滅活益生菌粉

1滅活益生菌粉本文件規(guī)定了滅活益生菌粉的術(shù)語和定義、產(chǎn)品分類和命名、生產(chǎn)工藝、技術(shù)要求和檢驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯存等內(nèi)容。本文件適用于滅活益生菌粉的加工和銷售。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過對文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新的版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志GB1886.187食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑山梨糖醇和山梨糖醇液GB2760食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)GB2762食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量GB4789.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.5食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗志賀氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB4789.35食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗乳酸菌檢驗GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定GB5009.11食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定GB7718食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則GB/T8884玉米淀粉GB19644食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)脫脂奶粉GB/T20880食用葡萄糖GB/T20881低聚異麥芽糖GB/T20884麥芽糊精GB/T23528低聚果糖GB25533食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑果膠GB25541食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑聚葡萄糖GB28050食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)包裝食品營養(yǎng)標(biāo)簽通則GB28307食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑麥芽糖醇和麥芽糖醇液GB30616食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品用香精GB/T35545低聚木糖2QB/T4575食品加工用乳酸菌3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1滅活益生菌粉可用于食品的益生菌菌種經(jīng)原輔料滅菌檢驗、冷卻、發(fā)酵、滅活、離心、干燥、混合調(diào)配等工藝加工，可添加糖或甜味劑等一種或幾種食品原輔料和食品添加劑。4生產(chǎn)工藝原輔料滅菌檢驗→冷卻→加入菌種→發(fā)酵→滅活→離心→提取→包被→干燥→混合調(diào)配→包裝→檢驗→入庫。5技術(shù)要求和檢驗方法5.1原輔料5.1.1青春雙歧桿菌、動物雙歧桿菌（乳雙歧桿菌）、兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、長雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、約氏乳桿菌、副干酪乳桿菌、植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、唾液乳桿菌、嗜熱鏈球菌的要求參見《可用于食品的菌種名單》。5.1.2腸膜明串珠菌腸膜亞種的要求參見《關(guān)于食品中使用菌種標(biāo)簽標(biāo)示有關(guān)問題的復(fù)函衛(wèi)辦監(jiān)督函〔2013〕367號的》。5.1.3乳酸片球菌、戊糖片球菌的要求參見《關(guān)于批準(zhǔn)殼寡糖等6種新食品原料的公告（2014年第6號）》。5.1.4清酒乳桿菌的要求參見《關(guān)于批準(zhǔn)番茄籽油等9種新食品原料的公告（2014年第20號）》。5.1.5玉米淀粉應(yīng)符合GB/T8884的規(guī)定。5.1.6脫脂奶粉應(yīng)符合GB19644的規(guī)定。5.1.7食用葡萄糖應(yīng)符合GB/T20880的規(guī)定。5.1.8麥芽糊精應(yīng)符合GB/T20884的規(guī)定。5.1.9低聚果糖應(yīng)符合GB/T23528的規(guī)定。5.1.10低聚木糖應(yīng)符合GB/T35545的規(guī)定。5.1.11果膠應(yīng)符合GB25533的規(guī)定。5.1.12抗性糊精應(yīng)符合衛(wèi)生部2012年第16號公告的要求。5.1.13低聚異麥芽糖應(yīng)符合GB/T20881的規(guī)定。5.1.14聚葡萄糖應(yīng)符合GB25541的規(guī)定。5.1.15麥芽糖醇應(yīng)符合GB28307的規(guī)定。5.1.16山梨糖醇應(yīng)符合GB1886.187的規(guī)定。35.2感官要求產(chǎn)品的感官要求應(yīng)符合表2的規(guī)定。表1感官指標(biāo)5.3理化要求理化指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。表2理化指標(biāo)水分/(g/100g)≤總砷(以As計)/(mg/5.4有效成分指標(biāo)有效成分指標(biāo)應(yīng)符合表4的規(guī)定。表3有效成分指標(biāo)5.5微生物指標(biāo)微生物指標(biāo)應(yīng)符合表5的規(guī)定。表5微生物指標(biāo)大腸菌群/（CFU/g）酵母和霉菌/（CFU/g）注：n為同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)；c為最大可允許超出m值的樣品數(shù)；m為45.6凈含量及允許短缺量應(yīng)符合國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局[2005]第75號令《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。5.7生產(chǎn)加工過程衛(wèi)生要求應(yīng)符合GB14881的規(guī)定。6檢驗規(guī)則6.1組批由同一次投料、同一班次、同一條生產(chǎn)線生產(chǎn)的包裝完好的產(chǎn)品為一批。6.2抽樣自同一組批產(chǎn)品中，按檢驗項目的要求隨機(jī)抽取不得少于8袋（瓶）或不得少于500g樣品。6.3出廠檢驗6.3.1每批產(chǎn)品出廠前生產(chǎn)單位都應(yīng)按本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行出廠檢驗，檢驗合格并附合格證的產(chǎn)品方可出廠。6.3.2出廠檢驗項目包括感官要求、水分、滅活益生菌數(shù)、大腸菌群、酵母和霉菌、凈含量。6.4型式檢驗型式檢驗項目包括5.2、5.3、5.4、5.5、5.6的全部項目。正常生產(chǎn)時每半年進(jìn)行一次，當(dāng)出現(xiàn)下列情況之一時亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗：——正式生產(chǎn)后，原料來源發(fā)生較大變化，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時；——出廠檢驗結(jié)果與上一次型式檢驗結(jié)果有較大差異時；——國家食品安全監(jiān)管部門提出要求時。6.5判定規(guī)則果為準(zhǔn)。若復(fù)檢結(jié)果仍有不合格項，則判定該批產(chǎn)品不合格。微生物指標(biāo)不得復(fù)檢。7標(biāo)簽、包裝、運輸和貯存7.1標(biāo)簽、標(biāo)志7.1.1產(chǎn)品的標(biāo)簽應(yīng)符合GB7718和GB28050的規(guī)定。7.1.2運輸包裝的儲運圖示標(biāo)志應(yīng)標(biāo)明：產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)公司名稱及地址、凈含量/規(guī)格、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期及符合GB/T191的包裝儲運圖示標(biāo)志的有關(guān)規(guī)定。7.2包裝7.2.1包裝材料和容器應(yīng)符合相應(yīng)的包裝材料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)及國家有關(guān)規(guī)定。7.2.2包裝應(yīng)干燥、清潔、無異味、無毒無害。57.3運輸7.3.1運輸工具應(yīng)清潔、干燥、無異味、無污染；運輸時應(yīng)防雨、防潮、防暴曬。7.3.2不得與有毒、有污染、有異味的物品混裝、混運。7.3.3裝卸時應(yīng)輕搬輕放，不得重壓。6.4貯存應(yīng)封好保存，并且盡快使用完畢。7.4保質(zhì)期在符合上述包裝、運輸、貯存條件下，本產(chǎn)品自生產(chǎn)日期起保質(zhì)期為36個月。6（規(guī)范性）顯微計數(shù)法A.1基本原理A.1.1微生物細(xì)胞顯微計數(shù)法中的血球計數(shù)板---血球計數(shù)法或細(xì)菌計數(shù)板---細(xì)菌計數(shù)法對樣品中的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，以檢測樣品中滅活乳酸菌粉總細(xì)胞數(shù)含量。A.1.2利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法的優(yōu)點是直觀、快速。將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的（0.1mm3），所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和，故又稱為總菌體計數(shù)法。A.1.3血球計數(shù)板，通常是一塊特制的載玻片，其上由四條槽構(gòu)成三個平臺（見圖A.1）。中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺上各刻有一個方格網(wǎng)，每個方格網(wǎng)共分九個大方格，中間的大方格即為計數(shù)室，微生物的計數(shù)就在計數(shù)室中進(jìn)行。A.1.4計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個大方格分成16個中方格，而每個中方格又分成25個小方格；另一種是一個大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成16個小方格。但無論是哪種規(guī)格的計數(shù)板，每一個大方格中的小方格數(shù)都是相同的，即16×25=400小方格。A.1.5每一個大方格邊長為1mm，則每一大方格的面積為1mm2，蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm，所以計數(shù)室的容積為0.1mm3。A.1.6在計數(shù)時，通常數(shù)五個中方格的總菌數(shù)，然后求得每個中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一個大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成1mL菌液中的總菌數(shù)。A.1.7下面以一個大方格有25個中方格的計數(shù)板為例進(jìn)行計算：——設(shè)五個中方格中細(xì)胞總數(shù)為A，菌液（樣品）稀釋倍數(shù)為B，那么，一個大方格中的總菌數(shù)——因1mL=1cm3=1000mm3（即0.1mm3中的細(xì)胞總數(shù)）為A/5——同理，如果是16個中方格的計數(shù)板，設(shè)五個中方格的細(xì)胞總數(shù)為A＇，菌液（樣品）稀釋倍A.2器材與藥品血球計數(shù)板、電子天平（有效位數(shù)0.01g）、顯微鏡（帶40倍物鏡和油鏡）、載玻片、蓋玻片、無菌毛細(xì)管、無菌蒸餾水。7圖A.1血球計數(shù)板及方格A.3計數(shù)步驟A.3.1制備細(xì)胞懸液：視待測菌懸液濃度，取1g菌粉樣品，加入100ml無菌水震蕩混勻，進(jìn)行10倍梯度稀釋，稀釋程度以每小格的菌數(shù)清晰可數(shù)為度。A.3.2鏡檢計數(shù)室。在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢，若有污物，則需清洗、吹干后進(jìn)行計數(shù)。加菌懸液樣品：將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無菌的毛細(xì)滴管吸取少許搖勻的菌懸液，從計數(shù)板中間平臺兩側(cè)的溝槽內(nèi)滴一小滴，讓菌液沿縫隙靠毛細(xì)滲自動進(jìn)入計數(shù)室，用吸水紙吸去多余水液，計數(shù)室內(nèi)不能有氣泡，靜置5min～10min，使細(xì)胞沉降至計數(shù)板上。A.3.3顯微鏡計數(shù)。將血球板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩(wěn)，先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計數(shù)。A.3.4計數(shù)時為保證計數(shù)的準(zhǔn)確性并避免重復(fù)計數(shù)和漏記，在計數(shù)時，對沉降在格線上的細(xì)胞的統(tǒng)計應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)定。如菌體位于大方