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ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB44內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標準DB15/T3363—2024綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定方法Thedeterminationofsheeprumenmicrobialreserveglycogen2024-02-232024-02-232024-03-23內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標準化技術委員會(SAM/TC19)歸口。本文件起草單位:內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學院。IIDB15/T3363—2024DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4890mg(Na2HPO4.2H20),溶于90ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.80,定容至100mL。細菌裂解液:TiangenRK160-02細菌裂解液,主要組成為:50mMTris-HCl、1mMPMSF、0.1%TritonX-100、10mg/mL溶菌酶。2mol/LNaOH220g200mLCO2108mL1000mL6儀器和設備綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定方法范圍本文件適用于綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定。(GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法下列術語和定義適用于本文件。下列術語和定義適用于本文件。微生物儲備糖原microbialreservecarbohydrate4測定原理標準葡萄糖溶液比色定量。5試劑及配制蒸餾水,符合GB/T66822g1000mL80C2HCl3O2。乙醚,C4HO。1mg/mL100mg80℃烘至恒重)100mL10.0001g。100mL1000mL250mL0℃~50185nm~900nm。20℃~420℃~40200rpm~15000rpm。0.57分析步驟瘤胃微生物樣品的制備200mL39℃預熱的暖水CO2100mLPBS1:139℃培養(yǎng),45min20410000rpm10PBSrpm離心10min-20貯存糖原提取1mL15min,10000rpm10min,500uL45minuL10000rpm10min2mol/LNaOH200ul1mL2.2mL4℃的60%v/v15000rpm離心15min60v/v1mL糖原含量測定1ml0.5mL1mg/mL1.5mL2mL10mL215620nm8測定結果的計算糖原含量以W表示,數(shù)值以mg/mL計,按公式(1)進行計算:式中:DUDS
WDS
0.512
0.9……………(1)0.5——表示0.5mL葡萄糖標準液中葡萄糖含量;2——表示比色液中標準管稀釋倍數(shù)為樣品管的2倍;1/10——表示由10mL瘤胃
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