疏肝補(bǔ)腎祛痰法對(duì)PCOS大鼠卵巢TGF-β1-smad及ECM相關(guān)因子表達(dá)的影響

疏肝補(bǔ)腎祛痰法對(duì)PCOS大鼠卵巢TGF-β1-smad及ECM相關(guān)因子表達(dá)的影響

摘要：多囊卵巢綜合征（PCOS）是一種常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病，其具有卵巢多囊，雄激素增多以及月經(jīng)紊亂的特征。本研究旨在探討疏肝補(bǔ)腎祛痰法對(duì)PCOS大鼠卵巢轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）/smad及細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）相關(guān)因子表達(dá)的影響。

方法：將50只健康雌性大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。其中，空白對(duì)照組（NC組）只接受生理鹽水，模型組（模組）接受DHEA注射，并給予高脂飼料。疏肝補(bǔ)腎祛痰法組（GKP組）在模型組的基礎(chǔ)上給予GKP治療，甲基蒼耳子天麻苦參湯。地塞米松治療組（DEX組）接受地塞米松治療，陽(yáng)性對(duì)照組（PC組）接受丹參酮治療。治療持續(xù)4周。檢測(cè)各組大鼠體重，卵巢指數(shù)（ovarianindex，OI）以及血清中睪酮、泌乳素、參與TGF-β1及ECM調(diào)控的相關(guān)因子水平。

結(jié)果：與NC組相比，模組大鼠的體重明顯增加，OI顯著增高，血清中雄激素和泌乳素水平升高，而疏肝補(bǔ)腎祛痰法能夠減輕這些變化。另外，TGF-β1、smad2和smad3的表達(dá)在模組中均顯著上調(diào)，fibronectin和laminin的表達(dá)也明顯上調(diào)，而在GKP組中這些變化得到了明顯的逆轉(zhuǎn)。地塞米松治療組和陽(yáng)性對(duì)照組也呈現(xiàn)了類(lèi)似的趨勢(shì)。

結(jié)論：疏肝補(bǔ)腎祛痰法能夠有效減輕PCOS大鼠的癥狀，抑制TGF-β1/smad信號(hào)通路及ECM的表達(dá)，從而改善卵巢多囊和雄激素異常等相關(guān)病理過(guò)程。此結(jié)果為疏肝補(bǔ)腎祛痰法在PCOS治療中的應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：多囊卵巢綜合征；疏肝補(bǔ)腎祛痰法；卵巢轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1；細(xì)胞外基質(zhì)；大鼠

引言

多囊卵巢綜合征（PolycysticOvarySyndrome,PCOS）是一種常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病，其主要特征包括卵巢多囊、雄激素增多以及月經(jīng)紊亂等癥狀（1）。目前尚未明確PCOS的病因和發(fā)病機(jī)制，臨床治療主要以緩解癥狀和調(diào)整內(nèi)分泌平衡為主，但長(zhǎng)期使用西藥可能帶來(lái)一些不適和副作用（2）。因此，探索有效的中藥治療方法成為了研究的熱點(diǎn)。

疏肝補(bǔ)腎祛痰法是傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中應(yīng)用于治療疾病的一種方法，其主要通過(guò)平衡肝腎功能，消除痰濕等方法來(lái)緩解病癥（3）。前期研究表明，疏肝補(bǔ)腎祛痰法在改善PCOS患者的生育能力方面具有一定的療效（4）。然而，對(duì)于疏肝補(bǔ)腎祛痰法在PCOS發(fā)病機(jī)制方面的作用仍不明確。

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TransformingGrowthFactor-β1,TGF-β1）是一種重要的生長(zhǎng)因子，參與了細(xì)胞的增殖、分化及膠原合成等過(guò)程（5）。卵巢組織中的TGF-β1及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路smad已經(jīng)被證明與PCOS的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)（6）。與此同時(shí)，細(xì)胞外基質(zhì)（ExtracellularMatrix,ECM）在卵巢多囊的形成和發(fā)展過(guò)程中也起到了重要的作用（7）。然而，關(guān)于疏肝補(bǔ)腎祛痰法對(duì)PCOS大鼠卵巢TGF-β1/smad及ECM相關(guān)因子表達(dá)的調(diào)控作用的研究還不多見(jiàn)。

本研究旨在探討疏肝補(bǔ)腎祛痰法對(duì)PCOS大鼠卵巢TGF-β1/smad及ECM相關(guān)因子表達(dá)的影響，以明確其在PCOS治療中的效果及機(jī)制。通過(guò)對(duì)PCOS大鼠模型的建立以及疏肝補(bǔ)腎祛痰法的干預(yù)，檢測(cè)大鼠體重、卵巢指數(shù)以及血清中睪酮、泌乳素等指標(biāo)的變化，并通過(guò)免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法檢測(cè)卵巢TGF-β1/smad及ECM相關(guān)因子的表達(dá)水平。

材料與方法

1.建立PCOS大鼠模型

選取50只健康的雌性大鼠，隨機(jī)分為5組，每組10只。其中，空白對(duì)照組（NC組）只接受生理鹽水，模型組（模組）接受DHEA注射，并給予高脂飼料（8）。疏肝補(bǔ)腎祛痰法組（GKP組）在模型組的基礎(chǔ)上給予GKP治療，甲基蒼耳子天麻苦參湯（9）。地塞米松治療組（DEX組）接受地塞米松治療，陽(yáng)性對(duì)照組（PC組）接受丹參酮治療。治療持續(xù)4周。

2.體重和卵巢指數(shù)的測(cè)定

每周測(cè)量各組大鼠的體重，并在治療結(jié)束后取出卵巢，稱重并計(jì)算卵巢指數(shù)（10）。

3.血清中雄激素、泌乳素水平的檢測(cè)

采集各組大鼠的血樣，離心后收集血清，使用Elisa法檢測(cè)血清中睪酮、泌乳素的水平變化（11）。

4.免疫組化檢測(cè)卵巢TGF-β1、smad2/3、fibronectin和laminin的表達(dá)

取出各組大鼠的卵巢組織，并進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋、切片，使用免疫組化方法檢測(cè)上述蛋白的表達(dá)水平（12）。

5通過(guò)建立PCOS大鼠模型，我們觀察了乳素等指標(biāo)的變化，并通過(guò)免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法檢測(cè)了卵巢TGF-β1/smad及ECM相關(guān)因子的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，在PCOS模型組中，大鼠的體重和卵巢指數(shù)明顯增加。血清中雄激素和泌乳素水平也顯著升高。此外，免疫組化結(jié)果表明，PCOS模型組中卵巢TGF-β1、smad2/3