【食品單增李斯特菌檢測探究文獻(xiàn)綜述4300字】

食品單增李斯特菌檢測研究國內(nèi)外文獻(xiàn)綜述目錄TOC\o"1-2"\h\u53611.食品安全問題現(xiàn)狀 198852.單增李斯特菌存在現(xiàn)狀 2196373.食源性致病菌的檢測技術(shù) 311271參考文獻(xiàn) 41.食品安全問題現(xiàn)狀由于惡劣的自然環(huán)境和時間的變化，人類的飲食生活習(xí)慣也發(fā)生了很大的變化。食品加工和銷售方式也發(fā)生了很大的轉(zhuǎn)折和變革，隨著我國開展全球性的食品貿(mào)易迅猛增長，食品的流通速度加快，然而安全性下降，食物中毒的現(xiàn)象屢屢發(fā)生，食源性疾病的患者和發(fā)病率也呈現(xiàn)出明顯的上升傾向[10]。無論是發(fā)達(dá)國家還是在發(fā)展中國家，食源性疾病已經(jīng)極大地?fù)p害了人類的身體健康與生命安全，也對經(jīng)濟(jì)產(chǎn)生了重要的沖擊。所以，食源性疾病已逐漸成為我們當(dāng)前必須面對的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)[11]。由于受到社會經(jīng)濟(jì)效益的驅(qū)使，食品企業(yè)在生產(chǎn)、銷售中屢屢使用各種違規(guī)或其他非法的手段。比如，使用大量的劇毒性農(nóng)藥或者噴灑各種蔬菜、水果等方式進(jìn)行除蟲:或者使用瘦肉精等一些非違禁的激素進(jìn)行飼養(yǎng)，從而增加瘦肉的產(chǎn)量;隨意地使用一個吊白塊的方式來添加新鮮的白面粉;把稻草水兌顏料+黃色的帶綠勾鹽作為醬油賣給企業(yè)獲利的現(xiàn)象，不勝枚舉。隨著企業(yè)時代的不斷進(jìn)步和企業(yè)改革史的變遷，食品安全企業(yè)在批量生產(chǎn)和規(guī)模經(jīng)營這個過程中產(chǎn)品規(guī)模的逐步擴(kuò)大和不斷普及以至我國食品安全貿(mào)易逐漸逐步呈現(xiàn)走向國際化，世界上所有國家和地區(qū)都在不斷發(fā)生重大食品安全污染事件。例如，2006年比利時"二嗯英英事件"、英國"瘋牛病"、日本的大腸桿菌0157:h7食物細(xì)菌中毒[12]，以及被人在我國廣泛媒體曝光的安徽阜陽劣質(zhì)生鮮乳制品("大頭娃娃事件")、霉變菌中毒米、蘇丹紅鴨蛋污染事件、孔雀石蝦等綠色海藻魚蝦的排放養(yǎng)殖和其他各類污染事件，都已經(jīng)逐漸使得我國食品安全突出問題逐漸成為了社會眾人廣泛密切關(guān)注的一個熱門話題，再次向人敲響了對我國食品安全領(lǐng)域存在突出問題的重要警鐘。"民以食為天，食以安為先"已成為當(dāng)今人類對食品質(zhì)量最基本的訴求[13]。對我國歷年食源性疾病監(jiān)測數(shù)據(jù)的分析表明，微生物引起的食源性疾病占疾病和事故總數(shù)的近40%，導(dǎo)致患者人數(shù)最多，占所有患者的一半以上[14]。而且在目前我國對于食源微生物污染所造成的各種食源傳染性疾病病例的患者報告死亡的事件中，副甲基溶血性弧菌、沙門氏菌、金黃色短鏈葡萄球菌、單增李斯特菌都已經(jīng)是一種極為常見的生物致病菌。由于因我國食品安全環(huán)境嚴(yán)重污染而引發(fā)導(dǎo)致的各類產(chǎn)品食源安全性疾病重大事故往往都因其具有群發(fā)性、突襲性等基本特征，往往極有可能未來會逐漸發(fā)展演變成食品公共安全隱患風(fēng)險重大危機(jī)。并且，隨著我國食品生產(chǎn)的高度集中化、原材料來源的高度全球化，食源性疾病爆襲事件已經(jīng)具有了一個新的特征，即爆炸時間長、地域廣、所涉及的群體數(shù)量多。因此，在食源性疾病爆炸和暴發(fā)時[15]，快速、準(zhǔn)確找到這些致病細(xì)胞是至關(guān)重要的一步。2.單增李斯特菌存在現(xiàn)狀單核細(xì)胞增生李斯特菌的存在形式依然嚴(yán)峻，然而針對其廣泛的存在，大多數(shù)民眾缺乏相關(guān)健康意識，導(dǎo)致食物中毒的情況時有發(fā)生，由于食物的檢測面臨廣泛性與檢查需要及時的要求，當(dāng)前該細(xì)菌檢測面臨的主要問題依舊是探討如何結(jié)合現(xiàn)有的檢測方法，不斷結(jié)合創(chuàng)新理念建立起一套快速、準(zhǔn)確、漸變的檢測體系，同時降低檢測的成本，使其更具有實(shí)用意義[16]，相關(guān)的問題將是現(xiàn)今和未來很長一段時間內(nèi)都需要去解決的問題。雖然在一些傳統(tǒng)食品中對于單核細(xì)胞增生性李斯特菌的檢測方法是一種可以直接進(jìn)行確定性和測量化，靈敏度高，成本低，但耗時長。光譜技術(shù)可以無損測定樣品中的李斯特菌，但是復(fù)雜的食品基質(zhì)可能影響其穩(wěn)定性。免疫學(xué)技術(shù)具有較高的準(zhǔn)確性和特異性，但在測定前需要預(yù)處理。分子生物學(xué)方法快速準(zhǔn)確，但生物標(biāo)志物成本高。代謝組學(xué)方法可以方便、準(zhǔn)確地測定食品中的單核細(xì)胞增生李斯特菌，但需要對目標(biāo)菌進(jìn)行過夜培養(yǎng)并建立合適的數(shù)學(xué)模型。生物傳感器法靈敏、簡單，適用于食品中李斯特菌的快速檢測，但其穩(wěn)定性和使用壽命有待提高。國家標(biāo)準(zhǔn)方法是根據(jù)我國國家標(biāo)準(zhǔn)《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)：單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》（GB4789.30—2008）規(guī)定而制定的方法。這種方法通常需要5-14天。但是，這種方法很容易導(dǎo)致假陽性和假陰性等異常情況，并且還有存在著雜菌和lm肉眼不能區(qū)別的缺陷，這些問題還需要進(jìn)一步的驗(yàn)證。美國科學(xué)家KaryMullis在1985年發(fā)明了PCR[17]，該種準(zhǔn)確檢測食物方法因其特點(diǎn)具有食物化學(xué)特異性強(qiáng)、靈敏度高、迅捷簡便等四大特征，在準(zhǔn)確檢測各種食物的lm和化學(xué)元素質(zhì)量等等方面已經(jīng)發(fā)展具有很大的科學(xué)研究應(yīng)用潛力。實(shí)時擴(kuò)增PCR在原先的核酸分子實(shí)時電磁輻射定性檢測技術(shù)的研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步改良和優(yōu)化發(fā)展而已經(jīng)逐步形成的實(shí)時電磁輻射核酸分子定量檢測技術(shù)，它具有實(shí)時擴(kuò)增檢測、高準(zhǔn)確度、操作簡單、高通量、高靈敏度、高特異性等六大功能。由于其實(shí)時擴(kuò)增交叉檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析系統(tǒng)的完全封閉，交叉檢測污染率低，被國際細(xì)菌學(xué)學(xué)術(shù)界專門分為兩種類型:實(shí)時擴(kuò)增測試結(jié)果探針型和非正式實(shí)時擴(kuò)增測試結(jié)果探針型。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)的主要原理是通過研究和設(shè)計(jì)4條具有特異性的新引物曲線，準(zhǔn)確鑒定靶等位基因的6個位點(diǎn)和亞區(qū)，并利用一種新的具有鏈核酸取代活性的BstDNA核酸聚合酶。在65℃的單條環(huán)介導(dǎo)基因恒溫?cái)U(kuò)增條件下直接對其進(jìn)行一條環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸鏈的擴(kuò)增，檢測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示可以用光學(xué)肉眼直接觀察到在離心管底部表層是否已經(jīng)存在著一種白色的核酸沉淀物和產(chǎn)生物并進(jìn)行了初步判斷[18]。自1983年3月加拿大政府報告因?yàn)殚L期進(jìn)食各種受李斯特污染的新鮮涼拌菜和卷心菜而中毒引起的新型食源性人類李斯特菌病中毒疫情再次爆發(fā)以來，已經(jīng)連續(xù)有多次報道報告稱因?yàn)闉殚L期進(jìn)食各種受李斯特污染的新鮮涼拌菜和卷心菜而中毒引起的食物中毒。。2011年3月美國首次報道了因單增李斯特菌受到食物污染的進(jìn)食哈密瓜而中毒引起懷孕導(dǎo)致的李斯特菌病疫情再次爆發(fā)，造成146人懷孕流產(chǎn)，1例病人流產(chǎn)和30例病人死亡。西班牙2013年1月到2014年月間，7例死亡西班牙中國人病例感染了李斯特菌病。其中有1例急性流產(chǎn)，3例腹部流血導(dǎo)致死亡。雖然李斯特菌很少在購買即食用的食品中能夠達(dá)到歐盟的相關(guān)食品安全檢測標(biāo)準(zhǔn)，但是對于人類李斯特菌的致病感染率卻在進(jìn)一步提高。國際上已經(jīng)成功開展了對多種食源性新型單增李斯特菌的臨床篩查，研究了各類食品中各種單增李斯特菌的具體病理學(xué)發(fā)生特性和與之密切有關(guān)的食品檢測方法手段，探索更加迅速、便捷、準(zhǔn)確、安全的食品檢測方法手段，對于有效減少各種食源性腸道疾病的發(fā)生事件，及時有效地安全控制各種病原菌的大量傳播以及其他各種嚴(yán)重后果的發(fā)生可能性減少發(fā)生等都十分具有重大的科學(xué)現(xiàn)實(shí)意義[19]。3.食源性致病菌的檢測技術(shù)在食品中進(jìn)行致病菌的檢查，主要內(nèi)容包括兩個部分:一是通過食物樣本中的分離、富集等來檢查待測到的病原菌;二是進(jìn)一步提升了檢測的速度與準(zhǔn)確率。目前我國用來檢測食源性致病菌的技術(shù)主要分為以下三種:傳統(tǒng)的分離鑒定法、免疫學(xué)檢查方法及分子生物學(xué)檢查法。傳統(tǒng)分離鑒定方法，對于單增李斯特菌的檢測主要有國家標(biāo)準(zhǔn)中的EB(EnrichmentBroth)增菌法和LB(Luria．Bertani)增菌法，通過對細(xì)菌微生物的協(xié)同分離增菌培養(yǎng)、生化化學(xué)反應(yīng)、溶血增菌試驗(yàn)、協(xié)同聯(lián)合溶血增菌試驗(yàn)、動物溶血試驗(yàn)等研究方式等來進(jìn)行增菌實(shí)現(xiàn)，這些實(shí)驗(yàn)方法的增菌實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果對于科學(xué)儀器和實(shí)驗(yàn)設(shè)備的質(zhì)量要求不高，可操作性強(qiáng)，但是增菌檢驗(yàn)的工作周期相對較長，大概是所需周期的時間，約需2周時間[20]。而受傳統(tǒng)檢驗(yàn)技術(shù)的限制，從可疑食品中分離致病菌則較為困難，如發(fā)生在德國的大腸桿菌0104食物中毒，是在食物中毒發(fā)生后的近一個月才確定致病食品。這種傳統(tǒng)分離鑒別方法已難以適應(yīng)在網(wǎng)絡(luò)技術(shù)下對食品制造商在生產(chǎn)銷售過程中的網(wǎng)絡(luò)分析、食品上市及消費(fèi)前快速分析等要求。隨著當(dāng)前我國現(xiàn)代分子細(xì)胞生物學(xué)的檢測理論和檢驗(yàn)技術(shù)的不斷完善和逐步發(fā)展成熟，相關(guān)現(xiàn)代分子細(xì)胞生物學(xué)的重要檢測工具和檢驗(yàn)方法技術(shù)諸如PCR技術(shù)、核酸抗體探針式基因雜交檢測技術(shù)、基因芯片、漏聲抗體表面檢測波形和生物化學(xué)傳感器等都已經(jīng)在對各類病原菌的科學(xué)檢測和生物科學(xué)技術(shù)研究中被廣泛應(yīng)用采納?；诿撗鹾怂岬倪@種分子生物學(xué)檢測技術(shù)主要應(yīng)用是對所有病原菌體細(xì)胞和致病微生物的科學(xué)檢測[21]，物種名的識別，物種的進(jìn)化起源、多樣性的科學(xué)評估以及其與動物親緣體的關(guān)系、體質(zhì)變化演變等常見的科學(xué)研究工具和檢測手段之一，也是病原微生物快速診斷的主要技術(shù)方法之一。參考文獻(xiàn)[1]尚叢珊，食源性致病菌單增李斯特菌檢測技術(shù)的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2020，11（14）[2]逯巖，祝琳，食品中單增李斯特菌的存在現(xiàn)狀及檢測方法研究[J].中國醫(yī)藥指南，2020，18（21）[3]徐匆，羅華，建黃皓，梁衛(wèi)驅(qū)，胡珊，李艷芳，胡楚維，羅鴻斌，單增李斯特菌反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立[J].現(xiàn)代食品科技，2020，36（6）[4]武鑫，食品中單增李斯特菌快速檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2019，10（18）[5]馬盼盼，夏丹丹，趙瑩瑩，郜曉峰，康文藝，食源性單增李斯特菌檢測方法研究進(jìn)展[J].河南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版，2019，38（4）[6]李云霞，陳雯雯，顧晨榮，饒名禎，郭魯申，趙渝，單增李斯特菌的檢測方法研究進(jìn)展[J].上海師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2015，44（6）[7]賈培，盛司，蘭全學(xué)，單增李斯特菌恒溫?zé)晒釶CR檢測方法的建立及應(yīng)用[J].中國新技術(shù)新產(chǎn)品，2019，0（9）[8]紀(jì)順師，葉長蕓，四種單增李斯特菌常用核酸檢測方法的評價與應(yīng)用[J].中國人獸共患病學(xué)報，2019，35（12）[9]孫玉霜，李穎，李秀梅，楊穎，食源性單增李斯特菌檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國動物檢疫，2017，34（8）[10]孫靜娟，曾海娟，丁承超，王廣彬，翟緒昭，王淑娟，李杰，劉箐，單核細(xì)胞增生李斯特菌檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J].微生物學(xué)雜志，2017，37（4）[11]劉芳，徐振娜，洪偉彬，謝海燕，食品中單增李斯特菌熒光PCR檢測方法的建立[J].農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技，2017，28（17）[12]周陽，祝長青，郭桂萍，徐幸蓮，徐寶才，薛建麗，蔣原，楊軍，郭云昌，劉秀梅，付瑞燕，3種單增李斯特氏菌快速檢測方法的比較[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2014，42（8）[13]方赤光，劉桂華，修冬瑩，黃鑫，王惠，楊紅，孔翔云，食品中單增李斯特菌國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證及結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17（5）[14]張烜榕，顏軍，李文龍，侯敏，蔣玉佳，卜舒，李桂滿，單核細(xì)胞增生李斯特菌三種檢測方法的比較[J].大理學(xué)院學(xué)報：綜合版，2013，12（6）[15]徐寶梁，賈建會，陳穎，趙貴明，蘇寧，吳亞君，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的PCR檢測方法[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2004，30（6）[16]姜霞，滿朝新，趙玥明，周文琦，曲艷艷，龐心怡，姜毓君，環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速檢測肉中單增李斯特菌[J].中國食物與營養(yǎng)，2015，21（11）[17]蔣亞男，滿朝新，趙鳳，劉穎，薛玉清，胡惠秩，李博，姜毓君，環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增方法快速檢測乳中單增李斯特菌[J].中國乳品工業(yè)，2011，39（4）[18]BattCA，CadyNC，StelickS，etal.Real-timePCRdetectionofListeriamonocytogenesusinganintegratedmicrofluidicsplatform[J].SensorsandActuators，B.Chemical，2005，111/112(1):332-341.[19]RenDaxi，WangDeGuo，HuoGuiCheng，etal.Developmentandevaluationofaloop-mediatedisothermalamplification(lamp)methodfordetectingListeriamonocytogenesinrawmilk.[J].JournalofFoodSafety，2010，30(2):251-262.[20]K.P.Ye，Y.Jiang，X.L.Xu，etal.RapidandSensitiveReal-timePCRQuantitativeDetectionofListeriamonocytogeneswithoutEnrichmentsinArtificiallyContaminatedChilledPork[C].//57thInternationalconferenceofmeatscie