云南省昆明市官渡一中2024年高三二診模擬考試生物試卷含解析

云南省昆明市官渡一中2024年高三二診模擬考試生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標(biāo)記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．將一種對青霉素敏感的細(xì)菌分別培養(yǎng)在裝有液體培養(yǎng)基（不含青霉素）的錐形瓶和100只小試管中。培養(yǎng)一段時間后，從錐形瓶和100只小試管中各取一定量菌液分別接種到含青霉素的培養(yǎng)基上。24h后統(tǒng)計每個培養(yǎng)基上的青霉素抗性菌的菌落數(shù)。實驗結(jié)果見下圖。據(jù)此判斷，下列敘述不合理的是（）A．試管中細(xì)菌發(fā)生基因突變的時間或數(shù)量不同B．青霉素抗性菌的產(chǎn)生是自發(fā)基因突變的結(jié)果C．錐形瓶中的基因突變后代在培養(yǎng)液中被混勻了D．實驗結(jié)果說明基因突變具有不定向性和低頻性2．如圖實驗裝置，U型管A、B側(cè)分別裝入20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的麥芽糖溶液和蔗糖溶液。一段時間后，在A、B兩側(cè)加入等量且適量的蔗糖酶溶液，觀察兩側(cè)液面的變化。下列有關(guān)實驗分析不正確的是（）A．加入蔗糖酶前，兩側(cè)液面等高B．加入蔗糖酶前，半透膜無水分子通過C．加入蔗糖酶后，最終A側(cè)液面下降，B側(cè)液面上升D．該實驗可驗證酶的專一性3．在抗震救災(zāi)中，發(fā)現(xiàn)有些在廢墟下由于肌肉受到擠壓導(dǎo)致局部組織壞死但仍保持清醒的幸存者，當(dāng)移開重物被救出后，卻因肌肉大量釋放的肌紅素、鉀等物質(zhì)迅速進入血液，結(jié)果救出來后最終因心腎功能衰竭而不幸去世。下列與之有關(guān)的敘述，錯誤的是（）A．在移開重物前，應(yīng)先為傷者靜脈滴注生理鹽水，使血液中的有害物質(zhì)隨尿液排出B．因嚴(yán)重缺水，幸存者體內(nèi)抗利尿激素分泌增多，尿量減少C．心腎功能衰竭是由于傷者血漿滲透壓過低所致D．有些剛被救出的傷者，其內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)已經(jīng)遭到破壞，影響正常的生命活動4．“母性效應(yīng)”是指子代某一性狀的表現(xiàn)型由母體的核基因型決定，而不受本身基因型的支配。椎實螺是一種雌雄同體的軟體動物，一般通過異體受精繁殖，但若單獨飼養(yǎng)，也可以進行自體受精，其螺殼的旋轉(zhuǎn)方向有左旋和右旋的區(qū)分。旋轉(zhuǎn)方向符合“母性效應(yīng)”，遺傳過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．與螺殼旋轉(zhuǎn)方向有關(guān)的基因的遺傳遵循基因的分離定律B．螺殼表現(xiàn)為左旋個體和表現(xiàn)為右旋個體的基因型均各有3種C．讓圖示中F2個體進行自交，其后代螺殼右旋∶左旋=3∶1D．欲判斷某左旋椎實螺的基因型，可用任意的右旋椎實螺作為父本進行交配5．下列有關(guān)群落初生演替和次生演替的敘述，錯誤的是A．兩種演替經(jīng)歷的階段不完全相同B．次生演替的速度一般比初生演替快C．兩種演替一般都朝向與環(huán)境相適應(yīng)的方向進行D．兩種演替總會使群落中物種豐富度增大、結(jié)構(gòu)更復(fù)雜6．下列關(guān)于艾滋病的敘述，錯誤的是（）A．艾滋病是通過體液傳播的疾病，它是由感染HIV所引起的B．HIV可以通過妊娠、分娩或哺乳等母嬰傳播途徑遺傳給孩子C．HIV中含有兩條RNA和在宿主細(xì)胞核糖體上合成的逆轉(zhuǎn)錄酶D．艾滋病患者的免疫功能嚴(yán)重衰退，往往很消瘦，也可能出現(xiàn)癡呆二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某種番茄的黃化突變體與野生型相比，葉片中的葉綠素、類胡蘿卜素含量均降低。凈光合作用速率(實際光合作用速率－呼吸速率)、呼吸速率及相關(guān)指標(biāo)如表所示。材料葉綠素a/b類胡蘿卜素/葉綠素凈光合作用速率(μmolCO2·m－2·s－1)細(xì)胞間CO2濃度(μmolCO2·m－2·s－1)呼吸速率(μmolCO2·m－2·s－1)突變體9.300.325.66239.073.60野生型6.940.288.13210.864.07(1)葉綠體中色素分布在________上，可用________(試劑)提取；如圖為野生型葉片四種色素在濾紙條上的分離結(jié)果，其中________(填標(biāo)號)色素帶含有鎂元素。(2)番茄細(xì)胞中可以產(chǎn)生CO2的具體部位是________。(3)番茄的黃化突變可能________(填“促進”或“抑制”)葉綠素a向葉綠素b轉(zhuǎn)化的過程。(4)突變體葉片中葉綠體對CO2的消耗速率比野生型降低了________(μmol·m－2·s－1)。研究人員認(rèn)為氣孔因素不是導(dǎo)致突變體光合速率降低的限制因素，依據(jù)是________。8．（10分）國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過個，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來測定，流程為：用濾膜過濾1ml待測牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目。（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。（2）為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_____________。（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進行統(tǒng)計，結(jié)果如下：培養(yǎng)時間12h24h平板對照組123對照組123大腸桿菌菌落數(shù)（個）01321211450132121145其他細(xì)菌菌落數(shù)（個）112253222244112253222244（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請說明理由：_____________。9．（10分）研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞（只有一個染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖所示，請分析回答下列問題：（1）利用PCR技術(shù)可以擴增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，還應(yīng)含有____；引物應(yīng)選用下圖中____（填圖中字母）。（2）在基因工程操作步驟中，過程①②稱為___。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞。結(jié)合上圖推測，過程①選用的兩種限制酶是___（填圖中的編號），③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加____（填“氨芐青霉素”或“G418”）。（3）圖中桑椹胚需通過____技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進行該操作前需對受體小鼠進行____處理。10．（10分）自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟效益?；卮鹣铝袉栴}。（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取____________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用____________法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的____________開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線____________。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____________培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了____________。長期保存菌種時，應(yīng)將培養(yǎng)的菌液與____________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。（3）甲、乙兩組同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時間記錄數(shù)據(jù)（統(tǒng)計時間內(nèi)微生物總數(shù)小于環(huán)境容納量），得到以下結(jié)果：培養(yǎng)時間(小時)24487296甲組菌落均值(個)18253632乙組菌落均值(個)20283832計數(shù)時最好取培養(yǎng)____________小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結(jié)果，一方面是由于培養(yǎng)時間較短，會遺漏菌落數(shù)目，另一方面是由于____________。11．（15分）隨著基因工程等現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，動物細(xì)胞工程的理論和應(yīng)用均獲得了突破性的進展。圖為動物細(xì)胞工程涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域?；卮鹣铝袉栴}：（1）在進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，將成塊的組織中的細(xì)胞分散成單個細(xì)胞的方法是___________。在培養(yǎng)過程中，要向培養(yǎng)液中加入一定量的____________，以防止微生物的污染。（2）1980年，科學(xué)家首次通過顯微注射法培育出世界上第一個轉(zhuǎn)基因小鼠。目前，主要通過______________________等途徑獲取基因工程需要的目的基因。（3）與植物細(xì)胞不同，動物細(xì)胞的全能性會隨著_______________而逐漸受到限制，因此，到目前為止，用動物體細(xì)胞克隆的動物，實際是通過上圖中所示的______________技術(shù)實現(xiàn)的。采用上圖中的___________技術(shù)，可使兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個________（選擇“單核”或“多核”）的雜交細(xì)胞。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

分析題干信息可知：將同種細(xì)菌分別培養(yǎng)在錐形瓶和100只小試管中，培養(yǎng)一段時間后，錐形瓶中各培養(yǎng)基的抗藥性差別不大，試管中的抗藥性差別很大，可認(rèn)為錐形瓶為相同環(huán)境，試管為不同的環(huán)境，據(jù)此分析作答?！驹斀狻緼、由于各個試管可看作不同的環(huán)境，經(jīng)試管培養(yǎng)后在不同培養(yǎng)基上的抗菌菌落差別較大，可推斷試管中細(xì)菌發(fā)生基因突變的時間或數(shù)量不同，A正確；B、實驗中的細(xì)菌放置于不含青霉素的液體培養(yǎng)基中，結(jié)果出現(xiàn)了抗性菌落，可推知青霉素抗性菌的產(chǎn)生是自發(fā)基因突變的結(jié)果，B正確；C、錐形瓶中的細(xì)菌在各個培養(yǎng)基培養(yǎng)后抗性菌落幾乎相同，應(yīng)為基因突變后代在培養(yǎng)液中被混勻的緣故，C正確；D、基因突變的不定向性是指基因突變可以向各種不同的方向發(fā)生突變，題干中只有抗菌一種性狀，無法證明其有不定向性，D錯誤。故選D。【點睛】解答此題需要明確錐形瓶和不同試管在本實驗中的作用，進而結(jié)合基因突變的特點分析作答。2、B【解析】

從圖示信息可知，蔗糖和麥芽糖都是二糖，相同濃度、相同體積的兩種溶液加入到被半透膜隔開的U型管中，一段時間后左右兩側(cè)液面高度相等。若向U型管兩側(cè)加入等量的蔗糖酶，由于酶的專一性，蔗糖酶只能使蔗糖水解成葡萄糖和果糖，導(dǎo)致B側(cè)滲透壓上升，B側(cè)吸水液面上升，A側(cè)液面下降?！驹斀狻緼、加入蔗糖酶前，蔗糖和麥芽糖都是二糖，相同濃度、相同體積的A、B兩種溶液滲透壓相同，左右兩側(cè)液面高度相等，A正確；B、加入蔗糖酶前，A、B兩種溶液滲透壓相等，兩側(cè)水分子通過半透膜的速率相等，B錯誤；C、加入蔗糖酶后，A側(cè)麥芽糖不會被水解，B側(cè)蔗糖會被水解為葡萄糖和果糖導(dǎo)致滲透壓增加，B側(cè)吸水液面上升，A側(cè)失水液面下降，C正確；D、兩側(cè)液面高度的變化是加入蔗糖酶后兩側(cè)滲透壓的變化引起，能證明酶的專一性，D正確。故選B?！军c睛】本題考查滲透作用的相關(guān)知識，解題的關(guān)鍵是滲透作用中水分的運輸方向是從低濃度一側(cè)運輸?shù)礁邼舛纫粋?cè)，并且半透膜只允許水分通過。3、C【解析】

據(jù)題文和選項的描述可知：該題考查學(xué)生對水鹽平衡調(diào)節(jié)、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)等相關(guān)知識的識記和理解能力?！驹斀狻坑深}意可知，有些幸存者的肌肉受到擠壓導(dǎo)致局部組織壞死，說明其內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)已經(jīng)遭到破壞，影響正常的生命活動，移開重物后肌肉大量釋放肌紅素、鉀等物質(zhì)迅速進入血液，導(dǎo)致其內(nèi)環(huán)境的化學(xué)成分穩(wěn)態(tài)失調(diào)，因此在移開重物前，應(yīng)先為傷者靜脈滴注生理鹽水，使血液中的有害物質(zhì)隨尿液排出，A、D正確；被困在缺少水的惡劣環(huán)境中，導(dǎo)致幸存者機體內(nèi)環(huán)境中缺水，細(xì)胞外液滲透壓升高，對下丘腦滲透壓感受器的刺激增強，促使下丘腦合成并經(jīng)垂體釋放的抗利尿激素的分泌量增加，促進腎小管和集合管對水的重吸收，使尿量減少，B正確；心腎功能衰竭是由于遇難者體內(nèi)抗利尿激素分泌增多，尿量減少，有毒物質(zhì)不能隨尿排出，血漿滲透壓過高所致，不是血漿滲透壓過低所致，C錯誤。4、B【解析】

據(jù)圖分析，左螺旋dd作為母本，與右螺旋DD作為父本雜交，后代基因型為Dd，表現(xiàn)型為左螺旋（與母本相同），子一代為Dd，Dd自交，子二代全部為右螺旋，且后代DD：DD：dd=1：2：1，說明Dd的遺傳遵循基因的分離定律，即“母性效應(yīng)”現(xiàn)象是符合孟德爾分離定律的。【詳解】A、根據(jù)以上分析已知，與螺殼旋轉(zhuǎn)方向有關(guān)的基因的遺傳遵循基因的分離定律，A正確；B、根據(jù)題意和圖形分析，螺殼表現(xiàn)為左旋，說明母本的基因型為dd，,故表現(xiàn)為螺殼左旋的子代基因型為dd或Dd2種；螺殼表現(xiàn)為右旋，說明母本的基因型為DD或Dd，則表現(xiàn)為螺殼右旋的子代基因型為DD、Dd或dd3種，B錯誤；C、讓圖示中F2個體進行自交，DD和Dd自交的后代都是右螺旋，dd自交的后代是左螺旋，因此后代螺殼右旋∶左旋=3∶1，C正確；D、左螺旋的基因型為dd或Dd，鑒定期基因型可以讓其與任意的右旋椎實螺作為父本進行交配，若后代都是左螺旋，則基因型為dd，若后代但是右螺旋，則基因型為Dd，D正確。故選B。5、D【解析】初生演替的過程可劃分為三個階段：侵入定居階段、競爭平衡階段、相對穩(wěn)定階段；次生演替會經(jīng)歷哪些階段，決定于外界因素作用的方式和作用的持續(xù)時間，與初生演替過程所經(jīng)歷的階段不完全相同，A正確；次生演替是在原有植被已被破壞但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子和其他繁殖體的地方發(fā)生的演替，與初生演替相比，次生演替的速度快，B正確；兩種演替一般都朝向與環(huán)境相適應(yīng)的方向進行，C正確；群落演替的根本原因在于群落內(nèi)部，但是也受外界環(huán)境因素的影響，因此兩種演替也不一定使群落中物種豐富度增大、結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，D錯誤?！军c睛】本題考查群落的演替，要求學(xué)生識記演替的類型、演替的方向和演替的過程，以及人類活動對演替的影響。6、B【解析】

艾滋病是獲得性免疫缺陷綜合癥，是一種削弱人體免疫系統(tǒng)功能的疾病。HIV病毒是艾滋病的病因，HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，它侵入人體后能識別，并結(jié)合輔助性T淋巴細(xì)胞表面的受體進入細(xì)胞，經(jīng)過長時間的潛伏后，輔助性T淋巴細(xì)胞被激活，前病毒復(fù)制出新的HIV并破壞輔助性T淋巴細(xì)胞，還可感染體內(nèi)其他類型的細(xì)胞，如腦細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。由于HIV的破壞作用，艾滋病人的免疫功能嚴(yán)重減退，便會招致一些平時對免疫功能正常的人無害的感染?！驹斀狻緼、艾滋病是通過體液傳播的疾病，病因為HIV感染，A正確；B、HIV可以通過妊娠、分娩或哺乳等母嬰傳播途徑傳染給孩子，不是遺傳，B錯誤；C、HIV中含有兩條RNA和逆轉(zhuǎn)錄酶等，其中HIV的蛋白質(zhì)可以在宿主細(xì)胞核糖體上合成，C正確；D、由于HIV的破壞作用，艾滋病人會招致一些平時對免疫功能正常的人無害的污染，許多感染在平時可用抗生素治愈，艾滋病患者的免疫功能嚴(yán)重衰退，往往很消瘦，也可能出現(xiàn)癡呆，D正確。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、類囊體薄膜(基粒)無水乙醇c、d細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)抑制2.94突變體葉片中的細(xì)胞間CO2濃度高【解析】

（1）葉綠體中的色素都分布在類囊體薄膜上，因為色素能溶于有機溶劑，所以常用無水乙醇進行提取。圖中的c表示葉綠素a，d表示葉綠素b，葉綠素含有鎂元素，所以是c和d。（2）能產(chǎn)生二氧化碳的部位是進行細(xì)胞呼吸第二階段的線粒體基質(zhì)，和進行無氧呼吸的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。（3）分析數(shù)據(jù)在突變體中葉綠素a/b的比值比野生型高，說明番茄的黃花突變可能是抑制了葉綠素a向葉綠素b的轉(zhuǎn)化過程。（4）突變體中二氧化碳的消耗速率是5.66+3.60=9.26(μmol·m－2·s－1)，而野生型二氧化碳消耗速率是8.13+4.07=12.20(μmol·m－2·s－1)，突變體中葉綠體對二氧化碳的消耗速率比野生型降低了12.20-9.26=2.94(μmol·m－2·s－1)，但因為突變體胞間二氧化碳濃度高于野生型，說明氣孔因素不是導(dǎo)致突變體光合速率降低的限制因素?！军c睛】光合作用的基礎(chǔ)知識如場所和過程一定要牢牢掌握，還需要根據(jù)題干中所給數(shù)據(jù)進行分析解答，如該題的第（3）和（4）問都是根據(jù)題中的數(shù)據(jù)分析得出結(jié)論的。8、蛋白胨鑒別培養(yǎng)基將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d黑色培養(yǎng)24h的菌落較大（或培養(yǎng)12h的菌落較?。φ战M有其他細(xì)菌菌落，說明培養(yǎng)基制作不合格或無菌操作存在問題，需重做實驗【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，蛋白胨可以提供碳源、氮源和維生素。添加了伊紅美藍的培養(yǎng)基上，大腸桿菌可以和伊紅美藍發(fā)生反應(yīng)形成黑色菌落，從而鑒別大腸桿菌。整個微生物培養(yǎng)的實驗中需要防止其它雜菌的干擾，否則會影響實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計?！驹斀狻浚?）蛋白胨可以同時提供碳源和氮源，乳糖只能提供碳源，氯化鈉只能提供無機鹽；按功能分，EMB培養(yǎng)基可以通過伊紅美藍鑒別大腸桿菌的有無，屬于鑒別培養(yǎng)基；（2）為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，一般常常使用將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d，觀察是否有菌落產(chǎn)生；（3）伊紅美藍和大腸桿菌反應(yīng)產(chǎn)生黑色；（4）培養(yǎng)時間越長，細(xì)菌的繁殖數(shù)量就越多，因此培養(yǎng)24h的菌落較大；（5）分析表格數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，對照組有其他細(xì)菌菌落，說明培養(yǎng)基制作不合格或無菌操作存在問題，需重做實驗?！军c睛】本題的易錯點為菌落數(shù)目統(tǒng)計的可用性的判斷，在菌落的計數(shù)實驗中都要求很嚴(yán)格的無菌技術(shù)，以防止為實驗數(shù)據(jù)的干擾。因此空白對照組中生長出菌落就是無菌技術(shù)不合格的證明，則在實驗組中的所有數(shù)據(jù)均存在明顯的誤差，因此該實驗需要重做。9、熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（或Taq酶）A和D基因表達載體的構(gòu)建Ⅰ和ⅡG418胚胎移植同期發(fā)情【解析】

1.PCR反應(yīng)的條件：模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、耐高溫的DNA聚合酶，其中，dNTP的作用是合成DNA的原料、提供能量。

2.基因工程的操作步驟為：提取目的基因、構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測和鑒定。【詳解】（1）根據(jù)分析可知，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，還應(yīng)含有耐高溫的DNA聚合酶。為了擴增目的基因的片段，根據(jù)圖示可知需要在引物A和D作用下以目的基因的兩條鏈為模板合成子代目的基因。（2）由圖可知，過程①②是將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒，即基因表達載體的構(gòu)建過程。重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，其作用是有利于篩選出含有目的基因的細(xì)胞。根據(jù)題意可知，氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞，因此應(yīng)選擇Neo′作為標(biāo)記基因，即質(zhì)粒上Neo′不能用限制酶切割，則過程①應(yīng)選用Ⅰ和Ⅱ兩種限制酶，圖中③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418以便于起到篩選的作用。（3）將桑椹胚通過胚胎移植技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進行該操作前需對受體小鼠進行同期發(fā)情處理，以保證供體與受體處于相同或相近的生理狀態(tài)?！军c睛】本題考查基因工程的知識點，要求學(xué)生掌握基因工程的操作步驟，把握基因表達載體構(gòu)建的過程及其標(biāo)記基因的作用，理解限制酶的作用并且能夠根據(jù)題意和圖示正確選擇限制酶，把握PCR擴增技術(shù)需要的條件和引物的作用，這是該題考查的重點。10、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連（或相接、相交等意思正確）倒置作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油72培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落【解析】

1、微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作技術(shù)，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。2、平板劃線操作的基本步驟是：（一）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。（三）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重