免疫學(xué)檢測技術(shù)的基本原理-免疫學(xué)課件

免疫學(xué)檢測技術(shù)的基本原理-免疫學(xué)課件CATALOGUE目錄免疫學(xué)概述免疫學(xué)檢測技術(shù)基礎(chǔ)抗原抗體反應(yīng)檢測技術(shù)免疫標(biāo)記檢測技術(shù)細(xì)胞免疫檢測技術(shù)免疫學(xué)檢測技術(shù)在臨床中的應(yīng)用01免疫學(xué)概述研究生物體對抗原的免疫應(yīng)答以及免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的科學(xué)。免疫學(xué)定義包括抗原、抗體、免疫細(xì)胞、免疫器官、免疫分子等。研究對象免疫學(xué)定義與研究對象免疫系統(tǒng)組成包括固有免疫和適應(yīng)性免疫兩大部分，其中固有免疫包括組織屏障、固有免疫細(xì)胞和固有免疫分子，適應(yīng)性免疫包括T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。免疫系統(tǒng)功能識別和清除外來抗原、維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視。免疫系統(tǒng)組成及功能根據(jù)抗原性質(zhì)和進(jìn)入機體的方式不同，可分為固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答。固有免疫應(yīng)答是非特異性的、快速的，而適應(yīng)性免疫應(yīng)答是特異性的、慢性的。免疫應(yīng)答類型具有特異性、記憶性和耐受性。特異性是指免疫系統(tǒng)能夠針對特定抗原產(chǎn)生應(yīng)答；記憶性是指免疫系統(tǒng)在初次應(yīng)答后能夠長期保留對該抗原的記憶，當(dāng)再次遇到相同抗原時能夠快速而有效地產(chǎn)生應(yīng)答；耐受性是指免疫系統(tǒng)在發(fā)育過程中對自身抗原不產(chǎn)生應(yīng)答，從而避免自身免疫病的發(fā)生。免疫應(yīng)答特點免疫應(yīng)答類型與特點02免疫學(xué)檢測技術(shù)基礎(chǔ)

抗原抗體反應(yīng)原理抗原與抗體的特異性結(jié)合抗原表面的抗原決定簇與抗體分子的抗原結(jié)合位點之間具有高度的特異性，能夠?qū)崿F(xiàn)精確的相互識別和結(jié)合。抗原抗體結(jié)合的親和力抗原抗體結(jié)合的親和力是指兩者之間相互作用的強度，高親和力有利于形成穩(wěn)定的抗原抗體復(fù)合物?？乖贵w反應(yīng)的可逆性在一定條件下，抗原抗體復(fù)合物可以解離，釋放出游離的抗原和抗體，這種可逆性有利于免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)和終止。免疫學(xué)檢測方法分類及應(yīng)用領(lǐng)域免疫沉淀法利用抗原抗體特異性結(jié)合形成沉淀物的原理，常用于檢測可溶性抗原或抗體，如免疫比濁法、免疫電泳等。免疫凝集法通過抗原抗體結(jié)合形成凝集物的現(xiàn)象進(jìn)行檢測，常用于細(xì)菌、病毒等微生物的快速檢測，如直接凝集試驗、間接凝集試驗等。免疫標(biāo)記法利用抗原抗體反應(yīng)的特異性和標(biāo)記物的可檢測性，對抗原或抗體進(jìn)行定量或定位檢測，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、放射免疫測定（RIA）等。免疫熒光法利用熒光素標(biāo)記抗體或抗原，通過熒光顯微鏡觀察熒光信號，實現(xiàn)對抗原或抗體的定性、定位和半定量檢測，如直接免疫熒光法、間接免疫熒光法等。病原微生物檢測利用免疫學(xué)檢測技術(shù)對病原微生物進(jìn)行快速、靈敏的檢測，如新冠病毒的抗原檢測、艾滋病毒的抗體檢測等。通過檢測患者體內(nèi)自身抗體的種類和含量，輔助診斷自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。利用免疫學(xué)檢測技術(shù)對腫瘤相關(guān)抗原或抗體進(jìn)行檢測，實現(xiàn)腫瘤的早期診斷、個性化治療和預(yù)后評估，如癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）等腫瘤標(biāo)志物的檢測。應(yīng)用免疫學(xué)檢測技術(shù)對食品、藥品中的藥物殘留進(jìn)行檢測，確保食品和藥品的安全和質(zhì)量，如瘦肉精、抗生素等藥物殘留的檢測。自身免疫性疾病診斷腫瘤標(biāo)志物檢測藥物殘留檢測免疫學(xué)檢測技術(shù)應(yīng)用實例03抗原抗體反應(yīng)檢測技術(shù)將可溶性抗原與相應(yīng)抗體直接混合，在電解質(zhì)參與下形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。直接凝集試驗將可溶性抗原或抗體先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體表面，再與相應(yīng)抗體或抗原混合，在電解質(zhì)參與下形成凝集現(xiàn)象。間接凝集試驗用抗體致敏顆粒性載體，再與相應(yīng)可溶性抗原混合，形成凝集現(xiàn)象。反向間接凝集試驗?zāi)囼炐鯛畛恋碓囼瀸⒖扇苄钥乖c相應(yīng)抗體在試管內(nèi)混合，形成肉眼可見的絮狀沉淀物。環(huán)狀沉淀試驗將可溶性抗原與相應(yīng)抗體在瓊脂擴(kuò)散試驗中彼此相遇，形成白色沉淀線。免疫比濁法在自動生化分析儀上利用透射比濁法或散射比濁法檢測抗原抗體復(fù)合物形成的濁度，判斷待測物質(zhì)的含量。沉淀試驗傳統(tǒng)補體結(jié)合試驗將已知抗原、待測抗體和補體按一定比例混合，觀察是否出現(xiàn)溶血反應(yīng)來判斷待測抗體是否存在。改良補體結(jié)合試驗采用酶標(biāo)記抗補體抗體，當(dāng)補體與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合后，酶標(biāo)記抗補體抗體可與復(fù)合物中的補體結(jié)合，加入底物后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，提高了試驗的敏感性和特異性。補體結(jié)合試驗04免疫標(biāo)記檢測技術(shù)基本原理將抗原或抗體吸附于固相載體表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進(jìn)行，通過洗滌去除未結(jié)合的成分，最后通過酶對底物的催化作用產(chǎn)生有色產(chǎn)物，從而進(jìn)行定性或定量分析。類型根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況，ELISA可分為雙抗體夾心法、間接法、競爭法和捕獲法等類型。應(yīng)用廣泛應(yīng)用于各種蛋白質(zhì)、激素、藥物等物質(zhì)的檢測，具有靈敏度高、特異性強、操作簡便等優(yōu)點。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）基本原理以放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行的免疫測定。標(biāo)記抗原與待測抗原競爭限量抗體，待反應(yīng)平衡后，用免疫分離劑去除未結(jié)合的標(biāo)記抗原，測定上清液中的放射性強度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算待測抗原的含量。優(yōu)點靈敏度高，可測定微量物質(zhì)；特異性強，能準(zhǔn)確識別抗原抗體復(fù)合物；標(biāo)記物穩(wěn)定，易于保存和運輸。缺點存在放射性污染問題；操作繁瑣，需要專門的設(shè)備和實驗室條件。放射免疫測定（RIA）利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)作為底物，在酶催化下產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象，通過測量發(fā)光強度對待測物進(jìn)行定量分析。與ELISA相似，CLIA也采用固相載體和酶標(biāo)記技術(shù)?；驹盱`敏度高，可檢測極低濃度的待測物；線性范圍寬，適用于不同濃度的樣本分析；自動化程度高，可實現(xiàn)高通量檢測。優(yōu)點廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、生物科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域中的痕量物質(zhì)檢測和分析。應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）05細(xì)胞免疫檢測技術(shù)T淋巴細(xì)胞分類01根據(jù)T細(xì)胞表面標(biāo)志物的不同，可分為CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞等亞群。T淋巴細(xì)胞功能02不同亞群的T淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答中發(fā)揮著不同的作用，如輔助性T細(xì)胞（Th）和細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc）等。T淋巴細(xì)胞亞群檢測方法03常用的方法包括流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光技術(shù)等，可檢測外周血、淋巴組織等樣本中的T淋巴細(xì)胞亞群比例和功能狀態(tài)。T淋巴細(xì)胞亞群檢測細(xì)胞因子檢測細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞分泌的小分子蛋白質(zhì)，具有廣泛的生物學(xué)活性，如白細(xì)胞介素（IL）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）等。細(xì)胞因子作用細(xì)胞因子在免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)、抗腫瘤等方面發(fā)揮著重要作用。細(xì)胞因子檢測方法常用的方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、生物活性測定、細(xì)胞內(nèi)染色等，可檢測血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中的細(xì)胞因子水平。細(xì)胞因子種類123細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在特定生理或病理條件下，通過一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和基因調(diào)控機制，主動結(jié)束生命的過程。細(xì)胞凋亡概念細(xì)胞凋亡在免疫系統(tǒng)的發(fā)育、穩(wěn)態(tài)維持和免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮著重要作用，如淋巴細(xì)胞的克隆刪除、免疫細(xì)胞的自穩(wěn)等。細(xì)胞凋亡與免疫常用的方法包括流式細(xì)胞術(shù)、DNA片段化檢測、TUNEL染色等，可檢測細(xì)胞凋亡的比例和程度。細(xì)胞凋亡檢測方法細(xì)胞凋亡檢測06免疫學(xué)檢測技術(shù)在臨床中的應(yīng)用通過檢測病原體特異性抗原或抗體，確定感染的存在及類型，如HIV抗原抗體檢測、乙肝病毒表面抗原檢測等。抗原抗體檢測通過對免疫細(xì)胞數(shù)量、比例、功能的檢測，評估機體免疫狀態(tài)，如T淋巴細(xì)胞亞群檢測、NK細(xì)胞活性檢測等。免疫細(xì)胞檢測通過檢測細(xì)菌對抗菌藥物的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥，減少耐藥性的產(chǎn)生。細(xì)菌耐藥性監(jiān)測感染性疾病診斷與治療監(jiān)測自身抗體檢測免疫復(fù)合物檢測治療藥物監(jiān)測自身免疫性疾病診斷與治療監(jiān)測通過檢測針對自身組織器官的特異性自身抗體，輔助診斷自身免疫性疾病，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體等。通過檢測血液中循環(huán)免疫復(fù)合物的存在，了解自身免疫性疾病的活動度和病情嚴(yán)重程度。通過對治療藥物濃度的監(jiān)測，確保藥物在有效治療濃度范圍內(nèi)，提高治療效果并減少副作用。腫瘤標(biāo)志物檢測通過檢測腫瘤相關(guān)抗原、抗體或腫瘤細(xì)胞代謝產(chǎn)物等腫瘤標(biāo)志物，輔助腫瘤的早期診斷、個性化治療和預(yù)后評估，如CEA、AFP等腫