24.5 藥物過敏篩選實(shí)驗(yàn)講解

第二十四章

超敏反應(yīng)性疾病免疫學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)目標(biāo)掌握：激發(fā)試驗(yàn)的概念、類型與臨床；血清IgE的檢測(cè)方法、臨床意義與應(yīng)用評(píng)價(jià)熟悉：藥物過敏篩選實(shí)驗(yàn)技術(shù)類型及應(yīng)用了解：循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)技術(shù)能力目標(biāo)1.解釋激發(fā)試驗(yàn)的原理及正確結(jié)果判讀2.運(yùn)用ELISA和IBT檢測(cè)SIgE。思政-素質(zhì)目標(biāo)耐心、責(zé)任心、質(zhì)控意識(shí)和生物安全意識(shí)教學(xué)目標(biāo)1.激發(fā)試驗(yàn)的概念、類型與臨床應(yīng)用

2.血清IgE的檢測(cè)方法、臨床意義與應(yīng)用評(píng)價(jià)3.藥物過敏篩選實(shí)驗(yàn)技術(shù)類型及應(yīng)用4.循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)技術(shù)本章要點(diǎn)血清IgE檢測(cè)三目錄一超敏反應(yīng)概述二激發(fā)試驗(yàn)四免疫復(fù)合物檢測(cè)技術(shù)五藥物過敏篩選實(shí)驗(yàn)類型一、實(shí)驗(yàn)策略二、嗜堿性粒細(xì)胞組胺釋放試驗(yàn)三、人嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)五藥物過敏篩選實(shí)驗(yàn)藥物超敏反應(yīng)研究切入點(diǎn)以組胺為代表的介質(zhì)釋放檢測(cè)常以嗜堿性粒細(xì)胞為觀察模型變應(yīng)原刺激劑致嗜堿粒細(xì)胞釋放組胺，可以檢測(cè)出嗜堿性粒細(xì)胞的釋放能力，變應(yīng)原刺激劑可以特異性確定變應(yīng)原的類型一、組胺含量測(cè)定BHRT是變應(yīng)原刺激劑刺激純化、洗滌后的嗜堿性粒細(xì)胞懸液而后釋放化學(xué)介質(zhì)組胺，通過測(cè)定組胺的量來反映嗜堿性粒細(xì)胞的釋放能力

BHRT的結(jié)果可以從細(xì)胞釋放一定量的組胺所需要的變應(yīng)原濃度或在一定濃度的變應(yīng)原作用下細(xì)胞所釋放定量的組胺量來表達(dá)實(shí)驗(yàn)的靈敏度高，結(jié)果可靠，但價(jià)格較高二、嗜堿性粒細(xì)胞組胺釋放(basophil

histamine

release

test，BHRT)(humanbasophildegranulationtest，HBDT)三、人嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)嗜堿性粒細(xì)胞內(nèi)大量的嗜堿性顆粒，可被堿性染料阿新利藍(lán)染成藍(lán)色，易于辨認(rèn)和計(jì)數(shù)。當(dāng)加入過敏原或抗IgE抗體后，與結(jié)合在嗜堿性細(xì)胞表面的IgE結(jié)合，受體交聯(lián)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顆粒脫出，細(xì)胞不再著色。從染色細(xì)胞數(shù)的減少，可判斷脫顆粒的情況目前主要采用試管法體內(nèi)激發(fā)試驗(yàn)和體外抗體及釋放介質(zhì)檢測(cè)，有助于明確超敏反應(yīng)變應(yīng)原輔助診療。體內(nèi)激發(fā)試驗(yàn)存在風(fēng)險(xiǎn)，優(yōu)勢(shì)在于可以綜合反映體內(nèi)免疫狀態(tài)，可信度大體外試驗(yàn)檢測(cè)總IgE含量，作為過敏性疾病診斷的參考；檢測(cè)血清中特異性IgE含量幫助確定變應(yīng)原目前采用