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文檔簡(jiǎn)介
ICS65.020.30
B43
備案號(hào):58397-2018DB21
遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)
DB21/T2739—2017
絨山羊鮮精稀釋與保存技術(shù)操作規(guī)程
Thetechnologyoperatingproceduresofdilutingandsavingforfreshsemenof
cashmeregoats
DB21/T2739—2017
絨山羊鮮精稀釋與保存技術(shù)操作規(guī)程
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了絨山羊鮮精稀釋與保存過程中的基本要求、品質(zhì)檢查、稀釋、分裝、標(biāo)記、保存和
使用等技術(shù)內(nèi)容。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于絨山羊人工授精技術(shù)中的鮮精稀釋、保存及精液處理。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
NY/T2893-2016絨山羊飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范
DB21/T2434-2015遼寧絨山羊人工授精技術(shù)操作規(guī)程
3術(shù)語與定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
鮮精Freshsemen
原精及其稀釋后未經(jīng)冷凍的精液。
3.2
原精Theoriginalsemen
采自公羊未經(jīng)處理的精液。
3.3
精子活力spermvitality
在顯微鏡下,精液中直線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)量占精子總數(shù)的比例。
3.4
精子密度spermdensity
每毫升精液中含有的精子數(shù)量。
3.5
1
DB21/T2739—2017
稀釋比例Dilutionrate
原精與稀釋液的體積比例。
4基本要求
4.1鮮精處理環(huán)境
室內(nèi),室溫不低于25℃,不高于35℃,無陽光直射、無煙塵、無強(qiáng)烈輻射。
4.2器材處理
根據(jù)材質(zhì)特點(diǎn),做好清洗、消毒、烘干處理,使用前保持干燥、潔凈并與精液等溫。
4.3采精季節(jié)
以8月中旬~11月下旬和4月中旬~5月下旬為宜。
4.4供精公羊
選擇一級(jí)以上種公羊作為供精公羊,日常飼養(yǎng)管理參照NY/T2893-2016的規(guī)定。
4.5精液品質(zhì)
嚴(yán)格按照DB21/T2434-2015相關(guān)要求進(jìn)行采精,原精活力和稀釋后的活力要求達(dá)到60%以上。
4.6保存期標(biāo)定
合格原精在稀釋與保存前,要進(jìn)行活力、存活時(shí)間和稀釋倍數(shù)的測(cè)定,根據(jù)上述測(cè)定指標(biāo),確定供
精公羊用于輸精的精液最長(zhǎng)保存時(shí)間,具體內(nèi)容詳見附錄A。
5品質(zhì)檢查
原精的檢查方法參照DB21/T2434-2015進(jìn)行操作,稀釋后的精液檢查活力和密度,操作方法同原
精檢查法。鮮精檢查后做好相關(guān)記錄,詳見附錄B。
6稀釋
6.1稀釋液
6.1.1自配稀釋液
所用試劑均為化學(xué)分析純?cè)噭秒p重蒸餾水或超純水溶解,調(diào)整稀釋液PH值至6.8~7.0,推薦稀
釋液配方及配制方法參照附錄C。
6.1.2商品稀釋液
按產(chǎn)品說明書使用和保存,過期或變色的稀釋液禁止使用。
6.1.3稀釋液標(biāo)記
配制的精液稀釋液在使用前要標(biāo)記稀釋液配方代號(hào)、配制時(shí)間。
2
DB21/T2739—2017
6.1.4稀釋液保存
商品稀釋液按照產(chǎn)品說明書保存;自配稀釋液低溫冷藏,冷藏溫度控制在0℃~5℃,保存期不超
過7天。
6.2鮮精稀釋
將稀釋液放入水浴鍋內(nèi)加熱至35℃,同時(shí)將集精杯的水溫調(diào)整并保持35℃,原精采集后應(yīng)在20
分鐘內(nèi)等溫稀釋。先將裝有原精的集精杯放水浴鍋內(nèi),然后將稀釋液沿集精杯內(nèi)壁緩緩加入,隨后將原
精和稀釋液輕輕混勻;將原精先進(jìn)行2~4倍稀釋,混勻后再稀釋到規(guī)定比例,稀釋比例的確定參照附錄
D。
7鮮精分裝與標(biāo)記
7.1鮮精分裝
鮮精稀釋后采用瓶、管等容器分裝并密封,容器材質(zhì)應(yīng)對(duì)精子無害并經(jīng)清洗、干燥和滅菌處理。容
器分裝精液時(shí)應(yīng)與精液等溫,根據(jù)精液體積選擇不同容量的容器,盡量充滿。
7.2鮮精標(biāo)記
分裝后的鮮精應(yīng)標(biāo)明生產(chǎn)單位、品種、公羊號(hào)、生產(chǎn)日期、保存期、稀釋液配方代號(hào)、精液量、輸
配劑量。
8鮮精保存
8.1保存方法
稀釋后的鮮精用8~12層紗布包裹或直接放入等溫水中,再置于0℃~5℃恒溫箱中存放,每間隔8
小時(shí),將精液重新輕輕混勻。
8.2鮮精抽檢
使用前對(duì)鮮精進(jìn)行品質(zhì)檢查,鏡檢溫度為37℃~38℃,檢查合格后可用于輸精。
8.3鮮精運(yùn)輸
運(yùn)輸過程中,將精液放置到0℃~5℃的恒溫箱中,避免劇烈震蕩。
8.4鮮精保存時(shí)間
以生理鹽水、5%的葡萄糖溶液、2.9%的檸檬酸鈉溶液稀釋精液時(shí),稀釋倍數(shù)不超過3倍,稀釋后
立即使用,最長(zhǎng)不超過2小時(shí)。
使用商品稀釋液或自配稀釋液進(jìn)行鮮精稀釋,使用前要測(cè)定不同供精公羊個(gè)體稀釋鮮精后的精子參
數(shù),主要包括活力變化、在38℃的存活時(shí)間等技術(shù)參數(shù),根據(jù)技術(shù)參數(shù)值確定鮮精保存的最長(zhǎng)時(shí)間,
原則上不宜超過5天。
9鮮精使用
3
DB21/T2739—2017
取用鮮精時(shí)應(yīng)快速操作,根據(jù)輸精用量取出相應(yīng)的精液,取出精液后迅速將精液保存容器蓋嚴(yán),取
出的精液不再放回保存容器內(nèi),一次性使用完畢。在取用過程中,防止未取用精液溫度回升。
4
DB21/T2739—2017
AA
附錄A
(規(guī)范性附錄)
鮮精保存期檢測(cè)標(biāo)定表
檢12243648607284
測(cè)
時(shí)
間
存存存存存存存
與畸畸畸畸畸畸畸
活活活活活活活活活活活活活活
指形形形形形形形
力時(shí)力時(shí)力時(shí)力時(shí)力時(shí)力時(shí)力時(shí)
標(biāo)率率率率率率率
倍間間間間間間間
數(shù)
2
4
10
20
備注:活力是指37℃~38℃下鏡檢活力,存活時(shí)間是指將精液置于38℃下精子全部死亡的時(shí)間,畸形率
為畸形精子占精子總數(shù)的百分率。
5
DB21/T2739—2017
BB
附錄B
(資料性附錄)
公羊鮮精保存登記表
保存第1保存第2保存第3保存第1
供生預(yù)每每份天天天天
公畸保
精產(chǎn)品配份有效搖搖搖搖備
羊形質(zhì)
單日種數(shù)劑精子活動(dòng)活動(dòng)活動(dòng)活動(dòng)注
號(hào)率期
位期量量數(shù)力時(shí)力時(shí)力時(shí)力時(shí)
間間間間
6
DB21/T2739—2017
CC
附錄C
(資料性附錄)
推薦稀釋液配方及配制方法
取三羥甲基氨基甲烷2.42g,檸檬酸1.34g,葡萄糖1g,EDTA-2Na0.15g,加入超純水80ml,
煮沸即冷卻至38℃,加入青霉素1×105IU,鏈霉素1×105IU,新鮮雞蛋卵黃20ml,混勻備用。
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DB21/T2739—2017
DD
附錄D
(資料性附錄)
稀釋比例確定方法
稀釋后的鮮精,每一次輸精劑量輸入的有效精子數(shù)應(yīng)保證發(fā)情母羊正常受孕,每劑的輸精劑量為
0.25ml~0.5ml,具體可參照如下公式確定最終稀釋比例。
plV
X=1:(01)。
k
在公式中,
p—原精精子密度,單位為1×108/ml;
V0—每次輸入稀釋后的精液體積,單位為ml,為設(shè)定值;
k—每次輸精輸入的有效精子數(shù)量,單位為1×108,為設(shè)定值;
l—稀釋后的精子活力,單位為%;
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