農(nóng)業(yè)植物病理學(xué)

農(nóng)業(yè)植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書黃云、龔國淑、秦蕓主編四川農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系二00五年十月前言為配合學(xué)生學(xué)習(xí)《園藝植物病蟲害防治學(xué)》，我們新編寫了《園藝植物病蟲害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書》。園藝植物病蟲害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書是園藝植物病蟲害防治學(xué)重要組成部份。該實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書共有9個(gè)實(shí)驗(yàn)及課程教學(xué)實(shí)習(xí)的綜合性實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)1～9的內(nèi)容為課堂教學(xué)內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)。以印證，直觀感受植物病害的癥狀和病原的形狀特點(diǎn)，為診斷病害打下基礎(chǔ)為目的；綜合性實(shí)驗(yàn)以系統(tǒng)應(yīng)用所學(xué)知識(shí)及補(bǔ)充植物病理學(xué)差不多實(shí)驗(yàn)技能，使學(xué)生能較多地把握本學(xué)科的系統(tǒng)知識(shí)，為本學(xué)科的研究工作打下基礎(chǔ)為目的。由于編者水平有限，雖盡力而為但也難以盡如人意，不對(duì)之處，望批判指正。編者二00五年十月園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)室守則一、實(shí)驗(yàn)室須知1．實(shí)驗(yàn)前須充分預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書的內(nèi)容，明確此次實(shí)驗(yàn)的目的要求、做到心中有數(shù)。2.實(shí)驗(yàn)操作要細(xì)心慎重，認(rèn)真進(jìn)行觀看，獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)作業(yè)。3．實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保持安靜，不能隨意走動(dòng)、高聲喧嘩，如有咨詢題需舉手請(qǐng)教。4．使用顯微鏡及其他貴重儀器時(shí)要按要求操作。取、放顯微鏡時(shí)應(yīng)一手握住鏡背，一手托住底座，使顯微鏡保持直立，防止鏡頭滑落地面而損壞；玻片標(biāo)本看后需放回盒內(nèi)。5.如損壞、丟失實(shí)驗(yàn)儀器及其它物品，須酌情賠償。6．實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)將儀器放回原處，擦凈桌面，收拾整齊。離開實(shí)驗(yàn)時(shí)前注意關(guān)閉門、窗、水、電等。二、實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)在實(shí)驗(yàn)室中，經(jīng)常與毒性強(qiáng)、有腐蝕性、易燃燒和具有爆炸性的化學(xué)藥品直截了當(dāng)接觸，常使用易碎的玻璃和瓷質(zhì)的器皿，以及在水、電等高溫電熱設(shè)備的環(huán)境下進(jìn)行操作。因此，必須十分重視實(shí)驗(yàn)室安全。1.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室開始工作前，應(yīng)了解水閥門及電閘所在處。2．使用電器設(shè)備(如烘箱、恒溫水浴、離心機(jī)、電爐等)時(shí)，嚴(yán)防觸電；絕不可用濕手開、關(guān)電器開關(guān)。3．使用可燃物，專門是易燃物(乙醇等)時(shí)，應(yīng)專門小心。4.如果不慎傾出了相當(dāng)量的易燃液體，趕忙關(guān)閉室內(nèi)所有的火源和電加熱器；用毛巾或抹布擦拭撒出的液體與清除。5．實(shí)驗(yàn)后的廢棄物不得倒水槽中，應(yīng)收集在指定的容器內(nèi)。6．可能造成環(huán)境污染的廢液、廢物應(yīng)密封塑料袋中，集中處理。三、實(shí)驗(yàn)室急救在實(shí)驗(yàn)過程中不慎發(fā)生受傷事故：應(yīng)趕忙采取適當(dāng)?shù)募本却胧?．受玻璃、刀片割傷及其他機(jī)械損害。第一必須檢查傷口內(nèi)有無玻璃或金屬等物的碎片，然后用硼酸水洗凈，再涂擦碘酒或紅汞水，必要時(shí)用紗布包扎。若傷口較大或過深而大量出血，應(yīng)迅速在傷口上部和下部扎緊血管止血，趕忙到醫(yī)院診治。2．燙傷一樣用濃的(90%～95%)酒精消毒后，涂上紅花油，防止感染。3．灼傷強(qiáng)堿（如氫氧化鈉，氫氧化鉀)、金屬鈉、鉀等其他堿性化學(xué)藥品觸及皮膚而引起灼傷時(shí)，要先用大量自來水沖洗，再用5％硼酸溶液或2％乙酸溶液涂洗。強(qiáng)酸、溴、氯、磷或其他酸性化學(xué)藥品觸及皮膚而致灼傷時(shí)，應(yīng)趕忙用大量自來水沖洗，再以5%碳酸氫鈉溶液或5%氫氧化銨溶液洗滌。如酚觸及皮膚引起灼傷，可用酒精洗滌。4．觸電趕忙切斷電路。①關(guān)閉電源；②用于木棍使導(dǎo)線與被害者分開；③使被害者和地面分離。急救者必須做好防止觸電的安全措施，手和腳必須絕緣。園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)指南園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)是園藝植物病蟲害防治學(xué)課程的重要組成部分，是植物病理學(xué)差不多概念、基礎(chǔ)理論、差不多原理的深化懂得、實(shí)驗(yàn)應(yīng)證、增強(qiáng)感性認(rèn)識(shí)和銜接補(bǔ)充，是理論與實(shí)踐相結(jié)合的具體體現(xiàn)。對(duì)學(xué)好農(nóng)業(yè)植物病理學(xué)具有重要意義。園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的是以植物病理學(xué)和其它關(guān)學(xué)科知識(shí)為基礎(chǔ)，追溯引起植物病害發(fā)生的緣故及過程，認(rèn)識(shí)不同病原所致病害的癥狀特點(diǎn)及病原形狀特點(diǎn)。把握植物病害實(shí)驗(yàn)及研究的差不多技能及方法，注重學(xué)生觀看、摸索、分析、解決實(shí)際咨詢題的能力培養(yǎng)，為今后的研究工作打下一定的基礎(chǔ)。園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)之前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，明確實(shí)驗(yàn)的目的意義，復(fù)習(xí)實(shí)驗(yàn)有關(guān)理論知識(shí)，了解實(shí)驗(yàn)的方法、步驟及重難點(diǎn)；認(rèn)真、客觀、正確地、觀看、記錄實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和顯微繪圖，整理、歸納，分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果，認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告，總結(jié)成功的體會(huì)及找出不足的緣故，培養(yǎng)科學(xué)態(tài)度。實(shí)驗(yàn)1～重點(diǎn)要求學(xué)生認(rèn)知和把握要緊果樹和蔬菜病害的癥狀和病原物的形狀特點(diǎn)、學(xué)習(xí)顯微繪圖、制片技術(shù)；綜合性實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生學(xué)習(xí)和把握從植物病害的調(diào)查、標(biāo)本的采集、鑒定到滅菌、消毒、培養(yǎng)基制作及病原物的分離和培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)技能。該實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書對(duì)癥狀和病原形狀特點(diǎn)進(jìn)行了描述，通過提示對(duì)重點(diǎn)觀看內(nèi)容與闡明并對(duì)實(shí)驗(yàn)技能進(jìn)行了簡述。作業(yè)與摸索題，要緊是實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的課堂作業(yè)及復(fù)習(xí)時(shí)的參考。第一部分園藝植物病害防治學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一、園藝植物病害癥狀一、目的要求本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)園藝植物病害標(biāo)本的觀看，明確植物病害的概念，認(rèn)識(shí)和把握植物病害的癥狀和病狀、病征及其類型；學(xué)習(xí)植物病害癥狀描述和記載方法以及癥狀在病害診斷中的作用。二、材料和用具各種類型的病害標(biāo)本、掛圖、放大鏡等。三、內(nèi)容和方法（一）癥狀：感病植物的外觀病態(tài)表現(xiàn)，可分為病狀和病征兩部分。病狀及其類型：病狀指植物生病后本身表現(xiàn)出來的不正常狀態(tài)。分為以下五種類型：1．變色：植物受害后局部或全株失去正常的綠色、但植物細(xì)胞未死亡。1.1褪綠和黃化：是由于葉綠素合成受到抑制使葉片顏色變淺或褪綠變黃。如：豌豆黃頂病（黃化）、大白菜病毒?。ㄑ厝~脈褪綠）。1.2花葉與斑駁：部分葉綠素受到破壞，葉片黃綠相間或深綠和淺綠相間。如：蘋果花葉病、蘿卜花葉病、南瓜花葉病等。2．壞死：是寄主被害后其細(xì)胞和組織死亡，仍保留著原有的形狀。2.1斑點(diǎn)：按照病斑顏色不同，有褐斑、灰斑、黑斑、白斑等。按照病斑形狀不同：有圓形、橢圓形、梭形、不規(guī)則形，有的受葉脈所限成為角斑，有的沿葉脈進(jìn)展形成條紋或條斑。如：豇豆褐紋病、黃瓜霜霉病、柑桔潰瘍病、葡萄褐斑病、蘋果灰斑病等。2.2穿孔：病斑部分組織脫落，形成穿孔。如：核果類穿孔病。2.3枯焦：早期發(fā)生斑點(diǎn)，隨后迅速擴(kuò)大或愈合成片，最后使局部或全部組織或器官死亡稱為枯焦。如：馬鈴薯晚疫病和早疫病。2.4猝倒：幼苗莖基部壞死腐爛，縊縮呈線狀、倒伏。如：茄科蔬菜幼苗猝倒病。2.5立枯：幼苗的根或莖基部與地面接觸處腐爛，全株枯死，病苗不倒伏。如：茄科蔬菜苗期立枯病。3．腐爛：是較大面積植物組織受病原物的破壞分解，細(xì)胞崩潰解體。干腐——組織本身含水量較低，腐爛后水份專門快散失。如：油菜菌核干腐病。濕腐——組織本身含水較多，水份不易散發(fā)。如：瓜、果腐爛、大白菜的軟腐病。4．萎蔫：植物根莖的維管束受病原物侵害后，大量菌體堵塞導(dǎo)管，或是產(chǎn)生毒素，阻礙水份運(yùn)輸，使其枝葉萎蔫下垂。（1）青枯：病株全株或局部迅速萎蔫，而葉片仍保持綠色。如：辣椒青枯病。（2）枯萎與黃萎：病狀與青枯相似，但葉片多先從距地面較近處開始色澤變黃，病情進(jìn)展較慢，不迅速枯死。如：番茄枯萎病和黃萎病。5．畸形：植物受害后，發(fā)生增生性病變或抑制性病變，分以下幾種類型。5.1卷葉：葉片兩側(cè)沿葉脈向上卷曲，葉片較厚，硬而脆，嚴(yán)峻時(shí)卷成筒狀。如：桃縮葉病。5.2蕨葉：病組織發(fā)育不均衡，葉片變成線狀或蕨葉狀。如：蕃茄蕨葉病。5.3叢枝：受病后莖節(jié)縮短，枝條過度分枝，密集叢生。如：棗瘋病。5.4瘤癭：受病組織局部細(xì)胞增生，形成不定型的畸形腫大。如：柑桔根結(jié)線蟲病、十字花科根腫病。病征及其類型病征是病原物在寄主的受病部位表現(xiàn)出來的特點(diǎn)?？煞譃橐韵骂愋停海?）霉?fàn)钗铮涸谑懿〔课划a(chǎn)生的各種霉層，霉層具有一定的厚度。如：萵苣的霜霉病，葡萄霜霉病。（2）粉狀物：在受病部位產(chǎn)生的各種粉狀物。如：瓜類的白粉病、梨白粉病等。（3）粒狀物：在受病部位產(chǎn)生的各種顆粒狀物，形狀、大小不定。如：十字花科蔬菜菌核病、瓜類的白粉?。ㄩ]囊殼）、蘋果腐爛病、炭疽病。（3）銹狀物：銹病的病征。如豇豆銹病、棗銹病。（4）膿狀物：這是細(xì)菌病害獨(dú)具的專門病征。如：十字花科蔬菜軟腐病、菜豆細(xì)菌性疫病、柑桔潰瘍病。四、作業(yè)1.按照所觀看的植物病害標(biāo)本，按下表內(nèi)容記載觀看結(jié)果，應(yīng)包括病狀、病征的各種類型，至少記載10種。表病害癥狀記載表序號(hào)病害名稱癥狀類型病害類型發(fā)病部位病狀病征12345五、摸索題：1．癥狀在病害診斷上有什么作用？2．學(xué)習(xí)病害癥狀的描述。實(shí)驗(yàn)二植物病害病原形狀觀看一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.病原真菌認(rèn)識(shí)真菌營養(yǎng)體:菌絲體——無隔菌絲、有隔菌絲的形狀；真菌的菌絲體的變態(tài)結(jié)構(gòu)——吸器、假根的形狀；真菌的菌組織及菌組織體——疏絲組織、擬薄壁組織；菌核、子座、菌索的形狀。認(rèn)識(shí)真菌繁育體的類型，真菌各種類型的孢子，學(xué)習(xí)常規(guī)的制片技術(shù)。2.病原細(xì)菌、病毒、線蟲寄生性種子植物形狀細(xì)菌病害、病毒病害、線蟲病害、寄生性種子植物的病原形狀。二、材料和用具真菌營養(yǎng)體、繁育體和其它病原物的各種玻片標(biāo)本和新奇材料，徒手切片常規(guī)用具及顯微鏡。三、內(nèi)容與方法（一）真菌的營養(yǎng)體其是真菌的要緊營養(yǎng)器官，具有絲狀并分枝的管狀體，每一根絲狀物叫菌絲，多數(shù)菌絲團(tuán)圓在一起稱菌絲體，按照菌絲有無隔膜，將菌絲分為無隔菌絲（低等真菌的菌絲）和有隔菌絲（高等真菌的菌絲）。1.菌絲觀看無隔菌絲，有隔菌絲玻片標(biāo)本，注意菌絲形狀、有無隔膜、分枝處有無縊縮。2.真菌營養(yǎng)體的變態(tài)結(jié)構(gòu)：真菌的營養(yǎng)體為了抗擊不良的環(huán)境條件和習(xí)慣寄生生活而形成的一些專門的結(jié)構(gòu)。2.1吸器：由菌絲特化而成的伸入寄生細(xì)胞內(nèi)吸取營養(yǎng)的結(jié)構(gòu)。有球狀、蟹狀、根狀等。觀看小麥白粉病菌吸器玻片、注意在葉片的表皮細(xì)胞內(nèi)，染成紅色的蟹狀吸器。2.2假根：是由菌絲分化的根狀分枝。3.真菌的菌組織：真菌的菌絲體可密集形成菌組織，觀看菌核切片玻片標(biāo)本，菌核外層有2—4層褐色近圓形或多角形，排列緊密的細(xì)胞即擬薄壁組織，向內(nèi)顏色較淺的為疏絲組織，可見菌絲體的長形細(xì)胞、組織排列疏松。4.真菌的菌組織體：真菌的菌組織還能夠進(jìn)一步形成菌組織體。4.2子座：觀看子座玻片標(biāo)本：子座是由擬薄壁組織和疏絲組織或由菌絲體與部份寄主組織結(jié)合而成的一種墊狀結(jié)構(gòu)，子座上形成產(chǎn)孢組織。4.3菌索：肉眼觀看竹菌索玻盒標(biāo)本，鏡檢菌索玻片標(biāo)本，可見菌索是由若干菌絲平行排列形成的。（二）真菌的繁育1．真菌的繁育有兩種類型：即無性繁育和有性生殖。真菌的無性繁育：是指不通過兩個(gè)性細(xì)胞或性器官的結(jié)合而進(jìn)行繁育產(chǎn)生新個(gè)體，無性繁育以營養(yǎng)繁育為特點(diǎn)，形成各種類型的無性孢子，常見的無性孢子有：1.1游動(dòng)孢子：鞭毛菌亞門的無性孢子。它是產(chǎn)生于孢子囊中的內(nèi)生孢子，無孢壁、圓形、洋梨形或腎形，具1～2根鞭毛的內(nèi)生游動(dòng)孢子。游動(dòng)孢子借助鞭毛在水中能游動(dòng)，隨后鞭毛收縮產(chǎn)生細(xì)胞壁、休止，然后萌發(fā)形成新個(gè)體。用挑片方法挑取少量十字花科白銹病皰斑內(nèi)粉沫于載玻片上水滴中進(jìn)行保濕培養(yǎng)，避光3～4小時(shí)后觀看十字花科蔬菜的白銹菌（Albugocadida）孢子囊萌發(fā)生產(chǎn)的游動(dòng)孢子在水中的游動(dòng)情形。觀看鞭毛玻片標(biāo)本，注意有幾根鞭毛。1.2孢囊孢子：接合菌亞門的無性孢子。它形成于孢子囊內(nèi)，有孢壁、無鞭毛、長筒形、圓球形、梨形的內(nèi)生不能游動(dòng)的孢子。成熟后孢子囊破裂放出孢囊孢子。觀看根霉菌（Rhizopusspp），注意孢囊梗頂端黑色圓形的孢子囊和它破裂后散出的孢囊孢子。孢囊梗2—3根著生在一起，下面有假根。1.3分生孢子：子囊菌亞門和半知菌亞門的無性孢子。它產(chǎn)生于菌絲分化而有形狀差異的孢子梗上，具有各種形狀的外生孢子。由于孢子成熟時(shí)從孢子梗上分生脫落故稱分生孢子。一些分生孢子產(chǎn)生在特異的分生孢子盤、分生孢子器、分生孢子座和孢梗束上。觀看辣椒炭疸病菌（Colletotrichumspp.），注意觀看：分生孢子梗、剛毛和分生孢子形狀。1.4厚垣孢子：各類真菌均可形成的無性孢子，它由菌絲體的個(gè)別細(xì)胞原生質(zhì)濃縮，壁加厚形成的一種休眠孢子，觀看厚垣孢子玻片，注意形狀，壁是否加厚。2．真菌的有性生殖：是指通過兩個(gè)性細(xì)胞或性器官的結(jié)合而進(jìn)行生殖的一種形式。有性生殖所產(chǎn)生的孢子稱為有性孢子。有性生殖進(jìn)程以細(xì)胞核結(jié)合為特點(diǎn)。有性生殖一樣包括三個(gè)時(shí)期：質(zhì)配（N+N）→[雙核期（N+N）]→核配（2N）→減數(shù)分裂（N）。有性孢子分以下幾種：2.1卵孢子：鞭毛菌亞門的有性孢子，由兩個(gè)異型配子囊交配接觸所形成的厚壁卵孢子。觀看油菜白銹病玻片標(biāo)本，卵孢子在寄主組織內(nèi)圓形，外層有一圈形似波浪的卵周質(zhì)。2.2接合孢子：接合菌亞門的有性孢子，是由兩個(gè)同型配子囊相結(jié)合而形成的。觀看接合孢子玻片標(biāo)本，注意觀看其形狀、顏色、表面有無紋飾。2.3子囊孢子：子囊菌亞門的有性孢子，是由兩個(gè)異形配子囊（雄器和產(chǎn)囊體）相結(jié)合經(jīng)產(chǎn)囊絲、鉤狀體，子囊母細(xì)胞，發(fā)育成子囊。子囊內(nèi)經(jīng)核配、減數(shù)分裂一樣形成8個(gè)（2n）內(nèi)生、單倍體的子囊孢子。子囊孢子產(chǎn)生于子囊內(nèi)為子囊菌的要緊特點(diǎn)。子囊一樣著生在子囊殼、閉囊殼、子囊盤等子囊果內(nèi)。觀看油菜菌核子囊盤（Sclerotiniasclerotiorum）玻片標(biāo)本，觀看子囊盤形狀，棍棒狀子囊和子囊孢子的數(shù)目。2.4擔(dān)子孢子：擔(dān)子菌亞門的有性孢子，通常兩性器官退化或無明顯分化，由不同性別的初生菌絲，孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管，或精子與菌絲之間結(jié)合形成雙核菌絲，擔(dān)子，經(jīng)核配，減數(shù)分裂，形成4個(gè)單倍體的外生擔(dān)孢子。挑取梨膠銹菌（Gymnosporangiumasiaticum）冬孢子萌發(fā)材料觀看擔(dān)子的形狀，有無隔膜，小梗著生部位，數(shù)目，擔(dān)孢子形狀，顏色和數(shù)目。（三）其它病原物3.1植物病原細(xì)菌：它可引起植物壞死、腐爛、萎蔫等癥狀，常在病部顯現(xiàn)膿狀物，取病組織塊鏡檢，有噴菌現(xiàn)象，即：組織切口處有大量細(xì)菌菌體縊出。取水稻白葉枯病葉，觀看噴菌現(xiàn)象，觀看白葉枯玻盒標(biāo)本，注意觀看菌膿。觀看大白菜細(xì)菌軟腐，注意有無臭味。3.2病毒：病毒是非細(xì)胞形狀、在寄主細(xì)胞內(nèi)營專性寄生的一種生物體，病毒粒體專門小，在一樣光學(xué)顯微鏡下看不到，病毒可引起植物花葉，皺縮，矮化，畸形，病毒病害無病征。但有的病毒病害有內(nèi)病征——即內(nèi)含體，觀看小麥黃色花葉病內(nèi)含體玻片標(biāo)本，在葉片的表皮細(xì)胞中或保衛(wèi)細(xì)胞中，細(xì)胞核染成紫色，在其旁邊粉紅色較疏松的顆粒狀物即為內(nèi)含體。觀看煙草花葉病病毒的外部形狀。3.3線蟲：線蟲是一種低等動(dòng)物，屬于無脊椎動(dòng)物中的線蟲門，它種類專門多，常見的有粒線蟲屬，如小麥線蟲，破壞子房后成蟲癭，鏡檢小麥線蟲玻片標(biāo)本，觀看蟲體形狀。根結(jié)線蟲屬，如芹菜根結(jié)線蟲，危害芹菜根，使根變成根結(jié)狀或瘤狀腫大，剝開結(jié)狀，觀看腫根內(nèi)雌蟲和卵的形狀特點(diǎn)。3.4寄生性種子植物：按照對(duì)營養(yǎng)的依靠程度不同，將寄生性種子植物分為兩大類：一類是全寄生，其葉片退化成鱗片，用吸盤伸入寄主體內(nèi)，與寄主的導(dǎo)管和篩管相連，完全依靠寄主供給有機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)營養(yǎng)和水分。觀看大豆菟絲子玻盒標(biāo)本。注意觀看菟絲子莖與大豆莖連接部位，是否有吸盤形成？另一類是半寄生，這類寄生性種子植物能合成自己所需要的有機(jī)營養(yǎng)，只需寄主提供水分和無機(jī)鹽。觀看茶樹桑寄生玻盒標(biāo)本。四、作業(yè)1．繪無隔菌絲、有隔菌絲圖。2．繪菌核橫切面圖（擬薄壁組織和疏絲組織）。3．繪根霉（無性時(shí)期）形狀圖。4．繪卵孢子和接合孢子形狀圖。5．繪辣椒分生孢子盤圖和油菜菌核子囊盤圖。五、摸索題1.真菌營養(yǎng)體態(tài)結(jié)構(gòu)的作用是什么？2.菌絲有、無隔膜在真菌分類上有何意義？3.真菌分哪幾個(gè)亞門？各亞門有何特點(diǎn)？4.無性孢子和有性孢子有何區(qū)別，它們?cè)谥参锊『ρh(huán)中分別起什么作用？實(shí)驗(yàn)三柑桔、桃和葡萄病害－、目的要求識(shí)別和把握柑桔、桃和葡萄要緊病害的癥狀及其病原菌的形狀特點(diǎn)；把握描畫病害癥狀圖和病原形狀圖的技巧；學(xué)習(xí)徒手切片、撕制和挑制片技術(shù)。二、材料、儀器和用具材料：柑桔、桃和葡萄要緊病害的玻盒標(biāo)本，浸漬標(biāo)本和病原菌玻片標(biāo)本；各種柑桔病害的掛圖和多媒體課件。儀器和用具：電視顯微系統(tǒng)、顯微鏡，放大鏡，載玻片，蓋玻片、解剖針、鑷子，培養(yǎng)皿，雙面刀片、通草，浮載劑等。三、實(shí)驗(yàn)操作（一）柑桔潰瘍?。╟itruscanker）1.癥狀柑桔潰瘍病是一種世界性重要病害，為國內(nèi)外（A2類和B類）植物檢疫對(duì)象。要緊危害柑桔新梢枝葉和未成熟的果實(shí)。1.1葉片癥狀正、背兩面均逐步隆起，成為近圓形、米黃色的病斑。病部表皮破裂，呈海綿狀，隆起更明顯，木栓化，表面粗糙，灰白色或灰褐色，后病部中心凹陷，并現(xiàn)微細(xì)輪紋，周圍有黃色或黃綠色的暈環(huán)，在緊靠暈環(huán)處常有褐色的釉光邊緣。一樣直徑在3～5mm。有時(shí)幾個(gè)病斑互相愈合，形成不規(guī)則形的大病斑。后期病斑中央凹陷呈火山口狀開裂。1.2枝梢癥狀以夏梢為重。病斑特點(diǎn)差不多與葉片上相似，灰褐色，木栓化，比葉片上的病斑更為隆起，病斑中心如火山口狀開裂，但無黃色暈環(huán)。1.3果實(shí)癥狀上病斑也與葉片上相似，但病斑較大，一樣直徑為4～5mm，最大的可達(dá)12mm，木栓化程度比葉部更強(qiáng)。病斑中央火山口狀的開裂也更為明顯。1.4潰瘍病與瘡痂病的癥狀區(qū)別：葉片上的癥狀區(qū)別，潰瘍病病斑突破葉表，出現(xiàn)于葉的兩面，病斑較圓，中央稍凹陷，邊緣明顯，外圍有黃色暈環(huán)；瘡痂病病斑僅出現(xiàn)于葉的一面，不突破表皮，一面凹陷，另一面凸起，呈漏斗狀或牛角狀，病斑較不規(guī)則，外圍無黃色暈環(huán)，潮濕條件下，牛角狀頂端有粉紅色小點(diǎn)狀物（分生孢子盤和分生孢子）。潰瘍病病葉外形一樣正常，而瘡痂病病葉常因病斑凹陷使葉片畸形。提示:注意觀看潰瘍病葉部癥狀的形狀、大小、是否貫穿葉正背兩面、是否凹陷、有無微細(xì)輪紋、黃色暈環(huán)、潮濕條件下有無粉紅色小點(diǎn)狀物、葉是否畸形等特點(diǎn)，并與瘡痂病作比較。2.病原病原菌為野油菜黃單胞菌柑桔致病變種(Xanthomonascampestrispv.citri)。菌體短桿狀，兩端圓，大小為1.5～2.0μm×0.55～0.7μm，極生單鞭毛，有莢膜，無芽孢。（二）柑桔黃龍病(CitrusHuanglongbing)1.癥狀柑桔黃龍病又稱黃梢病，我國臺(tái)灣省稱為立枯病。為國內(nèi)（B類）植物檢疫對(duì)象。其要緊為害梢、葉和果，表現(xiàn)為全株系統(tǒng)性癥狀。病樹初期典型癥狀是在濃綠的樹冠中發(fā)生1～2條或多條黃梢。病梢葉片黃化分為平均黃化型和斑駁黃化型兩類。1.1春梢春梢癥狀的特點(diǎn)：葉片黃化程度較輕且不平均，形成斑駁。1.2夏梢和秋梢兩梢表現(xiàn)的癥狀差不多相同。病梢停止轉(zhuǎn)綠。葉脈往往先變黃，隨之葉肉由淡黃綠色變成黃色（黃化）。中、下部葉片差不多轉(zhuǎn)綠，但也會(huì)褪綠變黃，顯現(xiàn)黃綠相間的斑駁。1.3枝梢的中后期癥狀當(dāng)年發(fā)病的黃梢，一樣到秋末葉片連續(xù)脫落。翌春病梢萌芽多而早，長出的新梢短而纖細(xì)，葉片小而窄，新梢葉片老熟時(shí)，葉肉停止轉(zhuǎn)綠而變黃，但葉脈及其周圍組織仍呈綠色，與缺鋅的癥狀相似，稱為花葉。病葉較健葉厚，有革質(zhì)感，在枝上著生較直立，有些黃葉的葉脈木栓化腫大，開裂，葉端稍向葉背彎曲。1.4病果果小，畸形，果臍常偏歪在一邊，著色較淡或不平均。有些品種的果蒂鄰近變橙紅色，而其余部分仍為青綠色“紅鼻果”。提示:注意觀看葉片變色的黃化和斑駁的特點(diǎn)，注意與缺鋅癥狀的區(qū)別；注意“紅鼻果”的癥狀特點(diǎn)。2.病原病原菌為一種原核生物，過去稱為、類立克次氏體和類細(xì)菌，按新的分類系統(tǒng)，該病原菌為薄壁菌門韌桿菌屬亞洲韌皮桿菌Liberobacterasiaticus。柑桔黃龍病菌菌體多數(shù)呈圓形、橢圓形或線形，少數(shù)呈不規(guī)則形，大小50～600nm×170～1600nm。菌體的外部界限是膜質(zhì)結(jié)構(gòu)，厚為17～33nm，平均25nm，由三層膜組成。（三）柑桔炭疽病(Citrusanthracnose)1.癥狀該病要緊危害葉、花和果。1.1葉片癥狀有兩種癥狀類型。葉斑型(慢性型)病斑多顯現(xiàn)在成長葉片或老葉的近葉緣、葉尖處，病斑呈半圓型或近圓形，稍凹陷，中央灰白色，邊緣褐色或深褐色。天氣潮濕時(shí)，病斑上顯現(xiàn)許多肉紅色黏質(zhì)小點(diǎn)；在干燥條件下則為黑色小粒點(diǎn)，散生或呈輪紋狀排列(分生孢子盤)。②葉枯型(急性型)癥狀常從葉尖開始，黃色或黃褐色，病健分界不明顯，似云紋狀。病部組織枯死后，常呈“V”字形，上生肉紅色小點(diǎn)或黑色小點(diǎn)，病葉脫落。1.2枝梢癥狀癥狀有兩種。一種由梢頂向下枯死，病斑多發(fā)生在受凍害后的秋梢上，病部褐色，后灰白色，枯死，其上生許多小黑點(diǎn)。另一種是發(fā)生在枝梢中部，病部淡褐色，橢圓形，后擴(kuò)展呈梭形，稍凹陷。1.3幼果癥狀病部暗綠色油漬狀斑點(diǎn)，后擴(kuò)至全果，在潮濕條件下，顯現(xiàn)白色霉層及淡紅色小粒點(diǎn)。癥狀表現(xiàn)有干疤、淚痕和腐爛三種類型。干疤型多在果腰部，圓形或近圓形，黃褐至深褐色，病部果皮革質(zhì)或硬化。淚痕型癥狀為果皮外表紅褐色或暗紅褐色條點(diǎn)狀微凸的干疤，似淚痕。腐爛型癥狀多在果蒂或其鄰近，初為淡褐色、水漬狀，后變褐腐爛。2.病原為盤長孢狀刺盤孢(ColletotrichumgloeosporioidesPen.)，屬半知菌亞門。分生孢子盤埋生于寄主表皮下，后突破表皮外露。有剛毛，深褐色，直或稍彎曲，具1～2個(gè)分隔，長40μm～160μm。分生孢子梗呈柵狀排列，圓柱形，無色單胞，頂端尖，大小為9.8～29.4μm×2.8～4.9μm。分生孢子橢圓形至短圓筒形，稍彎曲或一端稍小，無色，單胞，大小為8.4～16.8μm×3.5～4.2μm，內(nèi)含1～2個(gè)油球。提示:學(xué)習(xí)徒手切片方法切片炭疽病葉部病斑。切片時(shí)注意臂、腕、手指各部位的和諧，刀片從外向內(nèi)快速移動(dòng)；制片時(shí)，注意浮載劑（水或乳酚油）的多少、蓋蓋破片的方法、幸免過多產(chǎn)動(dòng)氣泡而阻礙觀看；顯微鏡檢玻片標(biāo)本時(shí)，注意觀看分生孢子盤是否于角質(zhì)層下、分生孢子盤、分生孢子梗、分生孢子的形狀及大小，分生孢子盤中有無剛毛、分生孢子梗有無隔膜、分生孢子內(nèi)有無油球。（四）柑桔樹脂病（Cirtusmelanose）病害因發(fā)生部位不同，有多種名稱：發(fā)生在樹干上的稱樹脂病或流膠病；發(fā)生在葉片和幼果上稱為砂皮病或黑點(diǎn)病；發(fā)生在果實(shí)上稱為褐色蒂腐病。1.癥狀病菌可危害樹干、新梢、嫩葉和果實(shí)等，癥狀復(fù)雜。1.1樹干癥狀有兩種類型：(1)流膠：病斑多發(fā)生在主干分叉處和其下的主干，以及易受日灼傷和凍害的部位。病部皮層組織松軟，呈灰褐色，滲出黃褐色黏液。最后病部逐步干枯下陷，病斑周緣產(chǎn)生愈合組織并隆起，中部已死亡的皮層開裂剝離，露出木質(zhì)部。(2)干枯：病部皮層紅褐色，干枯微下陷，微有裂縫，但皮層不趕忙剝落，在病健交界處有一條明顯的隆起線。在適溫、高濕時(shí)，干枯型可轉(zhuǎn)化為流膠型。木質(zhì)部病健交界處有一條黃褐色的痕帶，導(dǎo)管內(nèi)有褐色膠體和菌絲。病樹皮上形成黑色小點(diǎn)，潮濕時(shí)涌出淡黃色卷須狀黏液。1.2新梢和嫩葉癥狀新梢和嫩葉病部表面產(chǎn)生黃褐色堅(jiān)硬膠質(zhì)小點(diǎn)。小點(diǎn)散生或密集成片，表面粗糙，故稱為“砂皮”或“黑點(diǎn)”。病菌只限于表皮及其以下數(shù)層細(xì)胞。在枯死枝條上產(chǎn)生大量分生孢子器。1.3．果實(shí)癥狀受害幼果表現(xiàn)“砂皮”或“黑點(diǎn)”癥狀。初為圍繞蒂部顯現(xiàn)水漬狀褐色病斑，果皮較堅(jiān)強(qiáng)，病斑向臍部進(jìn)展，邊緣波浪狀，最后可使全果腐爛。當(dāng)果皮病變擴(kuò)大至果面l／3～1／2時(shí)，果心已全部腐爛，故有“穿心爛”之稱。后期有時(shí)在病果表面產(chǎn)生白色菌絲體、黑色點(diǎn)狀物和淡黃色絲狀物。提示:柑桔樹脂病菌因侵染柑桔樹體不同部位而表現(xiàn)出不同的癥狀特點(diǎn)，故有樹干上的樹脂病或流膠病；葉片和幼果上稱為砂皮病或黑點(diǎn)病；果實(shí)上稱為褐色蒂腐病等不同的稱謂。觀看樹干癥狀時(shí)，注意觀看病部是否深入到木質(zhì)部、病健交界處有無褐色菌痕帶；病樹皮上是否黑色小點(diǎn)和淡黃色卷須狀黏液。觀看葉、梢、果部“砂皮”或“黑點(diǎn)”的癥狀特點(diǎn)。注意觀看果實(shí)蒂腐的發(fā)生部位、感知果皮的堅(jiān)強(qiáng)度、病斑邊緣是否具波浪狀；剖果是否有“穿心爛”的特點(diǎn)；病果表是否有白色菌絲體。2.病原物病原物有性態(tài)為柑橘間座殼[Diaporthecitri(Faw.)Wolf]，子囊菌亞門間座殼屬；無性態(tài)為柑橘擬莖點(diǎn)霉(PhomopsiscirriFawcett)，半知菌亞門擬莖點(diǎn)霉屬。有性態(tài)子囊殼球形，埋藏在樹皮下的子座組織中，喙部細(xì)長，突出于子座外；子囊無色無柄，長棍棒狀，頂部較厚；子囊孢子無色，雙胞，隔膜處縊縮，長橢圓形或紡綞形。無性態(tài)分生孢子器在表皮下形成，近球形或不規(guī)則形，內(nèi)產(chǎn)生兩種類型分生孢子，一種為卵形，另一種為絲狀或鉤絲狀，均為單胞，無色。提示:注意觀看子囊殼的形狀、有無長喙。注意觀看分生孢子器內(nèi)的兩種類型分生孢子形狀。（五）柑桔脂點(diǎn)黃斑病(Greasyyellowspotofcitrus)1.癥狀脂點(diǎn)黃斑病要緊危害葉片。葉片上的癥狀有脂點(diǎn)黃斑型、褐色小圓星型及脂點(diǎn)黃斑與褐色小圓星混合型三種，而以脂點(diǎn)黃斑型為主。1.1脂點(diǎn)黃斑型葉片背面暗褐色至黑褐色的脂斑。與脂斑相對(duì)應(yīng)的葉片正面，形成不規(guī)則形的黃色病斑，邊緣不明顯，中部有淡褐色至黑褐色的皰疹狀小粒點(diǎn)。1.2褐色小圓星型病斑直徑1～3mm，邊緣紫褐色，稍隆起，中央灰白色，少數(shù)病斑上長有黑色小粒點(diǎn)，為病菌的子囊殼。脂點(diǎn)黃斑型病斑在后期會(huì)有少數(shù)轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚A星型。這種癥狀常見于秋梢的葉片上。1.3混合型為脂點(diǎn)黃斑和褐色小圓星混合型。提示:脂點(diǎn)黃斑病因危害稍期而表現(xiàn)出兩種完全相異的癥狀，以致過去曾認(rèn)為是兩種病害。注意觀看脂點(diǎn)黃斑型葉正面的黃斑的特點(diǎn)、黃斑相對(duì)葉背面黑褐色的皰疹的特點(diǎn)，并注意和柑桔黃蜘蛛為害狀的區(qū)別。2.病原有性態(tài)柑橘球腔菌(MycosphaerellacitriWhiteside)。無性態(tài)為柑橘灰色疣絲孢［Stenellacitri-grisea(Fisher)Sivanesan］。有性態(tài)子囊殼產(chǎn)生于崩潰的病葉兩面，叢生，近球形，黑褐色，有擬孔口，子囊殼直徑65～85.8μm，高80.2μm～96.2μm。子囊倒棍棒形或長卵形，成束著生在子囊殼基部，大小31.2～33.8μm×4.7～6.0μm。子囊內(nèi)含8個(gè)子囊孢子，排列成二行。子囊孢子無色，長卵形，一端鈍圓，一端稍尖，雙胞，大小10.4～15.6μm×2.6～3.4μm。無性態(tài)分生孢子梗直立，近圓柱形，0～4個(gè)分隔，初無色，后變?yōu)榈S褐色，而頂部色淺或無色，梗長13～20.8μm，梗粗2.6～3.9μm，梗壁偶然有微疣。分生孢子多數(shù)圓柱形，少數(shù)倒棍棒形，直或彎曲，無色至淡黃褐色，表面密生微疣，多數(shù)單生，少數(shù)為2～3個(gè)鏈生，孢子基部有明顯的臍；分生孢子大小13～52μm×2.3～2.9μm，0～8個(gè)分隔。（六）柑橘青霉病(Citrusbluemold)和柑橘綠霉病(Citruscommongreenmold)1.癥狀柑橘青霉病和柑橘綠霉病兩病癥狀相似。受害果實(shí)上產(chǎn)生水漬狀、淡褐色、近圓形病斑，病部組織變軟腐爛，用手指按壓病部時(shí)，果皮易破裂。病部生白色霉?fàn)钗?，后轉(zhuǎn)為青色或綠色霉層(分生孢子梗和分生孢子)，周圍有一圈白色菌絲環(huán)。兩病癥狀比較見下表:提示:注意兩種病害霉層的顏色、白色菌絲環(huán)帶的寬窄、邊緣、氣味和粘著性的差異。2.病原物柑橘青霉病和柑橘綠霉病的病原物分別為意大利青霉(PenicilliumalicumWehmer)和指狀青霉(P.digitatumSacc)，半知菌亞門青霉屬。病原形狀比較見下表:

表1柑橘青霉病和柑橘綠霉病兩病癥狀比較項(xiàng)目青霉病綠霉病分生孢子叢白色菌絲環(huán)軟腐邊緣果腐速度氣味粘著性青色，在果皮外表及果心間隙中形成，發(fā)生較快外觀粉狀較窄，約1～3mm寬邊緣明顯，較整齊較慢發(fā)霉氣味果實(shí)腐爛后與包果紙不粘連綠色，僅在果皮外表形成，發(fā)生較慢略帶粘性，微有縐褶較寬，約8～15mm邊緣不明顯，不整齊較快芳香氣味果實(shí)腐爛后與包果紙粘連在一起表2意大利青霉與指狀青霉形狀比較分生孢子梗(μm)小梗(μm)分生孢子(μm)意大利青霉指狀青霉150～300×4～550～160×4～511.5～13.8×3～416.1～23×4～54.9×2.76.8×4.2提示:學(xué)習(xí)挑制片的方法。用解剖針挑取少許柑桔青霉病和柑桔綠霉病癥狀部的霉層制片觀看病原物。注意觀看兩種病原菌分生孢子梗先端掃帚狀分枝的多少、形狀特點(diǎn)；小梗的形狀及分生孢子形狀、大小、是否串生等特點(diǎn)。（七）桃縮葉病(PeachLeafCurl)1.癥狀桃縮葉病要緊為害桃樹幼嫩部分，以嫩葉片為主，也可為害花、嫩梢和幼果。1.1葉部癥狀葉片變厚變脆，凹凸不平，卷曲，紅褐色，葉表面生出一層灰白色粉狀物(子囊層)。1.2枝梢癥狀受害后呈灰綠色或黃色，病部肥腫，枝條節(jié)間短，其上葉片叢生。1.3花癥狀受害其花瓣肥大變長。1.4幼果癥狀受害呈畸形，果表龜裂。提示:注意觀看葉部畸形的特點(diǎn)，注意與蚜蟲為害狀的區(qū)別。2.病原物病原有性態(tài)為畸形外囊菌[Taphrinadeformans(Berk)Tul.]，屬子囊菌亞門。子囊生于葉片角質(zhì)層下，無包被，柵狀排列。子囊圓筒形、頂部平截，無色，大小為18～42μm×5～12μm內(nèi)含4～8個(gè)子囊孢子。子囊孢子橢圓形，單胞，無色，5～7μm×4～5μm,可在子囊內(nèi)芽殖和產(chǎn)生許多芽孢。芽孢子卵圓形，分為厚壁和薄壁兩種。提示:注意該病原菌子囊外無包被，子囊裸生；注意觀看子囊的形狀特點(diǎn)及足胞；子囊內(nèi)子囊孢子的個(gè)數(shù)是否為8個(gè)，什么原因？（八）桃穿孔病（Peachshothole）1.癥狀要緊為害葉片，也能侵害果實(shí)和枝條。1.1.細(xì)菌性穿孔病葉部癥狀圓形或不規(guī)則形病斑，紫褐色至黑褐色，大小約2mm左右。病斑周圍呈水漬狀并有黃綠色暈環(huán)，病健組織交界處發(fā)生一圈裂紋，脫落后形成穿孔，穿孔邊緣破裂，不整齊。2.霉斑穿孔病褐色，圓形或不規(guī)則形，直徑2mm～6mm，潮濕時(shí)，病斑背面長出污褐色霉?fàn)钗铩?.褐斑穿孔病圓形病斑，直徑約1mm～4mm，邊緣清晰并略顯環(huán)紋。病斑上長出灰褐色霉?fàn)钗?，中部干枯脫落，形成邊緣整齊的穿孔。提示:穿孔病在核果類果樹櫻桃、李、杏上均有發(fā)生。注意觀看穿孔邊緣是否破裂、整齊，病斑上有無霉層及顏色、及病斑周圍是否呈水漬狀和有黃綠色暈環(huán)；注意區(qū)別細(xì)菌性穿孔和真菌性穿孔的差異。2.病原物2.1細(xì)菌性穿孔病病原為甘藍(lán)黑腐黃單胞桿菌桃李致病變種[Xanthomonascampestrispv.Pruni(Smith)Dye.]，屬薄壁菌門黃單胞菌屬。菌體短桿狀，大小1.4～1.8μm×0.2～0.8μm，單極生1～6根鞭毛，有莢膜，無芽孢。2.2霉斑穿孔病病原為嗜果刀孢菌[Clasterosporiumcarpophilum(Lév.)Aderh.]，屬半知菌亞門。分生孢子梗有分隔，暗色。分生孢子梭形橢圓形或紡綞形，有3～6個(gè)分隔，稍彎曲，淡褐色，大小16～28.5μm×9～10.5μm。2.3褐斑穿孔病病原為核果假尾孢菌[Pseudocercosporacircumscissa(Sacc.)Liu&Guo.]分生孢子梗10～16根呈束生長，橄欖色，不分枝，直立或彎曲，0～2分隔，大小12～32μm×3～4μm。分生孢子梗著生于子座上。分生孢子細(xì)長，鞭狀，倒棍棒狀或圓柱形，棕褐色；直立或微彎，3～12個(gè)分隔，大小24～120μm×3～4μm。（九）葡萄霜霉?。℅rapedownymildew）1.癥狀霜霉病為害葡萄所有綠色器官，以葉片受害最重。1.1葉部癥狀病斑黃色至紅褐色、壞死，多角形，多數(shù)病斑相互融合成大斑。后期病葉干枯脫落。1.2新梢、卷須、穗軸、葉柄癥狀病斑微凹陷、黃色至褐色病斑，病梢生長停滯，扭曲，甚至枯死。1.3果梗及果實(shí)癥狀果梗黑褐色壞死，果粒病部灰色變硬下陷。潮濕時(shí)病部產(chǎn)生白色霜狀霉層(孢囊梗及孢子囊)為其典型特點(diǎn)。提示:白色霜狀霉層是霜霉病的－般特點(diǎn)，但并非霜霉病都呈白色霜狀霉層。大多數(shù)霜狀霉層生于葉背、卻或多或少的受葉脈限制而呈多角形。2.病原物葡萄生單軸霉［Plasmoparaviticola(Berk．etCurtis)Berl.etdeToni］屬鞭毛菌亞門。孢囊梗自氣孔伸出，4～6根成束，樹枝狀，無色，單軸分枝3～6次，一樣2～3次，分枝處近直角，長400～780μm，寬6～10μm。分枝末端有2～3個(gè)短梗，圓錐形，末端鈍。孢子囊著生在短梗上，無色，單胞，卵形或橢圓形，頂端有乳頭狀突起。大小12.6～25.2μm×11.2～16.8μm，游動(dòng)孢子腎形，大小7.5～9.0μm×6～7μm，在扁平的一側(cè)生有2根鞭毛。卵孢子褐色，球形，直徑30～35μm，別處包著皺縮的藏卵器壁。翌年春季，卵孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管，在芽管先端形成芽孢囊，大小28～36μm，萌發(fā)后產(chǎn)生30～56個(gè)游動(dòng)孢子。提示:學(xué)習(xí)撕制片法制片觀看病原，其作法為用鑷子夾住病斑邊緣，撕下病斑后取最薄部位（不帶葉肉組織）制片。孢囊梗的分枝處的特點(diǎn)（二叉分枝、假二叉分枝、是否有一主軸、分枝是銳角或近直角等）及頂端形狀是分屬的重要依據(jù)。注意觀看孢囊梗叢何處伸出，是否有一主軸；分枝處是否為近直角；短梗（著生孢子囊處）形狀特點(diǎn)；觀看孢子囊的形狀及乳突。（十）葡萄黑痘病(Grapeanthracnose)1.癥狀黑痘病要緊為害葡萄果實(shí)、果梗、葉片、葉柄、新梢和卷須等綠色幼嫩的部分。1.1葉部癥狀病斑圓形或不規(guī)則形，中央壞死呈灰白色，稍凹陷，邊緣暗褐色或紫色，直徑1～4mm。中央破裂穿孔，周緣紫褐色暈圈。1.2葉脈癥狀病斑梭形，凹陷，灰色或灰褐色，邊緣暗褐色，組織干枯后，常使葉片扭曲，皺縮。1.3果實(shí)癥狀病斑圓形褐色，直徑2～5mm，中央凹陷，呈灰白色，外部仍為深褐色，周緣紫褐色，似“鳥眼狀”。潮濕時(shí)，病斑上顯現(xiàn)乳白色的粘質(zhì)物（分生孢子團(tuán)）。提示:注意觀看果實(shí)似“鳥眼狀”病斑，撕開病斑觀看病部是否伸入果肉；注意觀看由于葉脈受害、穿孔致使葉片扭曲、皺縮的特點(diǎn)。2.病原物葡萄痂圓孢(SphacelomaampelinumdeBary)屬半知菌亞門。有性時(shí)期為痂囊腔菌[Elsinoeampelina(deBary)Shear]屬子囊菌亞門，我國尚未發(fā)覺。分生孢子盤半埋生于寄主組織內(nèi)，直徑60μm；分生孢子梗短小，無色，單胞，大小6.6～13.2μm×1.3～2.0μm；分生孢子橢圓形或卵形，無色，單胞，稍彎曲，兩端各有一個(gè)油球，大小4.8～11.6μm×2.2～3.7μm。（＋一）葡萄褐斑病(Grapebrownspot)1.癥狀褐斑病僅為害葉片。1.1大褐斑病病斑定形后，直徑3～10mm的稱大褐斑??；直徑2～3mm的稱小褐斑病。大褐斑病在美洲系統(tǒng)葡萄上，病斑不規(guī)則或近圓形，直徑約5～9mm，邊緣紅褐色，中部黑褐色，外圍黃綠色，背面暗褐色，并生有黑褐色霉層。1.2小褐斑病病斑圓形，深褐色，中部顏色稍淺，后期背面長出黑色霉?fàn)钗铩?.病原物2.1．大褐斑病葡萄褐柱絲霉［Phaeoisariopsisvitis(Lev.)Sawada］屬半知菌亞門。分生孢梗束及分生孢子。分生孢子梗細(xì)長，常10～30根集結(jié)成束狀，單根分生孢子梗大小92～225μm×2.8～4.0μm，有隔膜1～5個(gè)，暗褐色，頂端有著生孢子的疤痕1～2個(gè)。分生孢子棍棒狀，暗褐色，稍彎曲，基部稍膨大，上部漸狹小，有隔膜7～11個(gè)，大小23～84μm×7～l0μm。2.2．小褐斑病座束梗尾孢［Cercosporaroesleri(Catt.)Sacc.］屬半知菌亞門。分生孢子梗較短，每叢僅數(shù)根，松散不集成束狀，淡褐色，大小158～221μm×4.0μm；分生孢子長柱形，直或稍彎曲，有3～5個(gè)分隔，棕褐色，大小26～78μm×6～9μm。（＋二）其它病害柑桔流膠病、根結(jié)線蟲病、根線蟲病、裂皮病、黑腐病、桃褐腐病、等病害的癥狀及病原觀看。四、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1.繪柑桔炭疽病病原形狀圖。2.繪桃縮葉病的病原形狀圖。3.繪葡萄霜霉病的病原形狀圖。4.繪葡萄褐斑病的病原形狀圖。5.比較柑桔潰瘍病和瘡痂病葉部癥狀特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)四、蘋、梨和棗病害－、目的要求識(shí)別和把握蘋、梨和棗要緊病害的癥狀及其病原菌的形狀特點(diǎn)；學(xué)習(xí)描畫病害癥狀圖和病原形狀圖的技巧；學(xué)習(xí)徒手切片和挑制片技術(shù)。二、材料、儀器和用具材料：蘋、梨和棗要緊病害的玻盒標(biāo)本，浸漬標(biāo)本、新奇標(biāo)本和病原菌玻片標(biāo)本；各種蘋果病害的掛圖和多媒體課件。儀器和用具：電視顯微系統(tǒng)、顯微鏡，放大鏡，載玻片，蓋玻片、解剖針、鑷子，培養(yǎng)皿，雙面刀片、通草，浮載劑等。三、實(shí)驗(yàn)操作（一）蘋果腐爛病（Applecanker）1.癥狀癥狀表現(xiàn)為潰瘍型和枝枯型兩種，以潰瘍型為主。潰瘍型病部紅褐色，略隆起，水漬狀，組織松軟，用手指按壓即下陷。后皮層腐爛，流出黃褐色汁液，濕腐狀，有酒糟味。病斑圓形或橢圓形，邊緣不清晰；后期病部失水干縮，黑褐色下陷，生黑色小粒點(diǎn)（外子座及分生孢子器）。天氣潮濕，病部產(chǎn)生橘紅色卷須狀物(分生孢子角)，生黑色粒點(diǎn)（內(nèi)子座及子囊殼）。枝枯型病部形狀不規(guī)則，紅褐色或暗褐色，有明顯的赤褐色輪紋，具黑色小粒點(diǎn)。提示:蘋果樹腐爛病與干腐病的癥狀有相似之處，注意該病在發(fā)生部位（主干和主枝）、流出黃褐色汁液的多少、酒糟味的濃淡、黑色小點(diǎn)的大小和疏密、潮濕時(shí)有無桔黃色卷須狀物等上兩病的區(qū)別。2.病原物病菌有性態(tài)為蘋果黑腐皮殼（ValsamaliMiyabeetYamada），屬子囊菌亞門。無性態(tài)為殼囊孢（Cytosporasp.），屬半知菌亞門。外子座黑色圓錐形，子座內(nèi)含1個(gè)扁瓶形、幾個(gè)相通的腔室分生孢子器，直徑為480μm～1600μm。分生孢子梗無色、長10.5～20.5μm；分生孢子無色，單胞，香蕉形或臘腸形，兩端圓，微彎曲，4.0～10.0μm×0.8～1.7μm；具橘紅色卷須狀孢子角。內(nèi)子座在外子座的下面或旁邊形成，內(nèi)含3～14個(gè)子囊殼。子囊殼球形或燒瓶形，直徑為320～540μm，具有長頸、頸長540μm～860μm，頂端有孔口。子囊長橢圓形或紡錘形，一端較寬，頂端鈍圓或較平，28～35μm×7.0～10.5μm，內(nèi)含8個(gè)子囊孢子，子囊孢子排列成兩行或不規(guī)則，無色，單胞，臘腸形或香蕉形7.5～10.0μm×1.5～1.8μm。提示:注意觀看該病原菌的分生孢子器和子囊殼均分別生于外子座和內(nèi)子座上的特點(diǎn)、分生孢子器為多腔室及從器口涌出桔黃色卷須狀物的特點(diǎn)。（二）蘋果褐斑病（MarssoniaLeafBrownSpot）1.癥狀褐斑病要緊危害葉片，也能危害葉柄和果實(shí)。葉部癥狀病斑有三種類型：1.1同心輪紋型病斑近圓形，直徑為1cm～2cm，中心褐色，四周黃色，周圍有綠色暈，病斑中部生排列成同心輪紋的黑色小粒點(diǎn)。1.2針芒型病斑褐色，不規(guī)則，上生由黑色小點(diǎn)(分生孢子盤)和黑色菌索組成呈針芒放射狀擴(kuò)展。1.3混合型病斑專門大，近圓形或不規(guī)則形，直徑約0.5cm～3cm，暗褐色，黑色小點(diǎn)在病斑中部呈同心輪紋狀排列，病斑外圍呈放射狀排列。果實(shí)癥狀病斑圓形或不整形，直徑約6mm～12mm。病斑褐色，凹陷，表面有黑色小粒點(diǎn)。提示:注意觀看該病葉部病班周圍具綠色邊緣及黑色小點(diǎn)（分生孢子盤）與線（菌索）相連呈放射狀的特點(diǎn)；注意癥狀的三種類型特點(diǎn)、注意與蘋果花葉?。ú《静『Γ┑幕ㄈ~的區(qū)別。2.病原物有性態(tài)為蘋果雙殼菌［DiplocarponmaliHaradaetSawamura］，屬子囊菌亞門。無性態(tài)為蘋果盤二孢[Marssoninacoronaria(Ell.etDavis.)Davis]，屬半知菌亞門。無性態(tài)菌索，多分枝，穿行于表皮下，交叉點(diǎn)上著生分生孢子盤。分生孢子盤初埋生于角質(zhì)層下，成熟后外露，直徑為100μm～200μm。分生孢子梗呈柵狀排列，無色、單胞、棍棒狀，大小15～20μm×3～4μm。孢子梗頂生分生孢子，分生孢子無色，雙胞，中間縊縮，上大且圓，下小而尖，呈倒葫蘆狀。大小為13.2～18μm×7.2～8.4μm，內(nèi)含2～4個(gè)油球，偶有單胞的分生孢子產(chǎn)生。有性態(tài)子囊盤肉質(zhì)，缽狀，大小105～200μm×80～125μm。子實(shí)層由子囊和側(cè)絲組成，子囊闊棍棒狀，有囊蓋，大小40～49μm×12～14μm。子囊內(nèi)含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子香蕉形，一端稍彎曲，成熟后有隔膜，大小24～30μm×5～6μm。提示:病原菌以無性態(tài)常見。其種名蘋果盤二孢告之我們病原菌的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)為分生孢子盤、分生孢子為雙胞；注意觀看雙胞的特點(diǎn)、有無油球。（三）蘋果白粉?。ˋpplePowderyMildew）1.癥狀白粉病要緊危害新梢、嫩葉，也危害花器、芽、幼果等。新梢癥狀節(jié)間縮短、葉細(xì)長、葉緣上卷、質(zhì)脆、被一層白粉覆蓋，后期變?yōu)辄S褐色、重者梢枯死。葉片癥狀病葉生褪綠斑，生長受阻而皺縮不平；葉片窄小，縱卷、變脆直至枯死脫落?；ò臧Y狀花淡黃或綠色，變窄，扭曲，干枯脫落。芽癥狀芽瘦小，灰褐色至暗褐色，芽鱗松散，張口呈刷狀。果實(shí)癥狀在果頂或梗洼等處產(chǎn)生白粉斑，稍后形成網(wǎng)狀銹斑，硬塊，易造成龜裂。受害部產(chǎn)生白色粉狀物（病菌的菌絲和分生孢子）為該病最明顯的特點(diǎn)。一些地區(qū)，在葉背主脈、支脈、葉柄上生成堆的黑色小點(diǎn)（閉囊殼）。提示:癥狀部位以產(chǎn)生白色粉狀覆于表面及后期生黑色小點(diǎn)（閉囊殼，一些地點(diǎn)產(chǎn)生）為其特點(diǎn)；注意觀看新梢發(fā)病后節(jié)間縮短、葉細(xì)長、上卷的特點(diǎn)。2.病原物病原為白叉絲單囊殼[Podosphaeraleucotricha(Ell.etEv.)Salm],屬子囊菌亞門。無性態(tài)分生孢子梗直截了當(dāng)在菌絲上產(chǎn)生，短棍棒狀。分生孢子串生，向基性成熟，無色，單胞，橢圓形，16.4～26.4×14.4～19.2μm。有性態(tài)閉囊殼近球形，初無色，后變淡黃色，成熟后褐色至黑褐色，直徑75～100×70～100μm。附屬絲兩種，一種生于閉囊殼頂部，3～10枝，基部褐色，端部色淡，透亮，分隔，頂端有二叉狀分枝，直立，長度為閉囊殼3～7倍；另一種生于閉囊殼基部，黃褐色，較粗，彎曲，有的也分叉，長度一樣小于閉囊殼直徑。閉囊殼內(nèi)生1個(gè)子囊，子囊橢圓形或球形，50.4～55.0μm×45.5～51.5μm，內(nèi)含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子無色，單胞，橢圓形，16.8～22.8μm×12～13.2μm。提示:挑取黑色小點(diǎn)制片，注意觀看閉囊殼兩種附屬絲的形狀；然而用解剖針于低倍鏡下輕壓蓋玻片，讓閉囊殼破裂、子囊釋出；注意觀看閉囊殼內(nèi)子囊的個(gè)數(shù)及子囊內(nèi)子囊孢子的個(gè)數(shù)。（四）蘋果霉心?。ˋppleMouldCoreandCoreRot）1.癥狀該病要緊危害果實(shí)。果實(shí)癥狀生長期田間外部癥狀不明顯，病果偶見果面發(fā)黃，果形不正，或者著色較早。發(fā)病嚴(yán)峻的果實(shí)，明顯呈畸形。貯藏期，果心霉?fàn)€進(jìn)展更快，病果果面可見水漬狀、褐色不規(guī)則形的濕腐斑塊，斑塊可連成片，以致全果腐爛。果心癥狀剖開病果，心室變褐，逐步向外擴(kuò)展，具粉紅色、灰綠色、黑褐色和白色霉?fàn)钗铩Ｌ崾?病果外觀無明顯癥狀。剖果后可見心室及果肉（如已擴(kuò)展時(shí)）有粉紅色、灰綠色、黑褐色和白色霉?fàn)钗铮ㄒ啦≡N類不同而異，但一樣僅有一優(yōu)勢種）。2.病原物蘋果霉心病是由多種真菌侵染所致，常見的有鏈格孢菌[Alternariaalternata(Fr.)Keissl]、粉紅單端孢菌[Trichotheciumroseum(Bull)Link]串球鐮刀菌（FusariummoniliformeSheld）等3種。此外，還有青霉菌(Penicilliumsp.)，擬青霉菌(Paecilomycessp.)、節(jié)孢狀鐮刀菌(F.arthrosporioidesSherb.)等20余屬的真菌。2.1T.roseum分生孢子梗直立，有少數(shù)橫隔或無隔，不分枝，梗端稍大。分生孢子自梗端單個(gè)地以向基式連續(xù)產(chǎn)生一串孢子。孢子形成后，靠著生痕彼此連接而集合在孢子梗的頂端，形成外觀圓形至矩形的孢子頭。分生孢子梨形或倒卵形，兩個(gè)孢室，上孢室較下孢室為大，下孢室基端明顯收縮變細(xì)，著生痕在基端或其一側(cè)，透亮或粉紅色，12～18μm×8～10μm。2.2A..alternata分生孢子梗直立，分枝或不分枝，淡橄欖色至綠褐色，有屈曲，頂端常膨大而具多個(gè)孢子痕，大小5～12.5μm×3～6μm，分生孢子組成鏈，有的長鏈由10個(gè)孢子組成。孢子有喙或無喙，形狀變化極大，表面平滑或有瘤，濃橄欖色至深橄欖色，有橫隔膜1～9個(gè)，縱隔膜0～6個(gè)，大小7～70μm×6～22.5μm。2.3F.moniliforme子座黃色、褐色或紫色，產(chǎn)生的菌絲為鮮黃色至淺粉紅色。分生孢子串珠狀，單胞，棱形至卵圓，大小4～30μm×1.5～5μm。大分生孢子生于分生孢子座或分生孢子團(tuán)內(nèi)，淡紅色至紅褐色，孢子細(xì)長、稍彎、具3～5個(gè)隔膜，大小為20～70μm×2～4.5μm。（五）蘋果炭疽?。ˋpplebitterrot）、輪紋?。ˋppleringrot）和褐腐?。ˋpplebrown）1.癥狀1.1輪紋病蘋果輪紋病又稱粗皮病、輪紋褐腐病。果實(shí)癥狀以皮孔為中心，水漬狀褐色腐爛斑點(diǎn)，呈同心輪紋狀向四周擴(kuò)展，病斑不凹陷，爛不變形，病組織呈軟腐狀，病斑的中部產(chǎn)生黑色小粒點(diǎn)，散生，不突破表皮。1.2炭疽病果實(shí)癥狀病斑圓形，直徑1～2cm，中心生黑色小粒點(diǎn)(分生孢子盤)，常呈同心輪紋狀排列。潮濕時(shí)，溢出緋紅色粘質(zhì)團(tuán)(分生孢子團(tuán))。爛部呈圓錐狀干腐。1.3褐腐病又名菌核病。果實(shí)癥狀病斑中心部逐步形成同心輪紋狀排列的灰白色、絨球狀菌絲團(tuán)，這是褐腐病的典型癥。病果干縮呈黑色僵果。提示:上述三種蘋果果實(shí)病害的共同特點(diǎn)是出現(xiàn)輪紋的共同特點(diǎn)，但組成輪紋的病征或病狀不同。輪紋病的輪紋由深淺褐色的癥狀組成；炭疽病的輪紋由病征黑色小點(diǎn)（分生孢子盤）或肉紅色粘質(zhì)物（分生孢子和粘質(zhì)物）組成；褐腐病的輪紋是由病征灰白色、絨球狀菌絲團(tuán)組成。此外，它們?cè)诓“叽笮?、是否凹陷等方面也不同?.病原物2.1病原輪紋病有性態(tài)為貝倫格葡萄座腔菌梨生?；停跙otryosphaeriaberengerianaf.sp.piricola(Nose)koganezawaetSakuma］屬子囊菌亞門；無性態(tài)為簇小穴殼菌(Dothiorellagregaria)，屬半知菌亞門。無性態(tài)分生孢子器扁圓形或橢圓形，直徑383～425μm；分生孢子無色、單胞，紡錘形或橢圓形，大小24～30μm×6～8μm。有性態(tài)子囊殼球形或扁球形，黑褐色，大小170～310μm×230～310μm；子囊無色，棍棒狀，頂端膨大，壁厚透亮，基部較窄，大小110～130μm×17.5～22.0μm；子囊孢子無色、單胞，橢圓形，大小24.5～26μm×9.5～10.5μm。2.2炭疽病有性態(tài)為圍小叢殼［Glomerellacingulata(Stonem)SchretSpauld.］屬子囊菌亞門；無性態(tài)為盤長孢狀刺盤孢［Colletotrichumgloeosporioides(Penz.)PenzetSate.］，屬半知菌亞門。有性態(tài)少見。無性態(tài)分生孢子盤埋生于表皮下，隨著分生孢子梗生長、產(chǎn)孢而突破表皮，其上專門少有剛毛。分生孢子梗無色單胞，大小15～20μm×1.5～2.0μm。分生孢子無色、單胞，長圓柱形或長橢圓形。大小10～35μm×3.5～7.0μm。2.3褐腐病褐腐病病原是仁果鏈核盤菌［Moniliniafructigena(Aderh．Etruhl.)Honey］屬子囊菌亞門；無性時(shí)期為仁果叢梗孢(MoniliafructigenaPers.)，屬半知菌亞門。菌絲集結(jié)灰白色菌絲團(tuán)，其上長分生孢子梗及孢子。分生孢子梗絲狀，無色，單胞，其上串生分生孢子。分生孢子橢圓形，無色，單胞，大小1l～31μm×8.5～17μm。后期，病果內(nèi)生成菌核，黑色，不規(guī)則，大小1mm左右，子囊盤漏斗狀，外部平滑，灰褐色，直徑3～5mm。子囊無色，長筒形，內(nèi)生8個(gè)子囊孢子。子囊孢子無色，單胞，卵圓形，大小10～15μm×5～8μm。子囊間有側(cè)絲，棍棒狀。（六）蘋果其它病害蘋果赤衣病、泡性潰瘍病、花葉病等等。（七）梨黑星?。≒earScab）1.癥狀梨黑星病能侵染梨樹所有的綠色幼嫩組織，要緊侵害葉片和果實(shí)，也能夠危害花序、鱗芽、新梢、葉柄、果柄等部位。葉片癥狀..葉背主、枝脈之間出現(xiàn)圓形、橢圓形或不整形的淡黃色斑，病斑沿主脈邊緣長出黑色的霉層，且有沿葉脈走向的特點(diǎn)。許多病斑互相結(jié)合，整個(gè)葉片的背面布滿黑色的霉層。葉柄癥狀長條形、凹陷病斑，其上生黑色霉?fàn)钗?。果?shí)癥狀病斑圓形，稍凹陷，上生黑霉，木栓化，堅(jiān)硬、凹陷并龜裂。幼果畸形；成果生大小不等的圓形黑色病疤，病斑硬化，表面粗糙。病芽及病梢癥狀病芽的要緊特點(diǎn)是鱗片變黑和產(chǎn)生黑霉，病芽梢要緊特點(diǎn)是從新梢基部開始，逐步向上產(chǎn)生黑色霉層。病部生有黑色霉?fàn)钗锸窃摬〉墓餐攸c(diǎn)。提示:注意觀看葉背黑色霉層具有沿葉脈走向的特點(diǎn)。2.病原物梨黑星病菌有性態(tài)為［VenturianashicolaTanakaetYamamoto］,屬子囊菌亞門。無性態(tài)為［FusicladiumvirescensBon.］,屬半知菌亞門。無性態(tài)分生孢子梗及分生孢子。分生孢子梗暗褐色，散生或叢生，直立或稍彎曲,大小為8.0～32.0μm×3.2～6.4μm。分生孢子著生于孢子梗的頂端或中部，脫落后留有瘤狀的痕跡。分生孢子梗單生或叢生，從寄主角質(zhì)層下伸出，呈倒棍棒狀，暗褐色，直立或彎曲，常不分枝，孢痕多而明顯。分生孢子淡褐色，卵形或紡錘形，兩端略尖，單胞，萌發(fā)前少數(shù)生一橫隔，大小為7.5～22.5μm×5～7.5μm。有性態(tài)假囊殼埋藏在落葉的葉肉組織中，成熟后有喙部突出葉表，如小黑點(diǎn)狀,以反背面為多。假囊殼圓形或扁球形，頸部較肥短，黑褐色，平均大小118.6μm×87.1μm。子囊棍棒狀，聚生于子囊果的底部，無色透亮，大小37.1～61.8μm×6.2～6.9μm。每個(gè)子囊內(nèi)含有8個(gè)子囊孢子，淡黃綠色或淡黃褐色，狀如鞋底，雙胞，上大下小，大小11.1～13.6μm×3.7～5.2μm。提示:病部黑色霉?fàn)钗餅椴【姆稚咦庸＜胺稚咦?。注意觀看分生孢子梗是否叢生，有無分生孢子脫落后留下的疤痕。（八）梨銹?。≒earRust）1.癥狀梨銹病要緊為害葉片和新梢，嚴(yán)峻時(shí)也能為害幼果和果梗。葉部癥狀，葉片正面生圓形小病斑，中央橙黃色有光澤，邊緣淡黃色，周圍具有黃色暈圈。隨著病斑的擴(kuò)大，病斑中央產(chǎn)生蜜黃色微凸的小粒點(diǎn)（性子器），潮濕時(shí)小粒點(diǎn)溢出淡黃色黏液（性孢子），黏液干燥后黃色小粒點(diǎn)變成黑色。之后病斑組織變肥厚，正面凹陷，背面隆起并長出十多根灰白色或淡黃色的毛管狀物（銹孢子器），內(nèi)有大量褐色銹孢子，成熟后從銹孢子器頂端開列散出。后期病葉變黑干枯，早落。幼果癥狀葉片癥狀相似。提示:注意觀看葉、葉柄、果及果梗上性子器（蜜黃色微凸的小粒點(diǎn)）及銹子器（淡黃色的毛管狀物）是否于同一部位。葉柄、果柄癥狀病部橙黃色，并隆起呈紡錘形，病斑上也可長出性子器和銹子器。新梢受害后的癥狀與葉柄、果柄相似。轉(zhuǎn)主寄主柏科植物癥狀針葉、葉腋或小枝上產(chǎn)生淡黃色斑點(diǎn)，病部于秋季黃化隆起，翌春，形成球形或近球形瘤狀菌癭，菌癭連續(xù)發(fā)育突破表皮露出紅褐色、圓錐形或鍥形的冬孢子角。冬孢子角成熟后，遇雨吸水膠化、膨大，冬孢子萌發(fā)產(chǎn)生擔(dān)子及擔(dān)孢子。2.病原物病原為亞洲膠銹菌(梨膠銹菌)［GymnosprangiumasiaticumMiyableexYamada］，屬擔(dān)子菌亞門。整個(gè)生活史中可產(chǎn)生4種類型的孢子。性孢子及銹孢子性孢子器扁燒瓶形，大小120～170μm×90～120μm，內(nèi)生許多無色、單胞、紡錘形或橢圓形的性孢子，大小8.0～12μm×3～3.5μm。銹子器細(xì)圓筒形，長約5mm～10mm，直徑0.2mm～0.5mm。銹孢子球形或近球形，大小18～20μm×19～24μm，膜厚2μm～3μm。橙黃色、表面有瘤狀細(xì)點(diǎn)。冬孢子及擔(dān)孢子冬孢子紡錘形或長橢圓形，雙胞，黃褐色、大小33～62μm×14～28μm，孢子的分隔處各有兩個(gè)發(fā)芽孔，柄細(xì)長。冬孢子萌發(fā)的最適溫為17～20℃，冬孢子萌發(fā)時(shí)長出擔(dān)子，4胞，每胞生一小梗，每小梗頂端生一擔(dān)孢子。擔(dān)孢子卵形，淡黃褐色，單胞，大小10～15μm×8～9μm。提示:梨膠銹菌具轉(zhuǎn)主寄生特性，其性孢子器和性孢子、銹子器和銹孢子生于梨樹，而冬孢子角和冬孢子、擔(dān)子和擔(dān)孢子生于柏科植物上。該菌還具有多型性，生活史中共產(chǎn)生性孢子、銹孢子、冬孢子和擔(dān)孢子等4種孢子（缺夏孢子）。注意觀看性孢子器和性孢子、銹子器和銹孢子及冬孢子、擔(dān)子和擔(dān)孢子的形狀特點(diǎn)。該病菌與蘋果銹病菌（GymnosprangiumyamadaiMiyabe）為同屬不同種，不能交互侵染。（九）梨輪紋病(PearRingRot)1.癥狀要緊危害枝干和果實(shí)，也可危害葉片。1.1枝干癥狀以皮孔為中心先形成暗褐色瘤狀突起，近圓形或扁圓形暗褐色壞死斑，直徑約5mm～15mm，沿病斑外緣產(chǎn)生一圈裂紋，邊緣翹起呈馬鞍狀。病斑產(chǎn)生許多的小黑點(diǎn)(分生孢子器)，形成以皮孔為中心的同心輪紋狀病斑。眾多病斑導(dǎo)致樹皮粗糙，故稱“粗皮病”。潮濕條件下，病斑小黑點(diǎn)中可溢出灰白色粘液狀分生孢子團(tuán)。1.2果實(shí)癥狀皮孔為中心，生成近圓形至紅褐色圓形爛斑，形成淺褐色與紅褐色至深褐色相間的同心輪紋。病斑散生的小黑點(diǎn)(分生孢子器)。1.3葉片癥狀病斑初期近圓形或不規(guī)則形，褐色，略顯同心輪紋；后期逐步變?yōu)榛野咨∈璧男『邳c(diǎn)。提示:注意觀看枝干上以皮孔為中心的“馬鞍狀”翹起病斑，注意其上是否有黑色小點(diǎn)、為何物？2.病原物病菌有性態(tài)為貝倫格葡萄座腔菌梨生?；停跙otryosphaeriaberengerianade.Notf.sp.piricola(Nose)KoganecawaetSokwwa］，屬子囊菌亞門；無性態(tài)為輪紋大莖點(diǎn)霉［MacrophomakuwatsukaiHara］，屬半知菌亞門。另一種病菌稱干腐病菌，即貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeriaberengerianade.Not，屬子囊菌亞門，無性態(tài)產(chǎn)生大莖點(diǎn)(Macrophoma)、杏核小穴殼(Dothiorella)型分生孢子。有性態(tài)子囊殼埋生于寄主表皮下子座中，單生，黑褐色，大小為170～310μm×230～310μm，有短喙。子囊棍捧形，大小為110～130μm×17.5～22μm，子囊內(nèi)含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子無色至淡黃色，橢圓形，大小為24.5～26μm×9.5～10.5μm。無性態(tài)分生孢子器黑褐色，球形或近球形，大小為383μm～425μm。分生孢子梗棒狀。分生孢子無色，單胞，紡錘至長橢圓形，大小為24～30μm×6～8μm。（十）梨黑斑病(PearBlackSpot)1.癥狀要緊危害葉、果及嫩梢。1.1葉片癥狀圓形、黑色斑點(diǎn)，在呈圓形或不規(guī)則形，中央灰白色，邊緣黑褐色，有時(shí)具輪紋大斑。潮濕時(shí)病班表生黑霉(病菌的分生孢子梗和分生孢子)。1.2幼果癥狀病斑近圓形至橢圓形，褐色至黑褐色，病斑略凹陷，潮濕時(shí)表面也產(chǎn)生黑色霉層。果面龜裂，裂縫可深達(dá)果心，在裂縫內(nèi)產(chǎn)生黑霉。重病果常數(shù)個(gè)病斑合并為大病斑，致使全果呈烏黑色，表面密生墨綠色至黑色霉層。1.3新梢及葉柄癥狀，病斑長橢圓形，淡褐色，明顯凹陷的病斑。病健交界處常產(chǎn)生裂縫。2.病原物病原為菊池鏈格孢［AlternariakikuchanaTanaka］，屬于半知菌亞門。分生孢子梗褐色或黃褐色，叢生，一樣不分枝，基部較粗，先端略細(xì)，有隔膜3～10個(gè)，大小為40～70μm×4.2～5.6μm，孢子脫落后有孢痕。分生孢子常2～3個(gè)鏈狀長出，形狀不一，大多數(shù)為棍棒，基部膨大,頂端細(xì)小，嘴胞短至稍長，有橫隔膜4～11個(gè)，縱隔膜0～9個(gè)，大小為10～70μm×6～22μm，分隔處略縊縮。老熟的分生孢子壁較厚，暗褐色；幼嫩的分生孢子則壁薄而成黃褐色和暗黃色。（十一）梨褐斑病(Pearbrownspot)1癥狀僅為害葉片。葉片癥狀圓形或近圓形的褐色病斑，病斑相互愈合呈不規(guī)則形的褐色斑塊。呈灰白色，密生黑色小點(diǎn)，周圍褐色，最外層為黑色。2.病原物有性態(tài)為梨球腔菌[Mycosphaerellasentina(Fr.)Schr?er]，屬子囊菌亞門。無性態(tài)為梨生殼針孢［SeptoriapiricolaDesm.］，屬半知菌亞門。無性態(tài)分生孢子器在葉組織內(nèi)形成，孔口突出表皮外，球形或扁球形，直徑80μm～150μm，暗褐色。分生孢子針狀，無色，大小50～83μm×4～5μm，3～5個(gè)隔膜。有性態(tài)子囊殼在落葉上形成，多數(shù)群生，球形或扁球形、黑褐色，頸部突出葉表皮外，直徑50μm～100μm。子囊棍棒狀，無色透亮，大小45～60μm×15～17μm。子囊內(nèi)含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子紡錘形或圓筒形，向一方略彎曲，無色，大小27～34μm×4～6μm，有1個(gè)隔膜，隔膜處略有縊縮，分成大小相等的兩個(gè)細(xì)胞。（十二）梨其它病害梨炭疽病、輪紋病、褐腐病、白粉病等。（十三）棗瘋病(Jujubewitche’sbroom)1.癥狀要緊表現(xiàn)花梗延長，花變?nèi)~和主芽不正常萌發(fā)而構(gòu)成枝葉叢生。1.1花器癥狀花器變成營養(yǎng)器官?；üＱ娱L4～5倍，萼片、花瓣、雄蕊均變?yōu)樾∪~。1.2葉片病狀葉肉變黃，葉脈仍綠，葉黃化，葉緣上卷，暗淡無光澤，硬而脆。有的葉尖邊緣焦枯，似缺鉀狀?；ê笏L的葉片狹小，明脈，翠綠色，易焦枯。有時(shí)在葉背中脈上，長一片鼠耳狀的明脈小葉。1.3枝癥狀病樹技呈叢枝狀。1.4根蘗癥狀根蘗枝纖細(xì)，節(jié)間縮短、葉小而黃，叢枝狀更為明顯。2.病原物棗瘋病的要緊病原是植原體。棗瘋病植原體為不規(guī)則球狀，直徑90～260nm，外膜厚度8.2～9.2nm，堆積成團(tuán)或聯(lián)結(jié)成串。四、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1.比較蘋果腐爛病和干腐病的癥狀特點(diǎn)。2.比較蘋果輪紋病、炭疽病和褐腐病果實(shí)上的癥狀特點(diǎn)。3.繪蘋果褐斑病病原菌形狀圖。4.繪梨黑星病無性態(tài)病原菌形狀圖。

實(shí)驗(yàn)五、蔬菜真菌病害－、目的要求識(shí)別和把握各種蔬菜要緊真菌病害的癥狀及其病原菌的形狀特點(diǎn)。二、材料、儀器和用具材料：各種蔬菜要緊病害的玻盒標(biāo)本，浸漬標(biāo)本、新奇標(biāo)本和病原菌玻片標(biāo)本；各種各種蔬菜病害的掛圖和多媒體課件。儀器和用具：電視顯微系統(tǒng)、顯微鏡，放大鏡，載玻片，蓋玻片、解剖針、鑷子，培養(yǎng)皿，雙面刀片、通草，浮載劑等。三、實(shí)驗(yàn)操作（一）蔬菜霜霉病(Vegetabledownymildewdisease)霜霉病要緊危害十字花科蔬菜，也能危害葫蘆科蔬菜。以白菜、青菜、油菜、菜苔、芥菜、榨菜、蘿卜和甘藍(lán)、黃瓜等發(fā)生霜霉病比較普遍。1.癥狀1.1葉部癥狀葉正面顯現(xiàn)變色斑（如黃色、黃褐色），葉背面產(chǎn)生白色霜狀霉層（注意，黃瓜為灰黑色霉層），病斑常受葉脈限制而成多角形。1.2花器癥狀花梗腫大、彎曲，常稱為“龍頭病”，病部生白霉，花瓣變?yōu)榫G色。提示:注意觀看葉背面霜狀霉層且常受葉脈限制而成多角形的癥狀特點(diǎn)。2.病原物病原為十字花科霜霉菌[Peronosporaparasitica(Pers.)Fr.]，黃瓜霜霉病為古巴假霜霉（Pseudoperonosporacubensis），均屬鞭毛菌亞門。無性態(tài)孢子囊生于孢囊梗上，由氣孔伸出寄主表面，無色、無隔，作重復(fù)二叉狀分枝，頂端小梗尖銳，每端著生孢子囊1個(gè)。孢子囊無色，單胞，長圓形至卵圓形，大小為24～27μm×25～30μm。有性態(tài)卵孢子黃色至黃褐色，圓形，厚壁，表面光滑或有皺紋，直徑30～40μm。（二）瓜類白粉病(Melonsandgourdspowderymildew)白粉病要緊危害黃瓜、西葫蘆、南瓜、甜瓜，其次是冬瓜、西瓜，絲瓜。要緊侵染葉片，亦可為害莖和葉柄一樣不為害果實(shí)。1.癥狀1.1葉片癥狀葉面初呈白色近圓形小粉斑，后逐步擴(kuò)大連接成片，呈邊緣不整齊的大片白粉斑，嚴(yán)峻時(shí)白粉布滿整個(gè)葉片，葉面上好像撒了一層白粉（分生孢子梗及分生孢子）。后期白粉狀物漸變成灰白色，上面散生許多小黑點(diǎn)（閉囊殼）。1.2莖和葉柄癥狀其癥狀與葉片相似，只是白色粉狀斑較小，白粉病斑上的白粉是病菌的菌絲體，小黑點(diǎn)是病菌的閉囊殼。提示:注意觀看白色粉狀物的病征特點(diǎn)，并注意與白色霜狀霉層的區(qū)別；注意觀看不同顏色的小點(diǎn)。2.病原物瓜類白粉菌有兩種，一種是二孢白粉菌（ErysiphecichoracerumDC.），另一種是單絲殼白粉菌[Sphaerothecafuliginea(Schlecht)Poll.]。無性態(tài)分生孢子梗不分枝，圓柱形分生孢子梗及分生孢子或短棍棒形，無色，有2～4個(gè)隔膜，其上著生分生孢子。分生孢子橢圓形，無色，單胞，串生呈念珠狀，大小為24～25μm×13～24μm。有性態(tài)閉囊殼皆為扁球形，暗褐色，無孔口，直徑約為70～140μm，表面有菌絲狀附屬絲。兩種菌的要緊區(qū)別為閉囊殼內(nèi)子囊數(shù)目和子囊內(nèi)子囊孢子數(shù)目不同。二孢白粉菌閉囊殼內(nèi)有多個(gè)子囊，每個(gè)子囊內(nèi)含有2個(gè)子囊孢子；單絲殼菌閉囊殼內(nèi)僅有1個(gè)子囊，子囊內(nèi)含有8個(gè)子囊孢子。提示:閉囊殼附屬絲的形狀，如絲狀、球針狀、鉤絲狀等等，以及閉囊殼內(nèi)子囊個(gè)數(shù)和子囊內(nèi)子囊孢子的個(gè)數(shù)是白粉菌分屬的重要特點(diǎn)。（三）豆類銹病(Legumerust)銹病要緊危害菜豆、豇豆、蠶豆、豌豆等。1.癥狀各種豆類蔬菜銹病的癥狀都十分相似。銹病要緊為害葉片，也為害葉柄、莖和豆莢。葉、莖癥狀初出現(xiàn)邊緣不明顯的褪綠小黃斑，后中央稍突起，逐步擴(kuò)大出現(xiàn)出黃褐色夏孢子堆，表皮裂后，散出紅褐色粉末，即夏孢子。在豇豆上，可見到在一個(gè)夏孢子堆周圍還有許多次生夏孢子堆圍成一圈，其外圍還有黃暈。夏孢子堆一樣多發(fā)生在葉的背面，而在相對(duì)的葉正面只形成褪綠斑點(diǎn)。后期，夏孢子堆轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏亩咦佣眩蛘咴谌~片上長出冬孢子堆。另外，在葉正面及莢上還會(huì)產(chǎn)生近圓形且具暈圈的黃褐色小斑點(diǎn)。上生黑褐色小粒點(diǎn)，即性子器，以后在性子器四周(莖、莢上)或相對(duì)的葉背產(chǎn)生黃白色小皰斑，即銹子器，再連續(xù)則形成夏孢子堆及冬孢子。但性子器和銹子器不常見。提示:銹病以夏孢子堆堆破裂散出銹色夏孢子為其癥狀特點(diǎn)。2.病原物豆類銹病是由擔(dān)子菌亞門單胞銹菌屬(Uromyces)不同種真菌侵染所致。幾種要緊豆類銹病的病原形狀特點(diǎn)和有關(guān)特性見表。表三種豆類銹病病菌形狀和其他特性比較菜豆單胞銹菌U．a(chǎn)ppendiculatus豇豆單胞銹菌U．vignae蠶豆單胞銹菌U．fabae性子器罕見罕見桔紅色小點(diǎn)銹子器罕見罕見白色或黃白色小點(diǎn)，周緣白色。夏孢子單胞，橢圓或卵圓形，淺黃或桔黃色，表生稀疏微刺，具1～3個(gè)芽孔，大小20～30μm×18～22μm。單胞、球形至橢圓形，黃褐色，密刺，具2個(gè)芽孔，大小20～32μm×18～25μm。單胞，球形至橢圓形，淡褐色，有刺，具3～5個(gè)芽孔，大小22～33μm×16～27μm。冬孢子單胞，近圓形或短橢圓形，褐色，頂端有乳頭狀突起，下有無色長柄，表面光滑，大小25～35μm×20～25μm。單胞，近圓形至橢圓形，褐色，頂有乳突，下有長柄，表面光滑，大小27～36μm×20～28μm。單胞，近圓形至橢圓形，褐色，頂部圓或平，下有長柄，表面光滑，大小為22～42μm×15～30μm轉(zhuǎn)主寄主無無無為害寄主菜豆、扁豆、綠豆等豇豆蠶豆（四）蔬菜灰霉病(VegetablesGrayMold)灰霉病要緊危害葫蘆科、茄科、豆科和其他蔬菜。植株地上部分均可受害，以果實(shí)和葉片為主。1.癥狀1.1果實(shí)癥狀先從殘留的敗花和柱頭部侵染，造成花腐，后向果面和果柄擴(kuò)展，呈灰白色腐爛；1.2葉片癥狀多從葉尖開始，向內(nèi)呈“V”字形擴(kuò)展，病斑初呈水漬狀，邊緣不規(guī)則，后呈淺褐色至黃褐色，具深淺相間的輪紋