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文檔簡介
96.1.簡潔說明革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌在細(xì)胞壁的化學(xué)組成和構(gòu)造方面的主要不同點(diǎn)。答:在化學(xué)組成上,革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖含量很高30-9和蛋白質(zhì),革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖含量很低〔5-2,不含有垣酸,脂質(zhì)和蛋白質(zhì)含量較高。在構(gòu)造方面,革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁厚度大〔20-80納米〕均勻,化學(xué)組分簡潔,革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁薄,層次較多,有外膜,成分較簡潔,肽聚糖層很薄〔僅2-3納米,故機(jī)械強(qiáng)度較革蘭氏陽性細(xì)菌弱。某制藥長生產(chǎn)林可霉素該廠為了提高質(zhì)量,請(qǐng)你從微生物遺傳變異的原理為該廠設(shè)計(jì)獲得高產(chǎn)菌株的試驗(yàn)方案。答:見教材218頁產(chǎn)量突變株的篩選,瓊脂塊培育法的操作程序某些微生物能在2C化合物為唯一碳源的培育基上生長,它是通過哪些途徑得到細(xì)胞生長3C以上的化合物,如核糖等?答:乙醛酸循環(huán)途徑,2C化合物如乙酸+CoACoA+草酰乙酸→檸檬酸,走TCA循環(huán)途徑生成草酰乙酸,在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸,抑制1、3二個(gè)限速步驟,逆EMPHMP菌種退化的根本緣由是什么?常用的菌種保存方法有哪幾種?答:有關(guān)基因的負(fù)突變。斜面低溫保藏法、礦油保藏法、載體吸附保藏法、真空冷凍枯燥保藏法、液氮冰箱保藏法、寄主保藏法用何法可以獲得耐終產(chǎn)物反響阻遏的突變株?答:見教材145頁〔一〔二〔三〕點(diǎn)97.1應(yīng)實(shí)行什么措施?腐胺〔丁二胺〕在細(xì)胞內(nèi)是如何形成的?它在細(xì)胞內(nèi)有何生理意義?生尸胺、腐胺,對(duì)人有毒,不能食用,但可以降低血壓。什么叫抗代謝物?簡述磺胺藥的作用機(jī)制。180頁98.2.產(chǎn)生養(yǎng)分缺陷突變株的原理是什么?簡述篩選養(yǎng)分缺陷型突變株的方法,并舉一例說明其在生產(chǎn)上的應(yīng)用狀況。已答過99.1.為什么說土壤是人類最豐富的“菌種資源庫”?246頁土壤所含水分本身是一種淡薄的鹽類溶液,其中含有各種有機(jī)和無機(jī)氮素及各種鹽類,養(yǎng)基的。土壤中的固體局部含有1—15%的有機(jī)物質(zhì)成分,而且每年有大量的動(dòng)物尸體、排空氣容積的7—8%。土壤本身一年四季溫度變化不大,更為微生物在土壤中生長生殖制造了有利條件。2.某發(fā)酵工廠消滅發(fā)酵特別狀況,你如何推斷它是否因感染噬菌體而引起?并設(shè)計(jì)一個(gè)解決的方案。答:12、PH34、產(chǎn)生大量氣泡,有時(shí)發(fā)酵液呈現(xiàn)粘稠狀,可拔絲5、代謝產(chǎn)物削減或停頓6、鏡檢可覺察菌體顯著削減,革蘭氏染色后呈現(xiàn)紅色碎片。78、倒平板培育看到噬菌斑解決方案:1、更換菌種2、殘?zhí)禽^高時(shí),提高溫度85—95℃,10分殺死噬菌體,補(bǔ)充玉米漿34、加藥物抑制〔符合食品和醫(yī)藥衛(wèi)生〕4.有的微生物能在以乙酸為唯一碳源的培育基中生長,試闡述它怎樣利用乙酸來合成己糖和戊糖。96.32023.2什么是Ames答:見教材215致癌性成正比,超過95%的致癌物質(zhì)對(duì)微生物有誘變作用,而90%以上的非致癌物質(zhì)對(duì)微生物沒有誘變作用。2023.3什么叫反響抑制和反響阻遏作用?它們?cè)诎l(fā)生氣制上有何不同?〔通常是催化第一步反響的酶〕活性的作用;一般針對(duì)緊接代謝途徑支點(diǎn)后的酶反響阻遏是末端代謝產(chǎn)物阻擋整個(gè)代謝途徑酶的合成作用,往往影響從支點(diǎn)到終點(diǎn)的酶?;饔檬艿接绊?,從而調(diào)整酶的反響速度及代謝過程。反響阻遏作用用操縱子學(xué)說解釋。在阻遏的操縱子體系中,調(diào)整基因R產(chǎn)生的阻遏物基因O結(jié)合,于是轉(zhuǎn)錄作用被抑制,酶合成自然停頓。2023.4什么叫挨次歸納法?他在爭論生物合成過程中有何用途?用什么方法鑒別某菌株三種不同的精氨酸基因突變型A、B、C相鄰在不含精氨酸培育基上的生長譜?假設(shè)基因突變型A在培育基內(nèi)積存氨基酸AA1,B積存AA2,C積存AA3,試斷定圖中三種精氨酸基因突變株的阻斷挨次。2023.2在發(fā)酵過程中如何推斷發(fā)酵液是否染了雜菌?答:1、溶解氧水平特別變化2、CO2含量上升3、耗糖速度加快4、代謝產(chǎn)物削減或停頓5、6、平板劃線或斜面培育是否有雜菌2023.1.試述自發(fā)突變的機(jī)制。答:自發(fā)突變:生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變可由:①背景輻射和環(huán)境因素;②微生物自身有害代謝產(chǎn)物DNA復(fù)制進(jìn)程中堿基配對(duì)錯(cuò)誤引起2023,2什么叫抗代謝物?簡述TWP(磺胺增效劑)的作用機(jī)理?;钚缘幕瘜W(xué)物質(zhì)TMP可以抑制二氫葉酸復(fù)原酶,可使二氫葉酸無法復(fù)原成四氫葉酸,同時(shí)磺胺與PABA構(gòu)造類似,兩者發(fā)生競爭性拮抗作用,這樣,凡能利用二氫蝶酸和PABA合成葉酸的細(xì)菌就無法合成葉酸,生長受到抑制。2023.1.何為微生物的同步生長?如何獲得同步生長的微生物〔各舉一例〕?同步生長:使群體中的全部個(gè)體細(xì)胞盡可能地處于同樣細(xì)胞生長和分裂期中;方法:①環(huán)境條件誘導(dǎo)法,如藻類的光照、黑暗把握,舉例溫度調(diào)整法②機(jī)械篩選法,如用過濾法收集同步生長的細(xì)胞2023.2如何從野生型和養(yǎng)分缺陷型混合菌液中檢出養(yǎng)分缺陷菌株(至少兩種方法)?并說明原理。以限量補(bǔ)充培育法;養(yǎng)分缺陷型菌株在根本培育基上生長受限逐個(gè)檢出法:養(yǎng)分缺陷型菌株在根本培育基上生長受限而在完全培育基上則可生長影印平板法:同逐個(gè)檢出法2023.3.試論述組成型突變株的獲得及富集方法.1生長緩慢的親株被恒化器漸漸淘汰E.coli在低濃度乳糖的恒化器。2將菌株輪番在有、無誘導(dǎo)物的培育基中培育,在第一個(gè)生長周期在含葡萄糖的培育基中極少量的組成型突變株與占確定優(yōu)勢的親株將以同樣的速率生長勢3使用誘導(dǎo)性很差的基質(zhì),如將經(jīng)誘變的群體生長在移種能作為碳源,但不能作為誘導(dǎo)物或其誘導(dǎo)性很差的基質(zhì)上,便可篩選出,組成型突變株,例如:4生長,因酶的誘導(dǎo)受抑制,只有那些不需要誘導(dǎo)物的突變株才能生長;5提高篩選效率的方法,盡管用上述方法能富集組成型突變株,但突變株的數(shù)量只是比原來相對(duì)提高很多,但與未突變株比還是占少數(shù)2023.1.在大腸桿菌高密度培育過程中,如何讓抑制其代謝過程中產(chǎn)生的乙酸對(duì)生長抑制?答:為防止有害代謝產(chǎn)物乙酸的生成,可承受自然培育基,降低培育基的pH,以甘油代替葡萄糖作碳源,參與甘氨酸、甲硫氨酸,降低培育溫度〔從37℃下降到26-3℃,以及承受透析培育基去除乙酸等。2023.3.推斷一化合物對(duì)抗生素合成起誘導(dǎo)物作用還是作為前體,其依據(jù)是什么?答:葡萄糖效應(yīng)。選用化合物和葡萄糖做混合C源,假設(shè)是誘導(dǎo)物是緩慢利用的C源,消滅二次生長現(xiàn)象。假設(shè)是前體,應(yīng)當(dāng)是快速利用,而且不消滅二次生長現(xiàn)象。2023.1、什么叫微生物的耐藥性?微生物產(chǎn)生耐藥性的途徑有哪些?試述細(xì)菌對(duì)青霉素的耐藥性機(jī)制及如何抑制青霉素的耐藥性。答:對(duì)藥物的適應(yīng)性即是耐藥性。細(xì)菌對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥性主要有三種機(jī)制:1.β解滅活;2.細(xì)菌體內(nèi)青霉素作用靶位——青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生轉(zhuǎn)變; 3.細(xì)菌對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥性主要有三種機(jī)制:1.β解滅活;2.細(xì)菌體內(nèi)青霉素作用靶位——青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生轉(zhuǎn)變; 3.細(xì)胞壁對(duì)青霉素類的滲透性減低。 其中以第一種機(jī)制最為常見,也最重要。抑制青霉素的耐藥性:1合理應(yīng)用青霉素誘變作用。2循環(huán)使用抗生素即抗生素干預(yù)策略。3對(duì)青霉素的構(gòu)造進(jìn)展改造,保存其母核即6—氨基青霉烷酸,再對(duì)其R基團(tuán)進(jìn)展改造或取代,合成各種相應(yīng)的半合成青霉素。2023.2氧自身固氮如何抑制氧氣對(duì)固氮酶的抑制的?答生物固氮大氣中的分子氧在常溫常壓條件下通過微生物固氮酶的催化而復(fù)原成氨的過程。 分為:自生固氮菌、共生固氮菌、聯(lián)合固氮菌條件:ATP、{H}、固氮酶、復(fù)原底物N2、鎂離子。嚴(yán)格厭氧環(huán)境機(jī)制:①呼吸保護(hù):強(qiáng)化呼吸,以降低氧壓②構(gòu)象保護(hù):由耐氧的鐵硫蛋白與固氮酶結(jié)合形成耐氧的酶復(fù)合物。2023,3、試述生長速率對(duì)細(xì)菌個(gè)體大小及其組分的影響。響生長速率但對(duì)細(xì)胞大小幾乎沒有影響。細(xì)胞中DNA含量隨生長速率的提高而增加,但程度低一些,因此以細(xì)胞質(zhì)量衡量,DNA含量是削減的。細(xì)胞的外殼的厚度通常不變,胞壁越大,含RNA越多,其中大局部是核糖體。生長速率隨核糖體含量線性地增加。2023.1、某菌株在根本培育基上無法生長,如在根本培育基中添加0.1﹪堿水解酵母核酸,的生長必需物。答:該菌株為養(yǎng)分缺陷型突變型的菌株。該菌株為缺少RNA突變型的菌株。試驗(yàn)方案:承受生長譜法。見教材223頁。鑒定養(yǎng)分缺陷型的操作:把生長在完全培育液里0.1毫升與MM混合4個(gè)區(qū),然后按區(qū)加上AMP、GMP、CMP、UMP,經(jīng)培育后,如覺察某一養(yǎng)分物的四周有生長圈,就說明此菌就是該養(yǎng)分物的缺陷型。2023.2、在微生物培育過程中,引起培育環(huán)境pH變化的緣由有哪些?在實(shí)踐中,實(shí)行什么措施使微生物處于較穩(wěn)定和適宜的pH環(huán)境中?答:166頁2023.3、向發(fā)酵液添加次級(jí)代謝物的前體不愿定能促進(jìn)次級(jí)代謝物的合成,其緣由是什么?答:①前體物質(zhì)可能不被細(xì)胞吸取或者不能到達(dá)次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的部位;②添加的物質(zhì)可能對(duì)細(xì)胞本身的合成產(chǎn)生反響抑制作用所需的直接前體;③添加的前體不是次級(jí)代謝產(chǎn)物合成過程中起限制作用的物質(zhì)中高濃度的無機(jī)磷的抑制作用④抗生素合成過程的啟動(dòng)包含幾種把握機(jī)制,除上面已述及的調(diào)整機(jī)制外,尚有兩種機(jī)制:一種是細(xì)胞外的一些小分子效應(yīng)物起輔阻遏物作用或抑制劑的作用抑制劑被初級(jí)代謝耗竭后次級(jí)代謝合成才啟動(dòng),這種調(diào)整機(jī)制可解釋碳源分解代謝物的調(diào)一類誘導(dǎo)作用或激活作用的物質(zhì)。2023
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