IT-ISJ標(biāo)記在加工蘋果品種遺傳關(guān)系研究中的應(yīng)用的中期報(bào)告

IT-ISJ標(biāo)記在加工蘋果品種遺傳關(guān)系研究中的應(yīng)用的中期報(bào)告摘要：本文介紹了IT-ISJ標(biāo)記在加工蘋果品種遺傳關(guān)系研究中的應(yīng)用。IT-ISJ標(biāo)記是一種新型的分子標(biāo)記，具有優(yōu)良的遺傳多態(tài)性和靈敏度。本研究采用PCR技術(shù)對(duì)27個(gè)蘋果品種的IT-ISJ標(biāo)記進(jìn)行分析，并利用數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行聚類分析。結(jié)果表明：IT-ISJ標(biāo)記在加工蘋果品種間親緣關(guān)系研究中有較高的應(yīng)用價(jià)值。關(guān)鍵詞：IT-ISJ標(biāo)記；加工蘋果；遺傳關(guān)系；聚類分析引言蘋果是我國的主要水果作物之一，其果肉纖維細(xì)膩、口感嫩滑、味道甜美等特點(diǎn)深受人們的喜愛。當(dāng)前，我國加工蘋果產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，但存在品種單一、生產(chǎn)水平低下等問題。因此，加強(qiáng)對(duì)各品種間遺傳關(guān)系的研究，為其優(yōu)化配對(duì)提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)于提高加工蘋果產(chǎn)業(yè)的質(zhì)量和效益具有重要意義。分子標(biāo)記在現(xiàn)代分子生物學(xué)和遺傳學(xué)研究中廣泛應(yīng)用，其中IT-ISJ標(biāo)記具有廣泛適用性、遺傳多態(tài)性高等優(yōu)點(diǎn)，成為目前研究蘋果品種遺傳關(guān)系的常用方法之一。材料與方法1、材料27個(gè)加工蘋果品種，PCR試劑盒，DNase，試劑酒精2、方法2.1DNA提取蘋果果實(shí)選取新鮮、無污染的果實(shí)進(jìn)行分析。將蘋果果肉切碎，加入10mMTris-HCl緩沖液，pH8.0，1mMEDTA，pH8.0和2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浸泡混勻10min,4000轉(zhuǎn)/min旋轉(zhuǎn)10min,繼而加入5%DNase酶溶液浸泡30min，4℃下存放15min，離心取上清液，加入等體積的冷酒精，在-20℃下保存過夜，脫水過濾，干燥后加入TE緩沖液溶解。2.2PCR擴(kuò)增選取IT-ISJ標(biāo)記，設(shè)計(jì)引物，PCR反應(yīng)具體條件參考以下表格：表1PCR反應(yīng)條件程序溫度（℃）時(shí)間1955min29430s35530s47230s57210min64無限制2.3電泳分析將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析，得出PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度，進(jìn)行圖譜處理和聚類分析。結(jié)果與分析本研究選取了27個(gè)加工蘋果品種，共擴(kuò)增出44個(gè)IT-ISJ標(biāo)記，在PCR反應(yīng)后得出了一系列長(zhǎng)度在200-1500bp左右的PCR產(chǎn)物。對(duì)此結(jié)果進(jìn)行聚類分析，得出以下結(jié)論：（1）27個(gè)蘋果品種可分為三大類，其中第一類有15個(gè)品種，第二類有8個(gè)品種，第三類有4個(gè)品種。（2）第一類品種的遺傳距離較近，第二類品種的遺傳距離較遠(yuǎn)，第三類品種的遺傳距離較近。（3）IT-ISJ標(biāo)記可以用于加工蘋果品種間親緣關(guān)系的研究。結(jié)論本研究證明了