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文檔簡介
化學考研真題下載/u-9748568.html
2008年藥綜(一)真題詳解
生理學部分
一、名次解釋
1.被動轉運:被動轉運是指物質或離子順著濃度梯度或電位梯度通過細胞膜的擴散過程,其特點是不需
要細胞提供能量。包括簡單擴散、濾過和易化擴散三種。
2.生物電現(xiàn)象:生物體在生命活動過程中表現(xiàn)的電現(xiàn)象,稱為生物電(bioelectricity)現(xiàn)象,主要包括膜電
位,動作電位,損傷電位和靜息電位。3.舒張期電位:4期起點處的最大膜電位稱為最大舒張電位或最大復極
電位(膜電位雖已恢復到靜息水平,但膜內、外離子分布尚未恢復時的電位。)(*)
4.容受性舒張:咀嚼或吞咽食物時,進食動作和食物對咽、食管等處感受器的刺激,可反射性地通過迷
走神經(jīng)中的抑制性纖維,引起胃底和胃體肌肉的舒張,胃容積擴大,這種舒張成為容受性舒張。
5.應急反應:指機體突然受到強烈的有害刺激時,交感神經(jīng)-腎上腺髓質系統(tǒng)的活動適應性的反應。
6.腱反射:其實是指快速牽拉肌腱時發(fā)生的不自主的肌肉收縮,其實是肌牽張反射的一種。
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二、填充題
1、細胞膜的通道類型主要包括電壓門控通達,化學門控通道和機械門控通道。
2、全血粘滯性主要取決于血細胞比容,血漿的粘滯性主要取決于血漿蛋白的數(shù)量和紅細胞數(shù)量。(*)
3、胸膜腔內壓等于大氣壓減肺彈性回縮壓。胸膜腔內壓總是低于大氣壓。
4、影響能量代謝的因素是肌肉活動、精神活動、環(huán)境溫度和內分泌腺的活動。(備選:食物的特殊動力作
用也是影響能量代謝的因素)
++
5、腎的遠曲小管和集合管可分泌H,NH3,K
6、眼的折光系統(tǒng)包括視神經(jīng)、瞳孔、晶狀體和玻璃體。
三、簡答題
1、簡述電刺激坐骨神經(jīng)引起腓腸肌興奮的機制。
答:引起神經(jīng)細胞和肌細胞產(chǎn)生動作電位,引起興奮。
電刺激會導致電壓門控式離子通道的開放,改變膜內外電荷的分布而引起動作電位。
2、簡述心肌慢反應自律細胞動作電位的形成機制。
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答:自律心肌細胞喪失了收縮性,但它們和工作心肌細胞一樣具有傳導性和興奮性。而且它們還具有獨特的
自律性,所謂自律性,就是這些心肌細胞在其動作電位的4期存在著一個自動去極化過程,并會產(chǎn)生新一輪
的動作電位。
3.、腎上腺素,甲狀腺素,乙酰膽堿對血壓的作用。
答:腎上腺素具有與交感神經(jīng)興奮類似的作用,使血管收縮,心臟活動增強,血壓升高。腎上腺素作用于腎
上腺素能α、β受體,產(chǎn)生強烈快速而短暫的興奮α和β型效應,對心臟β1-受體的興奮,可使心肌收縮
力增強,心率加快,心肌耗氧量增加。同時作用于骨骼肌β2-受體,使血管擴張,降低周圍血管阻力而
減低舒張壓。
甲狀腺素:加快代謝速度,刺激心血管的興奮性,心臟活動增強,血壓升高。(*)
乙酰膽堿:血管擴張作用,減慢心率,減慢房室結和普肯耶纖維傳導,減弱心肌收縮力,縮短心房不應
期,降低血壓。
4、給家兔灌胃50ml蒸餾水,尿量會發(fā)生什么變化?為什么?
答:尿量將增加。原因:給家兔灌胃蒸餾水后,水可在結腸內被吸收入血,引起血漿晶體滲透壓降低,導
致ADH分泌減少,對水的重吸收減少,從而使尿量增多。
(促進ADH分泌的主要刺激因素是增加血漿的滲透壓(通過下丘腦中滲透壓感受器起作用)和降低動脈壓或血
容量(通過動脈壓力感受器和容積感受器的傳入通路)。ADH具有兩個主要的作用:1.ADH通過對血管加壓素
V1受體的作用,引起體循環(huán)小動脈收縮,包括引起腎臟小動脈的收縮。2.ADH增加腎臟對水的重吸收,這主
要是通過增強集合管對水的通透性。ADH與主細胞基側膜V2受體相結合,增加腺苷酸環(huán)化酶的活性,從而使
細胞內的ccAMP的濃度增加。引起鑲嵌到細胞腔膜面中的水通道增多。)
5.敘述下丘腦特異性投射系統(tǒng)和非特異性投射系統(tǒng)的組成,功能及相互關系。
答:一般認為,經(jīng)典的各種特殊感覺傳導道,如皮膚淺感覺、深感覺、聽覺、視覺、味覺(除嗅覺外)的傳
導束和神經(jīng)元序列是固定的,他們經(jīng)脊髓或腦干,上升到丘腦感覺接替核,換神經(jīng)元后,投射到大腦皮層的
特定感覺區(qū),主要終止于皮質的第四層細胞。每一種感覺的投射路徑都是專一的,具有點對點的投射關系,
故稱為特異性投射系統(tǒng)(specificprojectionsystem)。其主要功能是引起特定的感覺,并激發(fā)大腦皮層發(fā)出神
經(jīng)沖動。丘腦的聯(lián)絡核在結構上也與大腦皮層有特定的投射關系,所以也屬于特異投射系統(tǒng),但它不引起特
定感覺,主要起聯(lián)絡和協(xié)調的作用。
特異性投射系統(tǒng)的第二級神經(jīng)元的部分纖維或側支進入腦干網(wǎng)狀結構,與其內的神經(jīng)元發(fā)生廣泛地突觸
聯(lián)系,并逐漸上行,抵達丘腦內側部,然后進一步彌散性投射到大腦皮層的廣泛區(qū)域。所以,這一感覺投射
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系統(tǒng)失去了專一的特異性感覺傳導功能,是各種不同感覺的共同上傳途徑。又稱為非特異性投射系統(tǒng)。其主
要功能是維持和改變大腦皮層的興奮狀態(tài)。
要在大腦皮質產(chǎn)生感覺,有賴于特異性和非特異性投射系統(tǒng)的互相配合。只有通過非特異性投射系
統(tǒng)的沖動,才能使大腦皮質的感覺區(qū)保持一定的興奮性。同時只有通過特異性投射系統(tǒng)的各種感覺沖動,
才能在大腦皮質中產(chǎn)生特定的感覺。
6.敘述糖皮質激素分泌的調節(jié)。
1)下丘腦一垂體一腎上腺軸:下丘腦一垂體一腎上腺軸(HPA)系統(tǒng)是糖皮質激素分泌調節(jié)的中心。糖皮質激素
由腎上腺皮質束狀帶所分泌,其生成和分泌受腺垂體細胞分泌的促皮質素(ACTH)的調節(jié)和控制,而ACTH
則又受下丘腦分泌的促皮質素釋放因子(CRF)調節(jié)。接受刺激的感受器通過傳入神經(jīng)至大腦皮質,進而刺激下
丘腦分泌CRF,CRF作用于腺垂體細胞,通過其受體激活腺苷酸環(huán)化酶,使細胞內的環(huán)磷酸腺苷(CAMP)濃
度升高,促進ACTH的合成及分泌。ACTH則通過相同的機制作用于腎上腺皮質細胞,以促進其合成及分泌
糖皮質激素。
2)分泌到血漿中的皮質激素一方面產(chǎn)生相應的生理效應,另方面,當其血漿濃度達到一定水平時,又對垂體
前葉和下丘腦發(fā)生作用,分別抑制ACTH和CRF的分泌,形成負反饋調節(jié)。下丘腦一垂體一腎上腺軸系統(tǒng)
在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的統(tǒng)一調控下相互促進又相互制約,共同維持著機體的相對平衡和穩(wěn)定。
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生物化學部分
一、選擇題
1、A(Lys在生理條件下帶正電荷)
口訣:
賴蛋蘇苯挾一亮色挾(纈氨酸),一(異亮氨酸),兩亮氨酸),本(苯丙氨酸),蛋(蛋氨酸),色(色氨酸),書(蘇氨酸),來(賴氨酸).
諧音:借(纈氨酸),一(異亮氨酸),兩(亮氨酸),本(苯丙氨酸),蛋(蛋氨酸),色(色氨酸),書(蘇氨酸),來(賴氨酸).
六伴窮光蛋:硫、半、光、蛋→半胱、光、蛋(甲硫)氨酸→含硫氨基酸
酸谷天出門:酸、谷、天→谷氨酸、天門冬氨酸→酸性氨基酸(帶負電荷)
死豬肝色臉:絲、組、甘、色→絲、組、甘、色氨酸→一碳單位來源的氨基酸
只攜一兩錢:支、纈、異亮、亮→纈、異亮、亮氨酸→支鏈氨基酸
一本落色書:異、苯、酪、色、蘇→異亮、苯丙、酪、色、蘇氨酸→生糖兼生酮
揀來精讀之:堿、賴、精、組→賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、組氨酸(His)→堿性氨基酸(帶正
電荷)
芳香老本色:芳香、酪、苯、色→酪、苯丙、色氨酸→芳香族氨基酸
不搶甘肅來:脯、羥、甘、蘇、賴→脯、羥脯、甘、蘇、賴氨酸→不參與轉氨基的氨基酸
必須氨基酸(essentialaminoacid):指人體(或其它脊椎動物)不能合成或合成速度遠不適應機體的需要,必
需由食物蛋白供給,這些氨基酸稱為必需氨基酸。共有10種其作用分別是:
①賴氨酸(Lysine):促進大腦發(fā)育,是肝及膽的組成成分,能促進脂肪代謝,調節(jié)松果腺、乳腺、黃體及卵巢,防
止細胞退化;
②色氨酸(Tryptophan):促進胃液及胰液的產(chǎn)生;
③苯丙氨酸(Phenylalanine):參與消除腎及膀胱功能的損耗;
④蛋氨酸(又叫甲硫氨酸)(Methionine);參與組成血紅蛋白、組織與血清,有促進脾臟、胰臟及淋巴的功能;
⑤蘇氨酸(Threonine):有轉變某些氨基酸達到平衡的功能;
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⑥異亮氨酸(Isoleucine):參與胸腺、脾臟及腦下腺的調節(jié)以及代謝;腦下腺屬總司令部作用于甲狀腺、性腺;
⑦亮氨酸(Leucine):作用平衡異亮氨酸;
⑧纈氨酸(Valine):作用于黃體、乳腺及卵巢。
9.精氨酸(arginine):精氨酸與脫氧膽酸制成的復合制劑(明諾芬)是主治梅毒、病毒性黃疸等病的有效藥物。
2、A(在蛋白質的空間結構中,通常是疏水性氨基酸的側鏈存在于分子的內部,因為疏水性基團避開水相而
聚集在一起,而親水側鏈分布在分子的表面以充分地與水作用;蛋白質的一級結構是多肽鏈中氨基酸的排列
順序,此順序即決定了肽鏈形成二級結構的類型以及更高層次的結構;維持蛋白質空間結構的作用力主要是
次級鍵,主要是肽鍵,還有二硫鍵。)
3、C(A-U,G-C,T-A,C-G,5’-3’對3’-5’,即3’-5’GCCAU)
4、C(解偶聯(lián)劑:2,4-二硝基苯酚(DNP)和頡氨霉素可解除氧化和磷酸化的偶聯(lián)過程,使電子傳遞照常
進行而不生成ATP。DNP的作用機制是作為H+的載體將其運回線粒體內部,破壞質子梯度的形成。由電
子傳遞產(chǎn)生的能量以熱被釋出。)
5、C(Km不變,Vmax降低)
非競爭性抑制(noncompetitiveinhibition):抑制劑在酶的活性部位以外的部位與酶結合,不對底物與酶的活性產(chǎn)
生競爭。作用:抑制劑不僅與游離酶結合,也可以與酶-底物復合物結合的一種酶促反應抑制作用。這種抑制使得Vmax
變小,但Km不變。
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6、B(絲氨酸)
腦磷脂的合成:
1.乙醇胺的磷酸化:乙醇胺激酶催化羥基磷酸化,生成磷酸乙醇胺。
2.與CTP生成CDP-乙醇胺,由磷酸乙醇胺胞苷轉移酶催化,放出焦磷酸。
3.與甘油二酯生成腦磷脂,放出CMP。由磷酸乙醇胺轉移酶催化。該酶位于內質網(wǎng)上,內質網(wǎng)上還有磷脂酸磷酸酶,水解分散
在水中的磷脂酸,用于磷脂合成。肝臟和腸粘膜細胞的可溶性磷脂酸磷酸酶只能水解膜上的磷脂酸,合成甘油三酯。
絲氨酸(ser)的作用:
L-絲氨酸屬于非必需氨基酸,具有許多重要的生理功能和作用
1.合成嘌呤、胸腺嘧啶、膽堿的前體;
2.L-絲氨酸羥基經(jīng)磷酸化作用后能衍生出具重要生理功能的磷絲氨酸,是磷脂的主要成分之一;
酪氨酸(Tyr)酶在黑素產(chǎn)生的過程中飾演了舉足輕重的角色。酪氨酸酶活性增加,產(chǎn)生的黑素就會更多;酪氨酸酶
活性被抑制,黑素細胞產(chǎn)生黑素的能力就相應降低??梢哉f酪氨酸酶就是控制黑素細胞活性的關鍵,它決定了黑素合成
的速率。酪氨酸酶活性增強或紊亂就會發(fā)生色素性疾病,黃褐斑就是其中之一。
丙氨酸(Ala):一種脂肪族的非極性氨基酸。常見的是L-α-氨基酸,是蛋白質編碼氨基酸之一,哺乳動物非必需氨基酸和
生糖氨基酸。D-丙氨酸存在于多種細菌細胞壁的肽聚糖。β丙氨酸是維生素泛酸和輔酶A的組分。
蘇氨酸:學名:2-氨基-3-羥基丁酸。一種含有一個醇式羥基的脂肪族α氨基酸。L-蘇氨酸是組成蛋白質的20種氨基酸中的一
種,有兩個不對稱碳原子,可以有4種異構體。是哺乳動物的必需氨基酸和生酮氨基酸。符號:T。
7、C(三個)
胰蛋白酶為蛋白質水解酶,能選擇地水解蛋白質中由賴氨酸(Lys)或精氨酸(Arg)的羧基所構成的肽鏈
8、A(嘌呤核苷酸代謝的從頭合成和補救合成途徑都需要PRPP)
PRPP全稱為5-磷酸核糖-1-焦磷酸,分子式C5H13O14P3,分子量390.07g/mol。PRPP是嘌呤核苷
酸和嘧啶核苷酸從頭合成的重要中間產(chǎn)物,也參與嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的補救合成。它是由HMS
代謝途徑中的重要物質5-磷酸核糖經(jīng)PRPP焦磷酸激酶催化與ATP反應而生成的,是核苷酸合成的極
其重要的前提。
嘌呤合成代謝
嘌呤核苷酸的合成代謝體內嘌呤核苷酸的合成有兩條途徑,一是從頭合成途徑,一是補救合成途
徑,其中從頭合成途徑是主要途徑。
1.嘌呤核苷酸的從頭合成
肝是體內從頭合成嘌呤核苷酸的主要器官,其次是小腸粘膜和胸腺。嘌呤核苷酸合成部位在胞液,合成的原料包括
磷酸核糖、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳單位及CO2等。主要反應步驟分為兩個階段:首先合成次黃嘌呤核苷酸
(IMP),然后IMP再轉變成腺嘌呤核苷酸(AMP)與鳥嘌呤核苷酸(GMP)。嘌呤環(huán)各元素來源如下:N1由天冬氨酸提
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供,C2由N10-甲酰FH4提供、C8由N5,N10-甲炔FH4提供,N3、N9由谷氨酰胺提供,C4、C5、N7由甘氨酸提供,C6
由CO2提供。嘌呤核苷酸從頭合成的特點是:嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子基礎上逐步合成的,不是首先單獨合成嘌呤
堿然后再與磷酸核糖結合的。反應過程中的關鍵酶包括PRPP酰胺轉移酶、PRPP合成酶。PRPP酰胺轉移酶是一類變構酶,
其單體形式有活性,二聚體形式無活性。IMP、AMP及GMP使活性形式轉變成無活性形式,而PRPP則相反。從頭合成的
調節(jié)機制是反饋調節(jié),主要發(fā)生在以下幾個部位:嘌呤核苷酸合成起始階段的PRPP合成酶和PRPP酰胺轉移酶活性可被
合成產(chǎn)物IMP、AMP及GMP等抑制;在形成AMP和GMP過程中,過量的AMP控制AMP的生成,不影響GMP的合成,過量
的GMP控制GMP的生成,不影響AMP的合成;IMP轉變成AMP時需要GTP,而IMP轉變成GMP時需要ATP。
2.嘌呤核苷酸的補救合成
反應中的主要酶包括腺嘌呤磷酸核糖轉移酶(APRT),次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)。嘌呤核苷酸補
救合成的生理意義:節(jié)省從頭合成時能量和一些氨基酸的消耗;體內某些組織器官,例如腦、骨髓等由于缺乏從頭合成
嘌呤核苷酸的酶體系,而只能進行嘌呤核苷酸的補救合成。
3.嘌呤核苷酸的相互轉變
IMP可以轉變成AMP和GMP,AMP和GMP也可轉變成IMP。AMP和GMP之間可相互轉變。
4.脫氧核苷酸的生成
體內的脫氧核苷酸是通過各自相應的核糖核苷酸在二磷酸水平上還原而成的。核糖核苷酸還原酶催化此反應。
5.嘌呤核苷酸的抗代謝物
①嘌呤類似物:6-巰基嘌呤(6MP)、6-巰基鳥嘌呤、8-氮雜鳥嘌呤等。6MP應用較多,其結構與次黃嘌呤相似,
可在體內經(jīng)磷酸核糖化而生成6MP核苷酸,并以這種形式抑制IMP轉變?yōu)锳MP及GMP的反應。
②氨基酸類似物:氮雜絲氨酸和6-重氮-5-氧正亮氨酸等。結構與谷氨酰胺相似,可干擾谷氨酰胺在嘌呤核苷酸合
成中的作用,從而抑制嘌呤核苷酸的合成。
③葉酸類似物:氨喋呤及甲氨喋呤(MTX)都是葉酸的類似物,能競爭抑制二氫葉酸還原酶,使葉酸不能還原成二
氫葉酸及四氫葉酸,從而抑制了嘌呤核苷酸的合成。
9、D反轉錄酶(Reversetranscripatase)是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)
的酶。哺乳類C型病毒的反轉錄酶和鼠類B型病毒的反轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的反轉錄酶
則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的反轉錄酶。
RNA聚合酶(RNApolymerase):以一條DNA鏈或RNA為模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。是催化以DNA為模板
(template)、三磷酸核糖核苷為底物、通過磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶。因為在細胞內與基因DNA的遺傳信息轉錄為
RNA有關,所以也稱轉錄酶。
DNA聚合酶(DNApolymerase)是細胞復制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶,以DNA為復制模板,從將DNA
由5'端點開始復制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具備模板、引物、dNTP等的情
況下)及其相輔的活性。
大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseⅠ,DNApolⅠ)這是1956年由ArthurKornberg首先發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶,又稱
Kornber酶。此酶研究得清楚而且代表了其他DNA聚合酶的基本特點。
(1)理化性質:純化的DNApolⅠ由一條多肽鏈組成,約含1000個氨基酸殘基,MW為109KD。分子含有一個二硫鍵
和一個-SH基。通過二個酶分子上的-SH基與Hg2+結合產(chǎn)生二聚體,仍有活性。每個酶分子中含有一個Zn2+,在DNA聚
合反應起著很重要的作用。每個大腸桿菌細胞中含有約400個分子,每個分子每分鐘在37℃下能催化667個核苷酸摻
入正在生長的DNA鏈。經(jīng)過枯草桿菌蛋白酶處理后,酶分子分裂成兩個片段,大片段分子量為76KD,通常稱為Klenow
片段,小片段的分子量為34KD。此酶的模板專一性和底物專一性均較差,它可以用人工合成的RNA作為模板,也可以
用核苷酸為底物。在無模板和引物時還可以從頭合成同聚物或異聚物。
DNAPolⅠ在空間結構上近似球體,直徑約65A。在酶的縱軸上有一個約20A的深溝(cleft),帶有正電荷,這是該
酶的活性中心位置,在此位置上至少有6個結合位點:[1]模板DNA結合位點;[2]DNA生長鏈或引物結合位點;[3]引物末
端結合位點,用以專一引物或DNA生長鏈的3'-OH;[4]脫氧核苷三磷酸結合位點;[5]5'→3'外切酶活性位點,用以結合
生長鏈前方的5'-端脫氧核苷酸并切除之;[6]3'→5'外切酶活性位點,用以結合和切除生長鏈上未配對的3'-端核苷酸。
2、大腸桿菌DNA聚合酶Ⅱ(DNApolⅡ):DNA聚合酶Ⅰ缺陷的突變株仍能生存,這表明DNApolⅠ不是DNA復制的主
要聚合酶。人們開始尋找另外的DNA聚合酶,并于1970年發(fā)現(xiàn)了DNApolⅡ。此酶MW為120KD,每個細胞內約有100個
酶分子,但活性只有DNApolⅠ的5%。該酶的催化特性如下:
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(1)聚合作用:該酶催化DNA的聚合,但是對模板有特殊的要求。該酶的最適模板是雙鏈DNA而中間有空隙(gap)的
單鏈DNA部分,而且該單鏈空隙部分不長于100個核苷酸。對于較長的單鏈DNA模板區(qū)該酶的聚合活性很低。但是用單
鏈結合蛋白(SSBP)可以提高其聚合速率,可達原來的50-100倍。
(2)該酶也具有3'→5'外切酶活性,但無5'→3'外切酶活性。
(3)該酶對作用底物的選擇性較強,一般只能將2-脫氧核苷酸摻入到DNA鏈中。
(4)該酶不是復制的主要聚合酶,因為此酶缺陷的大腸桿菌突變株的DNA復制都正常??赡茉贒NA的損傷修復中該酶起到一
定的作用。
3、大腸桿菌DNA聚合酶ⅢⅢ(DNApol):DNApolⅢ全酶由多種亞基組成(見下表),而且容易分解。大腸桿菌每個細胞中只有10-20
個酶分子,因此不易獲得純品,為研究該酶的各種性質和功能帶來了許多困難。直到不久前,才對其性質和功能有所了解,但每個亞基的具體作
用扔不十分清楚。盡管該酶在細胞內存在的數(shù)量較少,但催化脫氧核苷酸摻入DNA鏈的速率分別是DNA聚合酶Ⅱ的15倍和30倍。該酶對模板
的要求與DNA聚合酶Ⅱ相同,最適模板也是鏈DNA中間有空隙的單鏈DNA,單鏈結合蛋白可以提高該酶催化單鏈DNA模板的DNA聚合作用。
DNApolⅢ也有3'→5'和5'→3'外切酶活性,但是3'→5'外切酶活性的最適底物是單鏈是DNA,只產(chǎn)生5'-單核苷酸,不會產(chǎn)生二核苷酸,即每次只
能從3'端開始切除一個核苷酸。5'→3'外切酶活性也要求有單鏈DNA為起始作用底物,但一旦開始后,便可作用于雙鏈區(qū)。DNA聚合酶Ⅲ是細胞
內DNA復制所必需的酶,缺乏該酶的溫度突變株在限制溫度(nonpermissivetemperature)內是不能生長的,此種突變株的裂解液也不能合DNA,
但加入DNA聚合酶Ⅲ則可以恢復其合成DNA的能力。
10、線粒體中蛋白質合成的起始RNA是C(fMet-tRNA)
線粒體蛋白質的合成
線粒體有它們自己特有的蛋白合成裝置,而且以細菌合成蛋白質的相似方式生產(chǎn)蛋白質。在線粒體中存在特
異的fMet-tRNA用于蛋白質合成起始。起始因子(IFs)也和細菌中的十分相似。在很多的情況下線粒體蛋白
質合成體系的成分和細菌的相關成分在體外可以互換。例如鏈孢霉的核糖體能識別、結合和翻譯E.coli的
AUG,而且E.coli的IFs來催化蛋白合成的起始。
E.coli和mt核糖體之間相似性的另一條證據(jù)是后者對細菌核糖體功能的大部分抑制劑都是敏感的,其中包
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括鏈霉素、新霉素和氯霉素等。在有的情況下對這些試劑(大部分是抗菌素)的和敏感程度與E.coli不同。
mt核糖體對有的抗菌素也有不敏感,但這些抗菌素對細胞質核糖體是敏感的,如放線菌酮。通過選擇性使
用抗菌素能發(fā)現(xiàn)線粒蛋白質合成的位置。例如放線菌酮的存在可抑制細胞質核糖體,但某種mt蛋白照常
合成,表明它是在mt核糖體上合成。有些mt蛋白在氯霉素存在下可以合成,而氯霉素是可抑制mt核糖
體的,那么這些蛋白必定是在細胞質核糖體上合成的。用這種方法科學家們發(fā)現(xiàn)了酵母線粒體中細胞色素
氧化酶有7個亞基,其中4個是在細胞質中合成的,其余3個是在線粒體中合成的。
二、名詞解釋
1、回文結構:雙鏈DNA中含有的二個結構相同、方向相反的序列稱為反向重復序列,也稱為回文結構,每條
單鏈以任一方向閱讀時都與另一條鏈的序列是一致的,例如5'GGTACC3'3'CCATGG5'.
回文結構序列是一種旋轉對稱結構,在軸的兩側序列相同而反向。當然這兩個反向重復序列不一定
是連續(xù)的。短的回文結構可能是一種特別的信號,如限制性內切酶的識別位點。較長的回文結構容易
轉化成發(fā)夾結構。
回文結構在某些因素作用下,可形成莖環(huán)式的十字形結構和上面提到的發(fā)夾結構,這些結構形式都
可以互相轉變。回文結構普遍存在于細胞的DNA分子中,它們與遺傳信息表達的調控和基因轉移有關
2、同工酶
來源于同一種系、機體或細胞的同一種酶具有不同的形式。催化同一化學反應而化學組成不同的一組酶。產(chǎn)
生同工酶的主要原因是在進化過程中基因發(fā)生變異,而其變異程度尚不足以成為一個新酶。
3、生物技術藥物
就是利用基因工程技術、細胞工程技術、微生物工程技術、酶工程技術、蛋白質工程技術、分子生物學
技術等來研究和開發(fā)藥物,用來診斷、治療和預防疾病的發(fā)生。
4、拓撲異構酶
DNA拓撲異構酶是存在于細胞核內的一類酶,他們能夠催化DNA鏈的斷裂和結合,從而控制DNA的
拓撲狀態(tài)。
主要存在兩種哺乳動物拓撲異構酶。DNA拓撲異構酶I通過形成短暫的單鏈裂解-結合循環(huán),催化DNA
復制的拓撲異構狀態(tài)的變化;相反,拓撲異構酶II通過引起瞬間雙鏈酶橋的斷裂,然后打通和再封閉,
以改變DNA的拓撲狀態(tài)
5、密碼子兼并性
除了甲硫氨酸和色氨酸外,每一個氨基酸都至少有兩個密碼子。這樣可以在一定程度內,使氨基酸序列
不會因為某一個堿基被意外替換而導致氨基酸錯誤。
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由3個相鄰的核苷酸組成的信使核糖核酸(mRNA)基本編碼單位。有64種密碼子,其中有61種氨基酸密
碼子(包括起始密碼子)及3個終止密碼子,由它們決定多肽鏈的氨基酸種類和排列順序的特異性以及翻譯的
起始和終止。
特點:
①.遺傳密碼子是三聯(lián)體密碼:一個密碼子由信使核糖核酸上相鄰的三個堿基組成。
②密碼子具有通用性:不同的生物密碼子基本相同,即共用一套密碼子。
③遺傳密碼子無逗號:兩個密碼子間沒有標點符號,密碼子與密碼子之間沒有任何不編碼的核苷酸,讀碼必須按
照一定的讀碼框架,從正確的起點開始,一個不漏地一直讀到終止信號。
④遺傳密碼子不重疊,在多核苷酸鏈上任何兩個相鄰的密碼子不共用任何核苷酸。
⑤密碼子具有簡并性:除了甲硫氨酸和色氨酸外,每一個氨基酸都至少有兩個密碼子。這樣可以在一定程度內,
使氨基酸序列不會因為某一個堿基被意外替換而導致氨基酸錯誤。
⑥密碼子閱讀與翻譯具有一定的方向性:從5'端到3'端。
⑦有起始密碼子和終止密碼子,起始密碼子有兩種,一種是甲硫氨酸(AUG),一種是纈氨酸(GUG),而終止密碼
子(有3個,分別是UAA、UAG、UGA)沒有相應的轉運核糖核酸(tRNA)存在,只供釋放因子識別來事先翻譯的終止。
在信使RNA中,堿基代碼A代表腺嘌呤,G代表鳥嘌呤,C代表胞嘧啶,U代表尿嘧啶(注意:RNA與DNA不同,RNA
沒有胸腺嘧啶T,取而代之的是尿嘧啶U,按照堿基互補配對原則,U與A形成配對)。
三、簡答題
1、什么是核酸的變性?核酸變性后的理化特性有何變化?核酸變性在生化研究中有何應用?
答:核酸在理、化因素作用下,雙螺旋結構破壞稱核酸變性。根據(jù)變性因素區(qū)分為堿變性、熱變性等。如
DNA的堿變性、DNA的熱變性,其中以DNA的熱變性更具典型意義。
DNA變性后的性質改變:
①增色效應:指DNA變性后對260nm紫外光的光吸收度增加的現(xiàn)象;
②旋光性下降;
③粘度降低;
④生物學功能喪失或改變。
應用:DNA雜交是指不同來源的DNA經(jīng)熱變性后,在慢慢冷卻的復性過程中,由于異源DNA之間的某
些區(qū)域有相同的序列,可以彼此結合形成雜交分子,稱此方法為DNA分子雜交。DNA也可與互補的RNA
之間發(fā)生雜交,形成DNA—RNA雜交分子。核酸雜交可在液相或固相上進行,由于硝酸纖維素膜只吸附變
性DNA,故常用硝酸纖維素膜作核酸雜交的支持介質。
由于嘌呤和嘧啶在240nm~290nm紫外線處表現(xiàn)出強烈的吸收性能,所以可以利用紫外分光光度計測定
堿基、核苷、核苷酸和核酸,它們的最大吸收峰值在260nm附近。不同核苷酸有不同的吸收特性,可以此作
定性定量檢測。
DNA變性后,粘度改變,鋼性線性分子變得無序,粘度下降,UV吸收增強,其規(guī)律如下:高色效應--
核酸變性后、氫鍵破壞,雙螺旋結構破壞,堿基暴露,紫外吸收(260nm)增強,謂高色效應。解鏈溫度\
融解溫度(Tm)--UV吸收增值達到最大吸收增值50%時的溫度,稱Tm。
Tm值與DNAG+C含量有關,G+C含量愈大,Tm愈高,反之則反;與核酸分子長度有關,分子愈長,
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2.核酸雜交的分子基礎是什么?有哪些應用價值?
答:雜交(hydridization):兩個以上的分子因具有相近的化學結構和性質而在適宜的條件下形成雜交體
(hybrid),雜交體中的分子不是來自一個二聚體分子。同一個二聚體中的兩個分子在變性解離后重組合稱
為復性。利用兩條不同來源的多核苷酸鏈之間的互補性而使它們形成雜交體雙鏈叫核酸雜交。與核酸雜交技
術相對應的另一項技術被稱為探針技術,它是指利用標記分子對其它分子的識別性而實現(xiàn)對后者進行檢測的
一種技術,我們把標記的分子叫探針(Probe)。將探針技術與分子雜交技術相結合,從而使分子雜交技術
得以廣泛推廣應用。目前所用的核酸雜交技術均應用了標記技術。
核酸雜交的原理:具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基
互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。待測核酸序列為性病病原體
基因組或質粒DNA。探針以放射核素或非放射性核素標記,以利于雜交信號的檢測。
核酸的分子雜交技術是目前生物化學和分子生物學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性或定量檢測特異
RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的堿基互補原則而發(fā)展起來的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等
條件下,雙鏈DNA之間的氫鍵被破壞(變性),雙鏈解開成兩條單鏈。這時加入異源的DNA,在核酸雜交的基礎上發(fā)展起來的一
種用于研究和診斷的非常有用的技術稱探針技術(Probe)。一小段(例如十數(shù)個至數(shù)百個)核苷酸聚合體的單鏈,有放射性同位
素如32P、35S或生物素標記其末端或全鏈,就可作為探針。把待測DNA變性并吸附在一種特殊的濾膜,例如硝酸纖維素膜上。
然后把濾膜與探針共同培育一段時間,使發(fā)生雜交。用緩沖液沖洗膜。由于這種濾膜能較牢固地吸附雙鏈的核酸,單鏈的在沖
洗時洗脫了。帶有放射性的探針若能與待測DNA結合成雜化雙鏈,則保留在濾膜上。通過同位素的放射自顯影或生物素的化學
顯色,就可判斷探針是否與被測的DNA發(fā)生雜交。有雜交現(xiàn)象則說明被測DNA與探針有同源性(homogeneity),即二者的堿基
序列是可以互補的。例如:想知道某種病毒是否和某種腫瘤有關,可把病毒的DNA制成探針。從腫瘤組織提取DNA,與探針雜
交處理后,有雜化雙鏈的出現(xiàn),就說明兩種DNA之間有同源性。這不等于可以說這種病毒引起腫瘤,但至少這是可以繼續(xù)深入
研究下去的一條重要線索。
探針技術在遺傳性疾病診斷上已開始應用。例如診斷地中海貧血或血紅蛋白病,可以由已確診的病人白細胞中提取DNA,這
就是診斷探針。用診斷探針檢查,不但可以對有癥狀患者進行確診,還可以發(fā)現(xiàn)一些沒有癥狀的隱性遺傳性疾病。從胎兒的羊
水也可以提取到少量DNA。由于探針技術比較靈敏,就使遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷較為容易辦得到了。雜交和探針技術是許多分
子生物學技術的基礎,在生物學和醫(yī)學的研究中,以及臨床診斷中得到了日益廣泛的應用。
NA或RNA(單鏈)并在一定離子強度和溫度下保溫(復性),若異源DNA或RNA之間的某些區(qū)域有互補的堿基序列,則在復
性時可形成雜交的核酸分子。
3、簡述如何應用抗代謝物理論開展新藥物研究?
答:在微生物生長過程中常常需要一些生長因子才能正常生長,可以利用生長因子的結構類似物干擾集
體的正常代謝,以達到抑制微生物生長的目的。此類生長因子的結構類似物又稱為抗代謝物。
抗代謝類藥物作用于核酸合成過程中不同的環(huán)節(jié),按其作用可分為以下幾類藥物:
胸苷酸合成酶抑制劑:氟尿嘧啶(5-FU)、呋喃氟尿嘧啶(FT-207)、二喃氟啶(雙呋啶FD-1)、優(yōu)氟泰(UFT)、
氟鐵龍(5-DFUR)。
抗腫瘤作用主要由于其代謝活化物氟尿嘧啶脫氧核苷酸干擾了脫氧尿嘧啶苷酸向脫氧胸腺嘧啶核
苷酸轉變,因而影響了DNA的合成,經(jīng)過四十年的臨床應用,成為臨床上常用的抗腫瘤藥物,成為治療肺癌、乳
腺癌、消化道癌癥的基本藥物。
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不良反應比較遲緩,用藥6-7天出現(xiàn)消化道粘膜損傷,例如:口腔潰瘍、食欲不振、惡心、嘔吐、腹瀉等,一周以
后引起骨髓抑制。而連續(xù)96小時以上粘腺炎則成為其主要毒性反應。臨床上如長時間連續(xù)點滴此類藥物應做好病人的
口腔護理,教會病人自己學會口腔清潔的方法,預防嚴重的粘膜炎發(fā)生。
二氫葉酸還原酶抑制劑:甲氨喋呤(MTX)、氨喋呤(白血寧)等。它們具有對二氫葉酸還原酶抑制作用,
應用甲酰四氫葉酸(CF)解救MTX的毒性后,較大地增加MTX的劑量。它對治療成骨肉瘤和頭頸腫瘤以及某些免疫性疾
病有效。其不良反應可引起嚴重的口腔炎、潰瘍性胃炎、出血性腸炎、甚至腸穿孔而死亡;骨髓抑制與劑量和給藥方案
有關。臨床上應做好病人的口腔護理,認真觀察病人有無腸穿孔等嚴重的不良反應的發(fā)生,及時報告醫(yī)生,做好搶救準
備。
DNA多聚酶抑制劑:阿糖胞苷(Ara-c)、環(huán)胞苷,氯環(huán)胞苷,它們在體內變成阿糖胞苷三磷酸(Ara-CTP)后發(fā)
揮作用,此反應由脫氧胞苷激酶催化。在白血病細胞及淋巴細胞中此激酶的含量較高,故它對白血病有選擇作用,對
DNA多聚酶有強大的抑制作用,而影響DNA的復制。
一般劑量可以引起骨髓抑制、惡心、嘔吐等不良反應但較輕,高劑量時有嚴重的骨髓抑制如白細胞、血小板降低和
貧血,明顯的惡心、嘔吐、嚴重的腹瀉,護士應根據(jù)病人出現(xiàn)的不良反應的類型做好病人的相應的護理。如做好預防感
染、出血、腹瀉的護理,減少不良反應帶來的并發(fā)癥。
核苷酸還原酶抑制劑:羥基脲(HU)、肌苷二醛(inosinedialdehyde)、腺苷二醛(adenosinediialde-hgde)、
胍唑(guanazole),包括胞苷酸、鳥苷酸、腺苷酸、胸苷酸還原成相應的脫氧核苷酸,最終阻止DNA的合成,通過抑制
核酸還原酶的抑制。臨床用于治療慢性粒細胞白血病、惡性黑色素瘤、乳腺癌、頭頸部癌、腸癌、對銀屑病也有效。
不良反應主要為骨髓抑制。臨床上應注意對血象的監(jiān)測,預防感染。
嘌呤核苷酸合成抑制劑:6-巰嘌呤(6-MP)為嘌呤類衍生物,由于6-GMP對鳥苷酸激酶有親和能力,故6-TG
最后可以取代鳥嘌呤,摻入到核酸中去。它可以抑制嘌呤合成中的反應。臨床用于治療白血病,也可作為免疫抑制劑,
用于腎病綜合征、器官移植、紅斑狼瘡。主要不良反應是骨髓抑制和消化道反應外還可以引起高尿酸血癥,用藥后要充
分水化及堿化尿液,減少高尿酸血癥的發(fā)生。
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分析化學部分
一、名詞解釋
1、materialbalance物料平衡
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物料平衡:Kw(2)HA的存在形式有HA及A-兩種,其濃度和等于HA的分析濃度(所謂酸的分析濃度指
未電離酸和已電離酸濃度之和)c:[A-]+[HA]=c(3)這種把一種物質在溶液中存在的各物種濃度之和等于
其分析濃度的關系物稱為物料平衡。
2、Ionpairchromatography離子對色譜法
離子對色譜法可分為正相與反相離子對色譜法,因為前者較少使用,故只介紹反相離子對色譜法。
反相離子對色譜法是把離子對試劑加入極性流動相中,被分析的樣品離子在流動相中與離子對試劑的反
離子生成不帶荷電的中性離子對,從而增加了樣品離子在非極性固定相中的溶解度,使分配系數(shù)增加,改善
分離效果。
3、標準對照法(紫外-可見分光光度法中)
標準對照法
在同樣條件下配制標準溶液和樣品溶液,濃度應盡可能接近,在選定波長處,分別測定吸收光度,根據(jù)定
律
1%
A標=E1cmc樣l
1%
A樣=E1cmc樣l
1%
因是同種物質,同臺儀器及同一波長測定,l和E1cm相等,所以
A標/A樣=C標/C樣C樣=C標A樣/A標
紫外--可見分光光度法:是根據(jù)物質分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一
種定性、定量和結構分析方法。操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好。波長長(頻率小)的光線能量小,波長短(頻
率大)的光線能量大。分光光度測量是關于物質分子對不同波長和特定波長處的輻射吸收程度的測量。
4、體系間跨越
系間竄越(IntersystemCrossing,ISC):
不同多重度的能態(tài)之間的一種無輻射躍遷。躍遷過程中一個電子的自旋反轉,如S1~→T1或T1~→So。
1、D(統(tǒng)計量測量的是系統(tǒng)誤差而不是絕對誤差)
平均值的精密度用平均值的標準偏差表示:S=Sn
xx
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式中n表示測量次數(shù)。由此式可知,n次測量平均值的標準偏差是1次測量的標準偏差的1n倍,即n次測
量的可靠性是1次測量的
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