PE50對動物腹瀉的藥效學(xué)研究

PE50對動物腹瀉的藥效學(xué)研究目的探索PE50對動物腹瀉的藥效和最佳治療劑量。方法PE50單次給藥急性毒性實驗：實驗選取昆明系小白鼠60只,采用按性別分層隨機方法進行分組。以小鼠單次灌服PE50全死亡或90%死亡為最大劑量及10%以下死亡劑量為最小劑量,中間分別設(shè)3個劑量梯度進行試驗設(shè)計,從高到低依次為：實驗組Ⅰ、實驗組Ⅱ、實驗組Ⅲ、實驗組Ⅳ、實驗組Ⅴ,以及溶媒對照組。用Bliss法計算LD50。PE50體外抑菌試驗：實驗采用紙片法測量PE50的抑菌圈直徑,采用試管法測量原阿片堿和別隱品堿的MIC和MBC值。PE50對小鼠細菌性腹瀉的藥效試驗：實驗采用昆明系小白鼠88只,采用按性別分層隨機方法進行分組,將動物分為實驗組Ⅰ(高劑量組)、實驗組Ⅱ(中劑量組)、實驗組Ⅲ(低劑量組)、實驗組Ⅳ(陽性藥物組)、實驗組V(溶媒對照組)。采用腹腔注射的方法建立細菌性腹瀉模型,供試化合物和對照組藥物采用經(jīng)口灌胃給藥。試驗依據(jù)每組動物的稀便級數(shù),分析藥物對細菌性腹瀉的藥效。PE-50對小鼠蓖麻油所致腹瀉的藥效試驗：選取健康成年昆明種小鼠42只,隨機分為7組：試驗Ⅰ組(空白組)、試驗Ⅱ組(溶劑對照組)、試驗Ⅲ組(模型對照組)、試驗Ⅳ組(PE-50高劑量組)、試驗V組(PE-50中劑量組)、試驗Ⅵ組(PE-50低劑量組)、試驗Ⅶ組(陽性藥物對照組),每組6只。灌胃蓖麻油建立腹瀉模型。測量PE50對各組小鼠稀便級的影響,分析其抗腹瀉的效果。PE-50對正常小鼠小腸推進運動功能影響的藥效試驗：選取健康成年昆明種小鼠24只,隨機分為4組,分別為試驗Ⅰ組(正常對照組)、試驗Ⅱ組(PE50高劑量組)、試驗Ⅲ組(PE50中劑量組)、試驗Ⅳ組(PE50低劑量組),每組6只。實驗采用灌胃給藥。測量墨汁推進率,分析PE-50對正常小鼠小腸推進運動功能影響。PE-50對小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的藥效試驗：選取健康昆明種小鼠60只,隨機分為6組：試驗組Ⅰ(空白組)、試驗組Ⅱ(模型組)、試驗組Ⅲ(陽性藥物對照組)、試驗組Ⅳ(PE-50高劑量組)、試驗組Ⅴ(PE-50中劑量組)、試驗組Ⅵ(PE-50低劑量組)。以自由飲用含5%DSS溶液建立結(jié)腸炎模型,所有試驗動物均采用灌胃的方式給藥。通過測量每只小鼠體重,大便性狀及出血級別,得出疾病活動指數(shù)(DAI),分析PE50對小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的治療效果。PE50對仔豬腹瀉的藥效試驗：實驗分兩批進行。第一批選取自然發(fā)病仔豬60頭,分為6組,別按43.6mg/kg·bw、21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw、2.8mg/kg·bw的劑量灌胃給藥,第二批選取該豬場自然發(fā)病的腹瀉保育仔豬50頭,分為5組(具體分組情況見表二),分別按21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw、1.4mg/kg·bw的劑量灌胃給藥。對照組用慶大霉素注射液肌肉注射進行治療。PE50用藥組和對照組每天給藥一次,連續(xù)給藥7天,每記錄仔豬的精神狀況、采食情況和糞便,當(dāng)試驗仔豬排糞次數(shù)恢復(fù)正常,糞便成型,軟硬適中；精神、食欲恢復(fù)正常,即判定為治愈。統(tǒng)計各組仔豬痊愈天數(shù),分析PE50對仔豬腹瀉的藥效。結(jié)果1、PE50單次給藥急性毒性實驗：PE50的LD50為426.1mg/kg,毒性分級為中等毒。2、巴氏桿菌有和乙型溶血性鏈球菌對PE50中介敏感。3、PE-50對小鼠蓖麻油所致腹瀉的藥效試驗：各給藥組的稀便級較試驗Ⅲ組(模型對照組)低,且其中試驗Ⅳ組(PE-50高劑量組)與試驗Ⅲ組(模型對照組)有顯著差異(P<0.01),試驗V組(PE-50中劑量組)、試驗Ⅵ組(PE-50低劑量組)與試驗Ⅲ組(模型對照組)有差異(P<0.05)。4、PE-50對正常小鼠小腸推進運動功能影響的藥效試驗：PE50高劑量組、PE50中劑量組與正常對照組相比,有顯著差異,說明PE50對小腸小鼠小腸推進運動有促進作用。5、PE-50對小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎的藥效試驗：試驗組Ⅳ(PE-50高劑量組)與試驗組Ⅱ(模型組)有極顯著差異,而與試驗組Ⅰ(空白組)無顯著差異,說明PE-50極顯著地降低了小鼠的疾病活動指數(shù),說明PE-50對小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎有治療效果。試驗組Ⅵ(PE-50低劑量組)與試驗組Ⅱ(模型組)有顯著差異,與試驗組Ⅰ(空白組)無顯著差異。PE-50對小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎有治療效果。6、PE50對仔豬腹瀉的藥效試驗：綜合兩批實驗結(jié)果得出,PE-50在43.6mg/kg·bw、21.8mg/kg·bw、10.9mg/kg·bw、5.5mg/kg·bw的劑量使用時,均對仔豬腹瀉有好的治療效果。其中,PE-50在10.9mg/kg·bw的劑量使用時,相比其他PE-50試驗組,劑量較低、療效較好。結(jié)論以上實驗結(jié)果顯示,PE50對小鼠致病大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌所致細菌性腹瀉模型、小鼠蓖麻油致腹瀉模型、小鼠葡聚糖硫酸鈉所致結(jié)腸炎模型和仔豬