DB23-T 3529-2023 玉米抗絲黑穗病多標(biāo)記分子輔助育種技術(shù)規(guī)程_第1頁
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發(fā)布B DB23/T3529—DB23/TDB23/T3529—II 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定DB23/TDB23/T3529— 玉米抗絲黑穗病基因連鎖的SNP位點、基于該位點的分子標(biāo)記LSdCAP2及其應(yīng)用,專利號:DB23/TDB23/T3529—maizehead4儀器1本文件適用于玉米(ZeamaysL.)抗絲黑穗病多標(biāo)記分子輔助育種。NY/T1248.3-2006玉米抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第3部分:玉米抗絲黑穗病鑒定技術(shù)規(guī)范NY/T1432-2014玉米品種鑒定技術(shù)規(guī)程SSR標(biāo)記法DB23/TDB23/T3529—選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良但感或高感絲黑穗病的玉米自交系,且不具有bin2.09主效抗病位點/基因和按照NY/T1432-2014中9.2采用20μLdNTP(2.5mM/mL)2μl,10×TaqBuffer2μl,25mMMgCl21μl,Primer-F(20μM0.5μl,Primer-R(20μM)0.5μl,Taq(5U/μL)1μl,DNA(20ng/μL~50ng/μL)2μl,ddH2O11μl。擴增反應(yīng)條件為:PCR95℃預(yù)變性5min;95℃變性30s,55℃退火30s,72℃延伸10s,共34個循環(huán);72℃延伸10min,4℃保存。單標(biāo)記PCR產(chǎn)物酶切反應(yīng)體系10μl,包括10×NEBuffer1μl10U/μl0.4μl,PCR產(chǎn)物2.5μl,ddH2O6.1μl,37℃孵育3h左右。2DB23/TDB23/T3529—性鑒定按照NY/T1248.3-2006的要求執(zhí)行,通過小區(qū)品比試驗,選出優(yōu)良抗病玉米自交系。7田間檔案3LSdCAP2LSdCAP8和DNdCAPS8.03-1標(biāo)記酶切產(chǎn)物大小分別為73/20bp,22/114bp,19/113bp和114/23bp,可BC1F1BC2F144附錄dCAPS表A.1dCAPSQTL所在的QTL表型貢獻(xiàn)率15’CTGCAG3’GACGTC25’ACTGGN3’

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