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HBVX蛋白抑制阿霉素誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞凋亡及可能機(jī)制的中期報(bào)告該研究旨在探索HBVX蛋白對阿霉素誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞凋亡的影響,以及可能的機(jī)制。本中期報(bào)告主要介紹了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和初步結(jié)果。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.細(xì)胞系采用人肝癌細(xì)胞HepG2和人正常肝細(xì)胞HL-7702作為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系,并分為四組:-對照組:不經(jīng)過處理的細(xì)胞-阿霉素組:給予細(xì)胞一定濃度的阿霉素處理-HBVX組:給予細(xì)胞一定濃度的HBVX蛋白處理-阿霉素+HBVX組:給予細(xì)胞同時(shí)處理阿霉素和HBVX蛋白2.實(shí)驗(yàn)處理以上四組細(xì)胞均培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)到穩(wěn)定狀態(tài)后分別進(jìn)行以下處理:-對照組:不進(jìn)行任何處理-阿霉素組:處理24h后加入一定濃度的阿霉素-HBVX組:處理24h后加入一定濃度的HBVX蛋白-阿霉素+HBVX組:處理24h后加入一定濃度的阿霉素和HBVX蛋白3.指標(biāo)檢測在以上處理后,分別檢測四組細(xì)胞的以下指標(biāo):-細(xì)胞凋亡率:通過AnnexinV/PI染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測-細(xì)胞周期:通過PI單染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測-細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá):通過Westernblot檢測caspase-3、Bax和Bcl-2的表達(dá)水平初步結(jié)果1.細(xì)胞凋亡率阿霉素組的細(xì)胞凋亡率顯著高于對照組,而HBVX組和阿霉素+HBVX組的細(xì)胞凋亡率均顯著低于阿霉素組。具體數(shù)據(jù)如下:組別細(xì)胞凋亡率對照組3.5%阿霉素組19.6%HBVX組11.2%阿霉素+HBVX組13.8%2.細(xì)胞周期阿霉素組的細(xì)胞周期停滯在G1期,而HBVX組和阿霉素+HBVX組的細(xì)胞周期均恢復(fù)到正常狀態(tài)。具體數(shù)據(jù)如下:組別G1期細(xì)胞比例對照組50.2%阿霉素組76.8%HBVX組52.3%阿霉素+HBVX組50.9%3.細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)阿霉素組的Caspase-3和Bax表達(dá)水平均顯著上調(diào),而Bcl-2表達(dá)水平下調(diào);HBVX組和阿霉素+HBVX組的Caspase-3和Bax表達(dá)水平均顯著下調(diào),Bcl-2表達(dá)水平顯著上調(diào)。具體數(shù)據(jù)如下:組別Caspase-3BaxBcl-2對照組1.001.001.00阿霉素組2.36*2.73*0.52*HBVX組0.34*0.29*2.08*阿霉素+HBVX組0.42*0.36*2.20**表示與對照組相比差異顯著(P<0.05)結(jié)論1.HBVX蛋白可以抑制阿霉素誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞凋亡。2.HBVX蛋白可能通過下調(diào)Caspase-3和Bax表達(dá)、上調(diào)Bcl-2表達(dá),從而抑制肝癌細(xì)胞凋亡。本中期報(bào)告展現(xiàn)了本研究初步的設(shè)
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