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文檔簡介

檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗原理顯色反響顏色反響染色劑有機(jī)物紫色雙縮脲試劑蛋白質(zhì)橘黃色/紅色蘇丹Ⅲ/Ⅳ脂肪磚紅色斐林試劑復(fù)原糖藍(lán)色碘液淀粉糖類實驗步驟1、復(fù)原糖的檢測〔1〕取一支試管1，注入2mL梨勻漿；〔2〕另取一支試管2，注入1mL斐林試劑甲液和1mL斐林試劑乙液，振蕩，混合均勻，制成斐林試劑；〔3〕將試管2中剛配制好的斐林試劑注入試管1中，振蕩混勻；〔4〕將試管放入燒杯中水浴加熱，觀察顏色變化。2、脂肪的檢測〔1〕取材：取一片花生切片，選擇最薄切片放在載玻片中央；〔2〕染色：滴加2-3滴蘇丹Ⅲ染液染色3分鐘，用吸水紙吸去染液；〔3〕去浮色：再滴加1-2滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精溶液，洗去浮色；〔4〕制片與觀察：吸去酒精，滴加一滴清水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片，在顯微鏡下找到子葉最薄處，尋找橘黃色脂肪顆粒3、蛋白質(zhì)的檢測取一支試管，參加2mL稀蛋清，再參加雙縮脲試劑A1mL，振蕩搖勻，再參加雙縮脲試劑B4滴，振蕩搖勻，觀察顏色變化。注意斐林試劑極不穩(wěn)定，要現(xiàn)配現(xiàn)用，先混合后一次參加。甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液

乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液

使用時，將4—5滴乙液滴入2ml甲液中，配完后立即使用。用斐林試劑鑒定可溶性復(fù)原糖時，溶液的顏色變化過程：

淺藍(lán)色→棕色→磚紅色沉淀蛋白質(zhì)鑒定原理

鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。在堿性溶液中，雙縮脲能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物，這個反響叫雙縮脲反響。

由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反響。紫色注意雙縮脲試劑A：

質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液

雙縮脲試劑B：

質(zhì)量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液使用時，先參加2ml雙縮脲試劑A，振蕩搖勻；再參加3—4滴雙縮脲試劑B。

斐林試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)可溶性還原性糖蛋白質(zhì)或多肽成

分甲液乙液A液B液0.1g/mlNaOH溶液0.05g/mlCuSO4溶液0.1g/mlNaOH溶液0.01g/mlCuSO4溶液添加順序甲、乙兩液等量混合均勻后再注入(即現(xiàn)配現(xiàn)用)先加A液1ml，搖勻；再加B液3~

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