腎小球損傷臨床診斷新項目

關(guān)于腎小球損傷臨床診斷新項目腎小球損傷的概述腎小球損傷的定義由多種原因引起的，腎小球遭受破壞，使身體在排泄代謝廢物和調(diào)節(jié)水電解質(zhì)、酸堿平衡等方面出現(xiàn)紊亂,從而導(dǎo)致腎小球疾病.[主要表現(xiàn)]1、腎小球濾過膜通透性減少，引起排毒作用減弱;2、蛋白尿、血尿的出現(xiàn)；（涎蛋白減少）;

3、腎功能不全。第2頁,共32頁，2024年2月25日，星期天常規(guī)腎小球損傷檢測項目腎小球損傷常規(guī)檢測項目肌酐（Cr）尿素氮（BUN）第3頁,共32頁，2024年2月25日，星期天肌酐（Cr）肌酐（Cr）肌酐是肌肉在人體內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生1mg肌酐。肌酐主要由腎小球濾過排出體外。血中肌酐來自外源性和內(nèi)源性兩種，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物；內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。在肉類食物攝入量穩(wěn)定時．身體的肌肉代謝又沒有大的變化，肌酐的生成就會比較恒定。目前國內(nèi)外仍用血清肌酐作為臨床常規(guī)評估腎小球濾過功能受損的指標(biāo)。第4頁,共32頁，2024年2月25日，星期天肌酐（Cr）檢測優(yōu)缺點常規(guī)項目，易被人們接受方法、技術(shù)成熟，商品試劑盒較多，易于開展費用低，病人易接受ABC優(yōu)點第5頁,共32頁，2024年2月25日，星期天肌酐（Cr）檢測優(yōu)缺點反應(yīng)不靈敏：當(dāng)腎小球濾過率（GFR）下降60%-75%時，血清肌酐才有明顯異常。不特異：受性別、飲食、肌肉量等因素的影響。檢測方法缺陷：常規(guī)方法—苦味酸法測定結(jié)果易產(chǎn)生假性升高；而酶法測定易受其他項目的干擾，造成結(jié)果失真。參考范圍不一致：苦味酸法測定和酶法測定參考范圍不一致，易造成誤診。ABCD缺點第6頁,共32頁，2024年2月25日，星期天尿素氮（BUN）尿素氮（BUN）尿素氮是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物。腎臟為排泄尿素的主要器官，尿素從腎小球濾過后在各段小管均可重吸收；少量尿素由汗排除。第7頁,共32頁，2024年2月25日，星期天尿素氮（BUN）檢測優(yōu)缺點常規(guī)項目，易被人們接受方法、技術(shù)成熟，商品試劑盒較多，易于開展費用低，病人易接受ABC優(yōu)點第8頁,共32頁，2024年2月25日，星期天尿素氮（BUN）檢測優(yōu)缺點反應(yīng)不靈敏：當(dāng)腎小球濾過率（GFR）下降大于50%時，血清尿素氮才有明顯異常，但當(dāng)GFR下降大于70%時，BUN升高不再明顯。不特異：血尿素氮易受到尿量及氮負荷的影響，如上消化道出血、某些嚴(yán)重肝病、嚴(yán)重感染，應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)類固醇藥物和飲食中蛋白質(zhì)過多時，可引起血尿素氮的暫時增高。腎小管對尿素氮有明顯的被動重吸收性；不符合GFR標(biāo)志物的要求。AB缺點第9頁,共32頁，2024年2月25日，星期天反應(yīng)靈敏特異性較好新興的胱抑素C（CystatinC）腎小球損傷檢驗項目第10頁,共32頁，2024年2月25日，星期天胱抑素c概述發(fā)現(xiàn)和命名：1983年Anastasi等首次在雞蛋清中分離純化得到高純度的半胱氨酸蛋白酶抑制劑（cysteineproteinaseinhibitor，CPI），后被命名為胱抑素C（cystatinc）。[也被稱為γ-微量蛋白、γ-后球蛋白及γ-痕跡蛋白]第11頁,共32頁，2024年2月25日，星期天胱抑素c概述基本信息：胱抑素c是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑,廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中。是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì)，分子量為13.3KD,由122個氨基酸殘基組成，可由機體所有有核細胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定。第12頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢內(nèi)源性（來源）：僅由機體內(nèi)有核細胞產(chǎn)生，外源性因素不能產(chǎn)生。特異性（去路）：僅經(jīng)腎小球濾過而被清除。濃度恒定（重吸收）：在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代謝分解，不返回血液。靈敏性：大量文獻報道，CysC在腎小球損傷反應(yīng)上，遠遠早于Cr、BUN，一般在腎功能不全代償期就有異常。第13頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢Grubb及Simonsen等首先研究了血中低分子量蛋白質(zhì)（β2-微球蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白、胱抑素C）濃度與GFR的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)血清胱抑素C、β2-微球蛋白及視黃醇結(jié)合蛋白濃度的倒數(shù)與GFR的相關(guān)系數(shù)r分別為0.75、0.70及0.39，血清肌酐濃度倒數(shù)與GFR的相關(guān)系數(shù)r為0.73。可見胱抑素C是低分子量蛋白質(zhì)中與GFR最相關(guān)的內(nèi)源性標(biāo)志物，甚至優(yōu)于血清肌酐。第14頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢血清β2-微球蛋白濃度由于在炎癥、腫瘤及免疫疾病時也可升高，故不是理想的GFR內(nèi)源性標(biāo)志物。血清視黃醇結(jié)合蛋白的代謝十分復(fù)雜，且部分與前白蛋白結(jié)合，不能自由經(jīng)腎小球濾過，故血清視黃醇結(jié)合蛋白濃度的倒數(shù)與GFR相關(guān)性最差，不能作為GFR的內(nèi)源性標(biāo)志物。第15頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢胱抑素C即使在炎癥狀態(tài)下，其產(chǎn)生率也不會改變，血清濃度受年齡、性別、疾病的病情變化的影響較小。Newman報道血清胱抑素C、肌酐濃度診斷異常GFR的敏感性分別為78.1%及57.1%，各自濃度倒數(shù)與GFR的相關(guān)系數(shù)分別為：0.81、0.50。KyhseAndersen及Filley的最近臨床應(yīng)用也表明血清胱抑素C濃度與GFR的相關(guān)性優(yōu)于血清肌酐濃度。第16頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢Keevil等在對12%健康人的生物學(xué)差異研究中指出：血清肌酐的個體間變異為93%，而胱抑素C的個體間變異僅25%，因而作者認為在判定腎功能損傷時血清胱抑素C優(yōu)于血清肌酐。第17頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC在常規(guī)腎功能測定中的優(yōu)勢反映GFR變化的內(nèi)源性標(biāo)志物胱抑素C（CysC）理想早期靈敏特異第18頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC的臨床意義CysC反映的是腎小球濾過功能，凡涉及腎小球濾過膜功能損傷的疾病，血清中CysC濃度均有不同程度的升高；CysC診斷GFR降低的準(zhǔn)確性和敏感性比血肌酐(Cr)、血尿素高，能準(zhǔn)確、敏感地反映GFR的變化,且其反映腎功能的變化不受許多腎外因素的干擾,對于早期發(fā)現(xiàn)腎臟功能變化以及觀察腎臟功能的恢復(fù)有重要價值，現(xiàn)已推薦CysC作為判斷腎小球濾過功能的首選常規(guī)內(nèi)源性標(biāo)志物。第19頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC的臨床意義高血壓腎病高血壓發(fā)病逐年增加，所致腎損害是常見并發(fā)癥之一高血壓病通過引起良性小動脈腎硬化而導(dǎo)致高血壓慢性腎損害在良性小動脈腎硬化出現(xiàn)臨床癥狀以前，常規(guī)血液及尿液檢查都正常的情況下，即高血壓病的早期腎損害階段，CysC即可異常早期干預(yù)，對改善高血壓腎病患者預(yù)后有重要意義第20頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC的臨床意義糖尿病腎病糖尿病腎損害是糖尿病嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥，也是糖尿病患者的主要死因之一有超過30%的患者發(fā)展為腎功能衰竭及需要腎透析相關(guān)專家認為，CysC檢出糖尿病腎病的靈敏度為40%，特異性100%因此，在診斷糖尿病而無證據(jù)有腎病患者中，很有必要定期檢測CysC濃度變化以觀察其與糖尿病微血管病變的關(guān)系第21頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC的臨床意義腎移植手術(shù)后急慢性排斥反應(yīng)或免疫抑制劑治療的副作用是腎移植手術(shù)后的最大危害，較早檢出腎功能的損傷程度，有利于及時采取干預(yù)措施當(dāng)移植腎發(fā)生急性腎排斥時，血清CysC的增高比血清Cr更明顯、也更早第22頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)由于血清中胱抑素C濃度較低，故其測定方法需較高的分析靈敏度及特異性。最初Lofberg等用單向免疫擴散法（RID）及酶免疫測定法（EIA）對胱抑素C含量進行測定，不僅費時，而且檢測限也差。隨后又有較簡單且靈敏的放射、熒光及各種酶免疫測定（RIA、FIA及EIA）的方法報道，由于均屬于非均相測定方法，很難自動化，因此限制了胱抑素C的廣泛臨床應(yīng)用。第23頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)由于沒有合適檢測技術(shù)，一直未能廣泛應(yīng)用，直到1994年KyhseAndersenJ等報道的顆粒增強透射免疫比濁法（particleenhancedturbidmetricimmunoassay,PETIA）和1997年FinneyH等報道的顆粒增強散射免疫比濁法（particleenhancednephelometicimmunoassay,PENIA

），這兩種方法都能夠在自動生化分析儀上測定胱抑素C，而且快速穩(wěn)定，這樣使胱抑素C可以更方便的應(yīng)用于臨床。第24頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)吸光度上升吸光度下降技術(shù)流派第25頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)顆粒增強免疫比濁法基本反應(yīng)原理膠乳包被的抗胱抑素Ｃ的抗體，與待測胱抑素Ｃ發(fā)生抗原—抗體反應(yīng)，膠乳通過免疫反應(yīng)一層一層聚集形成不溶性免疫顆粒復(fù)合物第26頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)技術(shù)難點顆粒均勻度抗體純度最好為單克隆抗體顆粒大小均一，易引起沉淀適中，略小于檢測波長第27頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)吸光度下降技術(shù)反應(yīng)原理顯色膠體金顆粒與抗CysC的多克隆抗體結(jié)合，膠體顆粒在相應(yīng)波長有最大吸收，當(dāng)和樣本中的CysC抗原發(fā)生凝集，吸光度下降，吸光度值反映CysC的濃度。代表國家：日本第28頁,共32頁，2024年2月25日，星期天CysC測定技術(shù)吸光度下降技術(shù)反應(yīng)原理膠乳包被的抗胱抑素Ｃ的抗體，與待測胱抑素Ｃ發(fā)生連鎖反應(yīng)，膠乳通過免疫反應(yīng)一層一層聚集形成不溶性免疫顆粒復(fù)合物，膠乳的粒徑發(fā)生改變引起濁度明顯變化，濁度程度反映CysC濃度。代