農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 播種質(zhì)量 活力測定 編制說明

1《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程播種質(zhì)量活力測定標準編制說明國家標準主要起草人及其所做的工作等根據(jù)《國家標準化管理委員會關(guān)于下達2021年第二批推薦性國家標準計劃及相關(guān)標準外文版計劃的通知》（國標委發(fā)【2021】23號）要求，由全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心主持承擔(dān)《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程品種質(zhì)量活力測定》（項目編號20213530-T-326）的修訂工作。種子活力是種子質(zhì)量的重要指標之一，也是反映種用價值的主要組成部分，與種子田間出苗質(zhì)量密切相關(guān)。種子活力是種子重要的品質(zhì)，高活力種子具有明顯的生長優(yōu)勢和生產(chǎn)潛力，對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有十分重要的意義。具有高活力的種子，可以提高田間出苗率，抵御不良環(huán)境條件，增強對病蟲、雜草的競爭能力，抗寒力強、適于早播，節(jié)約播種費用，增加作物產(chǎn)量，提高種子耐藏性等。種子活力測定必要性表現(xiàn)在：一是活力測定是保證田間出苗率和生產(chǎn)潛力的必要手2段；二是活力測定是種子產(chǎn)業(yè)中必不可少的環(huán)節(jié)；三是活力測定是育種工作者必須采用的方法；四是活力測定是種子生理工作者研究種子劣變生理的必要方法。種子活力的測定經(jīng)過幾十年的研究，已經(jīng)取得了重大進展。在美國和歐洲，活力測定應(yīng)用已經(jīng)很普遍，許多種子公司把活力測定作為常規(guī)的檢測項目。我國現(xiàn)行GB/T3543-1995《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》標準中尚無種子活力測定。借完善修訂《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》之機，增加種子活力測定標準，以保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)用種質(zhì)量安全的需要。（三）主要起草單位及起草人……（四）主要工作過程2021年，標準制定計劃下達后，成立了由種子管理、科研教學(xué)單位資深專家組成的標準起草小組，研究確定了系列標準體例，確立了以引用標準為主，結(jié)合我國行業(yè)實際進行起草的工作主線，并對起草工作進行了詳細分工。2021年-2022年，起草小組查閱了國內(nèi)外同類標準及資料，并進行了整理、收集、分析，最終結(jié)合有關(guān)專家意見的基礎(chǔ)上形成初稿。2023年3-6月，召開了第二次標準討論會。標準起草小組對初稿進行了大討論。參考國際種子檢驗規(guī)程2022版相3關(guān)的技術(shù)內(nèi)容，進行再次修改完善。同時在多家單位進行比較分析，驗證了方法的可行性。2023年7-12月，全國農(nóng)技中心召開了標準制修訂研討會，對初稿里的格式、內(nèi)容、術(shù)語表達方式、修改內(nèi)容方面進行了修改。會后又征求有關(guān)專家意見，根據(jù)專家意見進一步完善了標準文本，形成了標準征求意見稿和編制說明。二、國家標準編制原則和確定國家標準主要內(nèi)容說明本標準按照GB/T1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草，確保文件結(jié)構(gòu)安排和表述規(guī)范。本標準非等效采用《國際種子檢驗規(guī)程第15章：活力采用目前公認的種子質(zhì)量分類方法，將活力測定獨立列為播種質(zhì)量的一部分，保持標準的連續(xù)性、科學(xué)性、實用性和前（二）主要內(nèi)容及論據(jù)1.內(nèi)容框架本標準為GB/T202X《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》第二組第8部分。標準由前言、引言、正文和規(guī)范性附錄構(gòu)成，正文內(nèi)容涵蓋9章，包括范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、測定內(nèi)容、測定程序、結(jié)果計算與表示、結(jié)果填報。以規(guī)范性附錄分別列出伸長胚根測定、電導(dǎo)率測定、加速老化測定、控制劣變測定、四唑活力測定5種測定方法。2.關(guān)于術(shù)語和定義4本標準給出了種子活力和種子活力測定的定義，對可接受發(fā)芽率、出苗、成苗分別定義，更有利于準確理解種子活力的定義。為了準確把握活力測定程序和方法類，將種子活力測定定義為“在本文件規(guī)定條件下評價種子批活力的直接或間接測定程序”。根據(jù)測定程序不同，分別定義了直接測定和間接測定。對不同的測定方法，分別定義了伸長胚根測定、電導(dǎo)率測定、加速老化測定、控制劣變測定、四唑活力3.關(guān)于測定內(nèi)容本標準將測定內(nèi)容作為獨立一章，強調(diào)活力測定重要意義，指出活力不是單一可測定的特性，而是描述種子批表現(xiàn)相關(guān)的多個特性的一個概念，包括種子的出苗能力、種子發(fā)芽和幼苗生長的速率和一致性、貯藏后的種子出苗和發(fā)芽能力的恢復(fù)。概括了針對不同測定要求，選擇不同特性測定的方法。同時，與發(fā)芽試驗比較，闡述活力測定的優(yōu)勢和指導(dǎo)價值。在生產(chǎn)上提供更加豐富的信息：一是更為敏感的種子質(zhì)量指標；二是對可接受種子批次作一致性的排序；三是有關(guān)出苗、貯藏潛力的信息。4.關(guān)于測定程序本標準列出伸長胚根計數(shù)測定、電導(dǎo)率測定、加速老化測定和控制劣變測定等測定方法供選擇，分別屬于幼苗生長測定、生化測定和逆境測定。并規(guī)定了這些方法的測定目的、適用作物種類，以規(guī)范性附錄分別列出各種測定方法的具體附錄C為加速老化測定，附錄D為控制劣變測定，附錄E為四唑活力測定。這些方法已經(jīng)檢驗機構(gòu)比對試驗和種子批比較試驗的確認。不同測定方法所需樣品數(shù)量和重復(fù)不同，為確保樣品代表性，試驗樣品來源必須是凈種子。凈種子可以從凈度分析后的凈種子中隨機數(shù)取，也可以從送驗樣品中直5接隨機數(shù)取。除委托檢驗外，所需種子數(shù)和重復(fù)必須隨機從種子批的有代表性樣品的凈種子部分中數(shù)取。試驗樣品應(yīng)從凈種子部分中隨機分取。（1）伸長胚根測定玉米、小麥、甘藍型油菜、蘿卜種子在發(fā)芽早期，可以通過檢測伸長胚根數(shù)量來反映發(fā)芽速率，伸長胚根數(shù)量越多，種子活力較高；伸長胚根數(shù)量越少，種子活力較低。通過測定不同種子批組織滲透液的電導(dǎo)率，評估植物組織電解質(zhì)的滲漏程度，用以評估種子活力程度。種子批電解質(zhì)滲漏較少（低電導(dǎo)率其種子活力較高；種子批電解質(zhì)滲漏較多（即高電解率其種子活力較低。（3）加速老化測定加速老化測定屬于逆境試驗，將種子短期置于高溫高濕（約95%）條件下，導(dǎo)致其加速老化。高活力種子批能忍受這種逆境條件處理，加速老化后仍能保持較高發(fā)芽率，而低活力種子批劣變較快，發(fā)芽率明顯降低。（4）控制劣變測定控制劣變測定屬于逆境試驗，是預(yù)先將種子水分提高到規(guī)定的統(tǒng)一水平，然后置于高溫下，這樣保證所有樣品接受同樣程度的劣變處理。高活力種子批能忍受這種逆境條件處理，控制劣變后仍能保持較高發(fā)芽率，而低活力種子批劣變較快，會明顯降低發(fā)芽率。四唑活力測定是應(yīng)用2,3,5～三苯基氯化（或溴化）四唑的無色溶液作為一種指示劑，在種子活細胞中，呼吸過程中發(fā)生還原反應(yīng)，產(chǎn)生一種紅色、穩(wěn)定的不擴散物質(zhì)，分析染色的位置、顏色和強度的詳細差異可以區(qū)分紅色有生命6種子部分和不染色死種子部分，從而識別出有活力種子或無活力種子。5.關(guān)于測定條件不同作物的活力測定方法不同，具有專一性，本標準列出了部分作物的活力測定方法，本文件沒有列入的作物種類需經(jīng)方法確認后方可使用?；盍y定需要比標準發(fā)芽試驗更加嚴格的試驗條件控制，每一種方法的試驗條件是規(guī)定的，測定時應(yīng)加以嚴格控制?；盍y定要求具有適宜的儀器并使用對照樣品，同時也與種子檢驗員的經(jīng)驗和技術(shù)培訓(xùn)密切相關(guān)。設(shè)置對照樣品的目的是為活力測定結(jié)果提供一致性的內(nèi)在質(zhì)量控制。對照樣品的結(jié)果差異反映了試驗條件（如溫度、種子水分或其他因素）的微小變異，而會導(dǎo)致明顯影響結(jié)果的可靠性。測定樣品的每一種作物必須有自己的對照樣品，而且達到如下要求：①在檢驗室保持需要經(jīng)常測定的每一作物種的對照樣品；②對照樣品每年必須經(jīng)過發(fā)芽率測定和活力篩選。被選擇的種子批必須沒有物理損傷和病蟲害感染，具有較高的發(fā)芽率和中等的活力。如玉米種子的對照樣品，發(fā)芽率為9095用低溫法測定的活力為70%~80不宜采用太高活力水平的對照樣品，否則很難測定微小差異；③對照樣品的數(shù)量應(yīng)足夠多，能滿足一年或一個生產(chǎn)季節(jié)的種子檢驗測定所需；④對照樣品的原始水分必須達到被檢種的安全貯藏水分，一般為1012并在防濕的容器中貯存；⑤最好將對照樣品分成許多約250粒種子的次級樣品。每一次級樣品須用防濕袋包裝（熱封口在檢測前放在低溫1020℃)下貯存。供整季檢測所需的足夠次級樣品必須包裝。使用的對照樣品須提前拿出，并在室溫下平衡4～6h（注：如果不能按照上述方法處理小的對照樣品，應(yīng)將對照種子批分成較大的次級樣品，放在防濕容器7內(nèi)，測定使用前在210℃低溫下貯存，然后從大的次級樣品中拿出小的次級樣品以供檢測，放在密封容器中，在使用前在室溫下平衡⑥對照樣品的水分在貯藏期間應(yīng)經(jīng)常測定，確信種子水分在貯藏期間沒有降低和升高。如有必要，將種子調(diào)到原始水分10%～12%，因為太干種子可能在測定期間產(chǎn)生機械損傷；⑦必須監(jiān)控對照種子批的每一次活力測定結(jié)果，以核查結(jié)果間的主要變幅。證實已存在的問題，應(yīng)及時馬上糾正，并重新試驗。6.結(jié)果計算和表示不同測定方法的結(jié)果計算和表示不同，本標準規(guī)范性附錄A～E分別針對不同方法給出詳細程序。種子活力測定結(jié)果計算和表示，主要有以下兩種類型：（1）以百分率表示的，比如：伸長胚根測定的伸長胚根數(shù)目百分率，加速老化測定的正常幼苗、不正常幼苗、硬實、新鮮種子、死種子的百分率，控制劣變測定（采用發(fā)芽試驗的）的發(fā)芽種子總數(shù)百分率”和“正常幼苗百分率，四唑活力測定的有活力種子的百分率；（2）以儀器讀數(shù)直接表示的，比如：電導(dǎo)率測定、控制劣變測定（采用電導(dǎo)率測定的）采用電導(dǎo)儀的讀數(shù)。7.結(jié)果填報活力測定結(jié)果應(yīng)報告測定結(jié)果、使用方法和附加說明。不同方法的結(jié)果填報內(nèi)容不同：（1）采用伸長胚根測定方法的測定結(jié)果：采用伸長胚根數(shù)目的百分率（修約至最接近的整數(shù)）。附加說明測定所使用的溫度、伸長胚根計數(shù)時間（單位為h）（2）采用電導(dǎo)率測定方法的測定結(jié)果：采用μScm-1g-1表示（修約至一位小數(shù)）。附加說明測定過程使用特定條件的相關(guān)信息，如浸泡時間和溫度。（3）采用加速老化測定方法的測定結(jié)果：采用正常幼8苗、不正常幼苗、硬實、新鮮種子、死種子的百分率（修約至最接近的整數(shù)）。附加說明測定中使用特定條件的相關(guān)信息，如老化前后種子重量、老化時間和溫度。（4）采用控制劣變測定方法測定的結(jié)果：采用“發(fā)芽種子總數(shù)百分率”和“正常幼苗百分率”表示，結(jié)果修約至最接近的整數(shù)。電導(dǎo)率測定結(jié)果采用μScm-1g-1表示，修約至一位小數(shù)。附加說明控制劣變過程使用特定條件的相關(guān)信息，如劣變時間和溫度，以及電導(dǎo)率測定的浸泡時間和溫度。如測定前提高種子水分，注明增加的種子水分。（5）采用四唑活力測定方法測定結(jié)果：采用有活力種子百分率，修約至最接近的整數(shù)。附加說明測定過程使用特定條件的相關(guān)信息，如2,3,5～三苯基氯化四唑溶液濃度、染色溫度和時間。（三）新舊國家標準對比現(xiàn)行國家標準GB/T3543.7-1995《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》未涉及種子活力測定具體內(nèi)容。隨著種子單粒播種方式的發(fā)展，種子活力已作為種子產(chǎn)業(yè)質(zhì)量控制的主要指標之一?；盍Φ臏y定經(jīng)過幾十年的研究，已經(jīng)取得了重大進展。在美國和歐洲，活力測定應(yīng)用已經(jīng)很普遍，許多種子公司把活力測定作為常規(guī)的檢測項目。本標準參考國際種子檢驗協(xié)會（InternationalSeedTestingAssociation，ISTA）發(fā)布起草，一致性程度為非等效。列為新修訂的GB/T202X《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》第8部分。該部分共設(shè)8章，規(guī)定了測定內(nèi)容、測定程序、方法選擇、結(jié)果計算與表示和結(jié)果填報內(nèi)容，并以規(guī)范性附錄（附錄A-E）列出5種測定方法：伸長胚根測定、電導(dǎo)率測定、加速老化測定、控制劣變測定、四唑活力測定。9三、預(yù)期的經(jīng)濟效果標準修訂以來，在標準各參加單位的共同努力下，標準修訂小組進行了廣泛的調(diào)研和試驗驗證，收集了各類作物種子的大量檢測數(shù)據(jù)。由于調(diào)查和檢測數(shù)據(jù)來源樣本量大，代表性強，涉及面廣，可以說較為全面地反映了活力測定方法上存在的問題，解決了檢測程序及判定上的困惑。種子活力測定是保證田間出苗率和生產(chǎn)潛力的必要手段。種子生產(chǎn)者和種子使用者，越來越感到種子活力對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要性。在播種之前，他們不僅要了解種子發(fā)芽力，而且更關(guān)心田間出苗率。本標準的頒布實施，必將規(guī)范種子活力測定技術(shù)程序，提高種子活力測定的準確性，真實反映種子的播種質(zhì)量、種子田間出苗質(zhì)量和種用價值。種子企業(yè)通過活力控制，及時改善種子加工、處理條件，保持和提高種子活力。指導(dǎo)育種工作者開展抗寒、抗病、抗逆、早熟、豐產(chǎn)等新品種選育，促進種子劣變機理及改善和提高活力方法研究?；盍y定標準的推廣運用，將政府、種子企業(yè)、用種農(nóng)民等社會各方提供規(guī)范的檢測程序和準確檢測結(jié)果，對推動種業(yè)高質(zhì)量發(fā)展、保護農(nóng)民利益、維護社會穩(wěn)定等方面發(fā)揮重要的作用，產(chǎn)生巨大的社會經(jīng)濟效益。國外樣品、樣機的有關(guān)數(shù)據(jù)對比情況本標準結(jié)合和參考了國際種子檢驗協(xié)會發(fā)布的參考國際種子檢驗協(xié)會（InternationalSeedTestingAssociation，ISTA）發(fā)布的《國際種子檢驗規(guī)程第15章：五、以國際標準為基礎(chǔ)的起草情況，以及是否合規(guī)引用或者采用國際國外標準，并說明未采用國際標準的原因；本標準參考國際種子檢驗協(xié)會（InternationalSeed15章：活力測定》（20