含菌復(fù)合肥料

含菌復(fù)合肥料本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了含菌復(fù)合肥料的術(shù)語和定義、要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、判定標(biāo)準(zhǔn)、標(biāo)志、包裝運(yùn)輸及貯存。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以功能微生物為肥料增效添加物與氮磷鉀等養(yǎng)分配伍而成的固體復(fù)合肥料產(chǎn)品。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB15063復(fù)混肥料（復(fù)合肥料）GB20287農(nóng)用微生物菌劑GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB18382肥料標(biāo)識(shí)內(nèi)容和要求GB/T8572復(fù)混肥料中總氮含量的測定GB/T8573復(fù)混肥料中有效磷含量的測定GB/T8574復(fù)混肥料中鉀含量的測定GB/T8576復(fù)混肥料中游離水含量的測定真空烘箱法GB/T22924GB/T23349GB/T24890GB/T24891復(fù)混肥料（復(fù)合肥料）中縮二脲含量的測定肥料中砷、鎘、鉛、鉻、汞生態(tài)指標(biāo)復(fù)混肥料中氯離子含量的測定復(fù)混肥料中粒度的測定GB/T19524.1肥料中糞大腸菌群的測定GB/T19524.2肥料中蛔蟲卵死亡率的測定HG/T2843化肥產(chǎn)品化學(xué)分析中常用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑溶液和指示劑溶液NY525有機(jī)肥料NY/T1847NY/T2321NY/T3083微生物肥料生產(chǎn)菌株質(zhì)量評(píng)價(jià)通用技術(shù)要求微生物肥料產(chǎn)品檢驗(yàn)規(guī)程農(nóng)用微生物濃縮制劑3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。含菌復(fù)合肥料Microbialcompoundfertilizer添加了養(yǎng)分增效功能微生物制劑的一種復(fù)合肥料。3.2有效菌（功能微生物）對(duì)作物養(yǎng)分具有活化增效等功能的微生物群體。3.3有效（活）菌數(shù)每克樣品中有效菌的數(shù)量。3.4總養(yǎng)分樣品中總氮、有效五氧化二磷和氧化鉀之和，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)。4要求4.1功能微生物制劑4.1.1添加的功能微生物制劑應(yīng)是經(jīng)國家登記批準(zhǔn)且在有效期內(nèi)的產(chǎn)品。功能微生物制劑產(chǎn)品質(zhì)量應(yīng)在符合GB20287或NY/T3083要求的基礎(chǔ)上，其胞外多糖含量不低于1.0mg/g(mL)。4.1.2所用菌種應(yīng)經(jīng)NY/T1847等技術(shù)規(guī)程評(píng)價(jià)，具有養(yǎng)分活化等增效的功能菌。4.2外觀（感官）均勻的顆粒狀固體。粒狀產(chǎn)品應(yīng)無明顯機(jī)械雜質(zhì)、大小均勻。4.3技術(shù)指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求。產(chǎn)品中的無害化指標(biāo)應(yīng)符合GB/T23349的要求；涉及產(chǎn)品中縮二脲限量指標(biāo)由供需雙方約定。表1含菌復(fù)合肥料產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)要求高濃度中濃度低濃度總養(yǎng)分（N+P2O5+K2O）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)a/%水溶性磷占有效磷百分率b/%有效活菌數(shù)c（cfu）/(億/g)有機(jī)質(zhì)/%b以鈣鎂磷肥等枸溶性磷肥為基礎(chǔ)磷肥并在包e當(dāng)用戶對(duì)粒度有特殊要求時(shí)，可由g此項(xiàng)僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為5試驗(yàn)方法5.1一般要求本標(biāo)準(zhǔn)中所使用的水，在未說明規(guī)格時(shí)，其pH值范圍和電導(dǎo)率應(yīng)符合GB/T6682中的三級(jí)水規(guī)格；本標(biāo)準(zhǔn)中所用的試劑，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑；本標(biāo)準(zhǔn)中所用的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑溶液和指示劑溶液，在未說明配制方法時(shí)，均按照HG/T2843配制。5.2外觀按GB15063的規(guī)定執(zhí)行。5.3總氮含量按GB/T8572規(guī)定執(zhí)行。5.4有效五氧化二磷和水溶性磷含量占有效磷含量的百分率按GB/T8573規(guī)定執(zhí)行。5.5氧化鉀含量按GB/T8574規(guī)定執(zhí)行。5.6有效活菌數(shù)的測定按照NY/T2321和NY/T3083規(guī)定執(zhí)行。5.7水分按GB/T8576規(guī)定執(zhí)行。5.8粒度按GB/T24891規(guī)定執(zhí)行。5.9氯離子含量按GB/T24890規(guī)定執(zhí)行。5.9砷、鎘、鉛、鉻、汞含量按GB/T23349規(guī)定執(zhí)行。5.10縮二脲含量按GB/T22924規(guī)定執(zhí)行。以液相色譜法為仲裁測定方法。5.11糞大腸菌群數(shù)的測定按照GB/T19524.1的規(guī)定執(zhí)行。糞大腸菌群數(shù)測定流程及最可能數(shù)（MPN）檢索表參見NY/T2321附錄D。5.12蛔蟲卵死亡率的測定按照GB/T19524.2的規(guī)定執(zhí)行。5.13胞外多糖測定按照附錄A測定方法對(duì)所選用功能微生物制劑中的胞外多糖含量進(jìn)行測定。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1檢驗(yàn)類別產(chǎn)品出廠時(shí)，應(yīng)由生產(chǎn)企業(yè)的質(zhì)檢部門按表1進(jìn)行檢驗(yàn)；出廠檢驗(yàn)時(shí)不包括氯離子質(zhì)量分?jǐn)?shù)和保質(zhì)期。6.1.2型式檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)應(yīng)包括本標(biāo)準(zhǔn)4.2和4.3所列指標(biāo)要求；有下列情況之一者，應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)?！懂a(chǎn)時(shí)，停產(chǎn)后重新開始生產(chǎn)時(shí)；—正式生產(chǎn)時(shí)，原料、工藝發(fā)生變化；—正式生產(chǎn)時(shí)，定期或積累到一定量后，應(yīng)周期性進(jìn)行一次型式檢驗(yàn)；—國家或地方質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)提出型式檢驗(yàn)的要求時(shí)。6.2組批產(chǎn)品按批檢驗(yàn)，按一天或兩天的產(chǎn)量為一批，最大批量為1000t。6.3采樣方案執(zhí)行GB15063中的采樣方案。6.4樣品縮分及試樣制備按照GB15063中的樣品縮分及試樣制備的條款進(jìn)行操作。6.5判定規(guī)則6.5.1本標(biāo)準(zhǔn)中產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)合格判定，采用GB/T8170中“修約值比較法”。6.5.2型式檢驗(yàn)項(xiàng)目全部符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，判定該批產(chǎn)品合格。6.5.3生產(chǎn)企業(yè)出廠檢驗(yàn)時(shí)，出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目全部符合本標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)，判定該批產(chǎn)品合格。如果檢驗(yàn)結(jié)果中有一項(xiàng)指標(biāo)不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求，應(yīng)重新自2倍量的包裝袋中采取樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，重新檢驗(yàn)結(jié)果中即使有一項(xiàng)指標(biāo)不符合本標(biāo)準(zhǔn)要求，則整批產(chǎn)品為不合格。6.5.4每批檢驗(yàn)合格的出廠產(chǎn)品應(yīng)附有質(zhì)量證明書，其內(nèi)容包括生產(chǎn)企業(yè)名稱、地址、產(chǎn)品名稱、批號(hào)或生產(chǎn)日期、總養(yǎng)分、配合式或主要養(yǎng)分含量、有效活菌數(shù)、雜菌率、氯離子含量、縮二脲含量、本標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)和GB15063。以鈣鎂磷肥等枸溶性磷肥為基礎(chǔ)磷肥的產(chǎn)品應(yīng)注明為“枸溶性磷”，并應(yīng)注明是“硝態(tài)氮”或“尿素態(tài)氮”。7標(biāo)識(shí)、包裝、運(yùn)輸和貯存產(chǎn)品包裝標(biāo)識(shí)內(nèi)容，在符合GB15063和GB18382要求的基礎(chǔ)上，可標(biāo)明本標(biāo)準(zhǔn)號(hào)、有效活菌含量及添加功能微生物制劑的登記證號(hào)。7.2包裝、運(yùn)輸和貯存按GB15063的包裝、運(yùn)輸和貯存要求。附錄A胞外多糖的測定苯酚硫酸法A.1范圍本方法規(guī)定了微生物菌劑生產(chǎn)菌株發(fā)酵液中胞外多糖的測定產(chǎn)蛋白酶活力的測定方法。本方法適用于微生物菌劑。A.2原理糖在濃硫酸作用下，脫水生成糠醛或羥甲基糠醛，與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10-100mg范圍內(nèi)其顏色深淺與糖的含量呈正比，且在490nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。A.3定義微生物生長過程中分泌到細(xì)胞壁外、易與菌體分離的水溶性多糖，屬于微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物。A.4試劑與溶液A.4.1硫酸（H2SO4ρ=1.84g/mL。A.4.2乙醇溶液（95%）A.4.3苯酚溶液（5%）:稱取苯酚5.0g,用100mL,溶解。4℃冰箱避光保存。A.4.4葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10mg/mL）:稱取干燥至恒重的葡萄糖1.000g，加水溶解,定容至100mL,混勻,置4℃冰箱中保存。A.4.5葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液（2mg/mL）:吸取10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10.0mL置于50mL容量瓶中,定容,混勻,置4℃冰箱中保存。A.5儀器與設(shè)備A.5.1可見分光光度計(jì)A.5.2分析天平A.5.3離心機(jī)A.5.4漩渦振蕩器A.6測定A.6.1待測菌株的發(fā)酵培養(yǎng)A.6.1.1種子培養(yǎng)：用接種環(huán)將活化好的菌株（1環(huán)）接種到三角瓶種子培養(yǎng)基（30mL）中,于適宜條件下培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期。A.6.1.2發(fā)酵培養(yǎng)：將種子培養(yǎng)液按5%接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，于適宜條件下培養(yǎng)48h-96h。A.6.2樣品處理A.6.2.1菌株發(fā)酵：發(fā)酵液經(jīng)5000r/min,離心15min,取10mL上清液加3倍體積的95%乙醇,搖勻，4℃沉淀過夜,8000r/min離心15min去上清液,所得沉淀加入10mL蒸餾水溶解，獲得待測液（樣品測定液）。A.6.2.2液體產(chǎn)品：取樣品30mL經(jīng)5000r/min,離心15min，取10mL上清液加3倍體積的95%乙醇,搖勻，4℃沉淀過夜,8000r/min離心15min去上清液,所得沉淀加入10mL蒸餾水溶解，獲得待測液。A.6.3繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液（2mg/mL）0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8mL,分別置于20mL具塞比色管中,準(zhǔn)確補(bǔ)水至1.0mL。加入5%苯酚溶液1.0mL,在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻,然后快速小心加入濃硫酸5.0mL,混勻,置沸水中水浴15min,冷卻后用蒸餾水定容至刻度。于分光光度計(jì)在490nm波長處以試劑空白溶液為參比,1cm比色皿測定吸光度值。以葡萄糖質(zhì)量為縱坐標(biāo),吸光度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。A.6.4比色測定吸取1.00mL待測液于20mL具塞試管中，按上操作步驟測定吸光度。若樣品多糖含量較高，需將待測液適當(dāng)稀釋再重新測定。A.6.5空白試驗(yàn)與試樣的測定平行進(jìn)行，取相同量的所