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專題二十六克隆技術(shù)考點一植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)原理:植物細(xì)胞具有
。全能性(2)過程:脫分化再分化人工種子2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)3.植物克隆技術(shù)的應(yīng)用植物組織培養(yǎng)愈傷組織植物體細(xì)胞雜交過程中雜種細(xì)胞類型及檢測方法(1)誘導(dǎo)結(jié)果(假設(shè)用于雜交的兩種植物細(xì)胞分別為A、B):①未融合的細(xì)胞:A和B。②兩兩融合的細(xì)胞:AA、BB和AB。③多細(xì)胞融合體。(2)檢測方法:對誘導(dǎo)產(chǎn)物中的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng),然后根據(jù)得到的植物性狀進(jìn)行判斷。①若只表現(xiàn)出一種植物的性狀,說明是未融合細(xì)胞。②若得到的是具有兩種親本性狀的植物,說明是雜種植株。③若得到的是兩種親本性狀的植物,且一種植物的性狀得到加強,則是多細(xì)胞融合體。④若得到的是一種植物的性狀,但是效果得到加強,則是同種細(xì)胞融合的結(jié)果。(3)植物體細(xì)胞雜交后的遺傳物質(zhì)分析①遺傳特性:雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì),故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。②染色體組數(shù)a.染色體組數(shù)=兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。b.植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株,有幾個染色體組就稱為幾倍體。植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交的比較名稱植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動性和細(xì)胞的全能性過程應(yīng)用②培育新品種③生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,培育作物新品種考點二動物細(xì)胞工程1.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程及條件培養(yǎng)液用具更換清除2.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程細(xì)胞培養(yǎng)去核重組細(xì)胞供體(2)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理、結(jié)果及應(yīng)用得到克隆動物遺傳改良3.動物細(xì)胞融合與單克隆抗體制備技術(shù)細(xì)胞膜的流動性B淋巴細(xì)胞單克隆抗體運載判斷正誤(1)連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型(2014·浙江,3A)()(2)制備肝細(xì)胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織,再用胃蛋白酶處理()××動物細(xì)胞培養(yǎng)與動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的比較
動物細(xì)胞培養(yǎng)動物體細(xì)胞核移植原理細(xì)胞增殖動物細(xì)胞核的全能性過程結(jié)果獲得細(xì)胞群獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體動物細(xì)胞融合與單克隆抗體制備的歸納(1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞兼有兩個親本細(xì)胞的特性——在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。(2)進(jìn)行動物細(xì)胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細(xì)胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。(3)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選1.不清楚動物細(xì)胞培養(yǎng)時,為何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶點撥進(jìn)行動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。分散細(xì)胞時不能用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶作用的適宜pH約為1.8。胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2~7.8,而多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4。2.誤認(rèn)為動物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入5%CO2的目的是維持氣體平衡或用于呼吸點撥動物的細(xì)胞培養(yǎng)時,需向培養(yǎng)液中加入5%CO2(+95%空氣),加入CO2的目的是“維持培養(yǎng)液的pH”。3.不清楚動物細(xì)胞克隆化培養(yǎng)時為何常選10代以內(nèi)的細(xì)胞,而“瘤細(xì)胞”卻為“50代以后”點撥取供體動物的體細(xì)胞培養(yǎng),一般選用傳至10代以內(nèi)的細(xì)胞,因為10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。然而欲獲得“無限增殖”的“瘤細(xì)胞”則往往在“50代以后”,其遺傳物質(zhì)已發(fā)生變化,具“癌變”特性。4.不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時選擇要求及原理點撥由于植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,所以常采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗。5.誤認(rèn)為克隆動物的產(chǎn)生體現(xiàn)了“動物細(xì)胞全能性”,不能解釋克隆動物性狀“變異”的成因點撥核移植形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個新個體,體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動物細(xì)胞的全能性。核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同,主要源于如下三方面:①克隆
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