林業(yè)生物技術復習資料

林業(yè)生物技術復習資料一、概念與名詞1、植物離體快速滋長——又稱微快繁，簡稱微繁，應用植物細胞的“全能性”理論，在無菌前提下，把離體的植物器官（如根、莖、葉、花、果實、種子等）、組織（如花藥、胚珠、形成層、皮層、胚乳等），放在人工操縱的情形中，使其分化、滋長，在短時刻內(nèi)產(chǎn)生大年夜量遺傳性一致的完全新植株的技巧。是應用植物組織培養(yǎng)技巧進行的一種養(yǎng)分滋長方法，是慣例養(yǎng)分滋長方法的一種擴大與延長。2、試管外生根技巧——試管外生根技巧是指將組織培養(yǎng)莖芽的生根引誘與馴化培養(yǎng)結合在一路，直截了當將莖芽扦插到試管外有菌情形中，邊引誘生根邊馴化培養(yǎng)。該方法舍棄了組織培養(yǎng)苗在試管內(nèi)生根這一環(huán)節(jié)，不僅躲開了瓶內(nèi)生根難的問題，同時也大年夜大年夜縮短了育苗周期和節(jié)儉了育苗成本。3、林業(yè)生物技巧——應用天然科學及工程學道理，依附叢林植物、動物、微生物作為反響器將物料加工轉化，范疇化臨盆和供給人們所需的生態(tài)情形、生物質產(chǎn)品和公益性辦事的科學技巧。（P8）4、細胞全能性——是指植物細胞具有發(fā)育成一個完全植株的全部遺傳信息，在恰當前提下能夠或許形成完全植株。（P26）5、組織培養(yǎng)——組織培養(yǎng)是指將植物的形成層組織、分生組織、表皮組織、薄壁組織和各類器官組織以及愈傷組織進行離體培養(yǎng)的技巧。6、胚珠培養(yǎng)——胚珠培養(yǎng)是將授粉的子房在無菌前提下解剖后，取胚珠置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)的過程。有時也把胚珠連同胎座一路取下來培養(yǎng)。7、離體葉的培養(yǎng)——在天然界，專門多植物的葉具有強大年夜的再生才能，能從葉片產(chǎn)生不定芽的植物，離體葉培養(yǎng)指包含葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉在內(nèi)的葉組織的無菌培養(yǎng)。它大年夜多經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再由愈傷組織分化出莖和根。個中葉片培養(yǎng)是一個典范的代表。8、植物細胞工程——植物細胞工程是植物生物技巧的一個重要構成部分，是在離體培養(yǎng)前提下，在細胞程度上對植物原料進行遺傳操作的技巧，即對植物體的任何一個部分（器官、組織、細胞、原生質體）進行離體引誘使其稱為完全植株的技巧。9、外植體——外植體指植物組織培養(yǎng)頂用來進行無菌培養(yǎng)的離體材料，可因此器官、組織、細胞和原生質體等。10、細胞懸浮培養(yǎng)——細胞懸浮培養(yǎng)是將游離的植物細胞按必定的細胞密度，懸浮在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)增殖的技巧。11、花粉培養(yǎng)——花粉培養(yǎng)也叫小孢子培養(yǎng)，是從花藥平分別出花粉粒，使之成為分散的或游離的狀況，經(jīng)由過程培養(yǎng)使花粉粒脫分化，進而發(fā)育成完全植株的過程。12、原生質體——原生質體是指植物細胞中除去細胞壁具有細胞全能性的裸露部分。13、轉基因林木——轉基因林木是指應用基因工程技巧改變基因組構成，用于林業(yè)臨盆或者林產(chǎn)品加工的叢林植物。包含轉基因叢林植物、轉基因叢林植物產(chǎn)品、轉基因叢林植物的直截了當加工品、含有轉基因叢林植物及其產(chǎn)品的其它相干產(chǎn)品。14、植物生物反響器技巧——植物生物反響器技巧是指應用植物體系，包含植物細胞、組織、器官甚至植物個別為工廠臨盆具有貿(mào)易價值的生物成品的方法。15、引誘抗病性——引誘抗病性是指應用生物因子或非生物因子處理植物，以改變植物對病害的反響，并產(chǎn)生局部或體系抗性的現(xiàn)象。16、反義技巧——反義技巧是指依照堿基互補道理，人工合成或生物體合成特定互補的DNA或RNA片段，以克制或封閉某些基因表達的技巧。17、玻璃化——實踐注解，當植物原料賡續(xù)地進行離體滋長時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會呈半透亮水跡狀，這種現(xiàn)象平日稱為玻璃化。18、基因工程——基因工程又稱為重組DNA技巧，是按著人們的科研或臨盆須要，在分子程度上，用人工方法提取或合成不合生物的遺傳物質（DNA片段），在體外切割，拼接形成重組DNA,然后將重組DNA與載體的遺傳物質從新組合，再將其引入到?jīng)]有該DNA的受體細胞中，進行復制和表達，臨盆出相符人類須要的產(chǎn)品或制造出身物的新性狀，并使之穩(wěn)固地遺傳給下一代。19、馴化——馴化是指試管苗移植前可將培養(yǎng)瓶移到天然光照下錘煉3-10d，讓試管苗接收天然光的照耀，感觸感染天然溫度的日夜溫差現(xiàn)象，使其結實，然后再開瓶移植，經(jīng)由較低溫、濕度的處理，以適應天然溫、濕度前提。20、脫毒苗——脫毒苗是指不含該栽種物的重要損害病毒，即經(jīng)檢測重要病毒在植物內(nèi)的存在表示為陰性反響的苗木。二、長短與選擇1、林業(yè)生物技巧應用范疇重要包含：優(yōu)質、高抗、速生林木良種培養(yǎng)，良種苗木工廠化繁育，有益天然產(chǎn)特離體臨盆，林業(yè)蛋白質工程、酶工程、能源生物技巧、情形生物技巧、藥材生物技巧等其它林業(yè)生物技巧。2、植物細胞全能性的實現(xiàn)需通過細胞脫分化和再分化過程。3、依照原由不合，植物細胞的逝世亡分為病理性逝世亡和心理性逝世亡。4、器官培養(yǎng)法度榜樣包含：無菌外植體的獲得、初代培養(yǎng)物的建立、培養(yǎng)物形狀產(chǎn)生、植株再生等環(huán)節(jié)。5、植物養(yǎng)分器官培養(yǎng)重要包含：根段培養(yǎng)、莖段培養(yǎng)、葉培養(yǎng)。6、植物滋長器官培養(yǎng)重要包含：花器官培養(yǎng)、幼果培養(yǎng)、種子培養(yǎng)。7、原生質體培養(yǎng)的體細胞變異大年夜于細胞培養(yǎng)的變異，而細胞培養(yǎng)的變異又大年夜于組織器官培養(yǎng)的變異。8、優(yōu)良變異的選擇方法有：直截了當選擇法、間接選擇法。9、細胞變異的類型包含：自發(fā)產(chǎn)生的變異、誘發(fā)產(chǎn)生的變異。10、決裂素/進展素的比例是操縱芽和根形成的一個重要前提，比例高時產(chǎn)生芽，比例低時產(chǎn)生根。11、由完全的植物器官分別單細胞，葉片是分別單細胞的最好材料。12、成功的懸浮細胞培養(yǎng)體系必須知足三個前提：懸浮培養(yǎng)物分散性優(yōu)勝，均一性好，細胞進展靈敏。13、植物細胞培養(yǎng)可分為：單細胞培養(yǎng)、單倍體培養(yǎng)、原生質體培養(yǎng)。14、常用的植物進展調(diào)劑劑有兩大年夜類：進展素類，如2,4-D、IAA、NAA等；細胞沖動素類，如6-BA、TDZ和ZT。15、原生質體培養(yǎng)基的全然成分與組織培養(yǎng)基類同，只是添加了滲入滲出壓穩(wěn)固劑。多半情形下所用的培養(yǎng)基是MS、B5或它們的衍生培養(yǎng)基。16、花草基因工程研究的內(nèi)容重要有：噴鼻味基因工程、花發(fā)育基因工程、花草保鮮基因工程、花草株型基因工程、花草抗性基因工程等五大年夜方面。17、自1986年第一株轉基因楊樹問世以來，不合樹種的轉基因工作接踵開展。18、關于植物懸浮細胞培養(yǎng)的生物反響器應相符：合適的氧傳遞、優(yōu)勝的流淌性、低的剪切力等要求。19、依照引誘子的來源可將其分為生物因子或非生物因子，生物因子包含真菌、細菌、病毒，還包含一些病原體的非致病性心理小種、選擇過的非病原體、弱致病性病原體、強致病性病原體以及病原體和非病原體的毒性產(chǎn)特；非生物因子包含一些物理和化學因子，如毀傷、電擊、高溫、紫外線、重金屬、有機化合物、無機化合物等。20、從實踐得知有些植物在B5培養(yǎng)基上進展更合適，如雙子葉植物專門是木本植物。21、母液是欲配制液的濃縮液，如許不只能夠包管各物質成分的精確性及配制時的快速移取，同時還便于低溫保藏，一樣母液配成比所需濃度高10-100倍。22、常用的滅菌方法可分為物理的和化學的兩類，即：物理方法如干熱(烘燒和灼燒)、濕熱(常壓或高壓蒸煮)、射線處理(紫外線、超聲波、微波)、過濾、清洗和大年夜量無菌水沖刷等方法；化學方法是應用升汞、甲醛、過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇兒、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學藥品處理。23、植物離體培養(yǎng)常用的重要糖類是蔗糖。24、無菌操作接種時，在操作前和操作時代要經(jīng)常用于擦拭雙手和臺面的酒精濃度是70%。25、根、莖、葉、花、果、木質部、形成層、韌皮部、中柱鞘等植物體細胞均可作為培養(yǎng)材料，引誘形成完全植物體。（√）26、以小孢子和大年夜孢子細胞等植物性細胞為培養(yǎng)材料，可引誘形成完全植物體，該植物體叫單倍體，能正常開花結實。（╳）27、植物細胞培養(yǎng)過程中，溫度、光照（如紫外線、濕度、通氣狀況）均會阻礙培養(yǎng)細胞的全能性。（√）28、愈傷組織是尚未分化的原始細胞團，其心理年紀幾乎為零。（√）29、每種激素必須零丁配成母液，濃度一樣配成1mg／ml。（√）30、一樣來講，繼代時刻越長、繼代次數(shù)越多，細胞變異的幾率就越大年夜。（√）31、莖尖培養(yǎng)與脫毒中，可否培養(yǎng)成功關鍵在于培養(yǎng)基。（×）32、平板培養(yǎng)是花粉培養(yǎng)的一種方法。（√）33、原生質體培養(yǎng)的合適溫度為25-30℃。（√）34、情形的相對濕度能夠阻礙培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，一樣要求80％-90％的相對濕度。（×）35、無病毒植株實際應用中最大年夜的問題并非反復感染。（×）36、機械法分別原生質體的重要缺點是原生質體的產(chǎn)量專門低、方法繁瑣辛勞。（√）37、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進行培養(yǎng)，又能夠分化形成根、芽等器官，這一過程稱為脫分化。（×）38、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基PH值都在5.8－6.0之間。（×）39、花粉培養(yǎng)是將花粉從花藥中游離出來，成為分散或游離態(tài)進行培養(yǎng)。（√）40、單細胞培養(yǎng)中選擇優(yōu)良細胞株常用平板培養(yǎng)法。（√）三、簡答與問答1、植物離體快速滋長的阻礙身分有哪些？答：1、外植體（1）外植體的基因型，（2）外植體的類型，（3）外植體的來源，（4）外植體的心理狀況，（5）外植體的大年夜小，（6）極性，（7）繼代培養(yǎng)次數(shù)2、芽的增殖門路3、培養(yǎng)基（1）全然培養(yǎng)基，（2）碳源，（3）氮源，（4）植物激素，（5）培養(yǎng)基中其它因子4、培養(yǎng)前提（1）光照，（2）培養(yǎng)溫度，（3）容器內(nèi)氣體成分，（4）濕度2、植物離體快速滋長的常見問題有哪些？答：1、污染，2、外植體褐變3、試管苗的玻璃化4、試管苗移栽的成活率5、遺傳穩(wěn)固性3、植物離體快速滋長中外植體褐變的阻礙身分有哪些？若何克服？答：阻礙外植體褐變的身分有：（1）植物種類和品種（基因型），含有單寧、酚類化合物、多酚氧化酶活性大年夜、色素含量多的植物較易產(chǎn)生如蘋果。（2）外植體的心理狀況，成年期＞幼齡期，老熟組織＞幼嫩組織，夏季＞春冬季。（3）取樣時刻欠妥，培養(yǎng)時刻過長，長時刻不繼代。（4）培養(yǎng)基，無機鹽濃度過高，細胞決裂素過高。（5）溫度，過高（6）光照，高光。（7）外植體受損程度，受傷嚴峻，消毒劑損害?？朔椒ㄓ校海?）外植體選擇的時刻、季候、部位，遮光處理。（2）合適的培養(yǎng)基。（3）合適的培養(yǎng)前提。（4）參加抗氧化劑，應用VC，PVP，活性碳。（5）縮短繼代時刻。（6）削減外植體受損程度及合理應用消毒劑。4、林業(yè)生物技巧的全然特點是什么？（P8-9）答：（1）林業(yè)生物技巧是以叢林群落（叢林植物、動物和微生物）為生物反響器進行產(chǎn)品臨盆。（2）林業(yè)生物技巧為人類供給生態(tài)產(chǎn)品、生物質產(chǎn)品和公益辦事。（3）林業(yè)生物技巧克服物種間生殖隔離，以各類來源的目標基因定向培養(yǎng)林木新品種。5、花器官培養(yǎng)的意思有哪些？答：花器官培養(yǎng)的意義有：（1）經(jīng)由過程離體花芽培養(yǎng)可明白得整體植物和內(nèi)源激素在花芽性別決定中所起的感化；（2）能夠明白得花器官各部分對果實和種子發(fā)育的感化；（3）內(nèi)、外源激素在果實種子發(fā)育過程中的調(diào)控感化；（4）臨盆上也可用于名貴品種的擴大年夜滋長。6、簡述種子培養(yǎng)的技巧答：種子培養(yǎng)技巧包含：（1）種子滅菌：種皮厚或不飽滿的種子，宜用0.1％升汞消毒10-20min。幼嫩的或發(fā)育不全的種子，宜用飽和漂白粉消毒15-30min。若種子上有絨毛或蠟質，應先用95％酒精或吐溫80處理，進步消毒后果。對殼厚難萌發(fā)的種子，可去殼培養(yǎng)。（2）培養(yǎng)基：A.促種子萌發(fā)用MS培養(yǎng)基，加或不加激素，引誘愈傷組織則可參加6-BA或2,4-D。B.無胚乳種子（棉花、大年夜豆、花生、向日葵、番薯、馬鈴薯、蘋果、煙草、薄荷）應恰當加進展素。C.一樣糖濃度為1-3%。D.打破休眠可加GA，或在接種前浸種處理。（3）接種：把種子按每瓶3-5粒放人培養(yǎng)瓶中，平均分列。培養(yǎng)溫度20-28℃，培養(yǎng)光強為1000-20001x，天天光照時刻10-12h。7、簡述組培中細菌污染的癥狀與致因答：組培中細菌污染的癥狀是：菌落呈黏液狀或渾濁的水漬狀痕或顯現(xiàn)泡沫的發(fā)酵狀等情形，色彩多為白色，與培養(yǎng)基別處界線清晰，接種后1~2天發(fā)明。引起細菌污染的可能緣故：外植體、培養(yǎng)基滅菌不完全、操作欠妥、接種對象、呼吸、不潔凈的手、室內(nèi)不潔凈等。8、簡述組培中真菌污染癥狀與致因答：組培中真菌污染的癥狀是：菌落多為黑色，綠色，黃色，白色的絨毛狀，棉絮狀，與培養(yǎng)基別處界線不清晰，接種后3~10天發(fā)明。引起真菌污染的可能緣故：四周情形、空氣污染、超凈工作臺、操作欠妥、器皿瓶口大年夜等。9、簡述細胞懸浮培養(yǎng)的長處答：細胞懸浮培養(yǎng)的長處重要有：能大年夜量供給比較平均一致的細胞，細胞增殖的速度比愈傷組織快，合適大年夜范疇培養(yǎng)，成為細胞工程中專門的家當。10、簡述植物組織培養(yǎng)所需養(yǎng)分與情形前提答：養(yǎng)分前提包含：無機養(yǎng)分（大年夜量元素、微量元素），有機養(yǎng)分（維生素類、肌醇、氨基酸、天然復合物），植物進展調(diào)劑物質，瓊脂，碳源，抗生物質，抗氧化物，活性炭等。情形前提包含：溫度，光照，濕度，滲入滲出壓，pH值，氣體。11、簡述 一個標準的組織培養(yǎng)實驗室必須具備的前提 答：一個標準的組織培養(yǎng)實驗室必須具備的以下前提：第一、清洗和儲存玻璃器皿、塑料器皿和其他實驗器皿； 第二、培養(yǎng)基的配制、滅菌和儲存； 第三、植物原料的無菌操作； 第四、可控溫度、光照、濕度的前提，以便對材料進行體外培養(yǎng)； 第五、培養(yǎng)物進展發(fā)育過程的顯微不雅察。12、簡述MS培養(yǎng)基的重要特點 答：MS培養(yǎng)基是1962年由Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草細胞而設計的。其重要特點是：無機鹽和離子濃度較高，為較穩(wěn)固的均衡溶液；其養(yǎng)分的數(shù)量和比例較合適，可知足植物的養(yǎng)分和心理須要；它的硝酸鹽含量較其他培養(yǎng)基為高，廣泛地用于植物的器官、花藥、細胞和原生質體培養(yǎng)，后果優(yōu)勝；有些培養(yǎng)基是由它演變而來的。13、簡述繼代培養(yǎng)時材料玻璃化的解決方法答：繼代培養(yǎng)時材料玻璃化的具體解決方法為： ①增長培養(yǎng)基中的溶質程度，以降低培養(yǎng)基的水勢； ②削減培養(yǎng)基中含氮化合物的用量； ③增長光照； ④增長容器通風，最好進行C02施肥，這對減輕試管苗玻璃化的現(xiàn)象有明顯的感化； ⑤降低培養(yǎng)溫度，進行變溫培養(yǎng)，有助于減輕試管苗玻璃化的現(xiàn)象產(chǎn)生； ⑥降低培養(yǎng)基中細胞決裂素含量，能夠推敲參加適量脫落酸。14、簡述基因工程有凸起的特點：答：基因工程有兩個重要特點：第一是可把來自任何生物的基因轉移到與其毫無關系的任何其他受體細胞中，是以能夠實現(xiàn)按照人們的欲望，改革生物的遺傳特點，制造出身物的新性狀；第二是某一段DNA可在受體細胞內(nèi)進行復制，為預備大年夜量純化的DNA片段供給了可能，拓寬了分子生物學的研究范疇。四、實踐與案例1、試述進步試管苗馴化移栽成活率的方法答：試管苗馴化移栽成活率低的緣故：（1）內(nèi)因：一樣地，試管苗細長、黃化、根系發(fā)育不良者移栽成活率低。試管苗葉片濃綠、莖細小、根系蓬勃及長勢好者移栽成活率高。（2）外因：光、溫、水、氣、濕度、有無雜菌、治理技巧及工作人員的義務心。進步試管苗馴化移栽成活率的方法：（1）盡力進步試管苗的質量，要求：有針對性調(diào)劑培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)前提。（2）及時出瓶馴化，幸免苗老化。（3）出苗時能夠推敲應用生根粉。（4）選用合適的基質，制造合適的培養(yǎng)前提。（5）按期噴施養(yǎng)分液及殺菌劑，防蟲防病；結合澆水澆灌養(yǎng)分液。用自來水澆灌時可不消加微量元素，一樣一周一次，初期濃度低0.15-0.2％，后期可增長到0.3％。逐步延長光照時刻，增長光照強度。同時每隔7-10天瓜代噴1000倍的百菌清或滅枯凈。（6）進步工作人員的義務心。2、試述莖尖培養(yǎng)的方法及步調(diào)答：莖尖培養(yǎng)的步調(diào)有：取材——材料處理及消毒——接種——培養(yǎng)——馴化移栽（1）取材①直截了當取材：在進展旺盛、枝條結實、無病的母株上選進展不久、雜菌污染少的頂梢（1－2cm）（取前可噴殺菌藥，可頂芽或側芽）。②從試管苗獵取。（2）材料處理及消毒將采集到的莖尖切成0.5-1.0cm長→→去葉（休眠芽預先剝除鱗片）→→流水沖刷2-4h→→75％的酒精中處理30s→→稀釋20倍的次氯酸鈉中浸5-8min(取自老枝條上的可恰當延長時刻）→→用無菌水沖刷數(shù)次，預備接種。（3）接種接種前再剝掉落一些葉片，使莖尖0.5cm→→接種。要求：隨切隨接，動作靈敏。亦可將切下莖尖材料在1－5%VC液中浸一下。（4）培養(yǎng)1）培養(yǎng)基①全然培養(yǎng)基MS、White、B5、Heller培養(yǎng)基。②蔗糖作碳源后果好，濃度2－3%。③激素（2，4-D，IAA，NAA）和有機添加物有明顯阻礙。但激素濃度以0.1mg/L為宜，不要太高。莖尖進展狀況：進展太慢：莖尖不增大年夜→→變綠→→細胞逐步老化→→休眠。緣故:進展素濃度太低；溫度過低或過高。進展太快：莖尖靈敏增大年夜→→愈傷組織→→損掉成苗才能。緣故:進展素濃度過高；光照太弱或溫度太高。進展正常：莖尖基部稍增大年夜并形成少量愈傷組織，莖尖色彩逐步變綠，并伸長，葉原基發(fā)育成可見的小葉，進而形成小苗。2）初代培養(yǎng)前提：天天光照16h/d，照度1500-2000Lx，溫度25±2℃。3）繼代培養(yǎng)：莖尖長成的新梢→→切成小段→→增殖培養(yǎng)基中→→1個月閣下→→新梢又可切成小段→→再轉入新培養(yǎng)基→→建立和保持了莖尖無性系。（即微型扦插）繼代培養(yǎng)可用MS培養(yǎng)基。4）引誘生根：采取I／2MS培養(yǎng)基參加必定的進展素類調(diào)劑物質，如NAA、IBA等。新梢基部浸入50或100mg/l的IBA溶液處理4-8h，然后轉移到無激素的生根培養(yǎng)基中。5）馴化移栽入土：在生根培養(yǎng)1個月閣下→→進展結實而蓬勃的根系→→煉苗→→移栽→→治理（溫、光、濕、氣）。3、試述植物離體培養(yǎng)過程中無菌操作的留意事項答：無菌操作留意事項重要有：（1）實驗器具和材料的預備。（2）用75%的酒精擦拭超凈工作臺，然后室內(nèi)及超凈工作臺用紫外燈殺菌20min-30min。（3）關紫外燈、打開風機，過5-10min進入緩沖間，以75%洗手和手臂，改換無菌服、帽子和口罩。進入接種室。（4）用70－75％的酒精拭擦臺面并消毒雙手。實驗器具也應當用酒精消毒。點燃酒精燈，將金屬器械在其火焰上灼燒，冷卻待用。（5）取流水沖刷（至少30min）過的外植體，用必定的消毒劑浸泡消毒，用無菌水沖刷3~4次，放入無菌培養(yǎng)皿中，置于酒精燈火焰下方，用無菌的接種器械進行分別、切割或其他處理。（6）打開培養(yǎng)瓶，瓶口在燈焰處扭轉灼燒，用鑷子將培養(yǎng)材料置于培養(yǎng)基上，灼燒鑷子放回，灼燒瓶口，蓋上瓶塞。（7）整頓臺面。4、紅葉石楠試管苗馴化和移栽基質配制答：基質的全然要求是：松散通氣、合適的保水性、潔凈衛(wèi)生?；|的成分比例是：V蛭石/V珍寶巖/V泥炭=6/3/1。成活率可達95