藥物安全性評價和GLP實驗室培訓課件

藥物安全性評價和GLP實驗室年份藥物（用途）毒性反應受害地區(qū)受害人數(shù)1889~1950甘汞（驅(qū)蟲、牙粉、通便）汞中毒歐、美、亞死亡兒童>585人1900~1949蛋白銀（抗炎、消毒）銀質(zhì)沉著癥歐、美>100人1930~1960醋酸鉈（頭癬）鉈中毒各國死亡>10000人1922~1970氨基比林（解熱鎮(zhèn)痛）粒細胞缺乏各國死亡>2082人1940硫代硫酸鈉金（風濕、哮喘）肝、腎、骨髓損害各國約1/3用藥者1935~1937二硝基酚（減肥）白內(nèi)障歐、美萬人失明，1人死亡1937磺胺酏，二甘醇作溶劑（抗菌消炎）肝腎損害美國358人中毒，107人死亡1953非那西?。ń鉄徭?zhèn)痛）腎損害、溶血歐、美、加死亡500人，腎病2000人以上1954二磺二乙基錫（治疥瘡、粉刺耳）神經(jīng)毒性、腦炎、失明法國死亡110人，中毒270人1956三苯乙醇（治高脂血癥）白內(nèi)障、陽痿、脫發(fā)美國>1000人1959~1961反應停（治妊娠反應）海豹樣畸形兒歐、美、日>10000人，死亡5000人1960異丙腎上腺素氣霧劑（平喘）嚴重心律失常、心衰英、美、澳死亡3500人1963~1972氯碘喹啉（治腸炎）骨髓病變、失明日本中毒>7856人，死亡率5%1933~1972已烯雌酚（治先兆流產(chǎn)）陰道腺癌（女）美國>300人1968~1979普拉洛爾（抗心律失常）角膜、心包、腹膜損害美國>2257萬人70年代至世紀末四咪唑(TMS)驅(qū)蟲藥遲發(fā)性腦病各國60年代到世紀末氨基糖苷類抗生素（抗感染）耳聾各國我國>100萬人耳聾2004關節(jié)炎鎮(zhèn)痛藥“萬絡”心肌梗塞和心臟猝死各國>6萬人20-21世紀重大藥害事件簡表2藥物安全性評價和GLP實驗室藥物非臨床安全性評價產(chǎn)生的背景國際經(jīng)濟合作與發(fā)展組織（OECD）提出了新化學物上市前的最低限度的安全性評價項目制定了一系列的毒性實驗準則凡按此實驗準則進行的毒理學實驗，成員國間相互承認和接受藥物安全性評價和GLP實驗室3第1節(jié)藥物非臨床安全性評價藥物非臨床安全性評價指在人臨床實驗之前的毒理學實驗研究，即按照規(guī)定的毒理學程序和方法評價藥物對機體產(chǎn)生的有害反應，并外推到通常條件下應用藥物對人體和人群的健康是否安全。研究內(nèi)容：評價藥物的毒性反應判斷劑量和時間與毒性的關系：最小中毒量、最小致死量、毒性反應的起始和持續(xù)時間確定藥物毒性的靶器官、中毒機制、毒性反應的性質(zhì)與可逆性、毒性劑量與安全范圍4藥物安全性評價和GLP實驗室藥物非臨床安全性評價的目的1.提供藥物安全性的實驗數(shù)據(jù)，支持I期臨床研究。2.確定臨床實驗的安全性起始劑量，以及可接受的安全劑量范圍。3.通過廣泛檢測，發(fā)現(xiàn)任何潛在和未知的毒性。4.在藥物開發(fā)中獲得最大的利益/風險性比率。藥物安全性評價和GLP實驗室5藥物非臨床安全性評價的局限性1.人與動物的種屬差異，反應的敏感性不同，甚至有質(zhì)的差異→假陽性、假陰性；如，沙利度胺。2.毒理學實驗給藥劑量較大，存在高濃度向低濃度外推的不確定性。3.實驗動物數(shù)量有限，對發(fā)生率較低的毒性難于發(fā)現(xiàn)→小數(shù)量動物向大規(guī)模人群外推的不確定性。4.實驗動物遺傳背景、身體狀況一致，而臨床用藥的人群個體差異較大。藥物安全性評價和GLP實驗室6

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致癌性遺傳毒性

生殖毒性

局部耐受性、過敏、依賴性、免疫毒性光敏和其它試驗等

了解毒性反應劑量、時間、強度、癥狀、靶器官及可逆性等，為臨床方案提供參考、預測出現(xiàn)的毒性反應，制訂臨床防護措施、保證受試者用藥安全

局部用藥毒性全身用藥毒性急性毒性長期毒性特殊毒性目的

藥物毒理學7藥物安全性評價和GLP實驗室第2節(jié)藥物安全性評價GLP實驗室非臨床安全性研究質(zhì)量管理規(guī)范（goodlaboratorypracticefornonclinicallaboratorystudies,GLP）GLP法規(guī)的頒布1999年10月，SDA頒布了《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（試行）》。2003年6月，SFDA局長2號令《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》藥物安全性評價和GLP實驗室8GLP的適用范圍各國的GLP適用的范圍不盡相同美國FDA——色素和食品添加劑、飼料添加劑、人用藥品、獸用藥品、生物制品、人用醫(yī)療器具、電子產(chǎn)品等經(jīng)濟合作與發(fā)展組織OECD——化學制品如工業(yè)化學品、人用藥品、獸用藥品、化妝品、食品添加劑及農(nóng)藥等中國SFDA——藥品9藥物安全性評價和GLP實驗室GLP已成為國際上藥物安全性試驗研究共同遵循的規(guī)范世界各國的GLP雖然各有特點，但是基本原則是一致的提高藥品非臨床研究的質(zhì)量確保試驗數(shù)據(jù)的真實性、完整性和可靠性最大限度地避免人為因素產(chǎn)生的錯誤和誤差，盡可能在試驗早期發(fā)現(xiàn)并修正保證臨床用藥安全實施GLP的目的10藥物安全性評價和GLP實驗室GLP的基本精神

GLP的基本精神在于：“怎樣減少人為的誤差，以得到可信性高的實驗數(shù)據(jù)”。降低系統(tǒng)誤差避免偶然誤差杜絕過失誤差實驗條件實驗系統(tǒng)實驗人員實驗操作實驗資料標準化規(guī)范化實驗數(shù)據(jù)和結(jié)果的質(zhì)量11藥物安全性評價和GLP實驗室藥物GLP認證試驗項目單次和多次給藥毒性試驗(嚙齒類)單次和多次給藥毒性試驗(非嚙齒類)生殖毒性試驗(I段、II段、III段)遺傳毒性試驗(Ames、微核、染色體畸變、小鼠淋巴瘤試驗)致癌試驗局部毒性試驗免疫原性試驗安全性藥理依賴性試驗毒代動力學試驗

12藥物安全性評價和GLP實驗室藥物GLP認證檢查主要內(nèi)容組織機構(gòu)和人員實驗設施與管理儀器設備和實驗材料標準操作規(guī)程研究工作的實施資料檔案其它(實驗技術現(xiàn)場考核、計算機系統(tǒng))申請試驗項目13藥物安全性評價和GLP實驗室二、組織機構(gòu)的設置與職責三、機構(gòu)人員構(gòu)成情況、人員基本情況以及參加培訓情況14一、機構(gòu)概要機構(gòu)發(fā)展概況組織機構(gòu)框架圖實驗設施平面圖GLP實驗室申請的資料審查內(nèi)容14藥物安全性評價和GLP實驗室GLP實驗室申請的資料審查內(nèi)容（續(xù)）15四、機構(gòu)主要人員情況機構(gòu)負責人質(zhì)量保證部門負責人專題負責人動物飼養(yǎng)管理負責人組織病理學檢查部門負責人資料保管負責人供試品管理負責人其他負責人15藥物安全性評價和GLP實驗室五、動物飼養(yǎng)區(qū)域及動物試驗區(qū)域情況動物設施面積和動物收容能力情況各動物飼養(yǎng)區(qū)的平面圖動物飼養(yǎng)區(qū)人流、動物流、物品流、污物流、空氣流等流向圖環(huán)境條件飼料、飲水、墊料等動物用品的來源與檢測功能實驗室、化學及生物污染特殊區(qū)域的環(huán)境控制狀況清潔劑、消毒劑、殺蟲劑使用情況實驗動物的來源、質(zhì)量合格證明和檢疫情況16GLP實驗室申請的資料審查內(nèi)容（續(xù)）16藥物安全性評價和GLP實驗室資料審查的內(nèi)容（續(xù)）六、儀器、儀表、量具、衡器等七、機構(gòu)主要儀器設備八、SOP（制訂、修改及廢棄）九、計算機系統(tǒng)運行和管理情況十、藥物安全性評價研究實施情況1717藥物安全性評價和GLP實驗室GLP實驗流程制定實驗方案。由項目負責人根據(jù)藥物特點、藥物安全性實驗指導原則和GLP實施規(guī)定制定將實驗方案遞呈質(zhì)量保證部門審查，同時檢查以往的SOP是否適應于該項實驗。實驗進行中各業(yè)務部門實驗工作記錄、執(zhí)行實驗方案和SOP實施情況。藥物安全性評價和GLP實驗室18GLP實驗流程（續(xù)）總結(jié)報告：收集實驗記錄、對資料和數(shù)據(jù)進行處理，計算統(tǒng)計學及生物學意義；歸納藥物毒性的主要靶器官，及臨床上可能出現(xiàn)的毒性反應。資料存檔：將實驗方案、各個環(huán)節(jié)的原始記錄、各種標本及總結(jié)報告保存于檔案部門。藥物安全性評價和GLP實驗室19軟件要求1.建立完善的組織管理體系2.高素質(zhì)的工作人員隊伍3.對各項工作必須采用的標準操作規(guī)程（SOP）4.對實驗的全過程要求詳細的進行記錄5.對數(shù)據(jù)管理與統(tǒng)計分析要求6.組織嚴密的實驗全過程的監(jiān)督、檢查和審查藥物安全性評價和GLP實驗室20硬件要求1.對實驗環(huán)境中各種設施的構(gòu)造、寬廣度、配置等有嚴格要求2.對實驗數(shù)據(jù)的收集、測定或分析等使用的儀器設備以及控制設備內(nèi)環(huán)境有嚴格要求藥物安全性評價和GLP實驗室21

GLP的基本內(nèi)容和要求

(一).研究課題的組織與管理(二).對實驗設施和儀器設備的規(guī)定與要求(三).標準操作程序(SOP)的制定和執(zhí)行(四).實驗設計方案(Protocol)及其主要內(nèi)容(五).研究資料的收集、整理和報告

藥物安全性評價和GLP實驗室22

（一）研究課題的組織和管理

1．業(yè)務／行政主管及其職責任命,指定和更換課題組長確保質(zhì)量保證單位履行職能提供人力，物力，財力等方面的保證確認各種錯誤或過失得以糾正對研究人員和質(zhì)保單位之間的爭議作出裁決藥物安全性評價和GLP實驗室232．課題組長及其職責-設計簽署實驗方案及其它正式文件并且注明日期。-保證所有實驗資料，包括意料之外的試驗反應，都被準確地記錄并核實。-當實驗過程中某些可能影響研究質(zhì)量和結(jié)果一致性性的未預料到的情況發(fā)生時，及時采取措施（行動）補救，并且立即如實記錄。-確保GLP的各項規(guī)定都遵守執(zhí)行。保證所有的原始資料、文件、實驗設計、標本及正式實驗報告按檔案材料保存和管理。 簽署正式研究報告，按照國家法規(guī)規(guī)定簽署遵守聲明（ComplianceStatement）。24藥物安全性評價和GLP實驗室3．質(zhì)量保證單位及其職責

保存實驗機構(gòu)的MasterSchedule，Protocols和SOPs（各1份）。研究進行期間對研究課題多次監(jiān)察，以確保研究的一致性。記錄和簽署每次監(jiān)察的結(jié)重要問題和發(fā)現(xiàn)立即口頭知會課題長或提交書面報告，陳述所發(fā)現(xiàn)的問題以及采取的相應措施審定無未經(jīng)批準或記錄的偏離Protocol和SOP的情況發(fā)生或出現(xiàn)審校正式實驗報告，確保報告中對研究方法SOP的描述準確無誤，實驗結(jié)果確實是原始資料整理分析的結(jié)果擬寫和簽署附在正式報告的質(zhì)量保證聲明25藥物安全性評價和GLP實驗室（二）實驗設施和儀器設備的規(guī)定要求

1.實驗設施實驗機構(gòu)具備足夠的實驗動物房間或者其他試驗系統(tǒng)區(qū)域，以使（1）不同種屬的動物或試驗系統(tǒng)分別飼育（2）不同的課題分離飼育（3）Quarantine動物（4）建立常規(guī)或特別的動物飼育系統(tǒng)。實驗機構(gòu)應有足夠的動物房間或其他試驗系統(tǒng)區(qū)域，以分別隔離那些用已知有生物危害的試驗系統(tǒng)、受試物、對照物或參照物，包括易揮發(fā)物質(zhì)、氣溶膠、放射活性材料以及感染性（傳染性）微生物。隔離的房間或區(qū)域應有診斷、處理和控制試驗系統(tǒng)／動物疾病的裝置。應有效地隔離有疾病、疑有疾病、或疾病攜帶的試驗系統(tǒng)／動物的房間或區(qū)域。

26藥物安全性評價和GLP實驗室1.實驗設施（續(xù))實驗設施應有和排放污染的水、土壤或其它材料的能力。如存養(yǎng)動物,則應有收集和處理所有動物廢物和排泄物的能力，或者具有安全消毒的裝置。實驗設施應按實驗設計方案要求，具備調(diào)控環(huán)境條件如溫度、溫度、光線等能力。藥物安全性評價和GLP實驗室272.儀器設備關鍵儀器設備(criticalequipment)常規(guī)儀器設備安全設施與設備儀器設備的認證。計量審計及日常維修保養(yǎng)28藥物安全性評價和GLP實驗室

（三）SOP的制定和執(zhí)行

1.種類和制定過程標準操作程序（StandardOperatingProcedure,SOP）

凡是實驗設計方案中沒有詳細說明的常規(guī)方法和操作程序，都應該制SOP。GLP明確規(guī)定，至少需要就以下具體方法和操作步驟制定標準操作程序:

1.試驗系統(tǒng)／動物的準備 2.試驗系統(tǒng)／動物的飼養(yǎng)管理 3.受試物、對照物和參照物的接收、鑒別、貯放、配制，以及采樣方法； 4.對試驗系統(tǒng)的觀察; 5.（試）驗和測試（定）方法29藥物安全性評價和GLP實驗室1.種類和制定過程(續(xù))6.

垂（頻）死中死亡試驗系統(tǒng)／動物處理；7.試驗系統(tǒng)的尸檢或者尸解；8.標本的收集采取與標記；9.組織病理學檢查；10.文件資料的處理、存放和檢索；11.儀器設備的校正（準）和保養(yǎng)；12.試驗系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移（運）、取（替）代和鑒別方法。

30藥物安全性評價和GLP實驗室

2.SOP的格式和內(nèi)容

－每一種標準操作程序都必須有各自的編號（碼），并且署明部門、版本和副本數(shù)目；－標準操作程序的名稱（題目）和生效日期；－審批者和共（會）簽者包括質(zhì)量保證部門負責人的簽字及簽署日期；－該標準操作程序的目的，涵蓋范圍,以及文中所用術語的定義；－材料，操作程序和過程;－轉(zhuǎn)換和計算方法；－報告要求，并將文中“材料”部分和報告的格式（常用表格式）作為標準操作程序之附件；－分發(fā)和保存的規(guī)定與要求；31藥物安全性評價和GLP實驗室2.SOP的格式和內(nèi)容(續(xù))－負責此標準操作程序的有效性，并且監(jiān)督其遵守執(zhí)行的人員；－該標準操作程序的復審和修訂計劃；－意外事件的補救對策略；－保密要求；－參考文獻和附件，包括各種表格。32藥物安全性評價和GLP實驗室（四）實驗設計方案及其主要內(nèi)容

實驗設計方案(Protocol)的主要內(nèi)容應該包括:

－課題名稱和研究目的； －受試物、對照物和參照物的名稱、化學文摘號（CAS）,或者其它代碼； －實驗委托者（保證者）和實（試）驗實施機構(gòu)的名稱和詳細地址： －實驗起始和終止完成日期； －實驗動物/試驗系統(tǒng)的選擇及其理由； －盡可能地寫明試驗系統(tǒng)的種屬（系）、年齡、性別，以及試驗系統(tǒng)的來源；

33藥物安全性評價和GLP實驗室（四）實驗設計方案及其主要內(nèi)容(續(xù))－試驗系統(tǒng)的鑒別方法和鑒別程序；－描述具體實驗設計，包括控制偏倚方法；－說明實驗期間所用飲料，溶劑、以及用以助溶或混懸的其它材料。對于飲料中可能出現(xiàn)的污染物，要詳細說明這些污染物的特性，可能影實驗結(jié)果的含量（濃度），以及實驗過程中可以容許的含量（濃度）；－染毒途徑及其選擇理由；－染毒劑量/濃度單位。受試物、對照物和參照物的給予方式和次數(shù)；34藥物安全性評價和GLP實驗室（四）實驗設計方案及其主要內(nèi)容(continue) －試驗、分析和測定（量）的方法和次數(shù)；－需要保存的記錄和資料；－委托者（保證者）和課題組長的準備簽署日期；－對研究中所用的統(tǒng)計處理方法加以說明。35藥物安全性評價和GLP實驗室（五）研究資料的收集、整理和報告

文字記錄(包括表格)1原始記錄應該用不裉色筆（最好是用黑色）及時記錄,字跡應清晰易認。2寫明觀察日期和記錄日期（最好為同一天），實驗觀察者須在每頁上簽字。3不得用各種涂改液。4不準涂改重描（Re--Writes），應重寫。5允許改錯，但只能用單線斜線在需改正處，并且簽名、署日期，說明改正的原因或理由（常用代碼示之）。6必須用裝訂成冊的實驗記錄本。7原則上不得有空白頁。所有空頁（處）要斜劃注明“空白”，或者在最后一頁加以特別說明。

36藥物安全性評價和GLP實驗室（五）研究資料的收集、整理和報告(續(xù)) 8.如某部分原如資料與多項課題有關，可以復?。ㄖ疲└北尽５糠莞北揪氉⒚鳌霸瓨痈北尽保ㄒ话闵w章），由復?。ㄖ疲┤撕灻褪鹑掌诓⑶艺f明原件在何處存放。自動收集的原始資料 1自動記錄的各種資料，應逐個記記錄日期、時間和儀器操作人。 2如需改動，同樣不準原記錄上“涂改”（Obscure）。要注明改動理由、改動人并署明改動日期。

37藥物安全性評價和GLP實驗室（六）正式實驗報告的基本內(nèi)容和要求

正式實驗報告（FinalReport）。原則上應有以下項目和內(nèi)容：

1、實驗實施機構(gòu)的名稱和地址：實（試）驗的起如日期、完成日期或者終（停）止日期。2、設計方案中確定的研究目的和程序以及研究過程中設計方案的任何修改和變更。3、用于分析實驗數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計方法（必須與設計方案的相應部分一致）。4、受試物、對照物和參照物的名稱，化學文摘號或其它編碼。這些物質(zhì)的強度、純度、組成及其它理化特性，以及它們在實驗條件下的穩(wěn)定性和溶解度。

38藥物安全性評價和GLP實驗室（六）正式實驗報告的基本內(nèi)容和要求(續(xù))5、描述說明實（試）驗方法、、試驗系統(tǒng)和染毒劑量。對于試驗系統(tǒng)的描述應包括動物數(shù)目、性別、體重范圍、種屬（系）、年齡和來源，以及標記和鑒別動物的方法等；染毒劑量應同時說明劑量、給毒次數(shù)和間隔時間，染毒途徑和持續(xù)時間等。6、描述和說明所有可能影響數(shù)據(jù)資料的質(zhì)量和一致性的環(huán)境條件因素。7、課題組長、業(yè)務主管和所有參加課題的專業(yè)人員的姓名。8、數(shù)據(jù)資料的轉(zhuǎn)換、計算及統(tǒng)計處理。資料的分析與總結(jié)，以及由資料分析而得出的結(jié)論。39藥物安全性評價和GLP實驗室（七）研究資料的保管、存貯和檢索

1.指定檔案保管人，并且在組織機構(gòu)圖上反映出來。 2.確定檔案材料的設施、區(qū)域、或者機構(gòu)。 3.明確有權(quán)進出檔案材料保管區(qū)域的人員，限制其他人進出該區(qū)域。 4.建立來該登記制度，借閱檔案材料要嚴格登記。 5.建立便于檢索的索引系統(tǒng)。 6.分類管理各類檔案材料，嚴格執(zhí)行保存其限的規(guī)定。 7.保管區(qū)域的環(huán)境條件要適宜于檔案材料的長期保存，應有防/火設備和防蟲蛀措施，以及緊急情況下的轉(zhuǎn)移疏散方案。

41藥物安全性評價和GLP實驗室（七）研究資料的保管、存貯和檢索(續(xù))EPA(FIFRA)-規(guī)定從以下三條中選擇最長時間為保存期限：1、用于向報審產(chǎn)品研究或上市的研究檔案，在所有的相關研究全部結(jié)束之前，都應妥善保管；2、報審自向正式遞交報審之日起，至少保存五年；3、如該項研究未用于報審，則從研究結(jié)束或終止之日起至少存二年。EPA(TSCA)-1、除濕（鮮）標本外，自最后試驗規(guī)則有效起，至少保存10年；2、商討方案“(NegotiatedTestAgreement)”自該方法案公布之日起，至少保存10年; 3.其它研究檔案材料，從向政府管理部門遞交正式研究結(jié)果之日算，至少保存5年。

42藥物安全性評價和GLP實驗室（七）研究資料的保管、存貯和檢索(續(xù))FDA（非臨床研究）－規(guī)定從以下三條中擇最短時間為規(guī)范保存期限：1、用來支持或補充已經(jīng)批準研究和上市產(chǎn)品的檔案材料，自批準之日起，最少保存2年；2、研究的檔案材料，自遞交正式申請之日起，最少保存5年；3、未能作為報審材料的檔案，在實（試）驗結(jié)束或終止后，再保存5年以上。43藥物安全性評價和GLP實驗室實驗設計的目的

1.有目的、有計劃、有步驟地進行實驗。

2.最大限度地減少實驗誤差。

3.節(jié)省時間、樣本、經(jīng)費開支，減少人力物力財力，獲得較高的效率。第3節(jié)實驗設計的隨機、對照、重復原則“預事則立，不預則廢”44藥物安全性評價和GLP實驗室試驗設計的原則對照的原則：

-意義：消除系統(tǒng)誤差，鑒別處理和非處理因素的差異

-類型：空白對照、陽性對照、陰性對照、自身對照隨機的原則：

-對照組和處理組除處理因素不同外，其余應全部相同。

-動物實驗隨機分組；觀察切片也應隨機選擇視野重復的原則：

-隨機原則可排除大部分非處理因素的影響，但不能全部消除；因此，有必要重復，以排除偶然因素的影響。

-表現(xiàn)為一定的試驗樣本數(shù)（人、動物、細胞株）45藥物安全性評價和GLP實驗室對照(control)的原