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文檔簡介

第二十二章

免疫組織化學檢驗技術知識目標1.掌握：免疫組化技術的定義、基本過程、抗原的修復方法（重難點），抗體的選擇和保存；酶標記抗體的免疫組化染色（直接、間接法）的原理，熒光免疫組化標本類型和保存。2.熟悉：免疫組化標本來源、固定于保存，結果判斷；非標記酶免疫組化的常見類型及原理、親和組織化學技術的定義及分類（重點）。3.了解：常見親和組織化學技術的原理、優(yōu)缺點及應用。能力目標掌握抗原的修復方法，免疫組化標本的采集、固定于保存、結果判斷。思政-素質目標責任心、質控、生物安全意識、臨床免疫學思維教學目標目錄概述一免疫組化技術基本知識二酶免疫組織化學檢驗技術三熒光免疫組織化學檢驗技術四親和組織化學檢驗技術五其他免疫組織化檢驗技術六

利用抗原抗體特異性結合的原理，先用熒光素標記已知抗體并以此作為探針，檢查細胞或組織內的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后，即會發(fā)出一定波長的熒光，進而對組織中的某種抗原進行定性、定位和定量分析。熒光免疫組織化學檢驗技術四一、標本制作

常見的臨床標本材料主要有組織、細胞和細菌三大類，按不同標本性質可制作涂片、印片或組織切片等。（一）載玻片和蓋玻片的處理載玻片和蓋玻片要厚薄均勻、潔凈及透光性好

（二）制片1．組織切片組織材料可制備成冰凍切片或石蠟切片。

2．印片組織材料也可制成印片。3．涂片細胞或細菌要制成涂片，涂片應薄且均勻。（三）標本的固定主要目的是：

1.防止細胞或切片從玻片上脫落

2.去除妨礙抗原抗體結合的類脂

3.便于保存。除活細胞外，其他標本應在染色前以適當的方式固定。

（四）標本片的保存固定好的標本片應盡快熒光染色檢查，如需保存，置-20℃下低溫干燥保存。二、熒光抗體標記及染色熒光抗體是熒光免疫技術的關鍵試劑，是將熒光素與特異性抗體通過共價鍵的方式結合而成。其制備過程通常包括抗體的標記、純化和鑒定三步。在已固定的標本上滴加經適當稀釋的熒光抗體，置于帶蓋的濕盒內，37℃溫育30min。檢測不耐熱抗原以4℃過夜為宜。溫育后充分洗滌、干燥、鏡檢。三、臨床應用

1.在自身免疫性疾病中的應用

2.各種病原微生物的快速檢查和鑒定

3.寄生蟲感染的診斷

4.白細胞

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