養(yǎng)殖水化學拓展實驗指導

PAGEPAGE1《養(yǎng)殖水化學拓展實驗指導》目錄1氯離子12氯度（銀量法）23鹽度（比重法）34鹽度（鹽度計法）45硫酸根（EDTA四滴法）76堿度（pH法）97氨氮（奈氏試劑法）118氨氮（次溴酸鹽氧化法）129氨氮（靛酚藍法）1410硝酸鹽氮（鋅鎘還原—重氮偶氮法）1611硝酸鹽氮（鎘柱還原法）1712凱氏氮2013總磷2214可溶性硅酸鹽（硅鉬藍法）2315透明度2516水色2617嗅和味2618懸浮物質2619渾濁度（目視比濁法）2820渾濁度（分光光度法）3021渾濁度（濁度計法）3122溶解氧（膜電極法）3223化學耗氧量（重鉻酸鉀法）3324化學耗氧量（堿性高錳酸鉀法）3525生化需氧量（五日培養(yǎng)法）3626硫化物（亞甲基藍分光光度法）38

實驗一氯離子一、方法原理水中氯離子含量的測定，可采用銀量滴定法。此法在中性或微堿性條件下（pH=6.5—10.5），以K2CrO4作為指示劑，用標準AgNO3溶液滴定，其滴定反應：Ag++Cl-=AgCl↓(白色)其指示劑反應為：2Ag++CrO42-=Ag2CrO4↓（磚紅色）因為AgCl的溶解度遠小于Ag2CrO4的溶解度，所以當AgCl定量沉淀后，才生成Ag2CrO4沉淀，指示滴定終點。二、儀器與設備錐形瓶、酸式滴定管、移液管等常規(guī)實驗室設備三、試劑及其配制AgNO3標準溶液：溶解4.8gAgNO3固體于1L純水中，置于棕色磨口試劑瓶保存。此溶液對于氯離子的滴定度TAgNO3/Cl約為1.0mg/mL，其準確值須用氯化鈉標準溶液標定。NaCl基準溶液（CCl-=1.000mg/mL）：準確稱取氯化鈉（NaCl，AR，在500—600℃的馬弗爐內灼燒1h）0.8243g，在500mL容量瓶中定容。K2CrO4溶液（10%）四、測定步驟AgNO3溶液的標定準確移取NaCl基準溶液20.00mL于錐形瓶中，加入30mL純水和0.5mLK2CrO4溶液，用AgNO3溶液滴定，滴定過程須不斷劇烈搖動錐形瓶，直至溶液由黃色變?yōu)榉€(wěn)定的桔黃色為止，讀取滴定管讀數(shù)V1（雙樣標定，取平均值）。按下式計算AgNO3標準溶液滴定度的準確值：TAgNO3/Cl=20.00x1.000/V1（mg/mL）水樣中氯離子含量的測定準確移取水樣50.00mL于錐形瓶中，加入0.5mLK2CrO4溶液，用AgNO3標準溶液滴定，滴定過程須不斷劇烈搖動錐形瓶，直至溶液由黃色變?yōu)榉€(wěn)定的桔黃色為止，讀取滴定管讀數(shù)V2（雙樣標定，取平均值）。五、結果計算ρCl-=TAgNO3/ClxV2x1000/50.00(mg/L)注意事項本法適用于一般淡水分析。本法要求在中性或微堿性條件下進行，若pH>10.5，滴定過程產(chǎn)生Ag2O沉淀；若pH<6.5，則指示劑CrO42-大部分轉變?yōu)镃r2O72-，使終點推遲出現(xiàn)，當水樣pH不符合滴定要求時，可分別用硝酸和氫氧化鈉的稀溶液進行調整。滴定中指示劑K2CrO4的濃度是以50mL水樣進行測算的，當?shù)味ㄋ畼芋w積有較大變動時，影響應增減指示劑的用量，以免對滴定終點的出現(xiàn)產(chǎn)生影響。AgNO3屬貴重藥品，須節(jié)約合理使用。實驗二氯度（銀量法）一、方法原理以銀量法測定海水的氯度，此法在中性或微堿性條件下，用標準AgNO3溶液滴定，以熒光黃鈉鹽吸附指示劑指示滴定終點，終點時溶液由黃綠色轉變?yōu)闇\玫瑰紅色，采用相同的方法滴定氯度標準溶液（或標準海水），從而計算海水的氯度。二、儀器及設備錐形瓶、酸式滴定管、移液管等常規(guī)實驗室設備三、試劑及其配制AgNO3標準溶液：溶解49.2gAgNO3固體于1L純水中，置于棕色磨口試劑瓶保存。熒光黃—淀粉指示劑：該指示劑由熒光黃鈉鹽溶液和淀粉溶液混合而成。這兩種溶液的配制方法分別如下：熒光黃鈉鹽溶液：0.1g熒光黃溶于10mLNaOH溶液（4.0g/L）中，以稀硝酸中和至中性，并稀釋至100mL。淀粉溶液（10%）：將可溶性淀粉調至糊狀，加水后煮沸即成。量取12.5mL熒光黃鈉鹽溶液與250mL淀粉溶液混合，并加入0.25g苯甲酸作防腐劑，此溶液可穩(wěn)定1個月，如出現(xiàn)絮狀物應重新配制。氯度標準溶液（氯度值為ClN）：溶解32.745g的氯化鈉固體（NaCl，AR，在500—600℃的馬弗爐內灼燒1h），用20℃的純水配制并于20℃下在1000mL容量瓶中定容。此溶液相當于氯度值為19.375的標準海水。四、測定步驟1.AgNO3標準溶液的標定：移取氯度標準溶液10.00mL于燒杯中，加入1.5mL的熒光黃—淀粉指示劑，放入磁轉子。在電磁攪拌下以AgNO3標準溶液滴定，當溶液剛由黃綠色變?yōu)榉€(wěn)定的玫瑰紅色時，即為滴定終點，記錄其消耗AgNO3標準溶液的體積VN(雙樣標定，取平均值)，則該AgNO3標準溶液的濃度校準因子為：f=ClN/VNf為每毫升AgNO3標準溶液所相當?shù)穆榷戎?。水樣的測定準確移取水樣10.00mL于100mL燒杯中，按標定氯度標準溶液步驟進行操作，記錄其消耗AgNO3標準溶液的體積Vw（雙樣測定，取平均值）。五、結果計算以下是計算海水樣品的氯度值：Cl‰=VwΧf+k=Vs+kVs——經(jīng)過校準后海水樣品所消耗的AgNO3溶液的（標準化體積）K——計算氯度的校正值（見下表）計算氯度的校正值kVsVskVsk0.0019.5719.57-0.010.1819.17.019.94-0.020.5818.77+0.0120.31-0.030.9918.34+0.0220.67-0.041.4217.89+0.0321.01-0.051.8817.41+0.0421.35-0.062.3616.91+0.0521.66-0.072.8816.37+0.0621.98-0.083.4515.78+0.0722.29-0.094.0815.13+0.0822.59-0.104.7914.40+0.0922.89-0.115.6413.32+0.1023.18-0.126.7412.39+0.118.8210.29+0.1210.298.82+0.13六、注意事項氯度計算的校正值k的提出時考慮到不同氯度的海水密度不同的因素，它可將由消耗AgNO3溶液的“標準化體積”Vs校正到由質量比定義的海水Cl‰值。在用上表差算k值時，只適用于以Cl‰=19.375的標準溶液（或同一Cl‰值的標準海水）標定AgNO3標準溶液的氯度計算。在大批海水樣品的滴定中，可采用10.00mL的海水自動移液管和具有自動裝液、自動調零裝置的25mL酸式滴定管。標定AgNO3溶液和水樣的測定條件應盡量保持一致，并且使用同一標準AgNO3溶液，使用同一移液管，終點色調要盡量控制一致。水樣與氯度標準溶液的溫度必須相近，通常需讓水樣預先在實驗室擱置一段時間，待其接近室溫后，方可進行測定。混濁海水一般對終點判斷無影響。如水樣太混濁，判斷終點有困難時，可將水樣經(jīng)定性濾紙過濾并立即滴定。指示劑也可用10%的K2CrO4溶液（每份加入5滴即可）。終點時，溶液由黃色突變?yōu)榉€(wěn)定的桔黃色，30s內不褪色，即可記下滴定管讀數(shù)。實驗三鹽度（比重法）一、方法原理海水密度（或比重）是海水溫度和鹽度的函數(shù)，借助海水比重計測出海水的比重（相對于17.5℃純水），再由海水的比重和水溫差表推算海水的鹽度。此法操作十分簡便，其準確度為0.1‰鹽度，可滿足海水動植物增養(yǎng)殖的生產(chǎn)和科學研究對鹽度的精確度的要求。二、儀器海水比重計（刻度由1.0000至1.0400）1支或精密海水比重計1套（共8支，包括不同密度范圍的比重計）、溫度計三、測定與查算待測海水樣品置于筒裝玻璃容器（如2L的量筒），把海水比重計置于筒內海水樣品中，使之呈懸浮狀態(tài)，待穩(wěn)定后即可讀數(shù)。讀數(shù)時眼睛視線必須與液面持平，液面的彎月面投影在比重計刻度標尺上的位置即為比重計讀數(shù)dt（讀至0.00001位），同時讀取置于筒內海水樣中的溫度計的讀數(shù)t℃(讀至0.1℃)。根據(jù)下式計算海水樣品在t℃的條件比重（at）：at=（dt-1）Х1000根據(jù)樣品溫度（t℃）和條件比重于“海水比重鹽度查對表”（見附表）用雙內插法查算海水的鹽度（精確至0.1‰）。六、注意事項在海洋學上，海水在t℃的條件比重at需訂正至17.5℃：ρ17.5=at+k，然后根據(jù)ρ17.5與鹽度的對應關系查出樣品的鹽度。訂正值k與ρ17.5—S‰等表見海洋學用表，這里提供的“海水比重鹽度查對表”則綜合上述二表推得。實驗四鹽度（鹽度計法）實驗室采用的鹽度計分為感應式、電極式兩種類型，適用于在陸地或船上實驗室中測量海水樣品的鹽度，典型的儀器應用范圍為：2≤S≤42，-2℃≤θ≤35℃。一、方法原理測量海水樣品與標準海水在101325Pa下的電導率比R0，再查國際海洋學常用表，得出海水樣品的實用鹽度?；蛴上率接嬎悖菏街校篴0=0.0080a1=-0.1692a2=25.385a3=14.0941a4=7.0261a5=2.7081K=0.0162b0=0.0005b1=-0.0056b2=-0.0066b3=-0.0375b4=0.0636b5=-0.0144Rθ——被測海水與實用鹽度為35的標準海水在溫度為θ時的電導率的比值（均在101325Pa下）。二、儀器及設備鹽度計（儀器型號不限，僅以WUS型感應式鹽度計為例介紹測定方法），常規(guī)實驗室設備。三、試劑及其配制標準海水四、測定步驟將被測樣品放置至與標準海水溫差在±2℃內，以備測量。測溫測鹽檢查：將溫鹽轉換開關轉到測溫檔，將讀取的溫度與室溫比較，其偏差在±1℃范圍內，則測溫橋路正常。將儲水杯下面的放水旋鈕擰緊。將鹽度已知的海水置于電導池下面的進水管處，電導池旋塞至進水位置，打開氣泵開關，用左手中指按緊儲水杯上面的氣孔，此時海水將緩緩注入電導池。當電導池出水口有少許海水溢入儲水杯時，即將電導池進水旋塞置關閉位置，放開手指，關閉氣泵，此時電導池內充滿海水。根據(jù)實測水溫，從儀器面板溫度換算表上查出對應的R2值，將R2置于相應的位置。將溫鹽轉換開關轉到測鹽檔，R0旋鈕置于已知海水電導率比的位置，調節(jié)R1旋鈕，指零表頭指零，則測鹽系統(tǒng)正常。定標將標準海水緩緩沖入電導池內，清洗1—2次后，測量標準海水的溫度并記錄在表內。從儀器面板溫度換算表上查出對應的R2值，并將R2旋鈕旋至辭職。按標準海水鹽度值查國際海洋學常用表Ia給出電導率比R15，根據(jù)所測溫度t和電導率比R15查海洋學常用表Ⅱa，給出鹽度修正量ΔS，按公式S=S未修正+ΔS，求得S未修正，再從表Ⅰa查出對應的電導率比Rt。此值即為所測溫度t(℃)下，標準海水電導率比的定標值。例：標準海水鹽度值S=34.544電導池溫度θ=21℃由表Ⅰa查出R15=0.98835由表Ⅱa查t=21℃，R15=0.98—0.99，得ΔS=-0.001S未修正=S-ΔS=34.545查Ⅰa表得R21=0.98838將標準海水的定標值Rt旋到電導率比的相應位置上。將溫鹽轉換開關轉到測鹽檔，調節(jié)R1旋鈕，使指零表頭指零，關閉攪拌，將水放掉。如此重復充灌調節(jié)，直到出現(xiàn)重復讀數(shù)為止，即完成儀器定標。將R1值記入記錄表內。樣品測量啟動氣泵，將樣品水緩緩吸入電導池內，清洗1—2次。當樣品水從電導池溢水口溢出時，立即關閉電導池進水旋塞，斷開氣泵電源，啟動攪拌。溫鹽轉換開關轉到測溫檔，測量海水樣品的溫度，記入記錄表內。將溫鹽轉換開關轉到測鹽檔，調節(jié)Rt旋鈕，使指零表頭指零，關閉攪拌，放掉電導池的水樣。若兩次測量，電導比旋鈕最后一位變動小于6時，則認為兩次測量是重復的，將測得的海水樣品的電導率比Rt數(shù)值記入記錄表內。五、結果計算計算實用鹽度有以下兩種方法：計算機處理：運用公式編制程序計算，計算結果應表示至小數(shù)點后第三位。查國際海洋學常用表若在15℃下測得電導率比值R15時，可由表Ⅰa、內插表Ⅰb，直接得到實用鹽度。例：在15℃時測得的電導率比為0.95427。查表ⅠaR15=0.95420→S=33.214R15=0.95430→S=33.217δS=3X10-3查內插表Ib（δS=3X10-3）δRX105=7→ΔS=2X10-3則R15=0.95427時，實用鹽度S=33.214+2X10-3=33.216也可以查表Ⅰa，然后用內插法計算的實用鹽度。在溫度θ下測得電導率比值Rθ，可查表Ⅰa和表Ⅰb確定未修正鹽度S未修正，據(jù)所測電導率比值Rθ和溫度θ，查表Ⅱa和表Ⅱb確定修正量ΔS。實用鹽度S=S未修正+ΔS。例2：當溫度為28.6℃時，測得電導率比為0.82354。查表Ⅰa和表Ⅰb，得S未修正=28.195查表Ⅱa，t=28.0→ΔSX103=-40t=29.0→ΔSX103=-43δSX103=-3δt=28.6-28.0=0.6查表Ⅱb，δtX10=6,δSX103=3SX103=2修正量ΔSX103=-40-2=-42實用鹽度S=S未修正+ΔS=28.195-0.042=28.153六、注意事項1.250mL樣品瓶及瓶塞必須用同一水樣嚴格清洗3次后，再裝取測試水樣。使用后的樣品瓶應盛有部分海水，在下一次取樣時放掉。2.向電導池內充灌海水樣品時，要注意避免電導池內有氣泡產(chǎn)生。若有氣泡，測量讀數(shù)一般會偏小，此時應重新充灌測量。產(chǎn)生氣泡的原因較多，主要有以下幾種：①充灌速度太快，氣泡來不及逸出而附著在電導池壁上。消除方法：調節(jié)儲水杯上面的調速小螺絲，使充灌時間大于10s。②電導池被臟物或油垢污染，容易附著氣泡，一般情況下，可用配制的30%洗潔凈溶液充灌清洗，再用蒸餾水清洗。特別情況下，需拆下電導池殼清除油污或臟物時，應特別小心，不要損壞電導池內的熱敏電阻加熱器。③熱敏電阻的密封環(huán)節(jié)有漏氣處，容易引進氣泡?？蛇m當擰緊螺絲，但不宜過緊，以免損壞熱敏電阻。④進水旋塞磨損，氣泡和水會同時進入電導池?？蓪⑿筮呌袡C玻璃螺母擰緊。若還不行，可取出旋塞，將孔清洗干凈，薄薄地涂上一層真空脂（不可涂得過多，以免污染電導池），裝上旋塞。向電導池充灌水樣時，要先把進水管內的殘留水樣放掉，擦干進水管，再按分析步驟中所述程序進行。否則，殘留水會污染水樣。4.連續(xù)測量時，應用標準海水或工作副標準海水定時檢驗儀器，并將檢測的數(shù)值填入記錄表內。間斷測量時，按需要隨時檢驗校準儀器，確保測量數(shù)據(jù)的準確可靠，并將校準的情況，計入記錄表內，以備分析參考。5.加熱器一般在儀器調節(jié)溫度補償時使用，測量時不用。電導池無水時，嚴禁開架熱氣，以免燒壞加熱器和探頭。6.經(jīng)常注意泄放儲水杯內的殘水，切不可使存水接近氣孔。否則，開氣泵時會把水吸入氣泵，損壞氣泵。水樣品鹽度測定記錄（鹽度計法）海區(qū)調查船采樣日期：年月日儀器型號測定日期：年月日序號站號層次（m）瓶號測定時水溫(℃)電導率比RθS未修正ΔS實用鹽度S12345678備注查國際海洋學常用表Ⅰa、Ⅰb查國際海洋學常用表Ⅱa、ⅡbS未修正+ΔS分析者計算者校對者實驗五硫酸根（EDTA滴定法）一、方法原理采用EDTA滴定法測定天然淡水中SO42-含量。在水樣中加入過量的BaCl2溶液，把SO42-轉變?yōu)殡y溶的BaSO4沉淀。過量部分的Ba2+連同水樣的Ca2+、Mg2+在pH約為10的氨緩沖條件下，用EDTA標準溶液滴定。另外同時測定水樣中的鈣鎂總量，以便計算時加以校正。二、儀器及設備實驗室常規(guī)設備三、試劑及其配制氨緩沖溶液（內含Mg-EDTA鹽）：溶液A——20gNH4Cl固體溶愚純水中，加入100ml濃氨水并稀釋至1L；溶液B——0.25gMgCl2·6H2O溶解后于100ml容量瓶中定容，然后用干燥潔凈的移液管移取50.00ml溶液，加5mlNH3-NH4Cl溶液，4滴鉻黑T指示劑，用0.1mol/L的EDTA-Na2溶液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{色為止，取與此等體積的EDTA-Na2溶液加入容量瓶中與剩余的MgCl2溶液混合，即成Mg-EDTA鹽溶液。將溶液A與溶液B混合即得含Mg-EDTA鹽的氨緩沖溶液。鉻黑T指示劑（0.5%）：0.5g鉻黑T固體溶于100ml純水中，于棕色瓶中保存。EDTA-Na2標準溶液（0.01mol/L）：1L溶液中含EDTA-Na2（基準級）4克，其準確濃度以標準Zn2+溶液標定。金屬鋅BaCl2標準溶液（0.01mol/L）：BaCl2固體1.04g溶解后，稀釋至500mL。BaCl2溶液（5%）HCl溶液（1∶1）四、測定步驟EDTA溶液的標定準確稱取0.33g的金屬鋅置于小燒杯中，加入10mLHCl溶液，蓋上表面皿，待鋅完全溶解后，將溶液全部轉入250mL容量瓶中定容，搖勻后即得Zn2+標準溶液。準確移取Zn2+標準溶液20mL于250mL錐形瓶中，逐滴加入氨水，待溶液有氨味后加入氨緩沖溶液5mL，鉻黑T指示劑3滴，用EDTA溶液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{色即為滴定終點。EDTA溶液的準確濃度可由下式計算：C1=(WX20.00X1000)/(V1X65.38X250)(mol/L)W——稱取金屬鋅的準確質量V1——標定時消耗EDTA溶液的毫升數(shù)BaCl2標準溶液的標定移取BaCl2標準溶液20.00mL，加入純水30mL，氨緩沖溶液5mL，鉻黑T指示劑3滴，用EDTA標準溶液滴定，當溶液剛由紫紅色變?yōu)榉€(wěn)定的純藍色，即為滴定終點，記錄EDTA溶液的消耗體積V2（雙樣標定，取平均值），按下式計算BaCl2標準溶液的準確濃度C2：C2=C1V2/20.00mol/LC1——EDTA標準溶液的準確濃度（mol/L）V2——滴定消耗的EDTA標準溶液的體積（mL）水樣中SO42-含量的略測：取5mL水樣于試管中，加入1∶1HCl溶液2滴，5%BaCl2溶液5滴，搖蕩均勻，觀察沉淀的生成情況，并根據(jù)下表決定準確測定時的取樣體積和BaCl2標準溶液的預加量。SO42-含量略測表渾濁情況SO42-大概含量（mg/L）取樣體積（mL）BaCl2標準溶液的預加量（mL）數(shù)分鐘后渾濁<10505立即出現(xiàn)輕微渾濁25—505010立即出現(xiàn)渾濁50—1002510渾濁程度較大100—3001010水樣中SO42-含量的測定按略測結果準確移取適量的水樣于錐形瓶中，并加純水至50mL，滴加1∶1HCl溶液至pH<3，加熱煮沸2min以驅除二氧化碳，并趁熱準確加入BaCl2標準溶液V3毫升，繼續(xù)加熱至沸，冷卻后放置5h以上使BaSO4結晶陳化。而后加入氨緩沖溶液5mL，鉻黑T指示劑3滴，以EDTA標準溶液滴定至溶液剛由紫紅色轉變?yōu)榉€(wěn)定的純藍色，即為滴定終點，記錄EDTA標準溶液的消耗量V4（雙樣測定，取平均值）。移取同體積水樣，加純水至50mL，滴加1∶1HCl溶液使水樣酸化，加熱煮沸除去二氧化碳后，加入氨緩沖溶液5mL，鉻黑T指示劑3滴，以EDTA標準溶液滴定至溶液剛由紫紅色轉變?yōu)榉€(wěn)定的純藍色，即為滴定終點，記錄EDTA標準溶液的消耗量V5（雙樣測定，取平均值）。五、結果計算水樣中的SO42-含量可按下式計算：ρSO42-=96.06x1000x[C2V3-C1(V4-V5)]/Vw(mg/L)C1——EDTA標準溶液的準確濃度（mol/L）C2——BaCl2標準溶液的準確濃度（mol/L）V3——預加的BaCl2標準溶液體積（mL）V4——滴定水樣時消耗的EDTA-Na2標準溶液的體積（mL）V5——滴定水樣中Ca2+、Mg2+消耗的EDTA標準溶液的體積（mL）Vw——水樣體積（mL）六、注意事項當水樣中SO42-含量低于20mg/L時，也可采用硫酸鋇比濁法測定，測定時將水樣調節(jié)至酸性，加入BaCl2溶液和明膠溶液保護膠，使SO42-與Ba2+形成均勻的BaSO4微粒并懸浮于溶液中，在波長600—700nm下測定其吸光度，其溶液的吸光度與水樣的SO42-含量成正比。實驗六堿度（pH法）一、方法原理在海水樣品中加入過量的HCl標準溶液，用酸度計測定酸化海水的pH值，根據(jù)有關公式計算水樣的總堿度。二、儀器及設備實驗室常備儀器及設備三、試劑及其配制HCl標準溶液（0.006mol/L）：0.5mL濃HCl用除去CO2的純水稀釋至1000mL。Na2CO3標準溶液（C1/2Na2CO3=0.01000mol/L）：稱取0.5300g無水碳酸鈉（AR，于180℃烘2h），以除去CO2的純水溶解并在1000mL容量瓶中定容。甲基紅—次甲基藍混合指示劑：0.032g甲基紅溶解于80mL95%的酒精中，加入5mL0.1%的次甲基藍酒精溶液，滴加NaOH溶液（0.02mol/L）至指示劑溶液呈淺褐綠色。鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液（0.05mol/L，25℃時pH=4.00）：稱取5.06g鄰苯二甲酸氫鉀固體（AR，于115℃烘干）溶于純水并稀釋至500mL，貯于聚乙烯瓶中?；旌狭姿猁}緩沖溶液（25℃時pH=6.86）：稱取3.39gKH2PO4固體和3.53gNa2HPO4固體（AR，均于115℃烘干）溶于純水并稀釋至1000mL，貯于聚乙烯瓶中。四、測定步驟HCl標準溶液的標定移取Na2CO3標準溶液15.00mL于錐形瓶中，加入甲基紅—次甲基藍混合指示劑3滴，用HCl標準溶液滴定至溶液由黃綠色變?yōu)槊倒寮t，加熱驅除CO2，玫瑰紅褪去，待稍冷卻后繼續(xù)滴至玫瑰紅即為滴定終點，記下消耗的HCl標準溶液體積V（mL，雙樣標定取平均值），按下式計算HCl標準溶液的準確濃度：CHCl=(0.01000x15.00)/V（mol/L）水樣的測定移取25.00mL水樣于100mL燒杯中，準確加入HCl標準溶液10mL，混勻。測定酸化水樣的pH值（酸度計采用混合磷酸鹽和鄰苯二甲酸氫鉀緩沖溶液二點定位），酸化水樣pH值應控制在3.4—3.9范圍內。如高于3.9應再加入1.00mLHCl標準溶液；如低于3.4應再加入水樣5.00mL。五、結果計算海水總堿度可按下式計算：A=1000x[CHClxVHCl–(αH+/γH+)x(Vw+VHCl)/]/Vw(mmol/L)Vw——水樣體積（25.00mL）CHCl——HCl標準溶液的準確濃度（mol/L）VHCl——加入的HCl標準溶液的體積（10.00mL）αH+——酸化水樣的氫離子活度γH+——酸化水樣中氫離子的活度系數(shù)（見下表），在一般情況下（S=21—23，pH=3.4—3.9），γH+可取0.753。海水γH+隨S和pH的變化γH+SpH3.571114.81821—33362.8—2.90.8650.8000.7850.7750.7700.7680.7733.0—3.90.8450.7820.7700.7600.7550.7530.7584.00.8900.8220.8100.8000.7950.7930.798六、注意事項對于同一批海水樣品總堿度的測定，Vw、CHCl、VHCl和γH+均可能是定值，此時計算公式可寫成斜截式的線性方程形式，并作出A—αH+的工作曲線，即可由酸化海水的αH+查出對應海水樣品的總堿度A。實驗七氨氮（奈氏試劑法）方法原理氨氮是指以游離態(tài)的氨和銨鹽形式存在的氮。采用碘化汞鉀的堿性溶液（即奈氏試劑）與氨氮反應生成棕色的絡合物，在420nm波長處，其吸光度與氨氮含量在低于150μmol(N)/L濃度范圍內成正比（當氨氮含量太高時，絡合物逐漸聚集并產(chǎn)生絮狀沉淀）。水樣中的Ca2+、Mg2+和鐵離子與試劑中的強堿產(chǎn)生沉淀對顯色反應的影響，可預加酒石酸鉀鈉予以避免。本法的最低檢出濃度為2.0μmol(N)/L。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管容量瓶、移液管等常規(guī)實驗室設備試劑及其配制無氨純水（下述兩法取其一）：（1）1L純水中加入0.5mol/L的NaOH溶液15ml和過硫酸鉀(K2S2O8)2g于玻璃蒸餾水器中，敞口煮沸10min后接冷凝管收集餾出液于聚乙烯瓶中（棄去150ml殘存液）。（2）1L純水中加入1ml堿性儲備液（15%的NaOH溶液與25%Na2CO3溶液的混合液），然后加熱蒸發(fā)至原體積的一半。酒石酸鉀鈉溶液(30%)：30g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O）溶于純水中，加熱煮沸以驅除氨，冷卻后以純水稀釋至100ml。氫氧化鈉溶液(20%)：20gNaOH固體溶于180ml水中，然后再加熱蒸發(fā)至原體積的一半以驅除氨。奈氏試劑：稱取HgI26g于50ml溫的無氨蒸餾水中，邊攪拌邊加入KI溶液（溶解7.4gKI于50ml無氨蒸餾水中）直至出現(xiàn)朱紅色沉淀為止。冷卻后加入20gNaOH（現(xiàn)在少量水中溶解后再加入），稀釋至250ml，靜置1天，將澄清液傾出置于帶橡皮塞的棕色試劑瓶中，此溶液有效期30天左右。氯化銨標準貯備液（1000μgN/mL）：準確稱取3.820g在110℃下干燥1小時的NH4Cl溶于無氨蒸餾水中，轉移至1000ml容量瓶中，用無氨蒸餾水稀釋至刻度，加入2ml氯仿固定劑。氯化銨標準使用液（10μgN/mL）：移取氯化銨標準貯備液1ml于100ml容量瓶中用無氨蒸餾水稀釋至刻度。測定步驟繪制工作曲線取6個50ml具塞比色管，分別加入0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml氯化銨標準使用液，加無氨蒸餾水至標線，混勻。分別加入酒石酸鉀鈉溶液4ml，混勻。分別加入1ml奈氏試劑，混勻后讓其反應5分鐘顯色。用分光光度計在420nm波長處，于比色皿中對照無氨蒸餾水測定上述溶液的吸光度E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，氨氮濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456氯化銨標準使用液體積（ml）0.001.002.003.004.005.00氨氮濃度（mgN/L）0.000.200.400.600.801.00吸光度值EE0E-E0水樣的測定取50ml水樣于比色管中。參照標準曲線繪制過程中的步驟②③④，顯色并測定該水樣的吸光度值E。結果計算由水樣的測定值E-E0查工作曲線，得該水樣中氨氮的含量。注意事項對于較清潔的水樣，均可直接顯色測定。而污水需采用蒸餾法將氨分離收集后再加奈氏試劑比色。海水中含有大量的Ca2+、Mg2+，若加入酒石酸鉀鈉后加入奈氏試劑仍有沉淀產(chǎn)生，可適當稀釋水樣或用其他方法測定。酒石酸鉀鈉溶液可用EDTA-Na2溶液代替。取樣后如不能立即進行測定，1L水樣可加入40mgHgCl2或4ml氯仿，并在低溫下保存。實驗八氨氮(次溴酸鹽氧化法)方法原理本法適用于大洋和近岸海水及還原性物質含量較低的河口水中氨氮的測定，不能用于污染較重、含有機物較多的養(yǎng)殖水體。在堿性介質中次溴酸鹽將氨氧化為亞硝酸鹽，然后以重氮—偶氮分光光度法測亞硝酸鹽氮的含量，扣除原有亞硝酸鹽氮的濃度，得氨氮的濃度。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管容量瓶、移液管等常規(guī)實驗室設備試劑及其配制硫酸銨標準貯備溶液（100.0mgN/L）：稱取0.4716g硫酸銨[(NH4)2SO4，預先在110℃烘1h，置于干燥器中冷卻，溶于少量水中，全部移入1000mL容量瓶中，加水至標線。加入1mL三氯甲烷混合，貯于棕色試劑瓶中，置冰箱內保存，此溶液有效期半年。硫酸銨標準使用溶液（10.0mgN/L）：移取10.0mL標準貯備溶液于100mL容量瓶中，加水至標線，混勻，臨用時配置。氫氧化鈉溶液（400g/L）：稱取200g氫氧化鈉（NaOH）溶于1000mL水中，加熱蒸發(fā)至500mL，盛于聚乙烯瓶中。鹽酸溶液（1:1）：將500mL鹽酸（HCl，ρ=1.19g/mL）與同體積的水混勻。溴酸鉀—溴化鉀貯備溶液：稱取2.8g溴酸鉀（KBrO3）和20g溴化鉀（KBr）溶于1000mL水中，貯于1000mL棕色試劑瓶中。次溴酸鈉溶液：量取1.0mL溴酸鉀—溴化鉀貯備溶液于250mL聚乙烯瓶種，加49mL水和3.0mL鹽酸溶液，蓋緊搖勻，置于暗處。5min后加入50mL氫氧化鈉溶液，混勻。臨用前配制?；前啡芤海?g/L）：稱取2.0g磺胺（NH2SO2C6H4NH2），溶于1000mL鹽酸溶液中，盛于棕色試劑瓶中，有效期為2個月。鹽酸萘乙二胺溶液（1g/L）：稱取0.5g鹽酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl），溶于500mL水中，盛于棕色試劑瓶中于冰箱內保存，有效期為1個月。測定步驟繪制工作曲線取6個200mL容量瓶，分別加入0、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60mL硫酸銨標準使用液，加水至標線，混勻。標準系列各點的濃度分別為0、0.010、0.020、0.040、0.060、0.080mg/L。各量取50.0mL上述溶液，分別置于100mL具塞錐形瓶中。各加入5mL次溴酸鈉溶液，混勻，放置30min。各加入5mL磺胺溶液，混勻，放置5min。各加入1mL鹽酸萘乙二胺溶液，混勻，放置15min。選取543nm波長，5cm比色皿，以無氨蒸餾水作參比，測定上述溶液的吸光度E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，氨氮濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456硫酸銨標準使用液體積（ml）0.000.200.400.801.201.60氨氮濃度（mgN/L）0.000.0100.0200.0400.0600.080吸光度值EE0E-E0水樣測定移取50.0mL已過濾的水樣于100mL具塞錐形瓶中。參照標準曲線繪制過程中的步驟③④⑤⑥，顯色并測定該水樣的吸光度值E。結果計算由水樣的測定值E-E0直接查工作曲線，得該水樣中亞硝酸鹽氮與氨氮的總量，扣除水樣中原有亞硝酸鹽氮的濃度，得水樣中氨氮的濃度。注意事項測定中要嚴防空氣中的氨對水樣、試劑和器皿的玷污。當水溫高于10℃時，氧化30min即可，若低于10℃，氧化時間應適當延長。在條件許可下，最好用無氮海水繪制工作曲線。加鹽酸萘乙二胺試劑后，必須在2h內測定完畢，并避免陽光照射。該法氧化率較高，快速、簡便、靈敏，但部分氨基酸也被測定。實驗九氨氮（靛酚蘭法）一、方法原理本法適用于大洋和近岸海水及還原性物質含量較低的河口水。在弱堿性介質中，以亞硝酰鐵氰化鈉為催化劑，氨與苯酚和次氯酸鹽反應生成靛酚藍，在640nm處測定吸光值。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管一般實驗室常備儀器和設備三、試劑及其配制1.硫酸銨標準貯備溶液（100.0mgN/L）：稱取0.4716g硫酸銨[(NH4)2SO4，預先在110℃烘1h，置于干燥器重冷卻]，溶于少量水中，全部移入1000mL容量瓶中，加水至標線。加入1mL三氯甲烷混合，貯于棕色試劑瓶中，置冰箱內保存，此溶液有效期半年。2.硫酸銨標準使用溶液（10.0mgN/L）：移取10.0mL標準貯備溶液于100mL容量瓶中，加水至標線，混勻，臨用時配制。3.氫氧化鈉溶液（0.50mol/L）：稱取10.0g氫氧化鈉（NaOH），溶于1000mL水中，加熱蒸發(fā)至500mL，盛于聚乙烯瓶中。檸檬酸鈉溶液（480g/L）：稱取240g檸檬酸鈉（Na3C6H5O7·2H2O），溶于500mL水中，加入20mL氫氧化鈉溶液，加入數(shù)粒防爆沸石，煮沸除氨直至溶液體積小于500mL。冷卻后用水稀釋至500mL。盛于聚乙烯瓶中，可長期保存。苯酚溶液：稱取38g苯酚（C6H5OH）和400mg亞硝酰鐵氰化鈉[Na2Fe(CN)5NO·2H2O]，溶于少量水中，稀釋至1000mL，混勻。盛于棕色試劑瓶中，冰箱內保存，此溶液可穩(wěn)定數(shù)月。硫代硫酸鈉溶液（0.10mol/L）：稱取25.0g硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O），溶于少量水中，稀釋至1000mL，加入1g碳酸鈉混勻，轉入棕色試劑瓶中保存。淀粉溶液（5g/L）：稱取1g可溶性淀粉，加少量水攪成糊狀，加入100沸水，攪勻，在電爐上煮至透明。取下冷卻后加入1mL冰醋酸，用水稀釋至200mL。盛于試劑瓶中。硫酸溶液（0.5mol/L）：移取28mL硫酸（H2SO4，ρ=1.84/mL）緩慢地傾入水中，并稀釋至1L，混勻。次氯酸鈉貯備液：市售品有效氯含量不少于5.2%。用下法對配制好的次氯酸鈉貯備液進行標定：加50mL硫酸溶液至100mL錐形瓶中，加入約0.5g碘化鉀（KI），混勻。加入1mL次氯酸鈉溶液，以硫代硫酸鈉溶液滴定至淡黃色，加入1mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍色消失。記下硫代硫酸鈉溶液的體積，1.00mL相當于3.54mg有效氯。次氯酸鈉使用液（1.50mg/mL有效氯）：用氫氧化鈉溶液稀釋一定量的次氯酸鈉貯備液，使其100mL含有150mg有效氯。此溶液盛于聚乙烯瓶中置冰箱內保存，可穩(wěn)定數(shù)周。四、測定步驟1.繪制標準曲線取6個100mL容量瓶，分別加入0、0.30、0.60、0.90、1.20、1.50mL硫酸銨標準使用液，加純水或無氨海水至標線，混勻。系列各點的濃度分別為0、0.030、0.060、0.090、0.12、0.15mgN/L。移取35.0mL上述各點溶液，分別置于50mL具塞比色管中。各加入1.0mL檸檬酸鈉溶液，混勻。各加入1.0mL苯酚溶液，混勻。各加入1.0mL次氯酸鈉使用液，混勻。放置6h以上（淡水樣品放置3h以上）。選640nm波長，5cm比色皿，以蒸餾水作參比，測定上述溶液的吸光度E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，氨氮濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456硫酸銨標準使用液體積（ml）0.000.300.600.901.201.50氨氮濃度（mgN/L）0.000.0300.0600.0900.120.15吸光度值EE0E-E0水樣測定移取35.0mL已過濾的水樣于50mL比色管中。參照標準曲線繪制過程中的步驟③④⑤⑥，顯色并測定該水樣的吸光度值E。五、結果計算測定海水樣品，若繪制標準曲線使用鹽度相近的無氨海水，則由水樣的測定值E-E0直接查工作曲線或用線性回歸方程計算，得該水樣中氨氮的含量。對于海水或河口區(qū)水樣，若繪制標準曲線時，用無氨蒸餾水，則應用E-E0值與鹽誤差校正系數(shù)f的乘積f?（E-E0）值查標準曲線或用線性回歸方程計算水樣中氨氮的濃度mg/L。鹽誤差校正系數(shù)表S0-8111417202327303336鹽效應校正系數(shù)f1.001.011.021.031.041.051.061.071.081.09六、注意事項測定中要避免空氣中的氨對水樣或試劑的玷污。采集氨氮低于0.8μg/L的海水，用0.45μm濾膜過濾后貯于聚乙烯瓶中，每升海水加1mL三氯甲烷，混合后即可作為無氨海水使用。若發(fā)現(xiàn)苯酚出現(xiàn)粉紅色則必須精制。步驟如下：取適量苯酚置蒸餾瓶中，徐徐加熱，用空氣冷凝管冷卻，收集182—184℃餾分。精制后的苯酚為無色結晶狀。在酚的蒸餾過程中要注意暴沸和火災。樣品和標準溶液的顯色時間保持一致，并避免陽光照射。該法重現(xiàn)性好，空白值低，有機氮化物不被測定，但反應慢，靈敏度略低。實驗十硝酸鹽氮（鋅鎘還原—重氮偶氮法）方法原理在一定鹽度條件下，加鋅卷和氯化鎘溶液于水樣中，其中的硝酸鹽氮被還原為亞硝酸鹽，然后按重氮—偶氮法測出亞硝酸鹽氮的總含量，扣除水樣中原有的亞硝酸鹽氮含量即得硝酸鹽氮的含量。本法最低檢出濃度為0.7μg(N)/L，測定上限為140μg(N)/L。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管容量瓶、移液管等常規(guī)實驗室設備試劑及其配制磺胺溶液：同亞硝酸鹽氮的測定。鹽酸萘乙二胺溶液：同亞硝酸鹽氮的測定。氯化鎘溶液（20%）：稱取20g氯化鎘（CdCl2·2.5H2O）溶于蒸餾水中，稀釋至100mL，盛于滴瓶中。鋅卷：將鋅片（AR）截成5cm×6cm的鋅片，用1.5cm外徑的試管卷成5cm高的鋅卷，置于具蓋的1000ml廣口瓶中。氯化鈉溶液（20%）：以AR試劑配制。硝酸鉀標準貯備液（0.14mg(N)/mL）：稱取KNO3（AR，于115℃烘1h）1.011g，溶于蒸餾水中，并于1000ml容量瓶中定容，加1ml氯仿并避光保存。硝酸鉀標準使用液（1.4mg(N)/L）：移取1.00ml標準貯備液于100ml容量瓶中用蒸餾水定容、混勻，臨使用前配制。測定步驟繪制工作曲線在6個清潔、干燥的60ml廣口試劑瓶中分別移入標準使用液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，并分別加蒸餾水至50ml（若是淡水樣品，再分別加入5ml20%的NaCl溶液，混勻）。分別用鑷子夾入鋅卷1卷，氯化鎘溶液2滴，加上瓶蓋，順序放入振蕩器振蕩10min。將廣口試劑瓶中的溶液順序倒入6個清潔、干燥的50ml具塞比色管中，分別加入磺胺溶液1ml，混勻。分別加入鹽酸萘乙二胺溶液1ml，混勻，放置15min.用分光光度計在543nm波長處于20mm比色皿對照純水測定各溶液的吸光度E（其中未加標準使用液為試劑空白E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，硝酸鹽氮濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456硝酸鉀標準使用液體積（ml）0.001.002.003.004.005.00硝酸鹽氮濃度（mg(N)/L）0.000.0280.0560.0840.1120.140吸光度值EE0E-E0水樣測定量取50ml過濾水樣及50ml蒸餾水，置于60ml廣口試劑瓶中（若是淡水水樣，再分別加入5ml20%的NaCl溶液），混勻。參照工作曲線繪制過程中步驟②—⑤，顯色并測定該水樣的吸光值E-E0。結果計算由水樣的測定值E-E0查工作曲線，得該水樣中硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮的總量C總。將兩者總量扣除水樣中亞硝酸鹽氮的含量，即得硝酸鹽氮的含量：CNO3--N(mg/L)=C總-CNO2--N注意事項若水樣是海水樣品，則在工作曲線制定過程中，應以無氮海水代替純水配制標準系列；而海水中因含有大量的NaCl等強電解質，所以在還原前不必再外加NaCl溶液。實驗十一硝酸鹽氮（鎘柱還原法）方法原理水樣通過鎘還原柱，將硝酸鹽定量地還原為亞硝酸鹽，然后按重氮—偶氮光度法（萘乙二胺分光光度法）測定亞硝酸鹽氮的總量，扣除原有亞硝酸鹽氮，得硝酸鹽氮的含量。儀器及設備分光廣度計及配套比色皿鎘柱具塞比色管一般試驗室常備儀器和設備試劑及其配制鎘屑：直徑為1mm的鎘屑、鎘?；蚝Ｃ捩k。鹽酸溶液（2mol/L）：量取83.5ml鹽酸（HCl，ρ=1.19g/mL）加水稀釋至500ml。硫酸銅溶液（10g/L）：稱取10g硫酸銅（CuSO4·5H2O）溶于水并稀釋至1000mL，混勻，盛于試劑瓶中。硝酸鉀標準貯備液（100μgN/mL）：稱取0.7218g硝酸鉀（KNO3），預先在110℃下烘1小時，置于干燥器中冷卻，溶于少量水中，用水稀釋至100ml，混勻。加1ml三氯甲烷（CHCl3），混合。貯于1000ml棕色試劑瓶中，于冰箱內保存，有效期為半年。硝酸鉀標準使用液（10μgN/mL）：移取10.0ml硝酸鹽標準貯備液于100ml容量瓶中，加水稀釋至標線，混勻臨用前配制。氯化銨緩沖溶液：稱取10g氯化銨（NH4Cl）溶于1000ml水中，用約1.5ml氨水（NH3·H2O，ρ=0.90g/mL）調節(jié)pH至8.5（用精密pH試紙檢驗）。此液用量較大，可一次配制5L?；前啡芤海和瑏喯跛猁}。鹽酸萘乙二胺：同亞硝酸鹽?；罨芤海阂迫?4ml硝酸鹽標準貯備溶液于1000ml容量瓶中，加氯化銨緩沖溶液至標線，混勻，貯于試劑瓶中。測定步驟鎘柱的制備鎘屑鍍銅：稱取40g鎘屑（或鎘粒）于150mL錐形分液漏斗中，用鹽酸溶液洗滌，出去表面氧化層，棄去酸液，用水洗至中性，加入100mL硫酸銅溶液振搖3min，棄去廢液，用水洗至不含有膠體銅時為止。裝柱：將少許玻璃纖維塞入還原柱底部并注滿水，然后將鍍銅的鎘屑裝入還原柱中，在還原柱的上部也塞入少許玻璃纖維，已鍍銅的鎘屑要保持在水面之下以防接觸空氣，為此，柱中溶液即液面，在任何操作步驟中不得低于鎘屑。還原柱的活化：用250mL活化溶液，以每分鐘7—10mL流速通過還原柱使之活化，然后再用氯化銨緩沖溶液過柱洗滌3次，還原柱即可使用。還原柱的保存：還原柱每次用完后，需用氯化銨緩沖溶液洗滌2次，而后注入氯化銨溶液保存。如長期不用，可注滿氯化銨溶液后密封保存。鎘柱還原率的測定：配制濃度分別為100μgN/mL的硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮溶液，硝酸鹽氮按下述工作曲線繪制過程中的步驟測定其吸光值（E-E0）（雙份測定取平均值）。亞硝酸鹽氮的測定除了不通過還原柱外，其余各步驟均按硝酸鹽氮的測定步驟進行，得其吸光值（E-E0）’。按下式計算硝酸鹽還原率R：R=[(E-E0)/(E-E0)’]×100%當R<95%時，還原柱需重新進行活化或重新裝柱。繪制工作曲線取6個100mL容量瓶，分別加入0，0.25，0.50，1.00，1.50，2.00mL硝酸鹽標準使用溶液，加水至標線，混勻。標準系列溶液的硝酸鹽氮濃度分別為0、0.025、0.050、0.100、0.150、0.200mg/L。分別量取50.0mL上述各濃度溶液，于相應的125mL具塞錐形瓶中，再各加50.0mL氯化銨緩沖溶液混勻。將混合后的溶液逐個倒入還原柱中約30mL，以每分鐘6—8mL的流速通過還原柱直至溶液接近鎘屑上部界面，棄去流出液。然后重復上述操作，接取25.0mL流出液于50mL帶刻度的具塞比色管中，用水稀釋至50.0mL，混勻。各加入1.0mL磺胺溶液，混勻，放置2min。各加入1.0mL鹽酸萘乙二胺溶液，混勻，放置20min。于543nm波長下用5cm測定池以二次去離子水作參比，測定吸光值E。以吸光值E-E0為縱坐標，濃度（mg/L）為橫坐標，繪制工作曲線。序列號123456硝酸鉀標準使用液體積（ml）0.000.250.501.001.502.00硝酸鹽氮濃度（mgN/L）0.000.0250.0500.1000.1500.200吸光度值EE0E-E0水樣測定量取50.0mL二次去離子水及50.0mL已過濾的水樣，于125mL具塞錐形瓶中，加入50.0mL氯化銨緩沖溶液，混勻。參照標準曲線繪制過程中的步驟③—⑦，顯色并測定該水樣的吸光度值E。結果計算由水樣的測定值E-E0查工作曲線，得該水樣中硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮的總量C總。將兩者總量扣除水樣中亞硝酸鹽氮的含量，即得硝酸鹽氮的含量：CNO3--N(mg/L)=C總-CNO2--N注意事項本方法適用于大洋和還原性物質含量較低的近岸海水、河口水中硝酸鹽氮的測定。水樣可用有機玻璃或塑料采水器采集，用0.45μm濾膜過濾，貯于聚乙烯瓶中。還原柱可用蝴蝶夾固定在滴定臺上，并配備可插比色管的塑料底座。在船上工作時可用自由夾固定比色管。水樣通過還原柱時，液面不能低于鎘屑，否則會引進氣泡，影響水樣流速，如流速達不到要求，可在還原柱的流出處用乳膠管連接一段細玻璃管，即可加快流速。水樣加鹽酸萘乙二胺溶液后，需在2小時內測定完畢，并避免陽光照射。工作曲線每隔一周須重制一次，但需每天測定一份標準溶液以核對曲線。當測定樣品的試驗條件與制定工作曲線的條件相差較大時，須及時重制工作曲線。水樣中的懸浮物會影響水樣的流速，如吸附在鎘屑上能降低硝酸鹽的還原率，水樣要預先通過0.45μm濾膜過濾。鐵、銅或其他金屬濃度過高使會降低還原效率，向水樣中加入EDTA即可消除此干擾。油和脂會覆蓋鎘屑的表面，用有機溶劑預先萃取水樣可排除此干擾。海綿鎘還原柱的處理過程及其他要求，可按產(chǎn)品特性說明書作相應調整。鋅鎘法可與本法等效使用。實驗十二凱氏氮方法原理凱氏氮指天然水體中氨氮和有機氮的總和。在高溫的條件下，于水樣中加入消解液（硫酸汞、硫酸鉀的硫酸溶液）消解，凱氏氮轉化為硫酸氫銨進而形成汞銨絡合物。在堿性條件下，汞銨絡合物經(jīng)硫代硫酸鈉分解形成游離態(tài)氨，蒸餾后用硼酸溶液吸收。采用奈氏試劑法測定吸收液中的氨氮含量，可推算出水樣中凱氏氮的濃度。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管凱氏氮蒸餾裝置：由800mL凱氏燒瓶、帶球管的接引管和一垂直的冷凝管組成，加熱電爐的爐面溫度須達340—370℃，其加熱速度要求達到5min內能將250mL常溫水加熱至沸。試劑及其配制無氨蒸餾水奈氏試劑：同氨氮的測定。硫酸溶液（3mol/L）：170mL濃硫酸緩緩倒入無氨蒸餾水中，并稀釋至1000mL。消解液：溶解K2SO4134g于650mL無氨蒸餾水中，加入濃硫酸200mL，在攪拌下加入25mL氧化高汞的硫酸溶液（2g氧化高汞溶于25mL濃度為3mol/L的硫酸溶液中），并用無氨蒸餾水稀釋至1L，在14℃以上保存，以防結晶析出。Na2S2O3—NaOH溶液：溶解25g硫代硫酸鈉固體（Na2S2O3·5H2O）和500g氫氧化鈉于無氨蒸餾水中，并稀釋至1L。硼酸溶液（2%）：用無氨蒸餾水配制。酚酞指示劑（0.5%）：0.5g酚酞溶于酒精（95%）中，并用無氨蒸餾水稀釋至100mL。硫酸銨標準貯備液（0.50mg(N)/mL）：稱取2.358g(NH4)2SO4（AR，經(jīng)115℃烘1h），溶解后以蒸餾水在1000mL容量瓶中定容，加氯仿2mL避光保存。硫酸銨標準使用液（0.05mg(N)/mL）：準確移取標準貯備液10.0mL于100mL容量瓶中以蒸餾水定容。測定步驟繪制工作曲線在6支清潔、干燥的50mL具塞比色管中分別加入標準使用液0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00mL，并用無氨蒸餾水稀釋至刻度。分別加入奈氏試劑1.5mL，搖勻后放置10min顯色。用分光光度計在420nm波長處于20mm比色皿對照無氨蒸餾水測定上述溶液的吸光度E（其中未加標準使用液為試劑空白）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，氨氮濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456硫酸銨標準使用液體積（ml）0.000.400.801.201.602.00氨氮濃度（mgN/L）0.000.0200.0400.0600.0800.100吸光度值EE0E-E0水樣測定量取一定體積的水樣于凱氏燒瓶中（水樣體積的選擇見下表），如選擇的水樣體積大于50mL，需加入硫酸溶液（3mol/L）5滴，在凱氏燒瓶中把水樣濃縮至50mL。消解：將50mL消解液緩緩倒入凱氏燒瓶中（如水樣含有大量的不含氮有機物，每1g固體多加消解液50mL），混勻后于通風櫥內加熱至冒白煙（SO3氣體），在煮沸至溶液變清后繼續(xù)煮30min，冷卻后用無氨蒸餾水稀釋至300mL。加入酚酞指示劑0.5mL并把燒瓶斜放，緩緩加入Na2S2O3—NaOH溶液至燒瓶內溶液變紅（50mL消解液大約需要加入該溶液50mL），在加入過程中必須不斷輕搖使燒瓶內溶液混合均勻。水樣體積選擇表凱氏氮大概含量（mgN/L）選擇水樣體積（mL）0—31503—61006—1250蒸餾：立即將燒瓶通過接引管與冷凝管連接，用裝有50mL硼酸溶液的500mL錐形瓶（在300mL處劃有刻線）收集餾出液，冷凝管下端出口浸入硼酸溶液中，以6—10mL/min的速度進行蒸餾，收集餾出液至總體積為300mL為止。移取50mL餾出液于50mL具塞比色管中，按上述工作曲線繪制過程測定吸光度值E。移取50mL無氨蒸餾水于凱氏燒瓶中，按上述②—④步驟，消解、蒸餾、顯色并測定試劑空白的吸光度E0。結果計算餾出液中氨氮的濃度由50mL餾出液的測定值E-E0查工作曲線，得餾出液中氨氮的濃度C。水樣中凱氏氮的濃度凱氏氮（mg/L）=C×A/BC—餾出液中氨氮的濃度（mg/L）收集餾出液的總體積（mL）水樣體積（mL）注意事項天然水體總氮的濃度為凱氏氮、亞硝酸鹽氮和硝酸鹽氮之和。若餾出液中氨氮含量過高，可用無氨蒸餾水稀釋后進行比色。實驗十三總磷方法原理天然水中總磷除包括活性磷酸鹽外，還包括以溶解形式和粒狀形式存在的其他無機磷（如偏磷酸鹽和焦磷酸鹽等）和含磷有機物。水樣經(jīng)消化后，上述各種形式存在的磷化合物，均轉化為能與鉬酸銨—硫酸溶液反應的磷酸鹽形式。采用與活性磷酸鹽測定類似的方法，即可測得水樣中總磷的濃度。儀器及設備分光光度計及配套比色皿具塞比色管電爐、凱氏燒瓶、漏斗、移液管等常規(guī)實驗室設備試劑及其配制鉬酸銨溶液（10%）：同活性磷酸鹽測定。硫酸溶液（1:1）：同活性磷酸鹽測定。鉬酸銨—硫酸混合試劑：上述鉬酸銨溶液與硫酸溶液以1:3體積比混合。SnCl2甘油溶液（2.5%）：同活性磷酸鹽測定。磷酸二氫鉀標準貯備液（0.500mg(P)/mL）：稱取KH2PO4（AR，于115℃烘1h）2.197g，溶解后于1000mL容量瓶中定容，混勻后加入氯仿2mL，避光保存。有效期半年。磷酸二氫鉀標準使用液（0.005mg(P)/mL）：移取標準貯備液1.00mL于100mL容量瓶中定容。濃硫酸（AR）。濃氨水（AR）。測定步驟繪制工作曲線在6個清潔、干燥的50mL凱氏燒瓶中，分別移入標準使用液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL，再分別加入蒸餾水至總體積為10mL。分別加入濃硫酸3mL和玻璃珠數(shù)粒，并在燒瓶瓶口插入一小漏斗，在電爐上緩緩加熱至透明。冷卻后先用少量蒸餾水沖洗小漏斗和燒瓶頸部，慢慢加入濃氨水至消化液呈中性（約需8—10mL）。將消化液分別轉移至6支50mL比色管中，并用少量蒸餾水沖洗燒瓶2次，沖洗液分別倒入各比色管中，用蒸餾水稀釋至刻度。在上述各比色管內分別加入鉬酸銨—硫酸混合試劑1mL，混勻3min后加入SnCl2甘油溶液2低，混勻后顯色10min。用分光光度計在690nm波長處，于30mm比色皿中對照蒸餾水測定上述溶液的吸光度E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，磷濃度為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號123456磷標準使用液體積（ml）0.001.002.003.004.005.00濃度（mg(P)/L）0.000.501.001.502.002.50吸光度值EE0E-E0水樣的測定量取10mL水樣于凱氏燒瓶中，按上述工作曲線繪制過程中的步驟進行消化和測定該水樣的吸光度值E（雙樣測定。水樣加熱消化至透明的時間一般比上述標準系列溶液稍長，大約需要10min左右）。結果計算由水樣的測定值E-E0查工作曲線，得該水樣中活性磷酸鹽的含量。注意事項消化加熱時開始燒瓶須不斷移動和輕輕搖動，以防治溶液爆沸。本實驗所用玻璃器皿，均不宜使用含磷洗滌劑洗滌。只測定總磷的水樣一般不需加防腐劑。由于SnCl2甘油溶液的穩(wěn)定性較差，目前人們通常選用抗壞血酸作為還原劑?？箟难崛芤旱呐渲品椒ㄈ缦拢喝芙?0g抗壞血酸（C6H8O6）于200mL水中，盛于棕色試劑瓶中。此溶液4℃避光保存，可穩(wěn)定1個月。測定時，先加入混合溶液后，直接加入抗壞血酸溶液1~2mL，混勻，顯色5分鐘即可，882nm處比色測定。此法不需檢查鹽效應。實驗十四可溶性硅酸鹽（硅鉬藍法）一、方法原理活性硅酸鹽在酸性介質中與鉬酸銨反應，生成黃色的硅鉬黃，當加入含有草酸（消除磷和砷的干擾）的對甲替氨基苯酚—亞硫酸鈉還原劑，硅鉬黃被還原為硅鉬藍，于812nm波長測定其吸光值。本法適用于硅酸鹽含量較低的海水。二、儀器及設備分光光度計具塞比色管一般實驗室常備儀器和設備三、試劑及其配制鉬酸銨（酸性）溶液：稱取2.0g鉬酸銨固體[(NH4)6Mo7O24·4H2O]，溶于70mL水中，加入6mL鹽酸（HCl，ρ=18g/mL），稀釋至100mL（如渾濁應過濾），貯于聚乙烯瓶中。草酸溶液（100g/L）：稱取10g草酸（H2C2O4·2H2O，優(yōu)級純），溶于水，稀釋至100mL，過濾，貯于聚乙烯瓶中。硫酸溶液（1:3）：在攪拌下，將1體積硫酸（H2SO4，ρ=1.84g/mL，優(yōu)級純）緩慢地加入值3體積水中，冷卻后盛于聚乙烯瓶中。對甲替氨基酚（硫酸鹽）—亞硫酸鈉溶液：稱取5g對甲替氨基酚（米吐爾）[（CH3NHC6H4OH）2·H2SO4]，溶于240mL水中，加3g亞硫酸鈉（Na2SO3），溶解后稀釋至250mL，過濾，貯于棕色試劑瓶中，并密封保存于冰箱中，此液可穩(wěn)定一個月。還原劑：將100mL對甲替氨基酚（硫酸鹽）—亞硫酸鈉溶液和60mL草酸溶液混合，加120mL硫酸溶液，混勻，冷卻后稀釋至300mL，貯于聚乙烯瓶中。此液臨用時配制。人工海水：鹽度為28：稱取25g氯化鈉（NaCl，優(yōu)級純）和8g硫酸鎂（MgSO4·7H2O），溶于水，稀釋至1L。鹽度為35：稱取31g氯化鈉（NaCl，優(yōu)級純）和10g硫酸鎂（MgSO4·7H2O），溶于水，稀釋至1L。其他鹽度的人工海水可按上述比例配制，貯于聚乙烯瓶中。硅標準貯備液（300mgSi/L）：硅酸鹽標準溶液系列（國家海洋局第二海洋研究所配制生產(chǎn)）用氟硅酸鈉配制：將氟硅酸鈉（Na2SiF6，優(yōu)級純）在105℃下烘干1h，取出置于干燥器中冷卻至室溫，稱取2.0090g置塑料燒杯中，加入約600mL水，用磁力攪拌至完全溶解（需半小時）全量移入1000mL容量瓶中，加水至標線，此溶液1.00mL含硅300.0μg，貯與塑料瓶中。有效期半年。用二氧化硅配制：稱取0.6418g研細至200目二氧化硅或色層用硅膠（SiO2，高純，經(jīng)1000℃灼燒1h）于鉑坩堝中，加4g無水碳酸鈉（Na2CO3）混勻。在960—1000℃融溶1h，冷卻后用熱的純水溶解，稀釋至1000mL，盛于聚乙烯瓶中。此溶液1.00mL含硅300.0μg，有效期一年。硅標準使用液（15mgSi/L）：取5.00mL硅標準貯備液加水稀釋至100mL，盛于聚乙烯瓶中，此溶液1.00mL含硅15.0μg，有效期一天。四、測定步驟繪制工作曲線取7個100mL容量瓶，分別移入0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00mL硅標準使用液，加水至標線，混勻。即得一系列硅標準溶液。向7個50mL具塞比色管中各加入3mL鉬酸銨溶液，再分別移入20mL上述硅標準系列溶液，每次加標準溶液后，立即混勻，放置10min，加入15mL還原劑溶液，加水稀釋至50mL，混勻。系列各點的含硅量分別為0、3.00、6.00、9.00、12.0、15.0、18.0μg。3h后，用5cm比色皿，以蒸餾水為參比，于812nm波長出逐個測定吸光值E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標紙上，以吸光度E-E0為縱坐標，相應的硅含量（μg）為橫坐標作圖，得工作曲線。序列號1234567硅標準使用液體積（ml）0.001.002.003.004.005.006.00系列各點的含硅量（μg）0.003.006.009.0012.015.018.0吸光度值EE0E-E0水樣測定加3mL鉬酸銨溶液于50mL具塞比色管中，移入20mL水樣與之混勻。放置10min加15mL還原劑，加水稀釋至50mL，混勻。參照工作曲線繪制過程中的步驟③測定水樣的吸光值E。五、結果計算由水樣的測定值Ew-E0查工作曲線，得該水樣中硅的含量，按下式計算水樣中活性硅酸鹽的濃度：ρSi=x/VρSi——水樣中活性硅酸鹽的濃度，mgSi/Lx——VmL水樣中的含硅量，μgV——水樣體積，mL六、注意事項測量水樣時，硅酸鹽溶液的溫度與制定工作曲線時硅鉬藍溶液的溫度之差不得超過5℃。本法測量時最佳溫度為18—25℃，當水樣溫度較低時，可用水浴（18—25℃）。采集水樣后立即過濾，然后貯存于冰箱中（<4℃），在24h內分析完畢。如水樣中硅酸鹽含量很低，可多取水樣或改用較長光程的比色皿測量；如水樣中硅酸鹽含量較高，則改用較短光程的比色皿測量。工作曲線應在水樣測定實驗室制定，工作期間每天加測標準溶液，以檢查曲線，并須每個站位加測一份空白。曲線延用的時間最多為一周。此方法受水樣中離子強度影響而造成鹽度誤差，除用鹽度校正表外，最好用接近于水樣鹽度的人工海水制得硅酸鹽工作曲線。水中含有大量鐵質、丹寧、硫化物和磷酸鹽將干擾測定。加入草酸以及硫酸化可以清除磷酸鹽的干擾和減低丹寧的影響。實驗十五透明度水的透明度是指黑白或白色透明度盤在水中的最大可見深度。透明度觀測只在白天進行，觀測地點應選在背陽光處，觀測時務須避免船只排出污水的影響。透明度用目視法測定，采用透明度盤觀測。透明度盤是一塊黑白相間或全部漆成白色的木質或金屬圓盤，直徑30cm。盤下應拴有鉛錘（約5Kg），盤上系有繩索。繩索上標有以米為單位的長度記號，繩索長度應根據(jù)水體透明度值大小而定。測定時，將透明度盤放入水中，沉至剛好看不見的深度，然后再慢慢地提到隱約可見時，讀取繩索在水面的標記數(shù)值（有波浪時應分別讀取繩索在波峰和波谷處的標記數(shù)值），讀到一位小數(shù)，重復二至三次，取其平均值，即為觀測的透明度值。若傾角超過15o，則應進行深度校正（根據(jù)“海洋水文常用表”的表2）。當繩索傾角過大時，盤下的鉛錘應適當加重。觀測工作應在透明度盤的垂直上方進行。實驗十六水色水色是指位于透明度值一半的深度，白色盤上所顯現(xiàn)的海水顏色。水色的觀測只在白天進行。水色根據(jù)水色計目測確定，水色計是由藍色、黃色、褐色三種溶液按一定比例配成的229支不同色級，分別密封在22支內徑8mm、長100mm無色玻璃管內，置于敷有白色襯里兩開的盒中。觀測透明度后，將透明度盤提到透明度值一半的水層，根據(jù)透明度盤上所呈現(xiàn)的海水顏色，在水色計中找出與之最相似的色級號碼并紀錄。水色計應保存在陰暗干燥處，切忌日光照射，以免褪色；每次觀測結束后，應將水色計擦凈并裝在里紅外黑的布套里；使用的水色計在6個月內至少應與標準水色計校準一次，發(fā)現(xiàn)褪色現(xiàn)象，應及時更換；作為校準用的標準水色計（在同批出廠的水色計中，保留一盒），平時應始終裝在里紅外黑的布套里，并保存在陰暗干燥處。實驗十七嗅和味以感官法測定水樣的嗅和味。原水樣的嗅和味：取100mL水樣，置于250mL錐形瓶中，振蕩后從瓶口嗅水的氣味，用適當詞句描述，并按六級（見下表）記錄其強度。與此同時，取少量水放入口中，不要咽下去，嘗嘗水的味道，加以描述，并按六級（見下表）記錄其強度。原水的水味檢定只適用于對人體健康無害的水樣。原水煮沸后的嗅和味：將上述錐形瓶內的水樣加熱至開始沸騰，立即取下錐形瓶，稍冷后測其嗅和味。按上法用適當詞句描述其性質，并按六級紀錄其強度。等級強度說明0無無任何嗅和味1微弱一般人甚難察覺，但嗅、味敏感者可以發(fā)覺2弱一般人剛能察覺，嗅、味敏感者已能明顯察覺3明顯能明顯察覺4強已有很明顯的嗅和味5很強有強烈的惡臭或異味實驗十八懸浮物質一、方法原理采用重量法測定河口、港灣和大洋水體中的懸浮物質。將一定體積的水樣通過0.45μm的濾膜，稱量留在濾膜上的懸浮物質的重量，計算海水中懸浮物質的濃度。儀器及設備取樣器過濾器真空泵量筒濾膜（孔徑0.45μm，直徑47mm或60mm）及濾膜盒錐形瓶、洗瓶、橡皮管、水桶、氣壓瓶及樣品箱等常規(guī)實驗室設備三、測定步驟準備工作將濾膜盒洗凈、烘干、編號。濾膜烘干（40—50℃）恒溫6—8h后，放入硅膠干燥器，冷卻6—8h。確定空白校正膜的數(shù)量，點上色點，區(qū)別于水樣濾膜。濾膜稱量，并把稱好的濾膜放入編號的濾膜盒內。現(xiàn)場作業(yè)安裝過濾設備：抽濾的適宜壓力為5×104—6×104Pa，負壓過大，懸浮物質顆粒嵌入濾膜微孔，妨礙過濾。為此，在真空系統(tǒng)中須有壓力表。用不銹鋼鑷子把預先稱重為W2的水樣濾膜置于預先稱重為Wb的空白校正膜的上面，放入過濾器中，裝好。將水樣振搖均勻，倒入量筒，量取一定體積。（視懸浮物質濃度而定，大于1000mg/L者取50—100mL；小于100mg/L者取1—5L）開啟真空泵，接通開關，將水樣倒入過濾器內，量筒用蒸餾水洗凈，并倒入過濾器。為了洗掉鹽分，待抽干后，在用蒸餾水淋洗懸浮物質三次，每次50mL，再抽干。用不銹鋼鑷子取下濾膜放在原濾膜盒內，置于紅外燈下低溫（50℃）烘干，或自然環(huán)境下風干。蓋好濾膜盒蓋，按次序保存，帶回實驗室。室內工作烘干：將濾膜放入電熱恒溫干燥箱內（40—50℃），恒溫脫水6—8h，取出放入硅膠干燥器，6—8h后再稱量。稱量：選用分析天平的感量，應視懸浮物質的多少而定。小于50mg時，用十萬分之一天平；大于50mg時，用萬分之一天平。稱量要迅速，過濾前、后兩次稱量，天平室的溫度，濕度要基本一致。濾膜空白校正：過濾時，醋酸纖維脂膜會因溶解而失重，直徑60mm膜失重1.0—2.0mg，直徑47mm膜失重0.2—0.5。為保證結果的準確性，濾膜的空白校正實驗室必不可少的。濾膜空白校正與樣品測定同時進行，當進行空白校正時用兩張濾膜過濾。其中一張點上色點作為空白校正膜，放在水樣濾膜的下面。在高濃度海區(qū)，10個樣品只需做1—2份空白校正，但每個測站至少有一張空白試驗膜。四、結果計算水樣懸浮物質濃度可按下式計算：ρ=(W1-W2-ΔW)/Vρ—懸浮物質濃度，mg/LW1—懸浮物加水樣濾膜重量，mgW2—水樣濾膜重量，mgΔW—空白校正濾膜校正值，為負值，mgV—水樣體積，L式中：Wn—過濾后空白校正濾膜重量，mgWb—過濾前空白校正濾膜重量，mgn—空白校正濾膜個數(shù)ΔW應是負值。五、注意事項水樣要現(xiàn)場過濾、烘干、按順序保存好。如果不能立即過濾，水樣放在陰涼處，但24h內必須過濾完畢。各種器具必須保持干凈，過濾前必須用清水洗滌干凈。過濾時，為防止海水倒灌，損壞真空泵，要及時放掉廢水。濾膜放入編好號的濾膜盒內，按站位順序排列。用不銹鋼鑷子夾取濾膜，以免沾污。烘干樣品時必須保持周圍環(huán)境清潔。樣品置于紅外燈下烘干時，溫度不超過50℃，一般紅外燈泡與樣品的距離不得小于30cm，避免濾膜卷曲或燃燒。實驗十九渾濁度（目視比濁法）一、方法原理濁度與透視度成反比關系，水樣與標準系列進行透視度比測定值。本法適用于近海海域和大洋水濁度的測定，本法中規(guī)定1L純水中含高嶺土1mg的濁度為一度。水樣中具有迅速下沉的碎屑及粗大沉淀物都可被測定為濁度。不潔凈的玻璃器皿和空氣泡，以及擾亂水樣表面能見度的振動都能造成虛假結果。二、儀器及設備抽濾瓶干燥器蒸發(fā)皿瑪瑙研缽具塞比色管一般實驗室常備儀器和設備三、試劑及其配制無濁純水：取蒸餾水或去離子水，通過0.2μm濾膜抽濾，貯于聚乙烯桶中，用過濾水淋洗聚乙烯桶二次，棄去初濾水200mL，最好當天制備。二氯化汞溶液（50g/L）：稱取5.0g二氯化汞（HgCl2）溶于少量水中并稀釋至100mL，貯于棕色試劑瓶中。焦磷酸鈉溶液（50g/L）：稱取5.0g焦磷酸鈉（Na4P2O7·10H2O）于100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至標線。濁度標準貯備溶液：將高嶺土至于105℃±1℃烘箱中烘干2h，移入盛有硅膠的干燥器中，冷卻30min。稱取高嶺土樣品3—5g，置于瑪瑙研缽中加少量水調成稀糊狀，研磨約50min，全部轉移入1000mL量筒中，補加純水到1000mL標線處，充分攪拌均勻后，在20℃±0.5℃下靜置24h。用虹吸法吸取上層800mL懸濁液移入第二個1000mL量筒中，補加無濁純水到1000mL標線處，充分攪勻后，再次置于20℃±0.5℃下靜置24h。。用虹吸法吸除上層液800mL，留取底層200mL懸濁液并加純水到1000mL標線，然后盛于1000mL棕色試劑瓶中，塞嚴保存。此即為濁度標準貯備液。濁度標準貯備液濁度的標定：量取標準貯備液50.0mL于恒重（W1）的蒸發(fā)皿中，置于水浴鍋上蒸干，移于105℃干燥箱中，烘干2h，置于硅膠干燥器中冷卻30min，稱重（W2）。重復上述烘干、冷卻、稱重步驟，直到兩次重量差小于0.2mg，按下式計算貯備液濁度：C貯（mg/mL）=[(W2(g)—W1(g))/50.0(mL)]Χ1000濁度標準中間液：準確量取一定體積（V，mL）含有250mg高嶺土的標準貯備液于1000mL容量瓶中，加入1.0g二氯化汞（HgCl2），溶解后，補加無濁純水至標線，充分混勻，轉入具橡皮塞的棕色試劑瓶中。此標準中間液濃度為0.25mg/mL，濁度為250度。取標準貯備液體積計算公式：V=250/C貯（mL）濁度標準使用液：移取40.0mL濁度標準中間液于100mL容量瓶中，加入0.50mL焦磷酸鈉溶液，加無濁純水至標線，混勻。此液濁度為100度。四、測定步驟0—10度標準系列：取12支100mL具塞比色管，分別加入濁度標準使用液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、9.00、10.0mL，再加入50.0mL二氯化汞溶液，然后再加無濁純水至標線，混勻。此系列濁度分別為0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00、9.00、10.0度。將混勻的水樣，傾入具塞比色管中至標線，立即同標準系列比較定量