廣藥藥理實(shí)驗(yàn)中樞神經(jīng)興奮藥LD50實(shí)驗(yàn)報(bào)告

EMBEDPBrush1藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)論文中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮藥對(duì)小鼠急性毒性研究二級(jí)學(xué)院藥科學(xué)院專(zhuān)業(yè)班級(jí)學(xué)生姓名學(xué)號(hào)指導(dǎo)教師2015年12月

中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮藥對(duì)小鼠急性毒性研究摘要：從未知藥物篩選出具有中樞神經(jīng)興奮作用的目標(biāo)藥物，通過(guò)給藥注射，觀察藥物對(duì)小鼠的興奮作用，測(cè)定其LD50，以評(píng)價(jià)該藥物的有效性和安全性。方法：預(yù)實(shí)驗(yàn)：取三只小鼠，腹腔注射母液，篩選出目標(biāo)藥物，再將15只小鼠隨機(jī)分為5組，測(cè)定LD0和LD100。正式實(shí)驗(yàn)：將50只小鼠隨機(jī)分成5組，按計(jì)算的劑量注射稀釋好的藥物，觀察小鼠死亡情況，以測(cè)定LD50。關(guān)鍵詞：LD50；中樞興奮藥前言作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物主要影響遞質(zhì)和受體而發(fā)揮作用，而其藥理效應(yīng)主要表現(xiàn)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的增強(qiáng)或抑制；通過(guò)觀察動(dòng)物的藥物反應(yīng)，可初步區(qū)分動(dòng)物的特性。通過(guò)藥物L(fēng)D50的測(cè)定，分析其安全性。藥物給藥劑量與動(dòng)物死亡率呈正態(tài)分布。以對(duì)數(shù)劑量為橫坐標(biāo)，累加死亡率為縱坐標(biāo)作圖，可得到一對(duì)稱(chēng)S型曲線，其兩端較平坦，中間較陡，說(shuō)明兩端處劑量稍有變化時(shí)死亡率的改變不易表現(xiàn)出來(lái)，在50%死亡率處斜率最大，該處劑量稍有變動(dòng)時(shí)，其死亡率變動(dòng)最明顯，即最靈敏，在技術(shù)上也最容易準(zhǔn)確測(cè)得，故常選用LD50值作為反映藥物毒性的指標(biāo)。若將死亡率換算成幾率單位，則對(duì)數(shù)劑量與幾率單位呈直線關(guān)系，用數(shù)學(xué)方法可擬合其回歸方程式，可精確地計(jì)算LD50及引起任何死亡率的劑量及相關(guān)數(shù)據(jù)。

材料與方法實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物：動(dòng)物名稱(chēng)：小鼠體重范圍：18~26g動(dòng)物來(lái)源：廣東藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心藥品與試劑：名稱(chēng)：中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物、生理鹽水來(lái)源：廣東藥學(xué)院藥科學(xué)院藥理系2.2實(shí)驗(yàn)方法2.2.1預(yù)實(shí)驗(yàn)確定實(shí)驗(yàn)藥物，大致探索該藥物的LD100和LD0,以便正式實(shí)驗(yàn)時(shí)確定劑量。實(shí)驗(yàn)過(guò)程：確認(rèn)主題，準(zhǔn)備預(yù)實(shí)驗(yàn)方案，并在課前做方案匯報(bào)與探討可能出現(xiàn)、需要注意的問(wèn)題。稱(chēng)量所取的18只小鼠，記錄其體重。從18只小鼠中隨機(jī)抽取3只小鼠，按0.1ml/10g的給藥量分別注射實(shí)驗(yàn)提供的三瓶母液，篩選出目標(biāo)藥物中樞興奮藥。將剩余小鼠分為5組，每組3只，進(jìn)行藥物興奮致死量研究。根據(jù)小鼠體重以0.1ml/10g的劑量注射，以母液濃度為100%，初定了20%、40%、60%、80%、100%的五組不同濃度興奮藥。為避免所設(shè)置的最低濃度過(guò)高，從最低濃度開(kāi)始試驗(yàn)，依次提高注射藥物濃度，并根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整濃度（如若在40%濃度小鼠全部死亡，則根據(jù)實(shí)際情況從新調(diào)整注射濃度）。在30分鐘內(nèi)觀察小鼠的反應(yīng)并記錄死亡情況。通過(guò)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察，得出了我們組中樞興奮藥的LD0和LD100的所在范圍。2.2.2正式實(shí)驗(yàn)按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行完成所選藥物的LD50測(cè)定實(shí)驗(yàn)劑量計(jì)算：r=(Dmin/Dmax)^(1/(n-1))根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和正式實(shí)驗(yàn)劑量組數(shù)設(shè)計(jì)，計(jì)算出正式實(shí)驗(yàn)的劑量公比r為0.87,則各組劑量為：1）262.5mg/kg2)262.5*0.87=228.38mg/kg3)262.5*0.87^2=198.6mg/kg4)262.5*0.87^3=172.86mg/kg5)262.5*0.87^4=150.39mg/kg實(shí)驗(yàn)過(guò)程：取小鼠50只，稱(chēng)重，標(biāo)記，隨機(jī)分為5組，每組10只，進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)；各組小鼠按0.1ml/10g給藥量分別腹腔注射相應(yīng)濃度藥液，立即記錄時(shí)間，觀察小鼠情況，并在30分鐘后記錄各組死亡數(shù)量。根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，計(jì)算LD502.3數(shù)據(jù)處理方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果將小鼠死亡情況，藥物濃度等輸入LD50數(shù)據(jù)處理程序,即可求得回歸方程與LD503結(jié)果表1預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選藥物情況組別編號(hào)現(xiàn)象藥物123123小鼠無(wú)任何異常小鼠跳動(dòng)，呼吸加快，最后死亡小鼠安靜，嗜睡，最后死亡生理鹽水興奮藥抑制藥表2預(yù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別劑量(mg/kg)現(xiàn)象死亡率1600小鼠興奮，驚厥，最后死亡100%2450小鼠興奮，驚厥，最后死亡100%3375小鼠興奮，驚厥，最后死亡100%4262.5小鼠興奮，驚厥，最后死亡100%5150小鼠跳動(dòng)，呼吸加快0%表3正式實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果組別劑量現(xiàn)象死亡率1262.5小鼠跳動(dòng)，呼吸加快，最后死亡100%2228.38小鼠跳動(dòng)，呼吸加快，最后部分死亡30%3198.69小鼠跳動(dòng)，呼吸加快，最后部分死亡40%4172.86小鼠跳動(dòng)，呼吸加快0%5150.39小鼠跳動(dòng)，呼吸加快0%表4中樞實(shí)驗(yàn)藥LD50測(cè)定組別劑量（mg/kg）對(duì)數(shù)劑量（X）動(dòng)物數(shù)（只）死亡動(dòng)物數(shù)（只）死亡率（%）幾率單位（Y）及95%可信度1262.52.419101010033.000=185.6062mg/kg95%可信度：2228.382.359103304.4803198.692.298104404.7504172.862.23810000.0035150.392.17710000.0034結(jié)論預(yù)實(shí)驗(yàn)中測(cè)得引起死亡的最大無(wú)效量為150mg/kg,最小有效量為262.5mg/kg。正式實(shí)驗(yàn)后求得該中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制藥的LD50為185.6115mg/k