戊型肝炎的實驗室診斷指標與臨床應用

病毒性肝炎之一。近年來HEV各檢測指標，包括HEVRNA、HEV抗原、抗-HEVIg斷年新發(fā)HEV感染約2000萬例，死亡約44000例[1]。自2012年起我國戊型肝現(xiàn)為無癥狀感染或急性戊型肝炎，孕婦感染HEV后死亡率高達20%[2],老年人中戊型肝炎的重癥率高達14%[3],基礎肝病患者重疊感染HEV后，容易發(fā)生肝臟失代償，愈后普遍較差[4-5]。免疫抑制患者感染HEV可導致慢性戊型肝炎，近年也有非免疫抑制人群呈現(xiàn)慢性HEV感染的報道[6-7]。HEV還可導致神經(jīng)系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)等多種肝外疾病[8]。一般認為急性戊型肝炎患者感染HEV后大約3~4周出現(xiàn)抗-HE患者的既往感染血清抗體存在交叉反應[10]?？?HEVIgM檢測結果在不同廠度差異較大[11];另一方面不同廠商的抗-HEVIgM試劑之間在與其他病毒的交叉反應也存在較大差異[12]。由于抗-HEVIgM在患者體內平均可維持5個完善，在急性肝炎患者中HEV-IgM陽性人群應配合病原學檢測指標確證現(xiàn)癥感者通常不表現(xiàn)明顯的抗體應答或丙氨酸轉氨酶(ALT)異常[14-15],慢性戊型肝炎患者主要為免疫抑制人群，抗-HEV抗體應答偏弱[16],因此抗-HEV根據(jù)量反應平行線法即可對血清樣品定量[18],單位為IU/ml。若疾病進程中不同時間點采集的多個樣本顯示抗-HEVIgG血清學陽轉或定量4倍及以上升高，用熒光實時定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(reveretranscription-polymerase9],近年有報道顯示cobas8平臺HEVRNA的檢測下限可低至22IU/ml[20]。逆轉錄環(huán)介導等溫擴增技術檢測極限可達0.045fg(9拷貝每反應)[21]。目前果顯示，病毒血癥持續(xù)3~5周，糞便排毒持續(xù)4~6周[1]。在出現(xiàn)急性肝炎癥狀后的1~2周內，60%~80%患者的血清和糞便中可檢測到HEVRNA[13,22],隨后隨著抗體的陽轉，RNA陽性率明顯下降，因此在斷效率越高。但仍有約20%~30%患者在發(fā)病時體內HEV已基本被清除[23-26],制假陰性結果),目前在國內醫(yī)院未常規(guī)開展HEVRNA檢測。但是在慢性戊型肝(二)HEV抗原HEV基因組開放閱讀框2除了編碼傳統(tǒng)認為的病毒衣殼蛋白之外，還編碼一環(huán)中，其血液中含量可達病毒衣殼粒子的近1000倍[27]。分泌型蛋白是HEV血液抗原水平提高80倍左右[29]。尿液HEV抗原主要來源于血液中的分泌型蛋白，因此尿液HEV抗原陽性也指示的是機體存在HEV感染[29]。兔子感染模型顯示，尿液抗原在感染后第8天陽轉，比血液RNA和血液抗原還要早6d,此肝炎患者隊列中檢測敏感度高達95.7%[29]。對急性和慢性戊型肝炎患者系列標本的結果顯示，尿液抗原是靈敏度最好的檢測指標，指示HEV現(xiàn)癥感染[29-30]。有研究顯示血液中HEVRNA陰轉之后抗原仍然為陽性[31],由于糞便HEVRNA陽性周期長于血液HEVRNA,因此這可能與體內仍然存在較低水平的病該試劑對戊型肝炎的檢測敏感度為91.16%,特異度為100.00%,準確度98.58%。(一)急性戊型肝炎急性戊型肝炎病原學檢測的優(yōu)選指標是糞便HEVRNA和尿液HEV抗原，因為糞便RNA和尿液抗原顯示出比血液中RNA和抗原的陽性周期長2~4周(表1)[8,29]。但是由于采集和處理糞便樣本的程序相對復雜，尿液抗原是新興的指標，出現(xiàn)癥狀后4周內均可維持90%以上的陽性率。其主要存在的問題是出現(xiàn)癥狀的然會持續(xù)平均5個月的陽性。而HEV抗原和HEVRNA在出現(xiàn)癥狀后1~2周維持較高的陽性率，在第3~4周隨著轉氨酶恢復正常，陽性率會快速下降[13,32-33]。因此檢測方法學核心應該是患者首次出現(xiàn)癥狀后多長時間進行的檢測，并IgM和病原學檢測同時為陽性時，可以確診為急性戊型肝炎；當在出現(xiàn)癥狀后12周內，因此急性戊型肝炎的診斷應盡早進行病靈敏度最高的戊型肝炎診斷指標[29],又因其采樣和檢測更簡便、成本更低，潛伏期(周)恢復期(周)肝炎癥狀期(周)潛伏期(周)恢復期(周)(二)慢性戊型肝炎+T細胞計數(shù)低的艾滋病患者及接受化療的血液惡性腫瘤患者等，其中大約33%37],因此抗-HEVIgM指標用于該人群的診斷會存在較大程度的漏檢。在慢性原。當免疫抑制患者如出現(xiàn)ALT異常，并且血液或糞便HEEVRNA會先于抗原發(fā)生陰轉[7],這可能與隨著藥物的使用病毒的復制受到抑(三)肝外感染HEV感染的肝外表現(xiàn)通常也伴隨ALT升高等肝炎癥狀，多數(shù)會出現(xiàn)抗-HEVIgM陽轉[38-39]。因此肝外表現(xiàn)的人群可同時檢測抗-HEVIgM與HEV抗原能異常，建議檢測抗-HEVIgM和HEV病原學[8]。有研究報道，累及神經(jīng)系(四)隱性攜帶者隱性攜帶者是近年在合格獻血員中發(fā)現(xiàn)的不表現(xiàn)明顯的急性肝炎(ALT正常)占合格獻血員的0.8%[14],其主要風險為輸血傳播。隱性攜帶者幾乎無抗體(五)相關職業(yè)體檢人員可達12個月甚至數(shù)年[41-42]。若發(fā)現(xiàn)單純抗-HEVIgM為陽性，不能直接各指標的標準品是實驗室質量控制和提高檢測結果的準確性和可靠性的重要手gG標準品為溯源物質研制了國家HEVIgG線性標準品[18],但目前還缺少可平存在顯著差異[29,31],提示HEV抗原的定量檢測可能對戊型肝炎患者的治檢測常見的基因1~4型HEV的RT-PCR引物并不能夠檢測到大鼠HEV,同時抗體和抗原檢測也面臨靈敏度不足或無法檢出的問題[43],亟須開發(fā)能夠準確識別[1]中華醫(yī)學會肝病學分會.戊型肝炎防治共識[J].中華肝臟病雜志，2022,30(8):820-831.DOI:10.3760/cma.j.cn501113-20220729-00401.ncy[J].IntJGynaecolObstet,2001,72(2):103-108.DOI:10.1016/s0020-7292(00)00264-2.[3]范振平，張文瑾，高峰，等.424例戊型肝炎臨床特點分析[J].解放軍醫(yī)學雜志，2006,31(8):812-814.DOI:10.3321/j.issn:0577-7402.2006.08.diseaseprogressioninpatientswithchronicHBVinfectionandincreasesmortalityinthosew05-1111.DOI:10.1016/j.jhep.2020.01.012.轉歸：系統(tǒng)綜述與Meta分析[J].中華疾病控制雜志，2020,24(3):348-3DOI:16462/ki.zhjbkz.2020.03.019.anelderlyimmunocompetentpatientwhoachievedasustainedvirologicresponsewithribavirintrea6(2):206-215.DOI:10.1007/s12328-022-01733-2.rusInfectioninanindividualwithou[8]EuropeanAssociationforthestudyoftheliver.EASLacticeGuidelines68(6):1256-1271.DOI:10.1016/j.jhep.2018.03.005.聚合現(xiàn)象研究[J].生物工程學報，2002,18(4):463-467.DOI:10.3321/j.issn:1000-3061.2002.04[10]TajdarM,ReyndersM,BerthM.EvaluationoftheVIDAShepatitisEIgMtestinanonendemicregion[J].DiagnMi19,95(1):67-70.DOI:10.1016/j.diagmicrobio[11]MastEE,AlterMJ,Holland861.DOI:10.1002/hep.510270331.nfections?Comparison&casestorytelling[J].Acta76(1):25-31.DOI:10.1080/17843286.2019.1655245.[13]TangZM,WenGP,YingD,etalrtstudy[J].EmergMicrobesInfect,2023,12(1):2140613.DOI:10.1080/22221751.2022.2140613.[14]WenGP,ChenCR,SongXY,etal.Long-termHantibodyseroconversionamongeligibleimmunoc[J].EmergMicrobesInfect,[15]Westh?lterD,HillerJ,Denzeationsrepresentarelevantinfectionrients[J].JHepatol,2018,69(1):36tstrategiesforchroninfectTher,2023,21(2):143-148.DOI:10.1080/14787210.2023.216693etohepatitisEvirusinfection[J].ClinMicrobiolRev,2014,27(1)139-165.DOI:10.1128/[18]高帆，卞蓮蓮，么山山，等.戊型肝炎疫苗抗原國家標準品的建立[J].中國病毒病雜志，2022,12(6):433-436.DOI:10.16505/j.2095-0136.2022.[19]VollmerT,KnabbeC,DreierJ.ComparJClinMicrobiol,2014,52(6):2150-2156.DOI:10.1128/JCM.03578-1[20]ThodouV,BremerB,AnastasiouOE,etal.PerformanceofualitativeHEVassayonthecobas6800platformfourementofHEVRNA[J].JClinVirol,2020,129:104525.DOI:10.1016/j.virus[J].JClinMicrobiol,2009,47(7):2304-2306.DOI:10.1128/JCM.HEVRNA動態(tài)變化及其診斷價值[J].實用肝臟病雜[23]AggarwalR,KiniD,SofatS,etal.1081-1082.DOI:10.1016/S0140-673gacutesporadichepatitisEvirusinfe95,108(1):225-230.DOI:10.1016/0016-5085NAinseraofpatientswithhepatitisEbypolymerasechainreaction[J].HepatobiliaryPancreatDisInt,2007,6(1):38-42.[26]ChandraNS,SharmaA,MalhotraB,etal.DynamicsofHEVviremia, 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