【NO處理對(duì)果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響探究5000字（論文）】

PAGE9NO處理對(duì)果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響研究TOC\o"1-3"\h\u134191.緒論 5235252.NO處理概述 634843.NO處理對(duì)海紅果果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響 6295563．1試驗(yàn)材料 6139883．2試驗(yàn)方法 776453.3測(cè)定方法： 7268823.3.1可溶性蛋白質(zhì)的測(cè)定 729683.3.2可溶性糖含量的測(cè)定 8175313.3.3腐爛率的測(cè)定 9291363.3.4總糖，總酸，VC的測(cè)定 10297023.4結(jié)論 10225844.NO處理對(duì)果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響 1137954.1NO可延緩果蔬成熟衰老 1157284.2NO延緩果蔬成熟衰老的機(jī)理及影響 1216078參考文獻(xiàn) 121.緒論采后果蔬保鮮最有效的方法就是低溫冷藏。適宜的低溫可以顯著抑制果蔬微生物生長(zhǎng)，延緩果蔬組織衰老，延長(zhǎng)貯藏期。一般而言，貯藏溫度越低，貯藏時(shí)間也越長(zhǎng)，不過(guò)也有前提條件，必須是在在適合果蔬貯藏的安全溫度范圍內(nèi)。例如，某些果蔬屬于低溫敏感型，當(dāng)溫度在10~12℃以下的時(shí)候，就會(huì)發(fā)生凍害。凍害對(duì)果蔬影響很大，它會(huì)造成果實(shí)抗病性和耐藏性下降，損害到果蔬的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，削弱果蔬本身的抗病能力，使果蔬的質(zhì)量變差或者腐爛。這對(duì)食品生產(chǎn)公司來(lái)講是大大不利的。Leshem等在1996[1]報(bào)道植物體內(nèi)可以合成NO，后來(lái)人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它對(duì)植物的光形態(tài)建成、呼吸作用[2]、根和葉片的生長(zhǎng)發(fā)育、氣孔運(yùn)動(dòng)、種子萌發(fā)、的生理過(guò)程都有影響。NO延緩果蔬的成熟衰老的原因是通過(guò)抑制內(nèi)源乙烯的合成或降低組織對(duì)乙烯的敏感度，抑制延緩果實(shí)硬度及VC的下降、果實(shí)水分的散失、可溶性固形物的增加[3]，且在成熟果實(shí)中內(nèi)源NO的含量低于還沒(méi)有成熟果實(shí)，隨著果實(shí)的成熟，乙烯含量逐漸升高內(nèi)源NO含量逐漸降低，而用外源NO處理獼猴桃、蘋(píng)果、香蕉、甜橙后，內(nèi)源NO量成熟果實(shí)均顯著低于未成熟果實(shí)。近年來(lái)延緩果蔬衰老等問(wèn)題受到人們的廣泛關(guān)注，NO對(duì)果蔬冷藏保鮮、延緩衰老的研究越來(lái)越多。[4]本文概述了NO處理對(duì)海紅果果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響，測(cè)量海紅果的Vc含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、腐爛率四個(gè)指標(biāo)，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)NO在果實(shí)保鮮上的大規(guī)模商業(yè)應(yīng)用提供理論依據(jù)。2.NO處理概述一氧化氮(nitricoxide，NO)是一種脂溶性的氣體小分子，具有水溶性，近年來(lái)被認(rèn)為是一種在植物中普遍存在的信號(hào)分子，它參與植物的氣孔運(yùn)動(dòng)、光形態(tài)建成、呼吸作用、種子萌發(fā)、根和葉片的生長(zhǎng)發(fā)育、果實(shí)蔬菜等組織的成熟衰老等多種生理代謝過(guò)程。[5]3.NO處理對(duì)海紅果果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響3．1試驗(yàn)材料“府谷海紅果”，系指產(chǎn)于陜西省府谷縣海紅果，中國(guó)國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品。海紅果是陜晉蒙接壤地帶所獨(dú)有的特產(chǎn)，府谷縣正位于這一區(qū)域，海紅果果實(shí)色澤鮮艷、酸甜可口、營(yíng)養(yǎng)豐富，含鈣量為水果之冠，每公斤含鈣2780毫克，素有“鈣王”之稱。它具有健脾胃、增食欲、助消化之功效，鮮果收購(gòu)價(jià)為25元/公斤左右。[6]用海紅果制成的果脯、果丹皮、海紅干、罐頭、糖葫蘆等獨(dú)具特色、別有風(fēng)味。2016年1月28日采收并于當(dāng)天運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。選擇大小、成熟度基本一致，無(wú)病蟲(chóng)害，無(wú)機(jī)械損傷的果實(shí)，在5℃預(yù)冷12h后進(jìn)行處理。3．2試驗(yàn)方法用無(wú)氧重蒸水分別配制0(對(duì)照)，1O，25和50p~mol·L的SNP溶液，共4個(gè)處理，3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)海紅果1500g，室溫浸泡2h，由于SNP釋放NO速度較慢，本試驗(yàn)參考朱樹(shù)華等(2005)的方法，保證海紅果實(shí)能夠充分吸收NO，但長(zhǎng)時(shí)間浸泡會(huì)傷害海紅果。[7]待果實(shí)表面水分晾干后單層隨機(jī)擺放在白瓷盤(pán)中，用保鮮膜封口，在(0±0．5)℃，相對(duì)濕度90％～95％的冷庫(kù)貯藏。貯藏期間每隔4天取樣測(cè)定海紅果的可溶性蛋白含量、Vc含量、可溶性糖含量、腐爛率四個(gè)指標(biāo).3.3測(cè)定方法：3.3.1可溶性蛋白質(zhì)的測(cè)定取海紅果密封于玻璃瓶中，玻璃瓶放在減壓條件下，用氮?dú)庵脫Q其中的空氣，使玻璃瓶達(dá)到相對(duì)無(wú)氧狀態(tài)；注入一定體積的NO氣體，濃度分別為0．1、0．5、1．0pmo1．L。f以未注入NO氣體的為對(duì)照)；熏蒸3h后，將海紅果均勻播種在盛有干凈濕砂的瓷盤(pán)中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光照強(qiáng)度300—350pmol-m-2．S。(光照l(shuí)4h．d一，6：00~20：00)，晝／夜溫度為20／20℃，培養(yǎng)室中相對(duì)濕度為70％。第10天開(kāi)始逐日統(tǒng)計(jì)。所有試驗(yàn)均重復(fù)3次，結(jié)果所列的數(shù)據(jù)是3次重復(fù)的平均值。采用SPSS13．0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用ANOVA進(jìn)行鄧肯氏多重差異分析(P<0．05)?？扇苄缘鞍踪|(zhì)圖1NO對(duì)海紅果可溶性蛋白質(zhì)含量的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果：NO處理的蒜苗中可溶性蛋白質(zhì)含量顯著高于未經(jīng)NO處理的。0．5gmo1．LNO處理的最高，超過(guò)此濃度則下降。3.3.2可溶性糖含量的測(cè)定切取樣品0.5g置入研缽內(nèi)，加入蒸餾水和少量石英砂研磨至勻漿，將勻漿連同殘?jiān)黄鸲ㄈ葜?00mL的容量瓶中，室溫下靜置30～60min（每隔5min混勻一次），或離心或過(guò)濾，棄去殘?jiān)?。取干凈試管若干支，分別加入樣液1ml和蒽酮試劑5ml，搖勻后于沸水浴中，加熱10min，冷卻后于620nm下測(cè)定吸光值（以標(biāo)準(zhǔn)曲線的空白為零點(diǎn)），并記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出每個(gè)處理每1g樣品所含有的可溶性糖含量。結(jié)果與計(jì)算C＝AN/WC.樣品可溶性糖量（ug/g）；A.標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到的可溶性糖量（ug）；N.稀釋倍數(shù)；W.樣品重量（g）。注意事項(xiàng)：研磨要充分，否則提取樣品的糖含量會(huì)偏低；研磨后靜置的過(guò)程要求每隔一段時(shí)間將容量瓶上下顛倒混勻這樣可以使糖充分地提取至溶液中；要求嚴(yán)格掌握反應(yīng)的時(shí)間和溫度；比色前，需冷卻才能比色，否則溫度會(huì)影響到比色的結(jié)果；蒽酮試劑不穩(wěn)定，易被氧化變成褐色，所以一般為當(dāng)天配置；蒽酮試劑的配制：稱取0.2g蒽酮溶于100ml98%濃硫酸中圖2NO對(duì)海紅果可溶性糖含量的影響在果實(shí)品質(zhì)的諸多因素中，含糖量對(duì)口感的影響很大，因此也是非常重要的因素。[8]含糖量不僅左右著風(fēng)味的好壞，而且還是生成維生素、類胡蘿卜素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)原料，因此改善果實(shí)品質(zhì)一定要注重提高含糖量。葡萄糖、蔗糖、果糖是果實(shí)中主要的可溶性糖，果實(shí)的甜度影響著糖的種類。在海紅果中，果糖是主要的可溶性糖，葡萄糖含量先下降而后增加，蔗糖含量逐漸增加。而海紅果屬于糖直接積累型果實(shí)，光合產(chǎn)物輸入果實(shí)僅在果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育早期有淀粉的積累，其余均以可溶性糖的形式輸入果實(shí)并貯藏于液泡中。在本試驗(yàn)中，海紅果果實(shí)的葡萄糖、果糖和麥芽糖含量逐漸降低，蔗糖含量呈先上升后下降的趨勢(shì)，而ClO2和NO處理可以延緩海紅果果實(shí)貯藏過(guò)程中葡萄糖、蔗糖和果糖含量的降低，使海紅果果實(shí)保持較好品質(zhì)。這可能是由于ClO2和NO處理抑制了海紅果果實(shí)采后單糖的積累與轉(zhuǎn)化，使葡萄糖、蔗糖和果糖的含量高于對(duì)照。3.3.3腐爛率的測(cè)定以海紅果果實(shí)表面出現(xiàn)病斑作為果實(shí)腐爛的判別依據(jù)。按果實(shí)腐爛面積大小將果實(shí)劃分為4級(jí)，0級(jí)：無(wú)腐爛；1級(jí)：果面有1～3個(gè)小腐爛斑點(diǎn)；2級(jí)：腐爛面積占果實(shí)面積的25％～50％；3級(jí)：腐爛面積大于果實(shí)面積的50％。按下式計(jì)算腐爛指數(shù)：腐爛指數(shù)=∑[(腐爛級(jí)別×該級(jí)果實(shí)數(shù))／(總果實(shí)數(shù)×最高腐爛級(jí)別)]×100％圖3NO對(duì)海紅果腐爛率的影響經(jīng)過(guò)16天貯藏后4個(gè)處理的海紅果果實(shí)都出現(xiàn)腐爛，高濃度NO(50I~mol·L)處理的果實(shí)腐爛指數(shù)與對(duì)照之間差異不顯著，10和25[zmol·L處理的腐爛指數(shù)均顯著低于對(duì)照(P<0．05)，但以25p~mol·L處理的腐爛指數(shù)最低，僅為對(duì)照果實(shí)的51．3％，說(shuō)明NO處理能夠抑制海紅果的腐爛，但抑制效果與處理濃度有關(guān)，高濃度NO處理可能對(duì)海紅果果實(shí)產(chǎn)生一定程度的傷害。3.3.4總糖，總酸，VC的測(cè)定海紅果壓榨取汁，經(jīng)活性炭脫色后，分別用蒽酮比色法和NaOH滴定法測(cè)定果汁中的總糖(以葡萄糖計(jì)量)和總酸(以檸檬酸計(jì)量)含量維生素C：用2，6一二氯靛酚法測(cè)定，含量以mg·(100g)-1Fw表示。圖4NO對(duì)海紅果總糖，總酸，VC含量的影響果實(shí)中總糖、總酸和維生素c的含量是影響風(fēng)味和品質(zhì)的主要因素之一。如表1所示：隨著貯藏進(jìn)程，海紅果果實(shí)的總糖、總酸和維生素c含量逐漸下降。貯藏前4天，NO處理對(duì)總糖、總酸和維生素C含量變化無(wú)顯著影響，而在第8天NO處理果實(shí)的總糖、總酸和維生素c含量顯著高于對(duì)照，尤其25p~mol·L處理的總糖、總酸和維生素C含量最高。貯藏末期各處理果實(shí)的總糖、總酸和維生素C含量無(wú)顯著差異。3.4結(jié)論(1)本試驗(yàn)用不同濃度NO對(duì)海紅果低溫貯藏。發(fā)現(xiàn)海紅果的貯藏需要合適的濃度?？娠@著抑制海紅果采后硬度的下降,取得了很好的貯藏效果。同時(shí)突破了無(wú)氧條件處理的限制,進(jìn)一步證實(shí)了NO大規(guī)模的商業(yè)應(yīng)用的可行性。(2)NO處理可抑制可滴定酸含量、Vc含量及可溶性固形物含量的變化,一定程度上緩解了海紅果貯藏過(guò)程中果實(shí)品質(zhì)的劣變。(3)NO處理可降低海紅果貯藏期間的呼吸速率和減少乙烯釋放量。其中對(duì)照在第7d出現(xiàn)呼吸高峰,10μL/L外源NO處理的果實(shí)呼吸速率逐漸下降,無(wú)呼吸高峰出現(xiàn);處理果乙烯高峰推遲2周出現(xiàn),且乙烯產(chǎn)率降低了37.57%。(4)10μL/LNO處理提高了果實(shí)中SOD、POD、CAT保護(hù)酶的活性,抑制了氧氣含量的增加,降低了MDA含量和相對(duì)膜透性,延緩了果實(shí)的衰老。4.NO處理對(duì)果實(shí)儲(chǔ)藏性的影響果蔬成熟衰老是一種復(fù)雜的生理生化過(guò)程?？寡趸赶到y(tǒng)活性的下降和喪失，果實(shí)自身活性氧代謝的失調(diào)會(huì)積累活性氧，誘導(dǎo)膜脂中不飽和脂肪酸發(fā)生過(guò)氧化作用，造成膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量和細(xì)胞膜透性的增加，加速衰老過(guò)程。NO作為一種自由基，不僅可以調(diào)節(jié)與活性氧代謝密切相關(guān)的酶活性，而且可以與活性氧直接發(fā)生復(fù)合反應(yīng)，從多方面多層次地調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。4.1NO可延緩果蔬成熟衰老NO可調(diào)控植物的成熟和衰老[10]。目前，很多研究顯示，NO和它的衍生物（N2O）通過(guò)抑制乙烯合成、延緩組織衰老進(jìn)程來(lái)提高果蔬貯藏過(guò)程中抵御逆境的能力，增加在超市貨架上存放的時(shí)間，并改善果蔬采后貯藏的品質(zhì)。20μL/L的NO處理可顯著維持低的花青素和高的酚含量、抑制柿子PAL和PPO的活性、延緩維生素C含量的降低，保鮮效果很好。NO處理可以保護(hù)酶的活性,提高CAT、SOD、POD和APX等，降低H2O2、O2·等活性氧的積累。同時(shí),NO處理還可以提高果實(shí)組織中ASA和GSH的含量,從而減緩活性氧自由基累積引的膜透性的升高以及MDA的大量產(chǎn)生。NO處理對(duì)貯藏中烯釋放量的影響中可以看出,剛剛采摘的果實(shí)內(nèi)活性氧含量較低,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)、果實(shí)的衰老,過(guò)實(shí)惠大量產(chǎn)生乙烯，同時(shí)果實(shí)的呼吸速率升高,產(chǎn)生大量活性氧,產(chǎn)生大量活性氧又反過(guò)來(lái)促進(jìn)合成乙烯。NO可以通過(guò)調(diào)控ACC氧化酶的輔助因子(抗壞血酸和Fe2+)以及ACC合成酶的活性調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素而抑制乙烯的合成,從而間接調(diào)控果實(shí)中活性氧的含量,延緩果實(shí)的衰老。由于NO獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì),它可作用于多種含離子的蛋白，也可以與H2O2、O2·反應(yīng),因而可調(diào)節(jié)CAT、SOD、APX等酶的活性;此外,它還可以抑制活性氧的產(chǎn)生，誘導(dǎo)交替氧化酶基因(AOX)的表達(dá)。因此，NO能作為信號(hào)分子誘導(dǎo)抗氧化酶基因的表達(dá),提高組織的抗氧化能力;也可能直接清除H2O2、O2·,阻斷包括脂質(zhì)過(guò)氧化在內(nèi)的ROS參與的傷害反應(yīng);同時(shí),NO可調(diào)控基因表達(dá),作用于鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(cGC)及其相關(guān)信號(hào)途徑,間接地提高組織的抗氧化能力,響應(yīng)組織衰老脅迫,防止膜脂過(guò)氧化,抑制活性氧的累積,從而保護(hù)原生質(zhì)體和細(xì)胞器的完整性及區(qū)隔化,促進(jìn)保鮮，延緩果蔬的衰老;NO也可能通過(guò)調(diào)控果實(shí)對(duì)其的敏感度以及果實(shí)中乙烯的生物合成而延長(zhǎng)果蔬的保鮮期。[11]4.2NO延緩果蔬成熟衰老的機(jī)理及影響NO對(duì)果蔬的作用巨大。一方面，低濃度的NO能迅速隔離脂質(zhì)自由基和超氧陰離子，誘導(dǎo)抗氧化酶基因的表達(dá)，消除包括脂質(zhì)過(guò)氧化在內(nèi)的活性氧參與的各種傷害效應(yīng)，保護(hù)了果蔬；另一方面，超氧陰離子與高濃度的NO相互作用生成大量的過(guò)氧亞硝酸陰離子，超氧陰離子質(zhì)子化再形成具有強(qiáng)氧化性的過(guò)氧亞硝酸，破壞了果蔬的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。乙烯也可以調(diào)控組織中NO的水平，作為一種調(diào)節(jié)物質(zhì)。在果實(shí)保持新鮮延緩衰老過(guò)程中，NO或乙烯的單獨(dú)作用并不如內(nèi)源NO與乙烯比值的大小重要?？梢?jiàn)NO可調(diào)節(jié)植物內(nèi)源環(huán)化核苷酸的水平，通過(guò)調(diào)控乙烯的生物合成，多種途徑參與植物組織的成熟和衰老調(diào)控，如NO通過(guò)自己的信號(hào)傳遞途徑而誘導(dǎo)新的蛋白產(chǎn)生，不與乙烯受體結(jié)合，抑制乙烯受體的轉(zhuǎn)錄，從而影響乙烯信號(hào)的傳遞，這還有待證明。[12]此外，有關(guān)NO在乙烯的啟動(dòng)及合成中的作用機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究證明。參考文獻(xiàn)[1]周春麗,鐘賢武,蘇虎,呂玲琴,范鴻冰.一氧化氮對(duì)果蔬采后保鮮機(jī)理的研究進(jìn)展[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,10:1954-1957.[2]丹陽(yáng),吳成勇.一氧化氮(NO)在處理果蔬過(guò)程中的降解規(guī)律研究[J].食品科學(xué),2009,04:268-272.[3]李順民,明建,