MCAO modelt醫(yī)學(xué)培訓(xùn)課件

MCAOmodel此ppt下載后可自行編輯心腦血管疾病是危及人類健康的頭號(hào)殺手

心血管疾病的高發(fā)病率及死亡率：LeadingCausesofDeathforAsianorPacificIslander(2002).Source:CDC/NCHS腦部血供大腦占人體重的2％，血流量占人體20％二個(gè)來源:一對(duì)頸內(nèi)動(dòng)脈，一對(duì)椎動(dòng)脈二類分支:大腦前、中、后動(dòng)脈發(fā)出皮質(zhì)支和中央支皮質(zhì)支→大腦皮質(zhì)及髓質(zhì)淺部中央支→基底核、內(nèi)囊及間腦一個(gè)環(huán):大腦動(dòng)脈環(huán)

頸內(nèi)動(dòng)脈椎動(dòng)脈基底動(dòng)脈大腦動(dòng)脈環(huán)1.頸內(nèi)動(dòng)脈——供應(yīng)大腦半球前2/3及部分間腦。行程可分為4段：頸部、巖部、海綿竇部與前床突上部，

后二部合稱為虹吸部。頸部巖部海綿竇部前床突上部虹吸部前交通動(dòng)脈大腦中動(dòng)脈后交通動(dòng)脈脈絡(luò)叢前動(dòng)脈眼動(dòng)脈頸內(nèi)動(dòng)脈分支大腦前動(dòng)脈大腦前動(dòng)脈

大腦前動(dòng)脈皮質(zhì)支:額葉內(nèi)側(cè)面中央支:尾狀核、豆?fàn)詈饲安浚瑑?nèi)囊前肢大腦中動(dòng)脈皮質(zhì)支：中央支：

半球外側(cè)面的大部分尾狀核、豆?fàn)詈恕?nèi)囊膝和后肢大腦中動(dòng)脈豆?fàn)詈思y狀體動(dòng)脈2.椎動(dòng)脈：腦干、小腦、間腦后部與大腦半球后1/3。左右椎動(dòng)脈合為一條基底動(dòng)脈椎動(dòng)脈腦橋動(dòng)脈大腦后動(dòng)脈小腦下后動(dòng)脈小腦下前動(dòng)脈小腦上動(dòng)脈椎

-基底動(dòng)脈的主要分支脊髓前動(dòng)脈脊髓后動(dòng)脈迷路動(dòng)脈大腦后動(dòng)脈皮質(zhì)支：中央支：全部枕葉，顳葉的內(nèi)側(cè)面和底面分布于背側(cè)丘腦，內(nèi)、外側(cè)膝狀體，下丘腦、底丘腦大腦后動(dòng)脈Willis動(dòng)脈環(huán)位于腦底下方、蝶鞍上方，視交叉、大結(jié)節(jié)、乳頭體周圍，由前交通動(dòng)脈、兩側(cè)大腦前動(dòng)脈始段、兩側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈末段、兩側(cè)后交通動(dòng)脈和兩側(cè)大腦后動(dòng)脈始段吻合而成。腦血管病包括缺血性和出血性腦血管病，其中缺血性腦血管病占80-85%大腦中動(dòng)脈是常見的出血或梗塞發(fā)生部位制作模擬人腦缺血模型對(duì)腦缺血發(fā)病機(jī)制及藥物篩選有重要意義腦缺血模型包括全腦缺血模型和局灶性腦缺血模型，前者不常用常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是大鼠和土沙鼠實(shí)例介紹最常用的大鼠MCAO模型制作及相關(guān)實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)和方法

eg：柚皮素對(duì)大鼠腦缺血損傷的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：成年SD大鼠，體重220-270g，雌雄各半分組：假手術(shù)組，模型組，柚皮素組，每組3-5只（可以加設(shè)陽性對(duì)照組）實(shí)驗(yàn)方法：MCAO，神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，腦組織TTC染色，免疫組化，免疫印記觀察caspases-3的表達(dá)量MCAOmodelmaking大鼠腦血管示意圖實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物：同前述器械：常規(guī)手術(shù)器械外，需要釣魚線，直徑0.22mm，一端用火焰灼成鈍圓形，距鈍圓段18mm做標(biāo)記（插入深度）麻醉：10%水合氯醛（3ml/kg）實(shí)驗(yàn)過程常規(guī)麻醉固定大鼠，頸前皮膚消毒切開頸前皮膚，鈍性分離皮下組織，分離頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈.結(jié)扎頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈，頸內(nèi)動(dòng)脈掛線、夾閉切口、插線結(jié)扎固定插入的魚線縫合Iamarat!Togetfreeismylife-longdream!Butwhocantellmehow?神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分評(píng)分方法有很多種，這里介紹longa評(píng)分法

0分：正常，無神經(jīng)功能缺損；

1分：左側(cè)前爪不能完全伸展，輕度神經(jīng)功能缺損；

2分：行走時(shí)，大鼠向左側(cè)（癱瘓側(cè)）轉(zhuǎn)圈，中度神經(jīng)功能缺損；

3分：行走時(shí)，大鼠身體向左側(cè)（癱瘓側(cè)）傾倒。重度神經(jīng)功能缺損；

4分：不能自發(fā)行走，有意識(shí)喪失。

2h時(shí)評(píng)分比較明顯，24h比較穩(wěn)定，1-3分造模成功成功的模型腦組織TTC染色TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感復(fù)合物，與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白腦組織TTC染色動(dòng)物麻醉，灌注（心臟左心室穿針,剪開右心耳，TTC和WB可以不灌注，若灌注，用生理鹽水），取腦腦組織TTC染色腦切片（切片前可將腦組織在負(fù)20度凍20min，方便切割）：一般切成5－6片，每隔2mm切一片腦組織TTC染色腦片置TTC染液中，37度避光染色30min，間或翻轉(zhuǎn)腦片，使染色均勻拍照，軟件計(jì)算梗死體積統(tǒng)計(jì)學(xué)分析模型組、實(shí)驗(yàn)組、假手術(shù)之間的差別免疫組織化學(xué)第一抗體為抗caspase-3，顯色方法不同，選用不同標(biāo)記的第二抗體（HRPor熒光素），拍照后統(tǒng)計(jì)學(xué)分析視