GB/T 4789.2-2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定_第1頁
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代替GB/T4789.2—1994食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定Detectionofaerobicbacterialcount2004-01-01實施778 按照GB/T1.1—2000對標(biāo)準(zhǔn)文本格式和文字進(jìn)行修改。 9食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中菌落總數(shù)的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中菌落總數(shù)的測定。下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有1mL(g)檢樣中所含菌落的總數(shù)。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果,只包括一群在營養(yǎng)瓊脂上生長菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志,也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動4.1冰箱:0℃~4℃。4.4均質(zhì)器或滅菌乳缽。4.5架盤藥物天平:0g~500g,精確至0.54.6菌落計數(shù)器。4.7放大鏡4×。5培養(yǎng)基和試劑5.1營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:按GB/T4789.28—2003中4.7規(guī)定。5.2磷酸鹽緩沖液:按GB/T4789.28—2003中3.22規(guī)定。5.30.85%滅菌生理鹽水。5.475%乙醇。菌落總數(shù)的檢驗程序見圖1。選擇2個~3個適宜稀釋度7.1.1以無菌操作將檢樣25g(mL)剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后,最好置均質(zhì)器中以8000r/min~10000r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。7.1.2用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,沿管壁徐徐注人含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液),振搖試管,混合均勻,做成1:100的稀釋液。7.1.3另取1mL滅菌吸管,按上條操作方法,做10倍遞增稀釋,如此每遞增稀釋一次,即換用1支7.1.4根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計,選擇2個~3個適宜稀釋度,分別在做10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌培養(yǎng)皿內(nèi),每個稀釋度做兩個培7.1.5稀釋液移人培養(yǎng)皿后,應(yīng)及時將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃水浴保溫)注入培養(yǎng)皿約15mL,并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使混合均勻。同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液滅菌培養(yǎng)GB/T4789.2—2003出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。選取菌落數(shù)在30~300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個稀釋度使用兩個平板,應(yīng)采用兩后乘2以代表全皿菌落數(shù)。平板內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為7.3.2.1應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30~300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例1).7.3.2.2若有兩個稀釋度,其生長的菌落數(shù)均在30~300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,應(yīng)報告其平均數(shù);若大于2則報告其中較小的數(shù)字(見表1中例2及例3)。7.3.2.3若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例4)。7.3.2.4若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例5)。7.3.2.5若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋信數(shù)報告之(見表1中例6)。7.3.2.6若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例7)。表1稀釋度選擇及菌落數(shù)報告方式稀釋液及菌落數(shù)兩稀釋液之比菌落總數(shù)/報告方式/[cfu/g(mL)]1多不可計16000或1.6×10?2多不可計38000或3.8×1

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