食源性疾病主動監(jiān)測生物樣本介紹

關(guān)于食源性疾病主動監(jiān)測生物樣本介紹主要內(nèi)容一、概述-為什么做？檢什么菌？采什么標(biāo)本？如何鑒定？如何報送菌株？（網(wǎng)報另講）二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌三、實驗室檢測技術(shù)-致瀉大腸埃希氏菌四、實驗室檢測技術(shù)-副溶血性弧菌以上菌株鑒定均安排了實驗室演示課第2頁,共42頁，2024年2月25日，星期天1、疑似食源性異常病例/異常健康事件監(jiān)測2、食源性疾病主動監(jiān)測3、食源性疾病（包括食物中毒）報告監(jiān)測食源性疾病監(jiān)測內(nèi)容第3頁,共42頁，2024年2月25日，星期天2013年我省食源性疾病監(jiān)測食源性疾病主動監(jiān)測2012年8家醫(yī)院和4家疾控機(jī)構(gòu)2013年11家醫(yī)院和11家疾控機(jī)構(gòu)

第4頁,共42頁，2024年2月25日，星期天2013年食源性疾病主動監(jiān)測單位第5頁,共42頁，2024年2月25日，星期天實驗室檢測(一)目的為食源性疾病診斷提供病原學(xué)確證，通過對病原體進(jìn)行深入的分析，從病原學(xué)上提供病因相關(guān)性的實際證據(jù)，結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，分析污染食品的來源、證實污染食品在暴發(fā)流行中的作用。建立我國食源性致病菌分子分型溯源數(shù)據(jù)庫，提高早期發(fā)現(xiàn)食源性疾病暴發(fā)的能力；同時，對食源性致病菌分離株開展藥敏試驗，為食源性疾病治療、預(yù)防和控制措施提供指導(dǎo)。第6頁,共42頁，2024年2月25日，星期天實驗室檢測(二)檢測項目（檢哪幾種病菌？）對標(biāo)本進(jìn)行可疑食源性致病菌菌株（沙門氏菌、致瀉大腸埃希氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌）實驗室檢測分離，向“國家食源性疾病主動監(jiān)測網(wǎng)”報送數(shù)據(jù)、信息，省疾控審核認(rèn)可后上報。原則上每家主動監(jiān)測點醫(yī)院每周提供不少于10份病歷信息和標(biāo)本，全年提供不少于500份。第7頁,共42頁，2024年2月25日，星期天實驗室檢測(三)標(biāo)本采集（如何采樣？）監(jiān)測病例為以腹瀉癥狀為主訴（吃了食品引起的）就診的門診和住院病例，每日排便3次或3次以上，且糞便性狀異常（稀便、水樣便、粘液便或膿血便等）。病人排出新鮮糞便于無菌容器內(nèi)，用2支無菌棉拭子多點采集糞便樣本（如有膿血或黏液應(yīng)挑取膿血、黏液部分，液體糞便應(yīng)取絮狀物，使棉拭子表面蘸滿糞便），插入Cary－Blair運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)。第8頁,共42頁，2024年2月25日，星期天實驗室檢測(三)標(biāo)本收集標(biāo)本包括新鮮的或轉(zhuǎn)移至Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基的糞便或肛拭子。最優(yōu)標(biāo)本是轉(zhuǎn)移至Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基的糞便拭子。肛拭子不是最佳標(biāo)本，僅在病人無糞便標(biāo)本時采用。肛拭子收集后應(yīng)當(dāng)目測，需要在拭子上明顯見到糞便。所采集的標(biāo)本盡快檢驗，放入Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基中的標(biāo)本應(yīng)在冷藏條件下24h內(nèi)送檢。新鮮的糞便標(biāo)本置于清潔、干燥、無肥皂或消毒液殘留的容器中，冷藏條件下8h內(nèi)送檢。

第9頁,共42頁，2024年2月25日，星期天糞便樣本的保存、運(yùn)送和檢測培養(yǎng)條件mEC:新生霉素增菌肉湯SBG磺胺增菌液MAC麥康凱瓊脂平板木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD)致病性大腸桿菌(EPEC)腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)腸出血性大腸桿菌(EHEC)腸黏附性大腸桿菌(EAEC)硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基TCBS第10頁,共42頁，2024年2月25日，星期天四、檢驗程序（如何鑒定？）第11頁,共42頁，2024年2月25日，星期天五、結(jié)果與報告（如何報？）

當(dāng)檢出的可疑菌落生化性狀符合致病菌主要生化特征，結(jié)合血清學(xué)和毒力基因鑒定結(jié)果，報告糞便標(biāo)本中是否檢出所規(guī)定的致病菌。通過“國家食源性疾病主動監(jiān)測網(wǎng)”報送數(shù)據(jù)、信息，省疾控審核認(rèn)可后上報。第12頁,共42頁，2024年2月25日，星期天

六菌株的保存和上送（如何送？）

培養(yǎng)物穿刺接種3%氯化鈉半固體培養(yǎng)基，輕擰管蓋，36℃±1℃培養(yǎng)24h，蓋緊管蓋。也可以在動力試驗培養(yǎng)基24h培養(yǎng)物上加入一層滅菌礦物油。（副溶弧菌室溫貯存培養(yǎng)物，不要冷藏。）

如果需要長期保存菌株，將0.7mL3%氯化鈉腦心浸液肉湯6h～12h培養(yǎng)物和0.3mL滅菌甘油加入滅菌菌種管，立即放置-70℃保存。按照方案要求定期上送。

第13頁,共42頁，2024年2月25日，星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第14頁,共42頁，2024年2月25日，星期天SBG磺胺增菌液MAC麥康凱瓊脂平板木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）動力-靛基質(zhì)-鳥氨酸瓊脂（MIO）第15頁,共42頁，2024年2月25日，星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第16頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第17頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第18頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共42頁，2024年2月25日，星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第20頁,共42頁，2024年2月25日，星期天三、實驗室檢測技術(shù)-致瀉大腸埃希氏菌第21頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第22頁,共42頁，2024年2月25日，星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第23頁,共42頁，2024年2月25日，星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第24頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第25頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第26頁,共42頁，2024年2月25日，星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第27頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第28頁,共42頁，2024年2月25日，星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第29頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第30頁,共42頁，2024年2月25日，星期天三、實驗室檢測技術(shù)-副溶血性弧菌第31頁,共42頁，2024年2月25日，星期天硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基TCBS第32頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第33頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第34頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第35頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第36頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第37頁,共42頁，2024年2月25日，星期天第38