內(nèi)含子miRNA反饋調(diào)節(jié)其宿主基因表達(dá)和功能的研究的開題報(bào)告

內(nèi)含子miRNA反饋調(diào)節(jié)其宿主基因表達(dá)和功能的研究的開題報(bào)告一、研究背景和意義在人類基因組中，大約50%的基因具有內(nèi)含子miRNA（miRNA）序列。miRNA是一類長(zhǎng)約20-22個(gè)核苷酸的非編碼RNA分子，能通過(guò)靶向mRNA的3'非翻譯區(qū)域進(jìn)行調(diào)節(jié)，并在細(xì)胞中廣泛參與基因表達(dá)和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等生命活動(dòng)。miRNA的表達(dá)調(diào)控機(jī)制已經(jīng)得到廣泛的研究，然而，對(duì)于內(nèi)含子miRNA與其宿主基因之間的相互作用和調(diào)節(jié)機(jī)制還所了解甚少。近年來(lái)已有研究表明，內(nèi)含子miRNA在調(diào)控其宿主基因表達(dá)和功能中發(fā)揮著重要的作用，例如在細(xì)胞周期、免疫應(yīng)答、癌癥發(fā)生等方面都有明顯的影響。此外，宿主基因也可能通過(guò)反饋調(diào)節(jié)內(nèi)含子miRNA的發(fā)揮作用，提高細(xì)胞的適應(yīng)能力和穩(wěn)定性。為了深入研究?jī)?nèi)含子miRNA和宿主基因之間的相互作用及其調(diào)節(jié)機(jī)制，從而為基因治療和癌癥治療等方面提供新的思路和方案，開展這方面的研究顯得非常重要。二、研究目標(biāo)和內(nèi)容本研究的主要目標(biāo)是探究?jī)?nèi)含子miRNA如何通過(guò)反饋調(diào)節(jié)其宿主基因的表達(dá)和功能，并進(jìn)一步研究?jī)?nèi)含子miRNA與宿主基因之間的相互作用機(jī)制。研究?jī)?nèi)容包括：1、收集和分析已有的內(nèi)含子miRNA和宿主基因反饋調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)資料。2、從多種細(xì)胞系和動(dòng)物模型中篩選出多種內(nèi)含子miRNA和宿主基因?qū)Σ⒄归_實(shí)驗(yàn)研究。3、采用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等技術(shù)手段，對(duì)研究細(xì)胞/動(dòng)物進(jìn)行相應(yīng)的基因表達(dá)分析、功能實(shí)驗(yàn)、交互作用的鑒定和功能機(jī)制的探究。4、預(yù)計(jì)將得到內(nèi)含子miRNA與宿主基因之間調(diào)控機(jī)制的新發(fā)現(xiàn)，并為相關(guān)疾病的治療和基因治療方案的設(shè)計(jì)提供新的思路。三、研究方法和技術(shù)路線1、實(shí)驗(yàn)材料的選擇和誘導(dǎo)選擇多種細(xì)胞系和動(dòng)物模型作為研究材料，并進(jìn)行相應(yīng)的誘導(dǎo)和處理。2、內(nèi)含子miRNA和宿主基因的表達(dá)分析采用qRT-PCR、Westernblot等技術(shù)手段，對(duì)內(nèi)含子miRNA和宿主基因的表達(dá)水平進(jìn)行分析。3、內(nèi)含子miRNA和宿主基因的功能實(shí)驗(yàn)采用OE、KD、CRISPR/Cas9等技術(shù)手段，對(duì)內(nèi)含子miRNA及其宿主基因進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)，包括增強(qiáng)或抑制細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、分化以及腫瘤形成等。4、內(nèi)含子miRNA和宿主基因之間的交互作用檢測(cè)采用顯微鏡、Westernblot、Co-IP等多種方法對(duì)內(nèi)含子miRNA與宿主基因之間的交互作用進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。5、內(nèi)含子miRNA和宿主基因之間調(diào)控機(jī)制的研究通過(guò)bioinformatics分析、SiRNA、RNA-seq技術(shù)等方法，深入研究?jī)?nèi)含子miRNA和宿主基因之間調(diào)控機(jī)制的相關(guān)性、鑒定關(guān)鍵基因以及調(diào)控通路等。四、研究預(yù)期成果通過(guò)本研究，預(yù)計(jì)可以對(duì)內(nèi)含子miRNA與其宿主基因之間的相互