臨床檢驗技術(shù)課件

血小板計數(shù)

（bloodplateletcount,BPC）

血小板來自骨髓內(nèi)巨核細胞

血小板的壽命為7－14天全身約1/3的血小板貯存在脾臟血小板生理血小板的大小約為紅細胞的1/3-1/5，直徑2μm－5μm,容積為6fl-8fl。在不染色標本中血小板在高倍鏡下觀察為：圓形、橢圓形或呈桿狀，胞漿帶有淡綠色的折光。血小板形態(tài)血小板計數(shù)（bloodplateletcount，BPC或PLT）測定單位體積血液中血小板的數(shù)量

測定方法及評價血小板計數(shù)方法主要為兩大類血細胞分析儀法目視顯微鏡法直接法間接法血小板分析原理-分析儀法血小板與紅細胞在一個系統(tǒng)進行檢測，根據(jù)所產(chǎn)生的脈沖信號不同閾值分別進行計數(shù)(細胞體積3-30fl輸入血小板通道)。血小板計數(shù)儲存于64個通道。顯微鏡計數(shù)法：①破壞紅細胞的溶血法草酸銨稀釋液法復方尿素稀釋法②不破壞紅細胞方法復方碘稀釋液法方法學評價血細胞分析儀法優(yōu)點：參數(shù)多、速度快、適于臨床應(yīng)用缺點：不能完全將血小板和其他類似大小物質(zhì)區(qū)別，計數(shù)誤差大；EDTA可致血小板聚集，假性血小板減少，應(yīng)用顯微鏡計數(shù)法校準。1．生理性變化:正常人血小板計數(shù)一天內(nèi)可有6-10%變化2．病理性（1）血小板減少（血小板數(shù)小于100×109/L）①血小板生成障礙：急性白血病、再生障礙性貧血②血小板破壞過多：如ITP、脾功能亢進，系統(tǒng)性紅斑狼瘡③血小板消耗增多：如DIC、血栓性血小板減少紫癜臨床意義（2）血小板增多（血小板數(shù)大于400×109/L）①骨髓增生性疾?。郝粤＜毎籽?，真性紅細胞增多癥②原發(fā)性血小板增多癥③急性大出血，急性化膿性感染④脾切除手術(shù)后血小板相關(guān)參數(shù)血小板平均體積血小板比容血小板體積分布寬度血小板平均濃度

瑞氏染色光學顯微鏡下觀察為：血小板易聚集多呈三、五成群。可分透明區(qū)和顆粒區(qū)。血小板形態(tài)檢查標本：

EDTA鹽抗凝血指血觀察要點：血小板大小血小板形態(tài)（胞質(zhì)受色、顆粒大小、形態(tài)等）血小板分布異常血小板形態(tài)大小異常：血小板直徑＞7.5um稱巨大型血小板。形態(tài)異常：幼稚型血小板、病理型血小板（藍色血小板）、衰老型血小板分布異常：血小板無力癥分散分布慢粒、原發(fā)性血小板增多癥聚集過度。

思考題

若同時進行紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)，如何安排采血順序，為什么？血細胞體積直方圖的應(yīng)用概念

血細胞分析儀根據(jù)細胞體積大小，出現(xiàn)相對頻率，以坐標式曲線表示出來，從而形成血細胞直方圖。1、白細胞直方圖

2、紅細胞直方圖fl100200

3、血小板直方圖

患者，女，歲68歲，有6個月貧血史

【實驗室檢查】Hb75g/L，RBC3.1*1012/L，血涂片紅細胞大小不均，中央蒼白區(qū)擴大紅細胞直方圖

4.病例100200fl血細胞分析儀的類型血樣

稀釋1:25000

稀釋1:250通過RBC/PLT小孔RBC破壞釋放Hb產(chǎn)生脈沖小大3-30fl被輸入血小板通道>30fl被輸入RBC通道RBC脈沖大小RDWMCVHCTMCHHbMCHCPLT值脈沖大小PDWMPVPCTHb測定WBC通過小孔管WBC計數(shù)根據(jù)脈沖大小35-90fl90-160fl160-300fl淋巴細胞（小細胞）中間細胞幼稚細胞單核細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞中性粒細胞（大細胞）血細胞分析儀的工作流程

1、按自動化程度分型

半自動血細胞分析儀：血液經(jīng)稀釋液預稀釋后再上機。全自動血細胞分析儀：血液在儀器內(nèi)部自動稀釋。

2、按白細胞分類功能分型：

分為二分類、三分類、五分類圖1．半自動分析儀

這是一個容易操作的系統(tǒng)。接通電源后，儀器處于正常的操作待機狀態(tài)時，只要把20μl血液樣品在機外稀釋，混勻后放在樣品架上，按下計數(shù)鍵它就可以對15種血液指標和3個細胞直方圖進行一次分析。測定完成后結(jié)果會立即在LCD上顯示并將結(jié)果打印出來。

這是一臺用于臨床實驗室體外診斷的全自動血液分析儀，能為血液異常病人提供準確的篩選結(jié)果，并提示其需作進一步檢查。能每小時分析80份樣品，打印出18份參數(shù)和3種細胞分布曲線圖。操作簡便，快速。圖2．全自動分析儀圖3．CD-3500血球計數(shù)分析儀

30個參數(shù)，10項白細胞分類，7個分布圖，7個散射表示圖

可以做網(wǎng)織紅細胞分析，以及動物血液測試高達60個品種采用最先進的激光技術(shù)和電阻法技術(shù)圖4．HS血液常規(guī)檢查流水線HST-330SE-9000/R-3000/SP-100

從血球計數(shù)、白血球分類到網(wǎng)織紅細胞測定以及標本的推片、染色，全面實現(xiàn)了自動化。實現(xiàn)了高效率的檢測。血細胞分析儀質(zhì)量控制1．人員培訓

1）儀器原理、操作規(guī)程、注意事項、異常報警的含義。

2）運用質(zhì)控圖的變化進行儀器的調(diào)試。2．儀器的鑒定

包括總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準確性。3．儀器的校正：

隨機的標準品、或者嚴格的手工法。4．標本的采集和運送

1）要求用抗凝的靜脈血

2）抗凝血在室溫下，WBC、RBC、PLT可以穩(wěn)定24h，血小板不適合在低溫下保存。5．注意分析中的幾個問題

1）最適宜溫度為18～22℃2）溶血劑用量及溶血時間

3）儀器的半堵孔現(xiàn)象6．分析后的注意事項思考題1、血細胞分析儀(電阻抗型)白細胞計數(shù)和分類計數(shù)原理2、何謂血細胞直方圖3、何謂RDW、血細胞分析儀常用的檢測項目有哪些(要求寫出英文縮寫和中文全稱)白細胞檢驗WBC、NE（中性粒細胞百分率）NE＃（中性粒細胞絕對值）、LY、LY＃、MO、MO＃、EO、EO＃、BA、BA＃PLT、MPV（血小板平均體積）PDW（血小板分布寬度）PCT（血小板比容）PLCR（大血小板比率）白細胞計數(shù)定義：測定單位體積外周血中各種白細胞的總數(shù)。血細胞分析儀法顯微鏡計數(shù)法原理用白細胞稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細胞后，滴入計數(shù)池中，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中各種白細胞的總數(shù)。

器材1、顯微鏡2、微量吸管3、計數(shù)板4、蓋玻片

質(zhì)量控制一、誤差技術(shù)誤差：由于操作不正規(guī)或器材不精確造成的誤差。這種誤差通過主觀努力可以避免或顯著減小。器材不符合要求采血部位不當稀釋倍數(shù)不準充液不當血液發(fā)生凝固包括計數(shù)域誤差、吸管誤差和計數(shù)室誤差。在計數(shù)室內(nèi)計數(shù)的面積越大，計數(shù)的細胞越多，計數(shù)室和吸管使用的次數(shù)越多，誤差越小。若細胞數(shù)太低（＜3×109/L），可數(shù)8個大方格，或降低稀釋倍數(shù)；若細胞數(shù)太高（＞15×109/L），可適當增加稀釋倍數(shù)。固有誤差：二、有核紅細胞的影響校正公式：校正后的血細胞數(shù)/L＝X×100/（100+Y）

X：校正前的白細胞數(shù)

Y：白細胞分類計數(shù)時，計數(shù)100個白細胞的同時計數(shù)到的有核紅細胞。例：某病人白細胞計數(shù)結(jié)果為5×109/L，白細胞分類計數(shù)時，計數(shù)100個白細胞的同時發(fā)現(xiàn)20個有核紅細胞，請問該病人真正的白細胞計數(shù)結(jié)果為多少？

WBC＝

5×109×100/（100+20）

/L＝

4×109/L

三.常規(guī)考核標準（RCS）RCS(routinecheckingstandard)RCS=（四大格的所見白細胞最大值－最小值）/四大格所見白細胞平均值*100%白細胞≤4×109/L者，RCS＜30%白細胞（4.1－14.9）

×109/L者，RCS＜20%白細胞≥15×109/L者，RCS＜15%

方法學評價血細胞分析儀法：操作簡單、效率高、重復性好適合于大批量的標本集中監(jiān)測缺點：儀器昂貴，準確性取決于儀器的性能及工作狀態(tài)，使用前需進行儀器的校準，堅持日常質(zhì)控顯微鏡計數(shù)法：操作簡單、費用低廉，試用于基層醫(yī)療單位及分散就診缺點：費時，重復性差，結(jié)果的準確性取決于操作者的技術(shù)水平，作為儀器檢驗的校準白細胞分類計數(shù)

DifferentialCount（DC）一.外周血五種白細胞中性粒細胞:中性桿狀核粒細胞中性分葉核粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞單核細胞淋巴細胞二.中性粒細胞形態(tài)細胞呈圓形，直徑10－15um細胞質(zhì)豐富，呈粉紅色，含較多細小、均勻、密集的針尖樣的染淡粉紅色的中性顆粒細胞核為深紫紅色，染色質(zhì)致密成塊狀，粗糙核最窄處＞1/3最寬處中性桿狀核粒細胞核最窄處＜1/3最寬處中性分葉核粒細胞嗜酸性粒細胞細胞呈圓形，直徑13－15um；胞核多為兩葉，呈眼鏡狀，也可偶見分葉的，染色質(zhì)粗糙染紫紅色胞漿內(nèi)充滿粗大、整齊、均勻、排列緊密的橘紅色嗜酸性顆粒。

嗜堿性粒細胞細胞呈圓形，直徑10－12um；細胞核常被顆粒遮蓋，核著色較淡，模糊不清。胞質(zhì)量較少，呈淡紅色，含少量粗大但大小不均、排列不規(guī)則，分布不均勻的紫黑色嗜堿性顆粒。單核細胞細胞呈圓形或不規(guī)則型，直徑15－25um。核大，呈不規(guī)則圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉，染色質(zhì)細致疏松如網(wǎng)狀，染色質(zhì)和副染色質(zhì)對比明顯，染紫紅色。胞漿豐富，染淡藍或灰蘭色，呈毛玻璃樣半透明，含大量細小、灰塵樣的紫紅色嗜天青顆粒。小淋巴細胞細胞呈圓形，直徑6－10um。核呈圓形，偶見凹陷，染色質(zhì)粗糙致密成塊，染色質(zhì)和副染色質(zhì)界線不清。胞質(zhì)量少，僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線天藍或深藍色胞漿，甚至完全不見。

大淋巴細胞細胞呈圓形，直徑10－15um。核呈圓形或橢圓形，常偏于一側(cè)，染色質(zhì)致密呈塊狀，但要比小淋巴細胞略為疏松，紫紅色。胞質(zhì)豐富，呈透明天藍色，常有少量大而稀疏的紫紅色嗜天青顆粒。

三.白細胞分類計數(shù)原理(一).電阻抗法通過微孔的血細胞所產(chǎn)生的脈沖信號幅度與血細胞體積成正比。白細胞脈沖信號的大小由被計數(shù)細胞在溶血液中的大小決定。

小細胞中間細胞大細胞flRELNOR1R2R3R4WBC白細胞體積分布直方圖(二).容量、電導、光散射（VCS）白細胞分類法

根據(jù)流體力學原理使用鞘流技術(shù)，使溶血后液體內(nèi)剩余白細胞逐個通過檢測器接受VCS三種技術(shù)的同時檢測。CoulterMaxm血細胞分析儀

體積（volumeV):

細胞體積的大小

電導性（conductivityC):細胞核與細胞質(zhì)的比例、顆粒的大小和密度

光散射(scatterS):檢查細胞膜表面特征和內(nèi)部結(jié)構(gòu)。光散射對細胞顆粒的結(jié)構(gòu)和密度的區(qū)分能力強，粗顆粒產(chǎn)生的光散射比細顆粒強。淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統(tǒng)采用電阻抗法（測量細胞體積）和射頻（檢測細胞核和顆粒密度）的聯(lián)合檢測。細胞懸浮液中加入溶血劑使紅細胞溶解，白細胞形態(tài)改變不大。當這些細胞通過檢測系統(tǒng)時，同時進行直流和射頻兩種電流的檢測。以DC（細胞大?。┬盘枮闄M坐標；以RF（核及顆粒的密度）為縱坐標結(jié)果將細胞分成淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞三個群體。

射頻檢測原理

電阻法檢測原理手工分類計數(shù)方法1、制作血片并染色，干燥后待用2、低倍鏡觀察白細胞的數(shù)量、分布和染色情況3、選擇血涂片體尾交界處染色良好的部位，用油鏡分類100－200個細胞4、記錄五種白細胞的細胞數(shù)四.鏡檢部位

一般體積小的細胞分布在頭部和體部比較多；而尾部和兩側(cè)以中性粒細胞和單核細胞較多，異常大的細胞在片尾末端出現(xiàn)，所以在體尾交界處觀察細胞。白細胞總數(shù)＜3×109/L，分類50－100個細胞白細胞總數(shù)＞15×109/L，分類200個細胞其間的白細胞數(shù)，分類100個細胞五.記錄方法手工完全記錄法：將所見的白細胞按其分類用“正”或“++++”的方法記錄至所需總數(shù)手工半記錄法：用上法記錄除中性粒細胞以外的各種白細胞，同時默記總數(shù)至所需細胞數(shù)分類記數(shù)器法六.白細胞計數(shù)及分類計數(shù)的臨床意義

分裂池：原、早、中成熟池：晚、桿儲備池：桿、分循環(huán)池：血液循環(huán)邊緣池：附著骨髓外周血（一）、生理變化

1.年齡

2.日間變化:

3.運動、疼痛、和情緒的影響

4.妊娠和分娩

結(jié)論：白細胞計數(shù)波動在30%以下，在臨床診斷上無意義，只有通過定時和反復觀察才有意義。（二）.病理變化

1.中性粒細胞增多急性感染、嚴重組織損傷、急性中毒、急性大出血白血病或惡性腫瘤。2.中性粒細胞減少某些感染、某些血液病、慢性粒化損傷、自身免疫性疾病、脾功能亢進。（二）.病理變化

淋巴細胞增多某些病毒、細菌感染、某些慢性感染、淋巴細胞白血病淋巴細胞減少接觸放射線及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激七.嗜酸性粒細胞直接計數(shù)原理:用嗜酸性粒細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時破壞紅細胞和大部分其它白細胞，并將嗜酸性粒細胞著色，然后滴入細胞計數(shù)池中，計數(shù)一定范圍內(nèi)嗜酸性粒細胞數(shù)，即可求得每升血液中嗜酸性粒細胞數(shù)。

臨床意義:1.生理變化:興奮刺激（交感興奮）↓下丘腦↓釋放ACTH腎上腺皮質(zhì)單核—巨噬（產(chǎn)生腎上腺皮質(zhì)激素）吞噬分解E↓

骨髓產(chǎn)生和釋放E受抑制2.病理變化:增多：過敏性疾病、寄生蟲病、某些傳染病、皮膚病、某些惡性腫瘤、某些血液病減少：長期使用腎上腺皮質(zhì)激素，某些傳染病早期。3.還可用于觀察急性傳染病、大手術(shù)和燒傷病人預后

測定腎上腺皮質(zhì)功能和腦垂體前葉功能。

尿液沉渣顯微鏡檢查OSU用顯微鏡對尿沉淀物進行檢查，識別尿液中細胞、管型、結(jié)晶、細菌、寄生蟲等各種病理成分；輔助對泌尿系統(tǒng)疾病作出診斷、定位、鑒別診斷及預后判斷的重要常規(guī)試驗項目。概念二檢測原理及方法學評價

直接鏡檢法:混勻一滴尿法自然沉降鏡檢法：離心鏡檢法：染色鏡檢法：可提高管型檢出傳統(tǒng)顯微鏡檢查法:特殊顯微鏡檢查法：相差顯微鏡：干涉顯微鏡：偏振光顯微鏡：透射電鏡：儀器檢查法：干化學法尿沉渣分析儀法三質(zhì)量控制

宜用新鮮（2h內(nèi)完成檢查），隨機中段尿液。使用標準器材，如尿液沉渣定量分析板。采用可靠的尿沉渣質(zhì)控物。尿沉渣檢查標準化。應(yīng)用各種細胞化學，免疫化學染色新技術(shù)。

加強與臨床的聯(lián)系。

尿液細胞檢查一紅細胞(RBC)

紅細胞形態(tài)：正常紅細胞：淡黃色，雙凹圓盤狀，直徑大約8um。異形紅細胞：大紅細胞、、小紅細胞、棘形紅細胞、環(huán)形紅細胞、新月形紅細胞、皺縮紅細胞及影紅細胞。圖1紅細胞血尿鏡下血尿：＞3個RBC/HPF，而尿液外觀變化不明顯。肉眼血尿：＞1ml血/1L尿，尿液外觀呈淡紅色。離心鏡檢法：0~3/HPF直接鏡檢法：0~偶見/HPF參考值臨床意義：引起血尿的疾病很多，可以歸納為三類原因：全身其它系統(tǒng)的疾病泌尿系統(tǒng)自身疾病泌尿系統(tǒng)附近器官的疾病完整白細胞閃光細胞膿細胞白細胞形態(tài)圖2白細胞參考值直接鏡檢法：0~3/HPF鏡下膿尿：尿液白細胞＞5/HPF離心鏡檢法：0~5/HPF臨床意義

腎盂腎炎膀胱炎女性陰道炎宮頸炎和附件炎腎移植后排異反應(yīng)其他三上皮細胞（epithelium）

來自腎小管立方上皮見圖3在正常人尿中極為少見一旦增多，即提示腎小管病變，在急來源形態(tài)參考值臨床意義腎小管上皮細胞（renaltubularepithelium）性腎小管腎炎時可見到；急性腎小管壞死的多尿期可大量出現(xiàn)圖3腎小管上皮細胞無染色圖3腎小管上皮細胞

移行上皮細胞（transitionalepithelium）來源形態(tài)參考值臨床意義由腎盂、輸尿管、膀胱和尿道近膀胱段等處的移行上皮組織脫落而來有多種形態(tài)，見圖4無或偶見在腎盂、輸尿管或膀胱頸部炎癥時可成片脫落，但其形態(tài)隨脫落部位而稍有區(qū)別圖4大圓上皮細胞圖4小圓上皮細胞圖4尾型上皮細胞扁平鱗狀上皮細胞（pavementepithelium）

來自輸尿管下部、膀胱、尿道和陰道的表層來源見圖5形態(tài)正常尿中可見少量扁平上皮細胞參考值大量出現(xiàn)，或伴白細胞、膿細胞，多見于尿道炎臨床意義圖5鱗狀上皮細胞（扁平上皮細胞）四吞噬細胞(phagocyte)臨床意義：尿中出現(xiàn)提示泌尿道急性炎癥五其他細胞

尿液管型檢查概念：尿液管型，是一些有機物或無機物，如蛋白、細胞或結(jié)晶等成分，在腎小管和集合管內(nèi)凝固聚合而形成的圓柱狀結(jié)構(gòu)物。尿液中出現(xiàn)管型往往提示有腎實質(zhì)性損害一管型形成機制和條件尿液蛋白質(zhì)和T-H蛋白濃度增高尿液濃縮和腎小管內(nèi)環(huán)境酸化有可提供交替使用的腎單位二管型的形成與分類

蛋白質(zhì)（白蛋白+T-H蛋白）濃縮、酸化、鹽析、凝膠化

透明管型紅細胞白細胞上皮細胞白蛋白+T-H蛋白白細胞管型粗顆粒管型細顆粒管型

蠟樣管型紅細胞管型血紅蛋白管型上皮細胞管型脂肪性變的上皮細胞+蛋白質(zhì)上皮細胞脂肪管型脂肪管型三管型種類、形狀和臨床意義透明管型形態(tài)臨床意義見圖6偶見于成人濃縮尿、激烈運動后等。病理情況可見于發(fā)熱、麻醉、心力衰竭、腎受刺激后。如大量持續(xù)出現(xiàn)透明管型，表示腎臟病變嚴重圖6透明管型圖7紅細胞管型臨床意義：多見于急性腎小球腎炎圖8白細胞管型臨床意義：提示腎實質(zhì)有感染性病變，多見于急性腎盂腎炎。圖9上皮細胞管型臨床意義：常見于腎小管病變。圖10顆粒管型臨床意義：提示腎臟有實質(zhì)性病變。尤其多見于急性或慢性腎小球腎炎。圖11蠟樣管型臨床意義：提示腎小管有嚴重病變，預后差?？梢娪诼阅I小球腎炎晚期，腎功能不全。圖12脂肪管型臨床意義：多見于腎病綜和征。寬大管型細菌管型和真菌管型結(jié)晶管型混合管型其他管型和類管型相似物Q：尿液中出現(xiàn)何種管型，多提示存在早期腎小球病變？A：紅細胞管型。Q：尿液中出現(xiàn)何種管型，多提示存在慢性腎炎或急性腎小球腎炎后期？A：細顆粒管型。簡述鏡檢出現(xiàn)管型的臨床意義？①透明管型：見于劇烈運動、發(fā)熱、麻醉、心功能不全。②紅細胞管型：提示腎單位內(nèi)有出血。③白細胞管型：提示腎實質(zhì)有細菌感染性病變。④腎小管上皮細胞管型：常見于腎小管病變。⑤顆粒管型：見于腎實質(zhì)性病變。⑥腎功能不全管型：見于慢性腎小球腎炎晚期尿毒癥時，常表示預后不良。⑦脂肪管型：見于慢性腎小球腎炎，尤多見于腎病綜合癥。⑧蠟樣管型：提示腎小管有嚴重病變，預后差?？梢娪诼阅I小球腎炎晚期、腎功能不全及腎淀粉樣變性時。尿管型基質(zhì)中含有的主要成分是：T-H糖蛋白尿管型形成的三個必要條件是：尿中存在蛋白質(zhì)、腎小管有使尿液酸化的能力、有可供交替使用的腎單位尿沉渣可見的細胞有：紅細胞、白細胞、、吞噬細胞、上皮細胞關(guān)于尿顆粒管型，下列錯誤的是E粗顆粒管型可見于慢性腎小球腎炎A來自變性的細胞分解B來自血漿蛋白，聚集于基質(zhì)管型C粗顆粒管型可變?yōu)榧氼w粒管型D細顆粒管型主要見于急性腎小球腎炎早期D

尿液結(jié)晶檢查DescriptionofthecontentsDescriptionofthecontents一

尿液結(jié)晶形成和檢查方法二生理性結(jié)晶：圖13草酸鈣結(jié)晶圖14尿酸結(jié)晶圖15三聯(lián)磷酸鹽結(jié)晶圖16非晶形尿酸鹽三病理性結(jié)晶膽紅素結(jié)晶：見于各種黃疸患者胱氨酸結(jié)晶：大量出現(xiàn)多為腎或膀胱結(jié)石的征兆(圖17）圖17胱氨酸結(jié)晶亮氨酸與酪氨酸結(jié)晶：可見于有大量組織壞死的疾病，如急性肝壞死、急性磷中毒患者尿中；在糖尿病性昏迷、白血病或傷寒等患者尿液中也可能出現(xiàn)（圖18~圖19）。膽固醇結(jié)晶：可出現(xiàn)于乳糜尿和膿尿。圖18酪氨酸結(jié)晶

圖19亮氨酸結(jié)晶尿沉渣的檢查內(nèi)容包括：細胞管型結(jié)晶紅細胞、白細胞、吞噬細胞、上皮細胞、異形細胞等透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型等磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶等細菌、寄生蟲（或卵）、真菌、精子、粘液

尿液沉渣定量檢查尿沉渣檢驗的操作步驟：取混勻10ml尿液置于刻度離心管中

用量筒準確量取全部尿液，并作記錄收集全部尿液離心后吸取上清液10ml傾去充池1500r/min,離心10min充分混勻剩余1ml尿沉淀液記數(shù)10個大方格中的紅細胞白細胞和管型數(shù)1小時尿有形成分計數(shù)法：定義參考值白細胞臨床意義準確留取3h全部尿液，將沉渣中紅細胞、白細胞及管型分別記數(shù)，再換算成1h的排出數(shù)。紅細胞：男＜30000/h，女＜40000/h；男＜70000/h，女＜140000/h；管型：兒童可偶見透明管型。尿沉渣定量分析板法組成：特制的尿沉渣離心管和定量分析板（圖16）參考值：紅細胞：0~12/μl白；細胞：0~12/μl；管型：0~1/μl定義：取一定量尿液離心后，將沉淀物滴入記數(shù)板，計算1μl容積中的紅細胞、白細胞及管型的數(shù)量優(yōu)點：符合尿液檢驗標準化要求圖16尿沉渣定量分析板12小時尿沉渣計數(shù)(艾迪氏計數(shù))：

定義：留取12h尿液進行沉渣記數(shù)紅細胞、白細胞及管型的方法。參考值：紅細胞：＜50萬/12h；白細胞：＜100萬/12h；管型：無。臨床意義圖17尿沉渣系統(tǒng)工作站

尿液檢驗?zāi)I臟形成尿液輸尿管輸送尿液膀胱暫時貯存尿液尿道排出尿液血管球腎小囊腎小管(二)尿液的生成

1、腎小球濾過

腎小球濾過膜面積腎小球濾過膜的通透性有效濾過壓有關(guān)

2、腎小管的重吸收3、腎小管和集合管的排泌

二、尿液分析的目的①泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察②其它系統(tǒng)疾病的診斷③安全用藥的監(jiān)護④職業(yè)病的輔助診斷:如鉛、鎘、鉍、汞等均可引起腎損害⑤對人體健康狀態(tài)的評估尿液標本的收集、保存與處理尿液標本采集尿液標本種類與采集病人準備標本容器準備尿液標本采集與質(zhì)量管理1234病人準備收集容器要求尿標本種類尿液標本采集的質(zhì)量管理文件化管理糾正失控檢驗的申請緊急報告病人準備填寫熱敏打印結(jié)果標本采集質(zhì)控評佑接收標本參加室間質(zhì)評檢驗報告尿標本保存尿標本保存糞便檢驗一、糞便的組成經(jīng)消化食物吸收一部分營養(yǎng)物質(zhì)排出食物殘渣糞便的組成4未消化的食物殘渣1235消化道的分泌物（膽色素、粘液）分解產(chǎn)物（糞臭素、靛基質(zhì)）腸壁脫落的上皮細胞腸道細菌：主要為大腸桿菌、厭氧菌、腸球菌二、糞便檢驗的意義意義了解消化系統(tǒng)有無炎癥、出血、寄生蟲感染、惡性腫瘤等情況判斷胃腸胰腺、肝膽系統(tǒng)功能狀態(tài)。檢查糞便中有無致病菌，以防治腸道傳染病

一般性狀檢驗

顯微鏡學檢驗糞便常規(guī)檢驗三、糞便檢驗的標本收集和要求1、一般檢驗應(yīng)留取約5g左右新鮮糞便標本，若標本有膿血粘液應(yīng)挑取膿血粘液部分，以提高陽性率。正常糞便標本要多點取樣涂片檢查。2、從糞便中檢查阿米巴滋養(yǎng)體等寄生蟲原蟲時，應(yīng)在收集標本后30分鐘內(nèi)送檢，注意保溫。3、糞便標本收集后應(yīng)放在清潔干燥的容器內(nèi)。在采取后一小時內(nèi)檢查完畢。4、糞便隱血試驗檢查，病人應(yīng)素食三天后送檢，消化道大出血除外。5、無糞便排出又必須檢查時，可經(jīng)肛門指診或采便管采取標本。

一般性狀檢查——顏色一般性狀檢查——性狀顯微鏡檢查制片與結(jié)果報告

玻片生理鹽水1－2滴挑取少量糞便與鹽水混勻制成涂片。

低倍鏡觀察全片情況:有無蟲卵、原蟲及包囊

高倍鏡仔細觀察病理成分的形態(tài)和結(jié)構(gòu)細胞-白細胞123腸道上段炎癥白細胞多分散存在，常有退行性變。腸道下段炎癥白細胞多集中在粘液，細胞結(jié)構(gòu)較清晰。過敏性腸炎、腸道寄生蟲病糞便中嗜酸粒細胞增多。細胞-紅細胞阿米巴痢疾紅細胞多于白細胞，紅細胞成堆并有殘碎現(xiàn)象。紅細胞細菌性痢疾白細胞多于紅細胞，多分散存在，形態(tài)正常?；颊咄蝗黄鸩。邪l(fā)熱、腹痛、食欲不佳表現(xiàn)。患者自述大便次數(shù)約3-5次/日，糊狀或水樣，里急后重較輕，伴有輕度的腹痛實驗室檢查：外觀：稀糊樣便，含少量粘液，無膿血。急性細菌性痢疾細胞腫瘤細胞上皮細胞巨噬細胞巨噬細胞常伴大量膿細胞出現(xiàn)在細菌性痢疾糞便中正常糞便中少見，炎癥時可大量出現(xiàn)，并可見細胞退行性變見于消化道的腫瘤食物殘渣肌纖維腸蠕動亢進、腹瀉、消化不良時可增多。淀粉顆粒正常糞便中少見，胰腺功能不良、碳水化合物消化不良時可大量出現(xiàn)。脂肪中性脂肪游離脂肪酸結(jié)合脂肪酸結(jié)締組織膠原纖維彈性纖維

Charcot-Leyden結(jié)晶阿米巴痢疾、鉤蟲病及過敏性腸炎糞便中可出現(xiàn)。棱形血晶腸道出血后可出現(xiàn)結(jié)晶真菌人芽孢子蟲普通酵母菌寄生蟲蟲卵隱血試驗

隱血：上消化道出血少量時，紅細胞被消化液破壞，以致糞便外觀無異常改變，顯微鏡也不能證明的微量血液為隱血。檢測隱血的方法為隱血試驗。隱血試驗?zāi)壳芭R床上多釆用化學觸酶法H2O2

過氧化物酶

新生態(tài)氧

色原（鄰甲苯胺）

鄰甲苯胺藍

POD原理（三）注意事項

1234試驗前3天必須禁食動物血、肉、肝，可致假陽性。禁服鐵劑、維生素C后者可致假陰性。H2O2最好新鮮配制所用的器具要清潔每天做陽性對照和陰性對照臨床意義糞便隱血試驗陽性對消化道出血的診斷有重要的價值。在消化性潰瘍時，陽性率為40%－70%，呈間斷性陽性。消化道癌癥時陽性率可達95%，呈持續(xù)性陽性。故糞便隱血試驗常作為消化道惡性腫瘤的一個篩選試驗。隱血試驗方法學進展為解決糞便隱血試驗的特異性問題，當前發(fā)展最快的是免疫學方法，此類試驗所用的抗體分為兩類：一種為抗人血紅蛋白抗體，另一種為抗人紅細胞基質(zhì)抗體。免疫學方法具有很好的靈敏度，一般血紅蛋白或為0.2mg/L或0.03mg/g糞便就可檢出，有較高的特異性，不需要控制飲食。免疫學法隱血試驗主要檢測下消化道出血，約有40-50%的上消化道出血不能檢出

紅細胞計數(shù)器材1、顯微鏡

2、微量吸管

3、計數(shù)板

4、蓋玻片

(2)枸椽酸鈉稀釋液

氯化鈉

10.0g

枸椽酸鈉

5.0g

甲醛

5.0ml

蒸餾水

加至1000ml

其中

氯化鈉

維持滲透壓

枸椽酸鈉

抗凝和維持滲透壓

甲醛

固定紅細胞和防腐

優(yōu)點

★配制簡單，紅細胞不凝集，稀釋數(shù)小時后仍然保

持正常的圓盤形

★遇自身凝集素過高患者可用不含甲醛的此液紅細胞稀釋液操作方法1、準備：干凈干燥小試管一支，加紅細胞稀釋液1.99ml2、

吸取血液10ul，擦去管外余血，將微量吸管插入小試管稀釋液的底部，輕輕將血打出，并用上清液洗數(shù)次混勻3、計數(shù)板和蓋玻片擦干凈備用

4、充液：混勻液體，用吸管吸取少量混勻的紅細胞懸液充入計數(shù)池內(nèi)，靜止2－3分鐘，待細胞下沉后進行計數(shù)。5、計數(shù)：

高倍鏡計數(shù)中央大方格內(nèi)四角及正中五個中方格的細胞數(shù)。

計算：X/5×25×10×200×106/L=X×1010/L

白細胞計數(shù)原理用白細胞稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細胞后，滴入計數(shù)池中，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)白細胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中各種白細胞總數(shù)。

試劑冰乙酸：2.0ml10g/L亞甲蘭：3滴蒸餾水加至100ml作用：冰乙酸溶液溶解紅細胞亞甲蘭：使白細胞核稍著色，并與其他細胞稀釋液區(qū)分。1、準備：小試管加白細胞稀釋液0.38ml。

2、

吸取血液20ul，擦去管外余血，將毛細吸管插入小試管稀釋液的底部，輕輕將血打出，并用上清液洗數(shù)次，混勻。

3、計數(shù)板和蓋玻片擦干凈備用。

操作方法4、

充液：混勻液體，用吸管吸取少量混勻的白細胞懸液充入計數(shù)池內(nèi)，靜止2－3分鐘，待白細胞下沉后進行計數(shù)。

5、

計數(shù)：

用低倍鏡計數(shù)四角四大方格的白細胞。計數(shù)原則壓線細胞數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右。

式中：在法定計量單位制中用△.△

△

×109/L表示

X：為4個大方格內(nèi)白細胞總數(shù)。

÷4：為每大方格（即0.1ul）內(nèi)白細胞平均數(shù)。

×10：1個大方格的容積為0.1ul，換算成1ul。

×20：血液的稀釋倍數(shù)。

×106：將ul換算成L。

計算

X/4×10×20×106/L=白細胞/L0.39ml白細胞稀釋液中加入10ul血液，混勻，充入計數(shù)池，計數(shù)二側(cè)計數(shù)池四角共8個大方格內(nèi)的細胞數(shù)為64個，請計算該標本的白細胞數(shù)。WBC＝64/8×10×40×106/L＝3.2×109/L

血小板計數(shù)

（bloodplateletcount,BPC）試劑要求

能有效防止血小板粘附、聚集、破壞

很快將血小板固定

破壞紅細胞，但對血小板無損傷

等滲，防止血小板收縮［操作］吸取稀釋液（草酸銨）－采血－稀釋混勻－充液靜置－計數(shù)－計算－結(jié)果報告計數(shù)范圍：中央大方格四角及正中五個中方格計算：血小板/L=N×5×10×20×106

結(jié)果報告：BPC(PLT)×109/L

顯微鏡計數(shù)法[操作]

RBC

WBC

BPC稀釋液量（ml)20.380.38血量（μl)102020稀釋倍數(shù)200

20

20計數(shù)范圍計算公式1、計數(shù)時應(yīng)注意與雜質(zhì)相鑒別2、刺血深度要深，使血液自然流出。3、采血后1h內(nèi)計數(shù)完畢，滴入計數(shù)池后必須靜置15min后再計數(shù)顯微鏡計數(shù)法[質(zhì)量控制]標本：EDTA鹽抗凝血指血觀察要點：血小板大小血小板形態(tài)（胞質(zhì)受色、顆粒大小、形態(tài)等）血小板分布比較：紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)細胞稀釋液的作用，其操作有何不同？對比血液分析儀對細胞參數(shù)的檢驗，進行方法評價

血紅蛋白的測定高鐵氰化鉀

Hi

+CN-過氧化物酶

HiCN

HbPOD

氰化高鐵血紅蛋白測定法試劑HiCN轉(zhuǎn)化液

氰化鉀

0.05g

高鐵氰化鉀

0.2g

無水磷酸二氫鉀

0.14g

非離子型表面活性劑

1.oml

蒸餾水

加至1000ml

方法A/44×64458（mg）/1000×251=A×367.7=Hb（g/l）（大試管）轉(zhuǎn)化液5ml末梢血20ul＋靜止5分鐘比色注意事項1、

分光光度計波長、靈敏度以及比色杯內(nèi)徑均應(yīng)嚴格校正。2、

血紅蛋白轉(zhuǎn)化液必須放在棕色玻璃瓶內(nèi)保存防止分解。3、

血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中有劇毒的KCN故要進行無公害處理后方可排入下水道。注意生物安全A、首先1：1以水稀釋廢液，再按每升上述稀釋廢液加35ml次氯酸鈉溶液，充分混勻后敞開容器口放置15小時以上，使CN-氧化為N2和CO2或水解成CO32-和NH4+，而后傾入下水道。B、分散丟棄，同時用大量水沖洗稀釋。

精液檢查精液（semen）的組成精液由精漿（seminalplasma）和精子（spermatozoa）組成精子在睪丸中形成，在附睪中成熟精液中為精子提供活動能力的物質(zhì)是果糖

精子的形態(tài)和結(jié)構(gòu)精子形似蝌蚪分為頭、尾兩部分頭部有核和頂體尾部可分為頸段、中間段、主段和末段精液分析的意義1、尋找男性不育的原因2、觀察輸精管結(jié)扎術(shù)后的效果3、作為男性生殖系統(tǒng)疾病診斷的參考4、計劃生育和科研5、篩選優(yōu)質(zhì)精子6、法醫(yī)鑒定一般性狀檢查

Generalproperties）精液量：每次2－6ml,平均3.5ml。量少多見于生殖道炎癥，尤其是結(jié)核性病變。顏色和透明度：正常精液呈灰白色，自行液化后為半透明的乳白色。異?？梢娧湍撔跃?/p>

粘稠度正常情況下新排出的精液膠胨狀；異常新排出的精液呈米湯樣

測定方法：玻棒法；粘度計法液化時間（liquefaction)

精液液化時間：是指剛排出的精液由膠胨狀自行轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂闪鲃訝顟B(tài)所需的時間。正常精液排出后60分鐘內(nèi)液化。精子活動率檢查精子活動力檢查精子濃度和總數(shù)精子形態(tài)的觀察顯微鏡檢查精子活動率檢查測定方法:

1.濕片法：

混勻高倍鏡觀察

2.精子體外染色法：精液+染液推片計數(shù)(不著色)參考值：以“活”精子比率表示

1.濕片法：

>70%(30-60min)2.精子體外染色：>75%(30-60min)

精子活動力（spermmotility）

精子向前運動的能力

WHO：a級－－快速前向直線運動

b級－－緩慢或呆滯的前向運動

c級－－精子呈緩慢或非前向運動

d級－－精子呈不動狀

正常：射精后60分鐘內(nèi)

a級+b級≥50或a級≥25%精子

精子濃度（spermdensity）和總數(shù)1.粗略估計法2.顯微鏡計數(shù)法(手工法)①血細胞計數(shù)板法

②Makler精子計數(shù)板法3.計算機輔助精液分析精子計數(shù)血細胞計數(shù)板法

原理：

碳酸氫鈉破壞精液的粘稠性，甲醛固定精子，稀釋后充入計數(shù)池內(nèi)計數(shù)。

一次排出精子總數(shù)＝精子濃度×精液量精子濃度(20-200)×109/L

精子總數(shù)(40－60)×106精子形態(tài)觀察

【檢測原理】1.濕片法：高倍鏡觀察

2.染色法：涂薄片

干燥、固定

染色

油鏡觀察

【方法學評價】1.濕片法：簡便、快速，結(jié)果偏差大。

2.染色法：復雜、費時，準確可靠，重復性好，

為WHO推薦方法。精子形態(tài)判斷標準

正常形態(tài)：似蝌蚪狀，分頭、體、尾①頭部正面呈卵圓形，側(cè)面呈扁平梨形，頭部長4.0～5.5μm，寬2.5～3.0μm②體部輪廓直而規(guī)則，與頭部縱軸成一直線，長5-7μm，寬1μm③尾部細長，外觀規(guī)則而不卷曲，長50-60μm精子形態(tài)判斷標準

異常形態(tài)：頭、頸、尾、聯(lián)合缺陷體

臨床意義：正常精液異常精子＜20%，若異常精子＞50%為不育原因之一?；瘜W檢查一、精漿果糖(seminalplasmafructose)

陰性：先天性精囊缺如降低：精囊炎二、精漿乳酸脫氫酶-X(LDH-X)降低：睪丸萎縮，少精或無精患者三、精漿α-葡糖苷酶對鑒別輸精管阻塞和睪丸生精障礙所致的無精癥有一定意義。四、精漿酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)

減低：前列腺炎增高：前列腺癌，前列腺肥大五、精子頂體酶(acrosomalenzyme)

與不育指標相關(guān)六、精漿鋅：減低：生育力下降、生殖器官發(fā)育不良

化學檢查習題：（）正常精液液化時間不超過：

A、10minB、20minC、30min

D、60min（）精液中提供精子活動力能量來源的是：

A、蔗糖

B、葡萄糖

C、果糖

D、糖原

血栓與止血基礎(chǔ)

出血（bleeding)止血（hemostasis)

凝血（bloodcoagulation)

血栓形成（thrombosis)

血栓（thrombus)

出血（bleeding）血管損傷后，血液自血管內(nèi)溢出或流出止血（hemostasis）自發(fā)的阻止出血和維持體內(nèi)血液呈溶膠狀態(tài)的一系列過程凝血（bloodcoagulation）血液由溶膠狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀態(tài)血栓形成（thrombosis）在某些因素作用下，活體血管內(nèi)或心臟中形成纖維蛋白塊或出現(xiàn)血凝塊的過程，所產(chǎn)生的纖維蛋白塊或出現(xiàn)血凝塊成為血栓出血和止血血液從破損的血管壁流出的過程，謂之出血。出血后的及時止血是機體維持生命的重要功能。出血后的止血過程是快速的，局限性的。止血的性質(zhì)：血液凝固，堵塞住血管破損的部位，防止血液進一步丟失。影響血液凝固的6個方面1.血管壁2.血小板系統(tǒng)3.凝血系統(tǒng)4.抗凝血系統(tǒng)5.纖維蛋白溶解系統(tǒng)6.血液流變學系統(tǒng)各系統(tǒng)相互制約處于動態(tài)平衡保持血液流通一、血管壁的作用：⑴止血作用：①血管收縮；②激活血小板；③激活凝血系統(tǒng)；④局部血粘度的增高。⑵血管壁又有抗血栓形成的能力。

血管壁的止血作用1.血管壁的結(jié)構(gòu)與調(diào)控（1）結(jié)構(gòu)：內(nèi)層：內(nèi)皮細胞（肝素、vWF、tPA、TM、AT-Ⅲ）中層：外層：（2）調(diào)控：神經(jīng)、體液、內(nèi)皮細胞內(nèi)皮系統(tǒng)：最初的保護血管內(nèi)壁有一層內(nèi)皮細胞。完整的內(nèi)皮細胞是防御出血和血栓形成的最初防線。內(nèi)皮細胞一旦損傷，易引發(fā)血栓形成。正常的血管內(nèi)皮細胞1.血小板的粘附功能機制：直接粘附血管內(nèi)皮下成分機制：依賴于vWF、血小板膜糖蛋白

2.血小板聚集功能血小板血小板活化血小板聚集3.血小板釋放功能溶酶體、a-顆粒和致密顆粒內(nèi)容物參與凝血、溶栓和組織修復4.血小板促凝功能血小板能與血漿凝血蛋白反應(yīng)的過程5.血塊收縮功能釋放血小板收縮蛋白6.維護血管內(nèi)皮的完整性凝血酶、ADP血小板膜糖蛋白血小板的止血作用Ca2+、Ⅰ內(nèi)皮下組織暴露血小板粘附血小板聚集血小板釋放纖維蛋白形成堅固的凝血塊ADP血小板的促凝血塊收縮凝血系統(tǒng)正常止血的兩個階段一期止血：血小板粘附、血小板聚集以及血管收縮二期止血：血漿凝血因子活化，形成纖維蛋白凝塊止血機制血管損傷內(nèi)皮下組織暴露血小板粘附初期止血血小板聚集凝血酶形成血小板釋放反應(yīng)止血栓形成纖維蛋白形成二期止血加固止血栓止血栓收縮血凝塊形成ADP、TxA2三、凝血因子作用及血液凝固機制凝血系統(tǒng)：凝血因子的活化。功能：是血栓形成的物質(zhì)基礎(chǔ)。內(nèi)容：凝血因子目前包括14個，包括12個經(jīng)典的凝血因子以及激肽系統(tǒng)的激肽釋放酶原（PK）和高分子量的多肽（HMWK），凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ。凝血因子及血液凝固機制凝血因子的特性正常血液中除組織因子（因子Ⅲ）分布在全身組織外，其余均可在血漿找到除Ca2+（因子Ⅳ）外，均為蛋白質(zhì)。凝血因子的種類依賴維生素K的凝血因子：Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ接觸凝血因子：Ⅻ、Ⅺ、激肽釋放酶原（PK）及高分子量激肽原（HMWK）對凝血酶敏感的凝血因子：Ⅰ、Ⅴ、Ⅷ、ⅩⅢ其他凝血因子組織因子（Ⅲ）、因子Ⅳ（Ca2+）三、凝血因子作用及血液凝固機制：①外源性凝血途徑：由組織因子啟動的凝血過程稱為外源性凝血途徑，參與的凝血因子少（Ⅲ、Ⅶ、Ca2+），反應(yīng)速度快（15秒以內(nèi)）。②內(nèi)源性凝血途徑：內(nèi)源性凝血從因子Ⅻ激活開始。參與的因子還有激肽酶原、激肽酶、高分子激肽原（HMWK）、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ca2+、PF3等。③凝血的共同途徑：凝血酶原激活物使凝血酶原激活為凝血酶。凝血酶再激活纖維蛋白原為纖維蛋白，凝血即告完成。

血液抗凝系統(tǒng)抗凝血系統(tǒng)：抗凝血蛋白質(zhì)（酶）對凝血因子的滅活功能：抵抗凝血系統(tǒng)，滅活活化凝血因子。內(nèi)容：①細胞抗凝作用：單核巨噬細胞系統(tǒng)，肝細胞和血管內(nèi)皮細胞②體液抗凝作用

抗凝血酶（AT）、蛋白C系統(tǒng)、組織因子途徑抑制物、肝素輔因子Ⅱ等抗凝血酶（ATⅢ）肝、內(nèi)皮細胞分泌的抑制凝血因子（Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅱ）及蛋白酶（纖溶酶、激肽釋放酶），肝素加強抗凝血酶活性蛋白C系統(tǒng)

微循環(huán)抗血栓形成的主要血液凝固調(diào)節(jié)物質(zhì)組織因子途徑抑制物

抑制Ⅹ因子纖維蛋白溶解（纖溶）系統(tǒng)的作用：溶解體內(nèi)或體外的凝血塊。纖溶酶原被激活，成為纖溶酶，纖溶酶作用于纖維蛋白（原），使之降解成多種肽鏈碎片。血液纖溶系統(tǒng)功能：在血栓形成后，溶解血栓。機制：血液凝塊形成，激活纖維蛋白溶解系統(tǒng)水解纖維蛋白和纖維蛋白原。治療：溶栓治療的理論基礎(chǔ)即將纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶組成：纖溶酶原激活物、纖溶酶原、纖溶酶及纖溶抑制物

纖溶酶原和纖溶酶

裂解纖維蛋白原和纖維蛋白，分解凝血因子纖溶酶原激活物

組織纖溶酶原激活物（t-PA）：

體內(nèi)最強烈的纖溶酶原激活物

尿激酶型纖溶酶原激活物（u-PA）纖溶抑制物

纖維蛋白的溶解機制纖溶酶原激活途徑

內(nèi)激活途徑：內(nèi)源凝血途徑中的某些因子（Ⅻ）繼發(fā)纖溶的理論基礎(chǔ)外激活途徑：體內(nèi)合成的某些激活物（tPA、uPA）原發(fā)纖溶的理論基礎(chǔ)

外源激活途徑：藥物（鏈激酶、尿激酶）溶栓治療的基礎(chǔ)纖維蛋白降解機制纖維蛋白原

可溶性纖維蛋白

交聯(lián)纖維蛋白凝血酶ⅫⅠ纖溶酶纖溶酶纖溶酶D二聚體X’Y‘DE’等X‘Y’DE’等XYDE等兩個系統(tǒng)間，動態(tài)平衡。凝血系統(tǒng)：過度活化易導致血栓形成。凝血系統(tǒng)：過度抑制易導致出血?？鼓到y(tǒng)：過度活化易導致出血?？鼓到y(tǒng)：過度抑制易導致血栓形成。毛細血管脆性試驗（CFT）出血時間BT血小板計數(shù)PLT血塊收縮時間CRT凝血時間測定CT血漿凝血酶原時間PT活化部分凝血活酶時間APTT凝血酶時間TT纖維蛋白原降解產(chǎn)物FDPD-二聚體測定DD第二節(jié)血栓與止血常用實驗出血時間（BT）測定

【原理】

將皮膚毛細血管刺破后，出血自然停止所需的時間（初期止血時間）。其長短主要受血小板質(zhì)、量，血管壁完整性、收縮力的影響；其次與凝血因子Ⅷ和vWＦ有關(guān)。

【方法及評價】

出血時間測定器法首選方法

【參考值】

測定器法：6.9±2.1min,超過9min為異常。

【質(zhì)量控制】1、不服用對管壁和血小板有影響的藥物2、采血部位應(yīng)注意保暖3、穿刺時應(yīng)避開淺表靜脈、疤痕和病變皮膚4、血液應(yīng)自動流出，濾紙吸去血液時，避免與傷口接觸，更不能擠壓傷口。【臨床意義】1.BT延長①血小板顯著減少：如原發(fā)性及繼發(fā)性血小板減少性紫癜。②血小板功能不良：如血小板無力癥、巨大血小板綜合征。③毛細血管壁異常：如維生素C缺乏癥、遺傳性出血性毛細血管擴張癥。④某些凝血因子嚴重缺乏如血管性血友病、DIC。2.BT縮短主要見于血栓前狀態(tài)及血栓形成性疾病3.術(shù)前篩查及用藥監(jiān)控不能區(qū)分血管功能和血小板質(zhì)和量的缺陷，重復性差血管退縮試驗CRT【原理】在一定條件下，按規(guī)定的時間觀察血塊收縮情況或計算血塊的收縮率，這主要與血小板的數(shù)量和功能有關(guān)?！痉椒霸u價】定性法：定量法：全血定量法：與血小板功能障礙程度不一致血漿定量法：富含血小板的血漿中加入Ca或凝血酶，去除血漿凝塊，測定析出血清體積占PRP體積的百分比參考值全血定量法：48%-64%

血漿定量法：大于40%以上[臨床意義]血塊收縮不佳或完全不收縮：

血小板數(shù)量異常：血小板減少性紫癜（尤其血小板數(shù)＜50×109/L）血小板功能異常：血小板無力癥纖維蛋白原、凝血酶原嚴重減少

血塊收縮過度：見于先天性凝血因子ⅩⅢ缺乏癥、嚴重貧血

凝血時間測定（clottingtime，CT）

【原理】

靜脈血放在玻璃試管中，觀察自采血開始至血凝所需要的時間稱為凝血時間。主要反映內(nèi)源性凝血過程第一期有無異常，與Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子關(guān)系最大?！痉椒霸u價】

玻璃試管法硅管法塑料試管法

【參考值】

4～12min（試管法）。

【質(zhì)量控制】1、抽血必須順利，不應(yīng)有溶血。2、實驗溫度應(yīng)保持恒定一致3、被APTT取代【臨床意義】

①凝血時間延長見于血漿Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子嚴重減少；凝血酶原嚴重減少；纖維蛋白原嚴重減少；DIC后期。

②縮短見于血液呈高凝狀態(tài)時，如DIC早期、腦血栓形成或心肌梗死。

活化部分凝血活酶時間測定

（activatedpartialthromboplastintime，APTT）

【原理】活化部分凝血活酶時間測定是在受檢血漿中加入APTT試劑（接觸因子活化劑和部分磷脂）和Ca2+后，觀察其凝固時間。反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)較好的篩選試驗。

【方法及評價】手工法：結(jié)果不易標準化儀器法：自動化程度高、參數(shù)多、抗干擾、速度快【參考值】

男性：37+-3.3秒，女性：37.5+-2.8秒較正常對照延長10秒以上為異常?！举|(zhì)量控制】1、標本應(yīng)及時檢測，是最遲不得超過2小時。2、離心3000r/min,10min，除去血小板。3、白陶土規(guī)格不一，參考值不一樣?！九R床意義】

同凝血時間，但較其試管法敏感，正逐漸取代凝血時間測定。APTT監(jiān)測肝素的首選指標。血漿凝血酶原時間（prothrombin

time,PT）

【原理】

在被檢血漿中加入足夠的組織因子（Ⅲ因子如兔腦或胎絨浸液）和適量的鈣離子后，血漿凝固所需要的時間。外源性凝血活性的檢查。

【方法及評價】ISI（國際敏感指數(shù)）=標準品組織凝血活酶（PT）與每批組織凝血活酶（PT）校正曲線的斜率INR（國際標準化比值）=（PT病人/PT正常）ISI【參考值】

11～13s。應(yīng)有正常對照，超過正常對照3s以上則有病理意義?！举|(zhì)量控制】1、采血應(yīng)順利，避免溶血，凝固，3000r/min，離心10min去除血小板。2、1小時內(nèi)測試完畢，4度冰箱保存不超過4h。3、選擇ISI值小的凝血活酶。4、雙份測定，正常對照?！九R床意義】

1.凝血酶原時間延長見于：①先天性:Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ減少及纖維蛋白原減少。②后天性:嚴重肝病、維生素K缺乏、

DIC后期，使用雙香豆素抗凝時。2.PT縮短：主要見于血液高凝狀態(tài)時，如DIC早期、腦血栓形成、心肌梗死等。3.INR用于監(jiān)測口服抗凝藥的首選指標血漿凝血酶時間（thrombin

time，TT）

【原理】

在待檢血漿中加入“標準化”的凝血酶溶液后，至血漿凝固所需的時間，抗凝物質(zhì)增多，時間延長。

【參考值】

16～18s。應(yīng)有正常對照，超過正常對照3s以上則有病理意義。

【質(zhì)量控制】1、待測血漿要新鮮。2、實驗前凝血酶要標準化。3、每次終點的判斷標準要統(tǒng)一。4、肝素或EDTA-Na2不宜作為抗凝劑。【臨床意義】

①TT延長:抗凝物質(zhì)增多；低（無）纖維蛋白原血癥

②TT縮短:常見于血樣本中有微小凝板或Ca2+

存在。

③作為使用鏈激酶、尿激酶時的監(jiān)護指標。血漿纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)g）【原理】

凝血酶比濁法：在受檢血漿中加入一定量凝血酶，使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白，通過比濁原理計算纖維蛋白原的含量。

【方法及評價】在受檢血漿中加入一定量的凝血酶，使血漿中的Fg轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。凝固時間與纖維蛋白原的含量呈負相關(guān)。此法操作簡單，敏感性和特異性較高，是目前常用的測定方法?！緟⒖贾怠?～4g/L?！九R床意義】

①增高見于血栓前狀態(tài):急性心肌梗死、急性腎炎、糖尿病、多發(fā)性骨髓瘤、休克、大手術(shù)后、妊娠高血壓綜合征、惡性腫瘤等。②減低見于DIC、重癥肝炎和肝硬化等。血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定纖維蛋白原和纖維蛋白受到纖溶酶作用后，形成多種肽鏈碎片，如片段A、B、C、X、Y、D、E等，統(tǒng)稱為纖維蛋白降解產(chǎn)物〔FDP〕。

【原理】降解產(chǎn)物具有纖維蛋白原的抗原決定簇，可獲得抗FDP抗體，利用免疫方法可檢測血漿中的FDP含量【方法及評價】紅細胞凝集抑制試驗參考方法膠乳凝集試驗常用方法【參考值】

膠乳凝集法：＜5mg/L?！九R床意義】

FDP增高是體內(nèi)纖溶亢進的標志，但不能鑒別原發(fā)和繼發(fā)性。增高見于原發(fā)性纖溶癥；繼發(fā)性纖溶(DIC，惡性腫瘤，急非淋M3，各種栓塞，器官移植的排斥反應(yīng)，心、肝、腎疾病，溶栓治療)。

血漿D-二聚體測定【原理】

在繼發(fā)性纖溶時，纖維蛋白被纖溶酶水解，先生成碎片YD/DY、YY/DXD、DD/E等中間產(chǎn)物，再進一步被纖溶酶分解為DD（D-二聚體）和E片段。繼發(fā)性纖溶的標志。【方法及評價】膠乳凝集試驗用于定性測定ELISA法全自動血液凝固測定儀【參考值】

膠乳凝集法為陰性；ELISA法小于400μg/L。

【臨床意義】

繼發(fā)性纖溶癥（如DIC、惡性腫瘤、各種栓塞，心肝腎疾病等）為陽性或增高；原發(fā)性纖溶癥為陰性或不升高，本試驗為鑒別原發(fā)與繼發(fā)纖溶癥的重要指標。FDP和D-D篩選試驗的結(jié)果分析

1.FDP和D-D均正常：表示纖溶活性正常，表明臨床的出血癥狀，與原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶無關(guān)。

2.FDP陽性伴D-D陰性：表示只有纖維蛋白原被降解，而纖維蛋白未被降解，見于原發(fā)性纖溶。

3.FDP陰性伴D-D陽性：表示只有纖維蛋白被降解，而纖維蛋白原未被降解，見于血栓栓子自發(fā)性溶解。

4.FDP和D-D均陽性：表示纖維蛋白原和纖維蛋白同時被降解，見于繼發(fā)性纖溶，如DIC和溶栓治療。毛細血管脆性試驗（CFT）出血時間BT血小板計數(shù)PLT血塊收縮時間CRT凝血時間測定CT血漿凝血酶原時間PT活化部分凝血活酶時間APTT凝血酶時間TT纖維蛋白原降解產(chǎn)物FDPD-二聚體測定DD血管壁和血小板凝血機制是否存在纖溶亢進和抗凝物質(zhì)血栓形成前后纖溶系統(tǒng)血凝儀及臨床應(yīng)用

全自動血液凝固測定法使用的全自動血液凝固測定儀，采用多參數(shù)檢定質(zhì)控，有多次質(zhì)量控制的能力，具有加樣、預溫、檢測、報告結(jié)果全部自動化及快速、準確、定量的優(yōu)勢。其特點是：①測定運轉(zhuǎn)速度快，單位時間內(nèi)檢測的標本數(shù)多，使離體血標本在最短時間內(nèi)，即血漿凝血因子活性最微小量改變前，測定完畢；②檢測方法多樣，具有生物（凝固）法、生物化學（呈色）法和免疫法；③檢測項目的任意組合和檢測隨機性；④先進的軟件系統(tǒng)有利于檢測數(shù)據(jù)的處理和檢測參數(shù)的設(shè)置；⑤檢測成本低（使用微小量試劑）和取血量少；⑥抗凝血漿中所含食糜或脂肪混濁或溶血或深淺不一黃疸等物質(zhì)的干擾；⑦貯存試劑的部位具有冷藏功能；⑧測定儀對部分常規(guī)檢測項目的試劑已提前預先制定標準曲線，一旦起用這類試劑后，預定標的標準曲線立即生效；⑨全部標準曲線均具最優(yōu)化的直線穩(wěn)定性；⑩針對不同濃度的血樣本，測定儀進行自動在線稀釋。實驗方法的選擇血液標本的采集與處理檢測試劑的選擇儀器的選擇和校準操作過程的質(zhì)量控制血凝儀及臨床應(yīng)用標本的采集抗凝劑的選擇及使用標本的運送和保存標本的分離血栓與止血的檢測主要用于血小板量與質(zhì)異常、凝血障礙、血栓前狀態(tài)和血栓性疾病的臨床診斷、鑒別診斷、病情觀察、療效評價和預后判斷，也用于抗栓治療的監(jiān)測。血栓與止血檢查方法繁多，可先選擇簡單易行的篩選試驗，再逐步做確診試驗。血栓與止血檢查進展

（一）一期止血缺陷的選擇

一期止血缺陷指血管壁和血小板異常所致的出血性疾病。

1．篩選試驗

血小板計數(shù)(Plt)和出血時間(BT)

篩選試驗

（1）Plt和BT都正常：多見于血管壁異常所致的出血性疾病，如過敏性紫癜、單純性紫癜、遺傳性出血性毛細胞血管擴張癥和其他血管性紫癜。（2）Plt減少，BT延長：多數(shù)為血小板減少性紫癜，如原發(fā)性或繼發(fā)性。

（3）Plt增多，BT延長：多數(shù)為繼發(fā)性血小板增多癥。（4）Plt正常，BT延長：見于：①血小板功能異常：血小板無力癥、；②某些凝血因子缺乏：低（無）纖維蛋白原癥、血管性血友病。2．診斷試驗

血小板減少:骨髓穿刺涂片、骨髓活檢、血小板壽命測定、血小板相關(guān)免疫球蛋白測定等。

血小板功能異常:血小板粘附試驗、血小板聚集試驗、血塊收縮時間、血漿β血小板球蛋白、血小板第4因子和血小板第3因子有效性測定等。

血小板聚集實驗在富血小板血漿中，加入致聚劑，血小板發(fā)生聚集，血漿濁度減低，透光度增加。將此光濁度變化通過光電池用電訊號方式記錄于圖紙上，形成血小板聚集曲線。血小板聚集曲線反映了血小板聚集程度和速度。（二）二期止血缺陷的選擇

二期止血缺陷指凝血因子缺乏和抗凝物質(zhì)所致的出血性疾病。

1．篩選試驗

APTT和PT（1）APTT和PT都正常：除正常人外，僅見于先天性和獲得性因子ⅩⅢ缺乏癥。（2）APTT延長，PT正常：多數(shù)見于內(nèi)源性凝血途徑中1個或幾個凝血因子缺乏。（3）APTT正常，PT延長：多數(shù)見于外源性凝血途徑缺陷。（4）APTT和PT都有延長：共同凝血途徑缺陷，以及肝臟疾病、應(yīng)用肝素等。

2．診斷試驗?zāi)蜃尤狈蛇x用糾正試驗、凝血因子促凝活性等測定。血漿因子ⅡⅤⅦⅩ促凝活性檢測受檢血漿分別于乏因子ⅡⅤⅦⅩ基質(zhì)血漿混勻，在家兔腦粉浸出液和鈣液，分別作血漿凝血酶原時間測定，將受檢者血漿測定結(jié)果與正常人新鮮血漿比較，計算因子促凝活性。血漿因子ⅧⅨⅪ促凝活性檢測受檢血漿分別于乏因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ基質(zhì)血漿白陶土腦磷脂懸液和鈣液，分別記錄開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需的時間，在各自的標準曲線中，分別計算出血漿中各因子相當于正常人的百分率。抗凝蛋白檢驗血漿蛋白C活性檢驗受檢血漿中加入蛋白C激活劑，PC被活化后作用于發(fā)色底物，釋出顯色集團，顯色深淺與PC含量平行。臨床意義：易栓癥尋找動靜脈血栓的病因(三)纖維蛋白溶解綜合征包括原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶兩種。1．篩選試驗

FDP和D-二聚體

3．彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）檢查法DIC是一種多種病因所引起的血栓止血病理生理改變的一個中間環(huán)節(jié)。