細(xì)胞因子檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用

細(xì)胞因子檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用1整理ppt細(xì)胞因子檢測(cè)的意義 細(xì)胞因子具有極強(qiáng)的生物學(xué)活性,可作為藥物用于臨床許多疾病的治療中。細(xì)胞因子發(fā)揮治療作用的濃度非常低,治療指數(shù)也比較低,劑量的增加一般都伴隨明顯的毒副作用。另一方面,細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用。在感染、炎癥、自身免疫病、AIDS等疾病狀態(tài)下，有些細(xì)胞因子明顯增高。 通過檢測(cè)血清或組織液中的細(xì)胞因子含量,可以對(duì)診斷和治療作出評(píng)價(jià),具有重要的臨床意義。根據(jù)檢測(cè)原理和手段的不同,細(xì)胞因子的檢測(cè)技術(shù)大致分為三類:免疫學(xué)方法、生物學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。2整理ppt一、細(xì)胞因子檢測(cè)概述一、細(xì)胞因子的類型與作用特點(diǎn)二、細(xì)胞因子檢測(cè)的特點(diǎn)與方法3整理ppt

由非神經(jīng)—內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的一大類與免疫應(yīng)答活動(dòng)密切相關(guān)的低分子蛋白與多肽。細(xì)胞因子4整理ppt細(xì)胞因子的類型與作用特點(diǎn)1、細(xì)胞因子的分類2、細(xì)胞因子的作用特點(diǎn)5整理ppt以生物學(xué)作用進(jìn)行劃分的分類白細(xì)胞介素〔Interleukin〕——IL-1、IL-2、……IL-18干擾素〔Interferon〕——IFN-、IFN-、IFN-腫瘤壞死因子〔Tumornecrosisfactor〕——TNF-、TNF-集落刺激因子〔Colony-stimulatingfactor〕——M-CSF、G-CSF轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子〔Transforminggrowthfactor〕——TGF-趨化因子〔Chemokine〕——IL-8、GROs、MCP-1生長(zhǎng)因子〔Growthfactor〕——EGF、FGF、IGF、PDGF6整理pptTNFsILsIFNsTGFsChemokinesCSFs各類細(xì)胞因子間關(guān)系7整理ppt1、旁分泌〔paracrine〕、自分泌〔autocrine〕性2、多源與同源性3、高效性4、多效性〔pleiotropy〕5、豐余性〔redundancy〕6、協(xié)同性7、拮抗性8、網(wǎng)絡(luò)性8整理ppt細(xì)胞因子細(xì)胞因子細(xì)胞因子受體細(xì)胞因子受體細(xì)胞因子的自分泌與旁分泌性9整理ppt

IL-2IFN-TNF-細(xì)胞因子的同源性與多源性IFN-

T細(xì)胞T細(xì)胞NK細(xì)胞10整理pptIL-4Th細(xì)胞肥大細(xì)胞Th細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的多效性11整理pptTh細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的豐余性IL-2IL-4IL-512整理pptTh細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的協(xié)同性IL-4IL-513整理pptTh2細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的拮抗性Th1細(xì)胞IL-4IFN-

14整理ppt細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)性IL-3、IL-5、IL-4、IL-6、GM-CSFTNFTGFIL-1IFNIL-1IFNTNFIL-1TGFIFNIL2IL-4IFNIL2IL-4IL-5IL-6TNFIFNIL-1TGFTNFIL-1IFNIL-5GM-CSFG-CSFM-GSFTNFTNFIL-1TGFIL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSFIL-1IL-6IL-1IL-6GM-CSFG-CSFM-GSFIFN內(nèi)皮細(xì)胞成纖維細(xì)胞TB15整理ppt細(xì)胞因子檢測(cè)的特點(diǎn)與方法1、檢測(cè)的特點(diǎn)2、檢測(cè)的方法

16整理ppt細(xì)胞因子檢測(cè)的特點(diǎn)免疫原性較弱樣品含量低樣品具有時(shí)效性生物效應(yīng)特異性差17整理ppt細(xì)胞因子檢測(cè)的方法免疫學(xué)檢測(cè)方法——抗原性檢測(cè)細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)方法——生物活性檢測(cè)分子生物學(xué)檢測(cè)方法——基因表達(dá)檢測(cè)18整理ppt二、細(xì)胞因子檢測(cè)的方法與原理一、細(xì)胞因子的細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)二、細(xì)胞因子的免疫學(xué)檢測(cè)三、細(xì)胞因子的分子生物學(xué)檢測(cè)19整理ppt細(xì)胞因子的細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)1、檢測(cè)方法與原理2、檢測(cè)中的操作注意要點(diǎn)

20整理ppt檢測(cè)方法與原理細(xì)胞增殖或增殖抑制試驗(yàn)細(xì)胞病變抑制試驗(yàn)細(xì)胞毒試驗(yàn)細(xì)胞趨化試驗(yàn)21整理ppt濾膜：計(jì)數(shù)受趨化細(xì)胞趨化因子細(xì)胞趨化試驗(yàn)原理示意22整理ppt檢測(cè)中的操作注意要點(diǎn)靶細(xì)胞的選擇與培養(yǎng)檢測(cè)標(biāo)本的制備顯示檢測(cè)結(jié)果23整理ppt靶細(xì)胞的選擇與培養(yǎng)1、對(duì)所測(cè)的細(xì)胞因子有特異的敏感性2、易培養(yǎng)、保存、生物學(xué)特性穩(wěn)定3、有良好的生長(zhǎng)狀態(tài)4、種屬適配24整理ppt各類細(xì)胞因子檢測(cè)的常用靶細(xì)胞細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)干擾因素IL-1D10〔M〕增殖法IL-2、IL-4EL-4〔M〕增殖法IL-4A352〔H〕增殖抑制法IL-2CTLL〔M〕增殖法IL-4IL-3KG-1〔H〕增殖法TF-1〔H〕增殖法GN-CSF、IL-5IL-6、EPOIL-4CTLL〔M〕增殖法IL-2IL-5BCL-1〔M〕增殖法IL-425整理ppt各類細(xì)胞因子檢測(cè)的常用靶細(xì)胞細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)干擾因素IL-6B9〔M〕增殖法IL-4、IL-11BM60〔H〕增殖法IL-7Clone-IXN/2b〔M〕增殖法IL-8中性粒細(xì)胞〔M、H〕趨化法GM-CSFTF-1〔H〕增殖法IL-3、IL-5IL-6、IL-5TNF/L929〔M、H〕細(xì)胞毒法IFNwish〔H〕病變保護(hù)法IFN-、IFN-L929〔M〕病變保護(hù)法IFN-、IFN-26整理ppt檢測(cè)標(biāo)本的準(zhǔn)備1、別離特定的產(chǎn)生細(xì)胞2、對(duì)產(chǎn)生細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)、激活3、選擇適當(dāng)?shù)氖占瘯r(shí)間27整理ppt顯示檢測(cè)結(jié)果1、細(xì)胞增殖狀態(tài)的顯示：放射性核素?fù)饺敕?、胞?nèi)酶活性顯示法活細(xì)胞染色法細(xì)胞熒光測(cè)定法2、細(xì)胞毒或細(xì)胞病變狀態(tài)的顯示活細(xì)胞染色法胞內(nèi)酶活性顯示法

DNA斷片測(cè)定法28整理ppt細(xì)胞因子的免疫學(xué)檢測(cè)分泌型細(xì)胞因子的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的檢測(cè)29整理pptELISPOT30整理ppt細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測(cè)技術(shù)激活膜抗原標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子標(biāo)記31整理ppt細(xì)胞因子的分子生物學(xué)檢測(cè)原位雜交技術(shù)Rt-PCR技術(shù)32整理ppt三、常用細(xì)胞因子的檢測(cè)方法一、IL-2的檢測(cè)二、IFN-γ的檢測(cè)三、TNF的檢測(cè)33整理ppt待檢樣品〔細(xì)胞上清〕指示細(xì)胞〔CTLL-2〕按不同稀釋度參加37oC，16-20小時(shí)參加3HTdR〔1-5Ci〕37oC，4-6小時(shí)收集細(xì)胞測(cè)定白細(xì)胞介素-2的測(cè)定示意圖34整理ppt待檢樣品〔細(xì)胞上清〕指示細(xì)胞〔L929〕按不同稀釋度參加37oC，4小時(shí)37oC，24-48小時(shí)棄取上清，參加VSV觀察細(xì)胞病變〔鏡檢或比色〕干擾素的測(cè)定示意圖35整理ppt腫瘤壞死因子的測(cè)定示意圖待檢樣品〔細(xì)胞上清〕指示細(xì)胞〔L929〕按不同稀釋度參加37oC，24小時(shí)棄取上清，洗滌參加結(jié)晶紫染液，洗滌參加細(xì)胞裂解液，比色36整理ppt四、細(xì)胞因子受體的檢測(cè)一、細(xì)胞因子受體的類型二、細(xì)胞因子受體的檢測(cè)37整理ppt

細(xì)胞因子受體的類型膜型細(xì)胞因子受體分泌型細(xì)胞因子受體38整理ppt細(xì)胞因子受體的檢測(cè)方法膜型細(xì)胞因子受體的檢測(cè)配體檢測(cè)法抗體檢測(cè)法分泌型細(xì)胞因子受體的檢測(cè)標(biāo)記抗體檢測(cè)法39整理ppt小結(jié) 細(xì)胞因子