選擇上樣量為3‰從分析到制備的過程：案例高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件62最終確定的制備條件：流動相：60%乙腈-水上樣量：填料質(zhì)量的3‰填料：XX牌-C8-10um-100A樣品溶劑：流動相高效液相色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用ppt課件6