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文檔簡介
第二十章金免疫技術教學目標掌握膠體金免疫滲濾技術及免疫層析技術的基本原理及技術要點。熟悉膠體金免疫技術的方法學評價。了解金免疫技術試劑盒的組成。知識目標技能目標掌握金免疫技術的操作方法、正確判讀和分析結果。思政-素質(zhì)目標臨床免疫學思維、生物安全、質(zhì)控意識、責任意識。膠體金免疫滲濾技術的檢測原理、方法類型和關鍵技術。膠體金免疫層析技術的檢測原理、方法類型和關鍵技術。金免疫技術的方法學評價及臨床意義。本章要點膠體金免疫層析技術二三一膠體金免疫滲濾技術金免疫技術的評價與應用目錄免疫滲濾試驗始創(chuàng)于1985年,最初以酶作為標記物。20世紀90年代初金免疫滲濾技術得到了快速發(fā)展,用于檢測各種傳染病的抗體和腫瘤標志物等。目前臨床中用于檢測尿液HCG的“金標”早孕診斷試劑就是應用這種方法。一膠體金免疫滲濾技術將抗原或抗體點加在固相載體硝酸纖維素膜上,制成抗原或抗體包被的微孔濾膜并貼置于吸水材料上,依次在膜上滴加標本、免疫金及洗滌液等,液體很快滲入吸水材料中,陽性反應即在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。一、檢測原理二、方法類型雙抗體夾心法測抗原
間接法測抗體
膠體金反應板膠體金標記物洗滌液抗原參照品或抗體陽性對照品
三、關鍵技術(一)試劑盒組成1將反應板平放于實驗臺面上,于小孔內(nèi)滴加含待測抗原的標本1~2滴,待完全滲入,待測抗原與膜上的抗體反應而結合在膜上。2于小孔內(nèi)滴加膠體金標記抗體試劑1~2滴,待完全滲入,使膠體金標記抗體與結合在膜上的待測抗原反應。
(二)技術要點3于小孔內(nèi)滴加洗滌液2~3滴,待完全滲入,洗去未結合的膠體金標記抗體。4在膜中央有清晰的淡紅色或紅色斑點顯示者判定為陽性反應;反之則為陰性反應。斑點呈色
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