2024年大學(xué)試題(農(nóng)學(xué))-植物組織培養(yǎng)歷年高頻考點(diǎn)試卷專家薈萃含答案

2024年大學(xué)試題(農(nóng)學(xué))-植物組織培養(yǎng)歷年高頻考點(diǎn)試卷專家薈萃含答案（圖片大小可自由調(diào)整）第1卷一.參考題庫(共25題)1.植物離體保存的主要步驟是（） ①離體培養(yǎng)物的保存 ②離體培養(yǎng)與祛除病原物 ③種質(zhì)離體收集 ④遺傳穩(wěn)定性鑒定A、①②③④B、③②①④C、②④①③D、①②④③2.植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個(gè)階段：萌芽階段、奠基階段、（）3.優(yōu)良的愈傷組織必須具備哪4個(gè)特性？4.為什么說植物器官培養(yǎng)是組織培養(yǎng)的一個(gè)最重要的方面？5.植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過程中是否需要光，可分為光培養(yǎng)和（）培養(yǎng)。6.植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與（）的百分?jǐn)?shù)。7.外植體選擇的原則是：（）、選擇健壯的植株、選擇最適時(shí)期、選取適宜的大小。8.論述植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)在組織培養(yǎng)中的作用。并列舉常見的種類。9.影響離體根生長的因素有哪些？10.大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適pH為（）A、5.0-7.0B、5.0-6.0C、3.0-4.0D、7.0-8.011.用平板培養(yǎng)法培養(yǎng)單細(xì)胞或原生質(zhì)體時(shí)，常用（）來衡量細(xì)胞培養(yǎng)效果。12.繼代培養(yǎng)有什么作用，以菊花為例，簡述其繼代培養(yǎng)的操作方法。13.胚狀體發(fā)生途徑與器官發(fā)生途徑形成植株的區(qū)別是什么？14.無病毒苗是指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測主要病毒在植物內(nèi)的存在表現(xiàn)（）的苗木。15.莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是（），其莖尖一般?。ǎ┖撩?。為了使脫毒效果更好，可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與（）結(jié)合起來。脫毒處理的試管苗，在用于生產(chǎn)之前，必須進(jìn)行（）16.在生長素中，（）對于許多作物花粉的啟動(dòng)、分裂、形成愈傷組織和胚狀體起著決定性作用，但是對（）卻有抑制作用。17.選擇外植體時(shí)應(yīng)選擇優(yōu)良的種質(zhì)、健壯的植株、最適的時(shí)期和（）18.光照條件下有利于細(xì)胞、愈傷組織的增殖，而器官的分化往往需要黑暗。19.下列有關(guān)生長素說法錯(cuò)誤的（）A、誘導(dǎo)愈傷組織形成B、體細(xì)胞胚的產(chǎn)生C、試管苗生根D、促進(jìn)莖增粗20.影響植物離體形態(tài)發(fā)生的因素有哪些？21.種質(zhì)資源離體保存方法有兩種：限制生長保存和（）22.不定芽產(chǎn)生的途徑一是從外植體上直接產(chǎn)生，二是從由（）產(chǎn)生的愈傷組織上產(chǎn)生。23.如何確定水稻單核靠邊期的花粉？24.從再生植株倍性來看，小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生（）植株，胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生二倍體植株，胚乳培養(yǎng)通常產(chǎn)生三倍體植株。25.1958年英國人Steward等將胡蘿卜髓細(xì)胞培養(yǎng)成為一個(gè)（），首次通過實(shí)驗(yàn)證明了植物細(xì)胞的全能性，成為植物組織培養(yǎng)研究歷史中的一個(gè)里程碑。第2卷一.參考題庫(共25題)1.去除植物病毒的主要方法是組培法和（）兩種方法，當(dāng)把二者結(jié)合起來脫毒效果最好。2.氯化汞能使菌體蛋白變性，造成菌體生物酶失去活性，從而抑制微生物繁殖，滅菌效果極好。但使用后殘留液對外植體有毒害作用，需用無菌水進(jìn)行多次沖洗。3.固體培養(yǎng)基可加進(jìn)活性炭來增加通氣度，以利于發(fā)根。4.造成組織培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？5.植物快速繁殖6.植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)方法生產(chǎn)出藥品，農(nóng)藥，香料，色素及食品添加劑。7.離體胚培養(yǎng)方法是成熟胚和（）8.種質(zhì)保存大致分為原地保存和（）兩種方式。9.簡述培養(yǎng)基生長素/細(xì)胞分裂素比值高低對外植體生長的影響。10.絕大多數(shù)培養(yǎng)植物再生植株時(shí)都先經(jīng)過（）階段。11.用（）技術(shù)可以克服雜交不親合的障礙，使雜種胚順利生長，獲得遠(yuǎn)緣雜種。A、體細(xì)胞雜交B、基因工程C、胚培養(yǎng)D、單倍體育種12.植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)？13.花粉植物細(xì)胞均為單倍體。14.組織培養(yǎng)中常用的生長素有吲哆乙酸（IAA），2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D），吲哆丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），它們的作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋ǎ?gt;（）>（）>（）15.從再生植株倍性來看，小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生（）植株，胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生（）植株，（）通常產(chǎn)生三倍體植株。16.花藥和花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株。17.如何純化分離的植物原生質(zhì)體并鑒定其活力？18.赤霉素（GA）需要用（）法滅菌。A、灼燒滅菌B、干熱滅菌C、過濾滅菌D、高壓濕熱滅菌19.一般情況下，細(xì)胞分裂/生長素的比值高，有利于愈傷組織長芽，比值低有利于長（）20.大多數(shù)植物組織培養(yǎng)最適溫度一般為（）℃。A、37±1B、26±2C、16±2D、4±221.胚培養(yǎng)在科學(xué)研究及生產(chǎn)實(shí)踐中有哪些應(yīng)用？22.由脫分化的細(xì)胞再分化出完整植株有兩種途徑，一種叫做（），另一種叫做（）23.組織培養(yǎng)中有三大不易解決的問題，它們分別是污染、褐變、（）24.配制培養(yǎng)基時(shí)，一般先配制母液，其目的在于使用方便和（）25.瓶口封塞可用多種方法，但要求絕對密閉，以防止培養(yǎng)基干燥和雜菌污染。第3卷一.參考題庫(共25題)1.單細(xì)胞培養(yǎng)可以采用發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)。2.怎樣利用母液進(jìn)行MS培養(yǎng)基的配制？3.植物組織培養(yǎng)可用于（）A、快速繁殖B、脫除病毒C、提高品質(zhì)D、育種E、減少品種變異4.如何利用大型臥式滅菌器進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌？5.如何對菊花莖段進(jìn)行消毒？6.為什么莖尖培養(yǎng)可獲得無特定病毒植株？怎樣獲得無特定病毒的試管苗？獲得的無病毒苗用一種方法鑒定其真的無特定病毒的植株？7.植物脫毒的主要方法有哪些？其主要原理是什么？8.下列材料遺傳上最穩(wěn)定的是（）A、莖尖分生組織B、不定芽C、體細(xì)胞胚D、愈傷組織9.植物原生質(zhì)體分離的方法有（）和機(jī)械法。10.以大蒜莖尖脫毒為例，簡述無菌接種操作的流程和注意事項(xiàng)。11.因地制宜建一個(gè)組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，需要哪些分實(shí)驗(yàn)室？各分室的作用是什么？12.經(jīng)高溫滅菌后，培養(yǎng)基的pH會(huì)（）A、降低B、升高C、不變D、不能確定13.植物遺傳轉(zhuǎn)化的方法是什么？14.論述離體培養(yǎng)污染產(chǎn)生的原因及防治措施。15.清洗玻璃器皿用的洗滌劑主要有肥皂、（）、（）、（）16.為什么要有一定的細(xì)胞起始濃度？17.抗氧化物的作用及有哪些抗氧氧化劑？18.由胚乳培養(yǎng)可以獲得（）倍體植株，經(jīng)秋水仙素處理可以獲得二倍體植株。19.體細(xì)胞雜交按所用親本原生質(zhì)體的性質(zhì)可分為哪幾類？20.通過莖尖培養(yǎng)脫毒苗的過程中，切取莖尖的大小與其成活率成正比，而與脫毒效果成（）21.活性炭在組織培養(yǎng)中的作用有（）A、吸附有毒物質(zhì)B、減少褐變，防止玻璃化C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境，利于根的生長D、增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分22.低溫保存和超低溫保存技術(shù)冷凍的方法有哪些？23.某些植物通過愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無病毒苗。24.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法有（）和連續(xù)培養(yǎng)等。25.離體授粉的類型有離體柱頭授粉、離體子房授粉、（）第1卷參考答案一.參考題庫1.參考答案:B2.參考答案:快速發(fā)展和應(yīng)用階段3.參考答案: （1）高度的胚性或再分化能力，以便從這些愈傷組織得到再生植物。 （2）容易散碎，以便用這些愈傷組織建立優(yōu)良的懸浮系，并且在需要時(shí)能從中分離出全能性的原生質(zhì)體。 （3）旺盛的自我增殖能力，以便用這些愈傷組織建立大規(guī)模的愈傷組織無性系。? （4）經(jīng)過長期繼代保存而不喪失胚性，便有可能對它們進(jìn)行各種遺傳操作。4.參考答案:植物器官培養(yǎng)是指離體的根、莖、葉、花器和果實(shí)的培養(yǎng)。以器官作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，進(jìn)行的植物種類最多，應(yīng)用的范圍也最廣，所以說植物器官培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)中最主要的一個(gè)方面。5.參考答案:暗6.參考答案:接種總細(xì)胞數(shù)7.參考答案:選擇優(yōu)良的種質(zhì)8.參考答案: （1）生長素類：主要被用于誘導(dǎo)愈傷組織形成，促進(jìn)細(xì)胞脫分化；促進(jìn)細(xì)胞伸長；誘導(dǎo)根的分化，促進(jìn)生根。如：IAA（吲哚乙酸）；NAA（萘乙酸）；IBA（吲哚丁酸）；2，4—D（2，4—二氯苯氧乙酸） （2）細(xì)胞分裂素類： ①誘導(dǎo)芽的分化促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長。 ②促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大。 ③抑制根的分化。抑制衰老，減少葉綠素分解，有保鮮效果。 如：包括6—BA（6—芐基腺嘌呤）、Kt（?激動(dòng)素）、Zt（玉米素）等。9.參考答案: 1、基因型：品種差異大。 2、培養(yǎng)基：生根培養(yǎng)基—鹽濃度為MS的一半或四分之一。 3、生長物質(zhì)：適當(dāng)?shù)纳L素，常用NAA和IBA，濃度為0.1-10.0毫克每升。但水仙，草莓等無需激素。 4、PH：中性偏酸。 5、光照和溫度：暗培養(yǎng)和25～27℃。10.參考答案:B11.參考答案:植板效率12.參考答案: 作用： ①改善培養(yǎng)環(huán)境 ②擴(kuò)大繁殖系數(shù) ③控制突變 操作方法： ①超凈工作臺(tái)及工具的準(zhǔn)備 ②接種工具滅菌 ③將菊花莖段從試管中取出，放于接種盤上 ④用接種刀和鑷子，將菊花莖段上的新鮮莖段切下 ⑤打開繼代培養(yǎng)基 ⑥將切下的外植體快速的接入培養(yǎng)基上 ⑦封口13.參考答案: ?①胚狀體具有兩極性，即在發(fā)育的早期階段，從其方向相反的兩端分化出莖端和根端；而不定芽和不定根都為單向極性。 ?②胚狀體的維管組織與外植體的維管組織無解剖結(jié)構(gòu)上的聯(lián)系。而不定芽或不定根往往總是與愈傷組織的維管組織相聯(lián)系。 ?③胚狀體維管組織的分布是獨(dú)立的“Y”字形。而不定芽的維管組織無此現(xiàn)象。14.參考答案:陰性反應(yīng)15.參考答案:脫毒；0.1；熱處理；病毒檢定16.參考答案:2,4-D；器官分化17.參考答案:適宜的大小18.參考答案:錯(cuò)誤19.參考答案:D20.參考答案: （1）植物種類和基因型 （2）培養(yǎng)材料的生理狀態(tài) 發(fā)育年齡：一般幼態(tài)比老態(tài)組織形態(tài)發(fā)生能力高； 培養(yǎng)器官或組織類型：細(xì)胞分裂旺盛的器官較好； 培養(yǎng)時(shí)間和細(xì)胞倍性：一般取處于旺盛生長期的愈傷來誘導(dǎo)器官形成。 （3）培養(yǎng)基 A.營養(yǎng)成分：一般認(rèn)為，培養(yǎng)基中的銨態(tài)氮和K+有利于胚狀體形成，提高無機(jī)磷的含量可促進(jìn)器官發(fā)生；?莖尖培養(yǎng)和芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基主要是MS及其修改的培養(yǎng)和B5培養(yǎng)基；??碳水化合物種類及濃度對胚狀體發(fā)育有重要作用，缺糖或低糖無法形成胚狀體。 B.植物激素及生長調(diào)節(jié)劑 （起主導(dǎo)作用，通過影響內(nèi)源激素的平衡起作用 C.培養(yǎng)基的性質(zhì)：愈傷組織誘導(dǎo)：在固體培養(yǎng)基上；細(xì)胞和胚狀體的誘導(dǎo)在液體培養(yǎng)基上 （4）培養(yǎng)條件：光照；溫度；氣體；濕度等21.參考答案:超低溫保存22.參考答案:外植體誘導(dǎo)23.參考答案: （1）在水稻中，在外部形態(tài)上可根據(jù)葉枕距為5-15cm，穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長度的1/2這些條件鑒定。 （2）利用這些外部標(biāo)志，選擇符合條件的花蕾，經(jīng)鏡檢確定花粉發(fā)育的準(zhǔn)確時(shí)期。 （3）壓片染色法是檢測劃分發(fā)育時(shí)期的簡便有效方法，常用染色劑為醋酸洋紅。24.參考答案:單倍體25.參考答案:完整植株第2卷參考答案一.參考題庫1.參考答案:理化法2.參考答案:正確3.參考答案:錯(cuò)誤4.參考答案: 造成組織培養(yǎng)過程中污染的原因很多，如工作環(huán)境及儀器的因素、培養(yǎng)基及器皿滅菌不徹底、外植體帶菌、操作時(shí)不遵守操作規(guī)程等。造成污染的病原主要分為細(xì)菌和真菌兩大類。 真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接種后3～8d即可發(fā)。真菌性污染一般多由接種室內(nèi)的空氣不清潔、超凈工作臺(tái)的過濾效果不理想、操作不慎等原因引起。此類污染可通過完善操作、控制培養(yǎng)環(huán)境、嚴(yán)格操作程序來克服。 細(xì)菌性污染除外植體帶菌或培養(yǎng)基滅菌不徹底外，主要是操作人員的不慎造成。除要求操作人員嚴(yán)格按照無菌操作程序操作外，外植體帶菌引起的污染與外植體的種類、取材季節(jié)、部位、預(yù)處理方法及消毒方法密切相關(guān)。因此，取材以春夏生長旺季、當(dāng)年生的嫩梢為佳，應(yīng)盡量選擇晴天中午進(jìn)行，或取離體枝梢在潔凈空氣條件下抽芽，然后從新生組織中取材接種。 外植體的徹底消毒是控制污染的前提，應(yīng)根據(jù)不同材料選擇合適的消毒劑和消毒方法，有些特殊材料還須進(jìn)行預(yù)處理，以達(dá)到最佳消毒效果。對于材料內(nèi)部帶菌的組織有時(shí)還需在培養(yǎng)基中加入適量抗生素。5.參考答案:利用離體培養(yǎng)技術(shù)，將來自優(yōu)良植株的器官、組織和細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，在短期內(nèi)獲得大量遺傳性一致的個(gè)體的方法6.參考答案:正確7.參考答案:幼胚培養(yǎng)8.參考答案:異地保寸9.參考答案: ①低生長素/高細(xì)胞分裂素時(shí)，更易促進(jìn)外植體長莖芽。 ②生長素與細(xì)胞分裂素均衡時(shí)，促進(jìn)外植體同時(shí)莖芽和根，或愈傷組織。 ③高生長素/低細(xì)胞分裂素時(shí)，更易促進(jìn)外植體產(chǎn)生根。10.參考答案:愈傷組織11.參考答案:C12.參考答案:植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)有： ①培養(yǎng)條件可以人為控制。 組織培養(yǎng)采用的植物材料完全是在人為提供的培養(yǎng)基質(zhì)和小氣候環(huán)境條件下進(jìn)行生長，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災(zāi)害性氣候的不利影響，且條件均一，對植物生長極為有利，便于穩(wěn)定地進(jìn)行周年培養(yǎng)生產(chǎn)。 ②生長周期短，繁殖率高。 植物組織培養(yǎng)是由于人為控制培養(yǎng)條件，根據(jù)不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養(yǎng)條件，因此生長較快。另外，植株也比較小，往往20-30d為一個(gè)周期。所以，雖然植物組織培養(yǎng)需要一定設(shè)備及能源消耗，但由于植物材料能按幾何級數(shù)繁殖生產(chǎn)，故總體來說成本低廉，且能及時(shí)提供規(guī)格一致的優(yōu)質(zhì)種苗或脫病毒種苗。 ③管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制。 植物組織培養(yǎng)是在一定的場所和環(huán)境下，人為提供一定的溫度、光照、濕度、營養(yǎng)、激素等條件，極利于高度集約化和高密度工廠化生產(chǎn)，也利于自動(dòng)化控制生產(chǎn)。它是未來農(nóng)業(yè)工廠化育苗的發(fā)展方向。它與盆栽、田間栽培等相比省去了中耕除草、澆水施肥、防治病蟲害等一系列繁雜勞動(dòng)，可以大大節(jié)省人力、物力及田間種植所需要的土地。13.參考答案:錯(cuò)誤14.參考答案:2，4-D；NAA；IBA；IAA15.參考答案:單倍體；二倍體；胚乳培養(yǎng)16.參考答案:正確17.參考答案: （1）原生質(zhì)體的純化 ①沉降法：應(yīng)用原生質(zhì)體的比重大于溶液的性質(zhì)而使原生質(zhì)體沉于底部。 ②漂浮法：應(yīng)用滲透劑含量較高的洗滌液使原生質(zhì)體漂浮于液體表面。 ③梯度離心法：選兩種不同滲透濃度的溶液，其中一種溶液密度大于原生質(zhì)體的密度，另一種溶液小于原生質(zhì)體的密度。 （2?原生質(zhì)體活力的測定 ①形態(tài)識別：形態(tài)上完整，呈圓形，含有飽滿的細(xì)胞質(zhì)，顏色鮮艷的即為存活的原生質(zhì)體。 ②染色識別 1、0.1%酚番紅或Evans藍(lán)染色：有活力的不被染色，死亡的被染上色。 2、雙醋酸鹽熒光素（FDA）染色法：在熒光顯微鏡下有熒光的即為有活性的原生質(zhì)體。18.參考答案:C19.參考答案:根20.參考答案:B21.參考答案: （1）用于胚的挽救?遠(yuǎn)緣雜交是植物育種工作的重要途徑之一，單遠(yuǎn)緣雜交難以成功的一個(gè)主要原因就是雜交后的合子胚發(fā)育不良，常常表現(xiàn)中途敗育。通過人工胚培養(yǎng)可使之成苗，用于育種。 （2）打破種子休眠?胚培養(yǎng)可使休眠的種子提高萌發(fā)成苗、縮短育種周期或加速良種繁育。 （3）克服珠心胚的干擾?利用幼胚離體培養(yǎng)技術(shù)可以排除多胚性植物珠心胚對合子胚的干擾，獲得雜種胚，大大提高雜交育種的效率。 （4）誘導(dǎo)胚狀體及胚性愈傷組織?利用植物的幼胚或其他胚胎組織，在離體培養(yǎng)條下可以產(chǎn)生大量次生胚狀體，從而用于快速繁殖。 （5）種子生活力的快速測定?木本植物經(jīng)層積和未層積處理的種胚離體培養(yǎng)條件的萌發(fā)速率一致。22.參考答案:不定器官形成；體細(xì)胞胚胎發(fā)生23.參考答案:玻璃化24.參考答案:用量準(zhǔn)確25.參考答案:錯(cuò)誤第3卷參考答案一.參考題庫1.參考答案:錯(cuò)誤2.參考答案:先配制4種母液： 1）大量元素貯備液，20倍； 2）微量元素貯備液，200倍； 3）鐵鹽貯備液，200倍； 4）除蔗糖外的有機(jī)物貯備液，200倍。 配制時(shí)將稱量出來的各種成分分別放入一個(gè)燒杯，先加少量蒸餾水溶解，再依次混合，最后定容；注意鐵鹽要裝入棕色細(xì)口瓶。再按每配1L培養(yǎng)基用母液1五十毫升，用母液2-4各五毫升的量進(jìn)行培養(yǎng)基的配制，例如配制100毫升培養(yǎng)基可加母液I五毫升，母液2-4各0.5毫升，再用蒸餾水定容到100毫升。3.參考答案:A,B,C4.參考答案:大型臥式滅菌器進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌：把已裝入了培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放入鐵絲籃里，上蓋幾張報(bào)紙吸濕，開始加熱前注水至最高水位線，接通電源，將壓力控制鈕至開位，關(guān)好門，使門關(guān)閉指示燈亮為準(zhǔn)；再將壓力控制鈕調(diào)至0.11M帕，升溫后，當(dāng)套層壓力表達(dá)在121℃，0.11M帕?xí)r才將總閥打至滅菌檔，這時(shí)熱氣進(jìn)入滅菌室，當(dāng)滅菌室壓力達(dá)0.05M帕?xí)r，將冷凝水泄出器閥門打開，讓冷凝水和少量蒸汽排出；當(dāng)滅菌室壓力達(dá)0.11M帕，溫度達(dá)121℃時(shí)，開始計(jì)時(shí)，滅菌15-20分鐘后，將壓力控制鈕打至關(guān)位，再將總閥打至慢排位，讓鍋內(nèi)氣壓緩慢下降，滅菌時(shí)壓力表指針回零后，再將總閥打至快排位，使套層壓力也歸零，再將總閥打至全排位，排出全部蒸氣，最后再開蓋取培養(yǎng)基。5.參考答案:流水沖洗10min→摘掉葉片，切成合適莖段裝入消毒瓶→超凈工作臺(tái)處用75%酒精浸泡30S→無菌水漂洗1次→0.1%升汞浸泡10min后倒入回收瓶→無菌水沖洗3次，3min/次→封存?zhèn)溆谩?.參考答案: （1）感染病毒植株的體內(nèi)病毒的分布并不均勻，病毒的數(shù)量隨植株部位及年齡而異，越靠近莖頂端區(qū)域的病毒的感染深度越低，生長點(diǎn)則幾乎不含或含病毒很少。 （2）了解植物攜帶何種病毒，病毒在體內(nèi)的分布位置；母體植株的選擇和預(yù)處理；莖尖的剝離；脫毒效果檢測。 （3）取培養(yǎng)植株的葉片置于研缽中，加入少量的水和等量的0.1mol/L磷酸緩沖液（pH7.0），磨成勻獎(jiǎng)，將其涂抹在指示植株葉片上，在指示植物的葉片撒上金剛砂，通過輕輕摩擦使汁浸入葉片表皮細(xì)胞而又不損傷葉片。5分鐘后用清水清洗葉面。將指示植株放于防蚜蟲網(wǎng)罩的溫室內(nèi)。然后視其病斑的有無，來判斷是否脫除了病毒。7.參考答案: （1）莖尖培養(yǎng)脫毒：病毒在植物體內(nèi)的分布并不均勻，越靠近莖端的病毒的感染深度越低，生長點(diǎn)則幾乎不含或含病毒很少。 （2）愈傷組織培養(yǎng)脫毒法：通過植物的器官和組織的培養(yǎng)，脫分化誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，然后從愈傷組織再分化產(chǎn)生芽，長成小植株，可以得到無病毒苗。 （3）珠心胚培養(yǎng)脫毒：病毒一般不通過種子傳播，由珠心細(xì)胞發(fā)育成的胚再生的植株是無毒的，并具有與母本相同的遺傳特性。 （4）莖尖微體嫁接：將實(shí)生苗砧木在人工培養(yǎng)基上種植培育，再從成年無病樹枝上切取0.4—1.0mm莖尖，在砧木上進(jìn)行試管微體嫁接，以獲得無病毒幼苗。 （5）熱處理脫毒：一些病毒對熱不穩(wěn)定，在高于常溫的溫度下（35-40℃），即鈍化失活 （6）化學(xué)處理脫毒：抑制或殺死病毒8.參考答案:A9.參考答案:酶解法10.參考答案: 流程： ①消毒接種工具并冷卻 ②體視顯微鏡下剝莖尖 ③接種至DS培養(yǎng)基 注意事項(xiàng)：進(jìn)無菌室之前，操作人員需著經(jīng)滅菌的白色工作服，戴口罩。操作人員雙手必順進(jìn)行滅菌。11.參考答案: 1、準(zhǔn)備室的設(shè)置及配備：器具的洗滌、干燥、消毒。 2、配置室：進(jìn)行藥品的配置、保存、分裝。 3、滅菌室：?培養(yǎng)基及使用器具的消毒與滅菌。 4、緩沖間：隔離接種室與外界，防止滅菌室直通接種室，控制污染氣流和控制壓差的作用，以保證接種室的