項(xiàng)目1細(xì)菌性滅活疫苗制造

疫苗制造基本程序?yàn)I州職業(yè)學(xué)院----細(xì)菌性滅活疫苗制造項(xiàng)目一細(xì)菌性滅活疫苗制造滅活細(xì)菌疫苗通用制造程序

菌種的選擇

菌液培養(yǎng)滅活

配苗

濃縮

細(xì)菌性滅活疫苗簡(jiǎn)稱滅活菌苗，種類、苗型甚多，但制造的基本程序差別不大。

細(xì)菌性滅活疫苗制造基本流程菌液佐劑+乳化分裝和保存原料配置滅活菌液滅活細(xì)菌性滅活疫苗制造（一）菌種與種子

1.菌種

制苗用菌種多數(shù)為毒力強(qiáng)、免疫原性優(yōu)良的菌株，通常使用1-3個(gè)品系，均由中國藥品生物制品檢定所或中國獸藥監(jiān)察所傳代、鑒定、凍干保存和供應(yīng)。各種用于制造菌苗的菌種應(yīng)按規(guī)定定期復(fù)壯，并進(jìn)行形態(tài)、培養(yǎng)特性、菌型、抗原性和免疫原性鑒定，合格菌種準(zhǔn)許用于制苗。菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗2.種子培養(yǎng)將經(jīng)鑒定符合標(biāo)準(zhǔn)的菌種接種于菌苗生產(chǎn)規(guī)程中所規(guī)定的培養(yǎng)基進(jìn)行增殖培養(yǎng)，經(jīng)純粹檢查、活菌計(jì)數(shù)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后即為種子液，用于菌苗生產(chǎn)。種子液通常保存于2-8

C冷暗處，不得超過規(guī)程規(guī)定的使用期限。

細(xì)菌性滅活疫苗制造菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗（二）菌液培養(yǎng)

大量生產(chǎn)的細(xì)菌培養(yǎng)方法甚多，既有手工式的，也有機(jī)械化或自動(dòng)化的培養(yǎng)方式。機(jī)械化或自動(dòng)化的培養(yǎng)方式通稱為反應(yīng)缸培養(yǎng)法，可供選擇的菌液培養(yǎng)法有：液體靜置培養(yǎng)法、液體深層通氣培養(yǎng)法、透析培養(yǎng)法及連續(xù)培養(yǎng)法等。

菌液培養(yǎng)也可采用固體培養(yǎng)法，該方法易獲得高濃度的細(xì)菌懸液，易稀釋成不同濃度，且含培養(yǎng)基的成分較少，所以比較適用于制備診斷用的抗原。細(xì)菌性滅活疫苗制造菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗（三）滅活

滅活菌苗通常根據(jù)細(xì)菌的特性加入最有效的滅活劑，采取最適當(dāng)?shù)臏缁顥l件進(jìn)行，幾種滅活菌苗的滅活方法如表所示。表

幾種滅活菌苗的滅活方法

細(xì)菌性滅活疫苗制造菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗（四）濃縮

為提高某些滅活菌苗的免疫力，在培養(yǎng)過程中采取提高菌數(shù)的基礎(chǔ)上，再通過濃縮方法達(dá)到目的。常用的濃縮方法：氧化鋁膠吸附沉淀法離心沉降法羧甲基纖維沉淀法

以上方法可使菌液濃縮一倍以上。此外，有些細(xì)菌在生長過程中產(chǎn)生分子量小的可溶性抗原，也可經(jīng)氫氧化鋁吸附濃縮；將破傷風(fēng)脫毒液按鹽酸—食鹽法處理，以作進(jìn)一步精制成提純破傷風(fēng)類毒素。細(xì)菌性滅活疫苗制造菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗

（五）配苗與分裝

由于滅活菌苗所用的佐劑不同，所以配苗方法也不相同。

氫氧化鋁菌苗：可在加入甲醛滅活的同時(shí)，按比例加入氫氧化鋁膠配制；也可在菌液經(jīng)甲醛滅活后再按比例加入氫氧化鋁膠配苗。有的廠油佐劑菌苗的配制程序?yàn)椋河跍缇挠腿閯?35m110號(hào)白油、11.4m1Span-85、3.6mlTween80混合液中，在邊攪拌下加入等量甲醛滅活菌液配制。

配苗和分裝：應(yīng)充分混勻，及時(shí)塞塞、貼簽或印字。細(xì)菌性滅活疫苗制造菌種的選擇菌液培養(yǎng)滅活濃縮配苗獲得質(zhì)量?jī)?yōu)良、安全的產(chǎn)品，關(guān)鍵環(huán)節(jié)如下

1.選擇優(yōu)良的菌種和毒種，并保持其穩(wěn)定性；

2.選用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)繁殖細(xì)菌與病毒等微生物的方法，包括優(yōu)良的培養(yǎng)基、合乎要求的