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文檔簡介
遼寧省營口高中等重點協(xié)作校2024屆高考全國統(tǒng)考預(yù)測密卷生物試卷注意事項1.考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.真核細(xì)胞的DNA片段有一富含TATA序列的啟動子,轉(zhuǎn)錄過程中,一些蛋白質(zhì)先與啟動子相連接產(chǎn)生蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,隨后RNA聚合酶就被安置在啟動子上開始進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。下列有關(guān)分析正確的是()A.轉(zhuǎn)錄過程中RNA聚合酶最先與啟動子結(jié)合,然后沿DNA分子移動B.富含TATA序列的啟動子經(jīng)誘變發(fā)生缺失不會影響轉(zhuǎn)錄的正常進(jìn)行C.轉(zhuǎn)錄合成的RNA與模板DNA鏈相應(yīng)區(qū)域的堿基互補配對D.RNA聚合酶作用的底物是DNA單鏈,產(chǎn)物是RNA分子2.科學(xué)家從動物的胰臟中分離到一類低分子量的蛋白質(zhì)(Ub),能對細(xì)胞中的異常蛋白(靶蛋白)貼上“標(biāo)簽”,被貼標(biāo)簽的靶蛋白隨即被蛋白酶水解,其過程如下圖所示,相關(guān)說法錯誤的是()(注:AMP為一磷酸腺苷)A.Ub為靶蛋白貼標(biāo)簽的過程需要消耗能量B.靶蛋白水解過程與人消化道內(nèi)蛋白質(zhì)水解過程不同C.Ub在維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)的過程中有重要作用D.Ub在靶蛋白水解過程中起到催化的作用3.下列關(guān)于雙鏈DNA分子結(jié)構(gòu)的敘述,錯誤的是()A.核苷酸與核苷酸之間通過氫鍵或磷酸二酯鍵連接B.不同直徑的堿基以不規(guī)則的方式沿核苷酸鏈排列C.堿基對排列在螺旋結(jié)構(gòu)內(nèi)側(cè)形成DNA基本骨架D.外側(cè)“糖-磷酸”間隔排列的兩條鏈反向平行螺旋4.下列關(guān)于有機物的鑒定實驗中,易導(dǎo)致實驗失敗的操作是()①蛋白質(zhì)鑒定時,將NaOH溶液和CuSO4溶液混合后再加入樣液②還原糖鑒定時,需要進(jìn)行水浴加熱③淀粉鑒定時,直接將碘液滴加到樣液中④脂肪鑒定過程中,對裝片染色后需用清水漂洗后放在顯微鏡下鏡檢A.①④ B.②③ C.①③ D.③④5.如圖為一對近親結(jié)婚的青年夫婦的遺傳分析圖,其中白化病由基因a控制,色盲由基因b控制(不考慮基因突變)。下列有關(guān)敘述錯誤的是A.D細(xì)胞為次級精母細(xì)胞,其中含有兩個B基因B.F細(xì)胞和G細(xì)胞含有的相同致病基因可能來自于家族中的同一祖先C.E細(xì)胞和G細(xì)胞結(jié)合發(fā)育成的個體表現(xiàn)型為正常女性D.這對夫婦所生子女中,患一種病的概率為7/166.細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運輸是進(jìn)行細(xì)胞代謝的保證,下列胰腺細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運輸途徑中不存在的()A.葡萄糖:細(xì)胞外→細(xì)胞膜→細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)→線粒體B.轉(zhuǎn)運RNA:細(xì)胞核→核孔→細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)→核糖體→細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)C.RNA聚合酶:核糖體→細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)→核孔→細(xì)胞核D.二磷酸腺苷:細(xì)胞膜→細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)→線粒體二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某種二倍體野生植物屬于XY性別決定型多年生植物,研究表明,該植株的花瓣有白色、藍(lán)色、紫色三種,花瓣的顏色由花青素決定,花青素的形成由兩對獨立遺傳的等位基因A、a和B、b共同控制(如圖乙所示),其中B、b基因位于圖甲中的Ⅰ段上。(1)據(jù)圖甲可知,在減數(shù)分裂過程中,X與Y染色體能發(fā)生交叉互換的區(qū)段是________。圖乙中體現(xiàn)了基因與性狀之間的關(guān)系為__________________________。(2)藍(lán)花雌株的基因型是_______;紫花植株的基因型有________種。(3)若某藍(lán)花雄株(AaXbY)與另一雙雜合紫花雌株雜交,則F1中的雌株的表現(xiàn)型及比例為________,若一白花雌株與一藍(lán)花雄株雜交所得F1都開紫花,則該白花雌株的基因型是________。(4)在個體水平上,要確定某一開紫花的雌性植株基因型的最簡便方法是________________________________________________________________________。(5)若某紫花雌株(AaXBXb)細(xì)胞分裂完成后形成了基因型為AXBXb的卵細(xì)胞,其原因最可能是____________________________________________________________。8.(10分)在很多淡水湖泊中,綠藻和藍(lán)藻等是鯉魚及沼蝦的食物來源,其中沼蝦也是鯉魚的食物。圖甲表示某湖泊中綠藻與藍(lán)藻對N、P的吸收量及PH>8時其體內(nèi)藻毒素含量的差異,圖乙表示該湖泊中不同體長鯉魚的食性比例。(1)從物質(zhì)循環(huán)的角度看,作為生態(tài)系統(tǒng)的淡水湖,其物質(zhì)循環(huán)中的“物質(zhì)”是指_____________。(2)該湖泊風(fēng)景優(yōu)美,其旅游業(yè)發(fā)達(dá),體現(xiàn)了生物多樣性的___________價值。(3)當(dāng)湖泊受到輕微污染時,能通過物理沉降、化學(xué)分解和__________很快消除污染,說明生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力,其基礎(chǔ)是_____________。(1)湖泊中綠藻和藍(lán)藻屬于生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的_____________;其中魚類由于食物種類和棲息場所的不同分布于不同水層,這屬于群落的__________結(jié)構(gòu)。(5)從圖乙來看,鯉魚體長在1.2cm時,假設(shè)該生態(tài)系統(tǒng)中存在鯉魚、小蝦、藻類,若鯉魚獲得的能量為21kJ,則最少需要藻類_________kJ。(6)為了既能獲得經(jīng)濟效益又能治理水體污染,先培養(yǎng)藻類吸收水體中的氮、磷元素,再構(gòu)建食物鏈快速去除藻類,具體措施:①治理磷元素富營養(yǎng)化的堿性水體,慮該選擇較理想的藻類是____________,理由__________________。②現(xiàn)要投喂鯉魚去除①中的藻類。投喂鯉魚的體長應(yīng)該大于1.2cm,理由是此時______________。9.(10分)研究人員利用基因工程借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長激素?;卮鹣铝袉栴}。(1)借助PCR技術(shù)可在短時間內(nèi)大量擴增目的基因,原因之一是利用了____酶。(2)要使目的基因在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并表達(dá),需要借助質(zhì)粒載體,原因是______。將目的基因?qū)氪竽c桿菌,常用____處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)。(3)研究人員在大腸桿菌提取液中未能檢測到生長激素,但在細(xì)胞中檢測到生長激素基因,推測可能是轉(zhuǎn)錄或翻譯過程出錯,通過實驗進(jìn)行判斷的方法及預(yù)期結(jié)果是________。(4)能否利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白?請做出判斷并說明理由_________。10.(10分)白細(xì)胞介素是人體重要的淋巴因子,具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn),如圖是將人的白細(xì)胞介素基因?qū)腭R鈴薯中,培養(yǎng)生產(chǎn)白細(xì)胞介素的過程。(tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因)(1)提取人的白細(xì)胞介素基因適宜選用的限制酶是___________,不能使用限制酶SmaI的原因是___________。(2)除圖示方法外,也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增,需提供Taq酶和___________等。(3)將目的基因?qū)腭R鈴薯細(xì)胞常采用___________法,其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。(4)為篩選出含目的基因的馬鈴薯細(xì)胞,需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達(dá),可通過____________方法進(jìn)行分子水平的檢測。11.(15分)科學(xué)家在研究果蠅時,發(fā)現(xiàn)果蠅的眼色中有紅色、褐色、白色三種表現(xiàn)型,身色有灰身、黑身兩種表現(xiàn)型。(1)若假設(shè)控制果蠅眼色A(a)與身色B(b)基因位于在兩對常染色體上。有人將兩只果蠅雜交,獲得了l00個體。其表現(xiàn)型為37只灰身褐色眼;l8只灰身紅眼;19只灰身白眼;l3只黑身褐色眼;7只黑身紅眼;6只黑身白眼。則兩個親本的基因型是_______________________。如果該人進(jìn)行的雜交實驗果蠅所產(chǎn)白眼果蠅胚胎致死,則理論上親代兩只果蠅雜交后代的表現(xiàn)型及比例為___________________________。(2)若控制眼色的基因由兩對位于常染色體上的等位基因控制(遵循基因的自由組合定律),其中C_DD為紅眼,C_Dd為褐色眼,其它基因型均表現(xiàn)白眼,現(xiàn)有CcDd兩只雌雄果蠅雜交,所產(chǎn)生F1代果蠅的表現(xiàn)型及比例為__________________________________,若再讓F1代中紅眼的個體自由交配,則子代的表現(xiàn)型及比例為____________________。(3)若已知灰身是位于X染色體上顯性性狀,有人進(jìn)行實驗讓純合灰身雌果蠅和黑身雄果蠅雜交,F(xiàn)1雌雄果蠅相互交配得F2,再讓F2代雌雄果蠅相互交配得F3,則F3代中雄性果蠅的表現(xiàn)型及比例__________________________________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解題分析】
啟動子位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點,驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行?!绢}目詳解】A、根據(jù)題干信息可知,一些蛋白質(zhì)先與啟動子相連接產(chǎn)生蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,隨后RNA聚合酶就被安置在啟動子上開始進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,A錯誤;B、當(dāng)富含TATA序列的啟動子經(jīng)誘變發(fā)生缺失后,某種蛋白質(zhì)和RNA聚合酶無法識別與之結(jié)合,無法進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,B錯誤;C、轉(zhuǎn)錄時以DNA一條鏈為模板根據(jù)堿基互補配對合成RNA的過程,C正確;D、RNA聚合酶作用的底物是核糖核苷酸,產(chǎn)物是RNA分子,D錯誤。故選C。2、D【解題分析】據(jù)圖可知,Ub與靶蛋白的結(jié)合過程需要消耗ATP,A項正確;靶蛋白水解過程需要消耗ATP,人消化道內(nèi)蛋白質(zhì)水解過程不需要消耗ATP,B項正確;細(xì)胞中的異常蛋白被水解有利于維持細(xì)胞內(nèi)部環(huán)境的相對穩(wěn)定,C項正確;Ub在靶蛋白水解過程中起到“標(biāo)簽”的作用,而不是催化作用,D項錯誤。3、C【解題分析】
DNA分子的立體結(jié)構(gòu)是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu),這種結(jié)構(gòu)的主要特點是:1.DN分子是由兩條長鏈組成的,這兩條長鏈按反向平行方式盤旋成雙螺旋結(jié)構(gòu),其中每條鏈上的一個核苷酸以脫氧核糖與另一個核苷酸上的磷酸基團結(jié)合形成主鏈的基本骨架,并排列在主鏈的外側(cè),堿基位于主鏈內(nèi)側(cè)。2.DNA分子一條鏈上的核苷酸堿基總是跟另一條鏈上的核苷酸堿基互補配對由氫鍵連接,其中腺嘌呤與胸腺嘧啶通過兩個氫鍵相連,鳥嘌呤與胞嘧啶通過3個氫鍵相連,這就是堿基互補配對原則;3.在DNA分子中,A(腺嘌呤)和T(胸腺嘧啶)的分子數(shù)相等,G(鳥嘌呤)和C(胞嘧啶)的分子數(shù)相等,但A+T的量不一定等于G+C的量,這就是DNA中堿基含量的卡伽夫法則?!绢}目詳解】A、由分析可知,核苷酸與核苷酸之間通過氫鍵或磷酸二酯鍵連接,A正確;B、不同直徑的堿基按照堿基互補配對原則進(jìn)行配對,以不規(guī)則的方式即隨機沿核苷酸鏈排列,進(jìn)而形成了DNA分子的多樣性,B正確;C、堿基對排列在螺旋結(jié)構(gòu)內(nèi)側(cè),使得DNA結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定,其基本骨架是由脫氧核糖和磷酸相間排列形成的長鏈結(jié)構(gòu)排在DNA分子的外側(cè),C錯誤;D、由分析可知,排在DNA分子外側(cè)的是“糖-磷酸”間隔排列的兩條鏈反向平行的長鏈,D正確。故選C。4、A【解題分析】
生物組織中化合物的鑒定:(1)斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀).斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉)。(2)蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(3)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)鑒定,呈橘黃色(或紅色)。(4)甲基綠能使DNA呈綠色,吡羅紅能使RNA呈紅色?!绢}目詳解】①蛋白質(zhì)鑒定時,先加NaOH溶液,后加CuSO4溶液,①錯誤;②還原糖鑒定時,需要進(jìn)行水浴加熱,②正確;③淀粉鑒定時,直接將碘液滴加到淀粉樣液中,③正確;④脂肪鑒定過程中,對裝片染色后需用酒精洗掉浮色后放在顯微鏡下鏡檢,④錯誤。故選A?!绢}目點撥】本題考查生物組織中化合物的鑒定,對于此類試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的使用方法、實驗現(xiàn)象等,需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。5、D【解題分析】
根據(jù)兩對基因在染色體上的位置分析題圖,左圖表示精原細(xì)胞(AaXBY)形成精子的過程,右圖中表示卵原細(xì)胞(AaXBXb)形成卵細(xì)胞的過程。又因為圖中子代是白化病色盲,所以子代的基因型是aaXbY,則卵細(xì)胞F的基因型是aXb,進(jìn)一步判斷E的基因型(AXB),進(jìn)一步可以得到G的基因型(aXb),最后可以得到H的基因型(AXB)?!绢}目詳解】A、根據(jù)題意分析,已知左圖表示精原細(xì)胞(AaXBY)形成精子的過程,C細(xì)胞為初級精母細(xì)胞,D細(xì)胞為次級精母細(xì)胞,因為F細(xì)胞的基因型為(aY),故D細(xì)胞的基因型為(AXB),其中含有兩個B基因是通過間期DNA復(fù)制而來,A正確;B、因為這對青年夫婦是近親結(jié)婚,F(xiàn)細(xì)胞和G細(xì)胞含有的相同致病基因可能來自于家族中的同一祖先,B正確;C、E細(xì)胞的基因型為(AXB),G細(xì)胞的基因型為(aXb),結(jié)合后的基因為(AaXBXb),表現(xiàn)型為正常女性,C正確;D、已知父本和母本的基因型分別是(AaXBY)和(AaXBXb),則后代患白化病的概率是1/4,患色盲的概率也是1/4,所以后代完全正常的概率是(1-1/4)×(1-1/4)=9/16,后代患一種病的概率為1/4+1/4-2×1/4×1/4=3/8,D錯誤。故選D。6、A【解題分析】
本題是對有氧呼吸的過程和場所、細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能之間的關(guān)系的綜合性考查,根據(jù)選項涉及的內(nèi)容回憶相關(guān)知識點,然后分析選項進(jìn)行解答?!绢}目詳解】A、葡萄糖在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中分解成丙酮酸,由丙酮酸進(jìn)入線粒體中,A錯誤;B、轉(zhuǎn)運RNA在細(xì)胞核中合成后,通過核孔運輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)基質(zhì),在核糖體中參與完成翻譯過程,B正確;C、RNA聚合酶由細(xì)胞質(zhì)中的核糖體合成后,通過細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)由核孔進(jìn)入細(xì)胞核,在細(xì)胞核中起作用,C正確;D、二磷酸腺苷被吸收進(jìn)入線粒體后參與ATP的合成,D正確。故選A。二、綜合題:本大題共4小題7、Ⅱ基因控制酶的合成來控制代謝過程,進(jìn)而控制生物體的性狀A(yù)aXbXb或AAXbXb6白:藍(lán):紫=2:3:3aaXBXB用aaXbY個體與其進(jìn)行測交減數(shù)第一次分裂后期兩條X同源染色體沒有分開【解題分析】
分析圖甲:II表示X和Y的同源區(qū)段,I表示X染色體特有的區(qū)段,且B、b位于該區(qū)段,III表示Y染色體的特有區(qū)段;分析圖乙可知:基因A控制酶1合成,酶1催化白色色素合成藍(lán)色色素,基因B控制酶2的合成,酶2催化藍(lán)色色素合成紫色色素,故藍(lán)色基因型為A—XbXb或A—XbY,紫色基因型為A—XBX—或A—XBY,其余基因型為白色。【題目詳解】(1)圖甲中,II表示X和Y的同源區(qū)段,該區(qū)段在減數(shù)第一次分裂前期聯(lián)會,可能發(fā)生交互互換;圖乙表示基因控制酶的合成,酶能促進(jìn)相關(guān)色素的合成,故體現(xiàn)了基因通過控制酶的合成控制代謝過程,進(jìn)而控制生物性狀;(2)藍(lán)色基因型為A—XbXb或A—XbY,故藍(lán)花雌株的基因型是AAXbXb或AaXbXb;紫色基因型為A—XBX—或A—XBY,即有AAXBXB、AAXBXb、AaXBXB、AaXBXb、AAXBY、AaXBY,共6種;(3)藍(lán)花雄株基因為AaXbY,與雙雜合紫花雌株(AaXBXb)雜交,F(xiàn)1雌株的基因型2/16AaXBXb(紫色)、2/16AaXbXb(藍(lán)色)、1/16AAXBXb(紫色)、1/16AAXbXb(藍(lán)色)、1/16aaXBXb(白色)、1/16aaXbXb(白色),故白:藍(lán):紫=2:3:3;白花雌株(aaX—X—)與藍(lán)花雄株(A—XbY)雜交所得F1都開紫花(A—XB—),說明該白花植株只含B基因,故其基因型為aaXBXB;(4)在個體水平上要確定某一開紫花的雌性植株基因型,可采用測交法,即用基因型為aaXbY個體與其進(jìn)行測交;(5)若某紫花雌株(AaXBXb)細(xì)胞分裂完成后形成了基因型為AXBXb的卵細(xì)胞,由于含有的等位基因XB和Xb,原因可能是減數(shù)第一次分裂后期兩條X染色體沒有分開,次級卵母細(xì)胞含AXBXb,第一極體含a,次級卵母細(xì)胞在減數(shù)第二次分裂后期姐妹染色單體分開,形成基因型為AXBXb的卵細(xì)胞?!绢}目點撥】解答此題需要根據(jù)題干中的信息寫出各種顏色的花對應(yīng)的基因型,并明確基因與染色體的位置關(guān)系,進(jìn)而分析作答。8、組成生物體的化學(xué)元素(C、H、O、N、P、S等元素)直接微生物的分解負(fù)反饋調(diào)節(jié)生產(chǎn)者垂直210綠藻綠藻在堿性水體中藻毒素含量低植食性比例高【解題分析】
(1)生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)指的是構(gòu)成生物體的化學(xué)元素在生物群落和無機環(huán)境之間往返的過程。(2)生態(tài)系統(tǒng)的觀賞、旅游等價值屬于直接價值。(3)生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自我調(diào)節(jié)能力,負(fù)反饋是自我調(diào)節(jié)的基礎(chǔ),當(dāng)湖泊輕度污染后,生態(tài)系統(tǒng)可以通過物理沉降、化學(xué)分解和微生物的分解很快消除污染。(1)藍(lán)藻和綠藻是植物,可以進(jìn)行光合作用,是生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者;生態(tài)系統(tǒng)中動植物的分層現(xiàn)象體現(xiàn)了生態(tài)群落的垂直結(jié)構(gòu)。(5)圖乙中鯉魚體長在1.2cm時,從植物獲得的能量的比例為0.75,從動物獲得的能量比例為1-0.75=0.25,則鯉魚獲得的能量為21kJ,則最少需要藻類21×0.75÷20%+21×0.25÷20%÷20%=210kJ。(6)①綠藻在堿性水體中藻毒素含量低,所以治理磷元素富營養(yǎng)化的堿性水體該選擇綠藻。②投喂鯉魚的體長大于1.2cm時植食性比例高,所以投喂鯉魚去除綠藻?!绢}目點撥】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)知識,意在考查考生理解所學(xué)知識的要點,把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。9、Taq(耐高溫的DNA聚合)重組質(zhì)粒能在宿主細(xì)胞中不被分解,有復(fù)制原點和啟動子,目的基因能被復(fù)制和表達(dá)Ca2+使用分子雜交技術(shù)檢測相應(yīng)的mRNA是否存在,若有雜交條帶出現(xiàn)說明翻譯出錯;若無雜交條帶出現(xiàn),則說明轉(zhuǎn)錄出錯不能,因為大腸桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,無法對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工【解題分析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:
1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。
3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
4、目的基因的檢測與鑒定:(1)分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。(2)個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!绢}目詳解】(1)PCR技術(shù)可在短時間內(nèi)大量擴增目的基因,是因為使用了熱穩(wěn)定性DNA聚合酶,即Taq酶。(2)質(zhì)粒在宿主細(xì)胞中不被分解,有復(fù)制原點和啟動子,用質(zhì)粒做載體可使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá);將目的基因?qū)氪竽c桿菌,可將大腸桿菌經(jīng)過鈣離子處理,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,易于吸收外源DNA。(3)若要驗證是轉(zhuǎn)錄過程還是翻譯過程出錯,可以使用分子雜交技術(shù)檢測相應(yīng)的mRNA是否存在。若有雜交條帶出現(xiàn),說明轉(zhuǎn)錄出了mRNA,則應(yīng)為翻譯出錯;若無雜交條帶出現(xiàn),則說明轉(zhuǎn)錄出錯。(4)因為大腸桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,無法對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工,因此不能利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白?!绢}目點撥】本題以“借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長激素”為題材,考查基因工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的原理及操作步驟,識記PCR技術(shù)的條件、過程等,能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題。10、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細(xì)胞介素基因中部,使用它會造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【解題分析】
分析題圖,圖示表示人的白細(xì)胞介素基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程,載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點,所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ,再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因(鳥槍法)。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進(jìn)入細(xì)胞后,可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中?!绢}目詳解】(1)載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點,使用限制酶SmaI則會破壞目的基因;(2)目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法(即逆轉(zhuǎn)錄法),指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體,采用PCR技術(shù)大量擴增,需提供Taq酶和引物等;(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA;(4)構(gòu)建好的表達(dá)載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因,因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進(jìn)行篩選,為檢測目的基因是否順利表達(dá),可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)?!绢}目點撥】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點,明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點,從而可以用于構(gòu)建基因表達(dá)載體,其他的酶切位點則會破壞目的基因或抗性基因。11、AaBb和AaBb灰紅∶灰褐∶黑紅∶黑褐=3∶6∶1∶
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