孕前肥胖影響胎鼠長鏈多不飽和脂肪酸營養(yǎng)的研究

孕前肥胖影響胎鼠長鏈多不飽和脂肪酸營養(yǎng)的研究目的:本研究選用高脂飼料喂養(yǎng)建立孕前肥胖鼠模型,通過觀察母鼠肝臟去飽和酶的表達情況和胎盤的發(fā)育情況及胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白的表達情況,探討孕前肥胖如何影響胎鼠長鏈多不飽和脂肪酸營養(yǎng)及相關(guān)機制。方法:選用4周齡C57BL/6J小鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。設(shè)普通飼料喂養(yǎng)的對照組(CON)和高脂飼料喂養(yǎng)的高脂組(HFD),10周后,根據(jù)小鼠體重的增長情況將高脂飼料喂養(yǎng)組分為肥胖組(DIO)、超重組(DIW)和肥胖抵抗(DIR)組。小鼠受孕后,高脂組繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料,對照組繼續(xù)喂養(yǎng)普通飼料,記錄各組小鼠孕期食物攝入情況。于孕18天給予小鼠麻醉處理,取母鼠血液、肝臟,記錄母鼠肝重;剝離胎鼠和胎盤并干燥,測量胎鼠身長和胎盤直徑,稱量胎鼠體重和胎盤重;收集胎血。血液離心后分離為血漿和紅細胞。采用qRT-PCR檢測母肝組織中去飽和酶(FADS1,FADS2)的mRNA表達情況和胎盤組織中炎性因子IL-1β和TNF-α及胎盤轉(zhuǎn)運蛋白(CD36、FATP4和FABPpm)的mRNA表達水平。采用WesternBlot的方法檢測母肝組織中去飽和酶(FADS1,FADS2)的蛋白表達情況和胎盤組織中炎性因子IL-1β和TNF-α及胎盤轉(zhuǎn)運蛋白(CD36、FATP4和FABPpm)的蛋白表達水平。采用GC-MS測量母血及胎血紅細胞膜中長鏈多不飽和脂肪酸水平。結(jié)果:CON組與HFD組小鼠體重在高脂飼料喂養(yǎng)兩周后出現(xiàn)差異(t=2.248,P=0.01)。高脂喂養(yǎng)10周后,根據(jù)小鼠體重增長情況,將HFD組小鼠體重高于CON組(n=12)小鼠平均體重20%、10%~20%之間和10%以內(nèi)的小鼠分別記為DIO組(n=12)、DIW組(n=15)和DIR組(n=12)。四組小鼠體重差異具有統(tǒng)計學意義(F=58.090,P<0.01),DIR組小鼠的平均體重與CON組無差異(P=0.448),DIW組和DIO組小鼠的平均體重均顯著高于CON組和DIR組,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。相比于CON組和DIR組,DIW組和DIO組的胎體比均明顯下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與CON組相比,未發(fā)現(xiàn)DIR組、DIW組和DIO組的FADS1的蛋白表達水平的改變(P>0.05);與CON組相比,DIW組和DIO組FADS2蛋白表達水平顯著下調(diào)(P<0.01);與DIR組相比,DIO組FADS2蛋白表達水平有下調(diào)趨勢(P<0.01)。與CON組和DIR組相比,DIW組和DIO組FATP4和CD36蛋白的表達水平顯著下調(diào)(P<0.01)。與CON組相比,僅發(fā)現(xiàn)DIW組和DIO組FABPpm蛋白的表達水平顯著下調(diào),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。相對于CON組和DIR組,DIW組和DIO組的IL-1β、TNF-α蛋白表達水平有顯著上調(diào),差異具有統(tǒng)計學意義。通過對胎鼠紅細胞膜中LC-PUFAs進行檢測發(fā)現(xiàn),與DIR組相比,DIO組胎鼠紅細胞膜中DHA水平顯著降低(P<0.05);通過對母鼠紅細胞膜中LC-PUFAs水平檢測發(fā)現(xiàn),DIW組母鼠紅細胞膜中ALA、DHA和EPA含量較CON組顯著上升(P<0.05);DIO組母鼠紅細胞膜中EPA含量較DIW組顯著下降(P<0.05)。結(jié)論:孕前肥胖引起了去飽和酶FADS2蛋白表達水平的下調(diào)。此外,孕前肥胖可能通過引起胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運體(CD36,FATP4和FABPpm)的蛋白表達水平下調(diào)及胎盤炎性因子(IL-1β和TNF-α)的蛋白表達水平上調(diào)進而影響子代LC-PUFAs營養(yǎng)水平。因此,我們推測孕前肥胖影響子代LC-PUFAs營養(yǎng)的原因為肥